Антитіло до il-23

Реферат: Винахід стосується гуманізованого антитіла до IL-23p19 або його антигензв'язуючого фрагмента, фармацевтичної композиції, що містить вказане антитіло або його антигензв’язуючий фрагмент, експресійного вектора, клітини-хазяїна та способу одержання вказаного антитіла. UA 112301 C2 (12) UA 112301 C2 UA 112301 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Галузь техніки, до якої належить винахід Даний винахід належить в цілому до антитіл до IL-23p19, призначених для діагностичного і терапевтичного застосування. Більш конкретно, описані гуманізовані антитіла до IL-23p19 і способи їх застосування для лікування різних захворювань або порушень. Описано також фармацевтичні композиції та набори, що містять зазначені сполуки. Передумови створення винаходу У вищих еукаріотичних організмів у процесі еволюції розвинулася складна відповідь на патогени, що спочатку проявляється у вигляді вродженої імунної відповіді, після чого запускається адаптивна імунна відповідь. У поєднанні один з одним ці два механізми не тільки знищують патогени, які заражають організм, але і створюють також довготривалу імунологічну відповідь проти подальших впливів. Дефіцит зазначених відповідей може призводити до підвищеної чутливості до інфекцій і / або змін адаптивної імунної відповіді, що призводить до хронічного запалення і аутоімунітету. IL-12, гетеродимерний цитокін, що складається з білкових субодиниць p40 і p35, протягом багатьох років розглядався як цитокін, який є відмітною ознакою вродженої імунної відповіді, що робить дуже великий вплив на адаптивний імунітет. Проте дані досліджень біологічної ролі цього цитокіну призвели до неоднозначних результатів. Наприклад, у той час як миші з дефіцитом p40 мали стійкість до індукованого колагеном артриту (CIA) і експериментального аутоімунного енцефаломієліту (EAE), миші з дефіцитом p35 мали чутливість до обох захворювань, і у них відзначалося навіть загострення хвороби. Зазначені "загадки" почали вирішуватися з відкриттям наприкінці 1990-х років нового представника сімейства IL-12-цитокінів, що грає особливу роль в імунній відповіді, а саме, IL-23. IL-23 складається із загальної з IL-12 субодиниці (p40) і унікальної субодиниці p19. Незважаючи на присутність загальної субодиниці p40, ролі IL-23 і IL-12 є абсолютно різними. IL12 відіграє важливу роль для Th1-відповідей за допомогою посилення диференціювання, проліферації і активації Th1-клітин. На противагу цьому, IL-23 забезпечує розвиток і підтримку нещодавно виявленої популяції CD4 +-T-клітин-хелперів, позначених як Th17-клітини через їх здатності продукувати IL-17 і родинні цитокіни. Є переконливі дані про те, що IL-23 бере участь у хронічному аутоімунному запаленні, і модуляція активності IL-23 може являти собою перспективний терапевтичний підхід до лікування аутоімунних захворювань. Таким чином, існує необхідність у що мають цінні фармакологічні властивості молекулахантагоністах IL-23, які можна застосовувати в якості терапевтичних засобів для лікування захворювань, зокрема, імунологічних та аутоімунних захворювань у людей. Таким чином, одне із завдань, покладених в основу даного винаходу, полягало в тому, щоб розробити анти-IL-23 антагоністичні молекули, зокрема анти-IL-23 антагоністичні молекули, які мають високу афінність зв'язування з IL-23. Наступне завдання, покладене в основу даного винаходу, полягало в тому, щоб розробити анти-IL-23 антагоністичні молекули, які мають високу специфічність щодо IL-23. Наступне завдання, покладене в основу даного винаходу, полягало в тому, щоб розробити анти-IL-23 антагоністи, які мають високу блокуючу активність щодо асоціації IL-23 з його рецептором. Наступне завдання, покладене в основу даного винаходу, полягало в тому, щоб розробити анти-IL-23 антагоністи, які мають ефективну клітинну активність. Наступне завдання, покладене в основу даного винаходу, полягало в тому, щоб розробити анти-IL-23 антагоністи, які мають кращу біодоступність. Наступне завдання, покладене в основу даного винаходу, полягало в тому, щоб розробити анти-IL-23 антагоністи, які мають переважні біофізичні властивості. Наступними завданнями, покладеними в основу даного винаходу, є комбінації будь-яких із зазначених вище завдань. Короткий виклад суті винаходу Даний винахід спрямовано на вирішення зазначених вище завдань і в ньому запропоновані антитіла, які зв'язуються з субодиницею p19 білка IL-23. Відповідно до одного з об'єктів винаходу антитіло, пропоноване в даному винаході, зв'язується з людським IL-23 з високою афінністю. Згідно іншому об'єкту винаходу антитіло, пропоноване в даному винаході, інгібує стимульоване IL-23 виробництво IL-17 у мишачих спленоцитах. Згідно іншому об'єкту винаходу антитіло, пропоноване в даному винаході, не зв'язується з IL-12 і не робить антагоністичну дію на IL-12, що є близькоспорідненим до IL-23 представником сімейства. Одним з варіантів здійснення даного винаходу є антитіла до IL-23p19, отримані з мишачих гібридом, наприклад, моноклональні антитіла. Одним з варіантів здійснення даного винаходу є повнорозмірні антитіла до IL-23p19. Іншим варіантом здійснення даного винаходу є гуманізовані антитіла до IL-23p19, наприклад, гуманізовані моноклональні антитіла до IL-23p19, наприклад, 1 UA 112301 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 повнорозмірні гуманізовані моноклональні антитіла до IL-23p19. Відповідно до одного з об'єктів винаходу гуманізоване антитіло, пропоноване в даному винаході, зв'язується з людським IL-23 з високою афінністю. Згідно іншому об'єкту винаходу гуманізоване антитіло, пропоноване в даному винаході, зв'язується також з IL-23 мавп ціномолгус (яванський макак-крабоїд) з високою афінністю. Згідно наступного об'єкта винаходу гуманізоване антитіло, пропоноване в даному винаході, інгібує індуковане IL-23 фосфорилювання STAT3 в клітинах лінії DB. Згідно іншому об'єкту винаходу гуманізоване антитіло, пропоноване в даному винаході, антагонізує дію IL-23 за допомогою зв'язування з субодиницею p19 IL-23, про що можна судити, наприклад, по інгібуванню цитокінів, таких як IL-17 і IL-22, виробництво яких стимулюється IL-23. Згідно іншому об'єкту винаходу гуманізоване антитіло, пропоноване в даному винаході, має прийнятний фармакокінетичний (ФК) профіль. Згідно наступного об'єкта винаходу гуманізоване антитіло, пропоноване в даному винаході, має переважні біофізичні властивостями, такими як якість, стабільність чи розчинність, наприклад, при визначенні на основі процентного вмісту антитіл в мономерній формі. Іншими варіантами здійснення винаходу є молекули ДНК, які кодують антитіла, запропоновані в даному винаході, експресійні вектори і клітини-господарі, які містять зазначені молекули ДНК, і способи створення антитіл, пропонованих в даному винаході. Даний винахід належить і до терапевтичного застосування антитіл, пропонованих в даному винаході, зокрема, щодо імунологічних та аутоімунних захворювань. Одним з варіантів здійснення винаходу є також антитіло до IL-23p19 або його антигензв'язуючий фрагмент, яке / що містить послідовність CDR1 (L-CDR1) легкого ланцюга SEQ ID NO: 1, 4, 6, 7, 8, 11, 15, 18, 19, 22, 27 або 30; послідовність CDR2 (L-CDR2) легкого ланцюга SEQ ID NO: 2, 5, 9, 12, 16, 20, 23, 25, 28 або 31; послідовність CDR3 (L-CDR3) легкого ланцюга SEQ ID NO: 3, 10, 13, 14, 17, 21, 24, 26, 29 або 32; послідовність CDR1 (H-CDR1) важкого ланцюга SEQ ID NO: 33, 36, 38, 40, 43, 45, 48, 51, 54, 57, 60, 63, 66, 67, 68, 69, 77 або 80; послідовність CDR2 (H-CDR2) важкого ланцюга SEQ ID NO: 34, 39, 41, 46, 49, 52, 55, 58, 61, 64, 70, 72, 73, 75, 78 або 81; і послідовність CDR3 (H-CDR3) важкого ланцюга SEQ ID NO: 35, 37, 42, 44, 47, 50, 53, 56, 59, 62, 65, 71, 74, 76, 79 або 82. В одному з варіантів здійснення винаходу антитіло до IL-23p19 або його антигензв'язуючий фрагмент містить варіабельну область легкого ланцюга, що включає вказаний вище L-CDR1, вказаний вище L-CDR2 і зазначений вище LCDR3, і варіабельну область важкого ланцюга, що включає вказаний вище H-CDR1, вказаний вище H-CDR2 і зазначений вище H-CDR3. Одним з варіантів здійснення винаходу є також антитіло до IL-23p19 або його антигензв'язуючий фрагмент, де антитіло або його антигензв'язуючий фрагмент містить послідовність L-CDR1, L-CDR2, L-CDR3, H-CDR1, H-CDR2 і H-CDR3 SEQ ID NO: 1, 2, 3, 33, 34 і 35 відповідно; або послідовність L-CDR1, L-CDR2, L-CDR3, H-CDR1, H-CDR2 і H-CDR3 SEQ ID NO: 4, 5, 3, 36, 34 і 37 відповідно; або послідовність L-CDR1, L-CDR2, L-CDR3, H-CDR1, H-CDR2 і H-CDR3 SEQ ID NO: 1, 2, 3, 38, 39 і 35 відповідно; або послідовність L-CDR1, L-CDR2, L-CDR3, H-CDR1, H-CDR2 і H-CDR3 SEQ ID NO: 6, 2, 3, 40, 41 і 42, відповідно; або послідовність L-CDR1, L-CDR2, L-CDR3, H-CDR1, H-CDR2 і H-CDR3 SEQ ID NO: 7, 2, 3, 43, 41 і 44 відповідно; або послідовність L-CDR1, L-CDR2, L-CDR3, H-CDR1, H-CDR2 і H-CDR3 SEQ ID NO: 8, 9, 10, 45, 46 і 47 відповідно; або послідовність L-CDR1, L-CDR2, L-CDR3, H-CDR1, H-CDR2 і H-CDR3 SEQ ID NO: 8, 9, 10, 48, 49 і 50 відповідно; або послідовність L-CDR1, L-CDR2, L-CDR3, H-CDR1, HCDR2 і H-CDR3 SEQ ID NO: 11, 12, 13, 51, 52 і 53 відповідно; або послідовність L-CDR1, LCDR2, L-CDR3, H-CDR1, H-CDR2 і H-CDR3 SEQ ID NO: 7, 2, 14, 54, 55 і 56 відповідно; або послідовність L-CDR1, L-CDR2, L-CDR3, H-CDR1, H-CDR2 і H-CDR3 SEQ ID NO: 15, 16, 17, 57, 58 і 59 відповідно; або послідовність L-CDR1, L-CDR2, L-CDR3, H-CDR1, H-CDR2 і H-CDR3 SEQ ID NO: 18, 16, 17, 60, 61 і 62 відповідно; або послідовність L-CDR1, L-CDR2, L-CDR3, H-CDR1, HCDR2 і H-CDR3 SEQ ID NO: 19, 20, 21, 63, 66, 67 або 68, 64 і 65 відповідно; або послідовність LCDR1, L-CDR2, L-CDR3, H-CDR1, H-CDR2 і H-CDR3 SEQ ID NO: 22, 23, 24, 69, 70 і 71 відповідно; або послідовність L-CDR1, L-CDR2, L-CDR3, H-CDR1, H-CDR2 і H-CDR3 SEQ ID NO: 22, 25, 26, 55, 72 і 71 відповідно; або послідовність L-CDR1, L-CDR2, L-CDR3, H-CDR1, H-CDR2 і H-CDR3 SEQ ID NO: 8, 9, 10, 45, 73 і 74 відповідно; або послідовність L-CDR1, L-CDR2, L-CDR3, H-CDR1, H-CDR2 і H-CDR3 SEQ ID NO: 27, 28, 29, 45, 75 і 76 відповідно; або послідовність LCDR1, L-CDR2, L-CDR3, H-CDR1, H-CDR2 і H-CDR3 SEQ ID NO: 8, 9, 10, 77, 78 і 79 відповідно; або послідовність L-CDR1, L-CDR2, L-CDR3, H-CDR1, H-CDR2 і H-CDR3 SEQ ID NO: 30, 31, 32, 80, 81 і 82 відповідно. В одному з варіантів здійснення винаходу антитіло до IL-23p19 або його антигензв'язуючий фрагмент містить варіабельну область легкого ланцюга, що включає комбінацію зазначених вище L-CDR1, L-CDR2 і L-CDR3, і варіабельну область важкого ланцюга, що включає комбінації зазначених вище H-CDR1, H-CDR2 і H-CDR3. 2 UA 112301 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 Одним з варіантів даного винаходу є також антитіло до IL-23p19 або його антигензв'язуючий фрагмент, де антитіло або його антигензв'язуючий фрагмент містить варіабельну область легкого ланцюга, що включає амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 84, і варіабельну область важкого ланцюга, що включає амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 121; або варіабельну область легкого ланцюга, що включає амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 86, і варіабельну область важкого ланцюга, що включає амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 123; або варіабельну область легкого ланцюга, що включає амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 88, і варіабельний область важкого ланцюга, що включає амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 125; або варіабельну область легкого ланцюга, що включає амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 90, і варіабельну область важкого ланцюга, що включає амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 127; або варіабельну область легкого ланцюга, що включає амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 91, і варіабельну область важкого ланцюга, що включає амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 128; або варіабельну область легкого ланцюга, що включає амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 93, і варіабельну область важкого ланцюга, що включає амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 130; або варіабельну область легкого ланцюга, що включає амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 95, і варіабельну область важкого ланцюга, що включає амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 132; або варіабельну область легкого ланцюга, що включає амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 97, і варіабельну область важкого ланцюга, що включає амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 134; або варіабельну область легкого ланцюга, що включає амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 99, і варіабельну область важкого ланцюга, що включає амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 136; або варіабельну область легкого ланцюга, що включає амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 101, та варіабельну область важкого ланцюга, що включає амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 138; або варіабельну область легкого ланцюга, що включає амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 103, та варіабельну область важкого ланцюга, що включає амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 140; або варіабельну область легкого ланцюга, що включає амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 105, та варіабельну область важкого ланцюга, що включає амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 142; або варіабельну область легкого ланцюга, що включає амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 107, та варіабельну область важкого ланцюга, що включає амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 144; або варіабельну область легкого ланцюга, що включає амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 109, та варіабельну область важкого ланцюга, що включає амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 146; або варіабельну область легкого ланцюга, що включає амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 111, та варіабельну область важкого ланцюга, що включає амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 148; або варіабельну область легкого ланцюга, що включає амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 113, та варіабельну область важкого ланцюга, що включає амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 150; або варіабельну область легкого ланцюга, що включає амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 115, та варіабельну область важкого ланцюга, що включає амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 152; або варіабельну область легкого ланцюга, що включає амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 117, та варіабельну область важкого ланцюга, що включає амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 154; або варіабельну область легкого ланцюга, що включає амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 119, та варіабельну область важкого ланцюга, що включає амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 156. Одним з варіантів здійснення даного винаходу є також антитіло до IL-23p19 або його антигензв'язуючий фрагмент, де антитіло або його антигензв'язуючий фрагмент містить варіабельну область легкого ланцюга, що включає амінокислотну послідовність, яка вибрана з групи, що складається з SEQ ID NO: 158, 160, 162 і 164, і варіабельну область важкого ланцюга, що включає амінокислотну послідовність, яка вибрана з групи, що складається з SEQ ID NO: 166, 168, 170 і 172. Одним з варіантів здійснення даного винаходу є також антитіло до IL-23p19 або його антигензв'язуючий фрагмент, де антитіло або його антигензв'язуючий фрагмент характеризується величиною KD щодо IL-23, що становить менше ніж 40пM, або величиною KD щодо IL-23, що становить менше ніж 20пM, або величиною KD щодо IL-23, що становить менше 10пM, або величиною KD щодо IL-23, що становить менше ніж 1пM. Іншим варіантом здійснення даного винаходу є антитіло до IL-23p19 або його антигензв'язуючий фрагмент, яке / який зв'язується з людською субодиницею IL-23p19 на епітопі, що складається з амінокислотних залишків 108 і 126 і амінокислотних залишків 137-151 з SEQ ID NO: 181. 3 UA 112301 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Наступним варіантом здійснення даного винаходу є антитіло до IL-23p19 або його антигензв'язуючий фрагмент, яке / який конкурує за зв'язування з людської субодиницею IL23p19 з антитілом, запропонованим у даному винаході. Одним з варіантом здійснення цього винаходу є антитіло до IL-23p19 або його антигензв'язуючий фрагмент, яке / що конкурує за зв'язуванням з людської субодиницею IL-23p19 з гуманізувати моноклональних антитіл до IL23p19, що містить легкий ланцюг, яка містить амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 174, і важкий ланцюг, яка містить амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 176. Одним з варіантом здійснення цього винаходу є антитіло до IL-23p19 або його антигензв'язуючий фрагмент, яке / що конкурує за зв'язуванням з людської субодиницею IL-23p19 з гуманізувати моноклональних антитіл до IL-23p19, що містить легкий ланцюг, яка містить амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 174, і важкий ланцюг, яка містить амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 178. Одним з варіантом здійснення цього винаходу є антитіло до IL-23p19 або його антигензв'язуючий фрагмент, яке / який конкурує за зв'язуванням з людською субодиницею IL-23p19 з гуманізованим моноклональним антитілом до IL-23p19, що містить легкий ланцюг, що містить амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 180, і важкий ланцюг, що містить амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 176. Одним з варіантом здійснення цього винаходу є антитіло до IL23p19 або його антигензв'язуючий фрагмент, яке / який конкурує за зв'язуванням з людською субодиницею IL-23p19 з гуманізованим моноклональним антитілом до IL-23p19, що містить легкий ланцюг, що містить амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 180, і важкий ланцюг, що містить амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 178. В одному з варіантів здійснення винаходу антитіло до IL-23p19 представляє собою гуманізоване антитіло. В одному з варіантів здійснення винаходу антитіло до IL-23p19 являє собою моноклональне антитіло. В одному з варіантів здійснення винаходу антитіло до IL-23p19 являє собою повнорозмірне антитіло. В одному з варіантів здійснення винаходу антитіло до IL23p19 являє собою гуманізоване моноклональне антитіло, наприклад, повнорозмірне гуманізоване моноклональне антитіло. В одному з варіантів здійснення винаходу антигензв'язуючий фрагмент являє собою Fab-, F (ab ') 2 - або одноланцюговий Fv-фрагмент. В одному з варіантів здійснення винаходу антигензв'язуючий фрагмент містить варіабельну область легкого ланцюга і варіабельну область важкого ланцюга. Одним з варіантів здійснення даного винаходу є також антитіло до IL-23p19 або його антигензв'язуючий фрагмент, де антитіло або його антигензв'язуючий фрагмент містить амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 19 (CDR1-L); амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 20 (CDR2-L); амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 21 (CDR3-L): амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 63, 66, 67 або 68 (CDR1-H); амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 64 (CDR2-H) і амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 65 (CDR3-H). Одним з варіантів здійснення даного винаходу є також антитіло до IL-23p19 або його антигензв'язуючий фрагмент, де антитіло або його антигензв'язуючий фрагмент містить амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 19 (CDR1-L); амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 20 (CDR2-L); амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 21 (CDR3-L); амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 66 (CDR1-H); амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 64 (CDR2-H) і амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 65 (CDR3-H). Одним з варіантів здійснення даного винаходу є також антитіло до IL-23p19 або його антигензв'язуючий фрагмент, де антитіло або його антигензв'язуючий фрагмент містить варіабельну область легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 19 (CDR1-L); амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 20 (CDR2-L) і амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 21 (CDR3-L); і варіабельну область важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 63, 66, 67 або 68 (CDR1-H); амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 64 (CDR2-H) і амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 65 (CDR3-H). Одним з варіантів здійснення даного винаходу є також антитіло до IL-23p19 або його антигензв'язуючий фрагмент, де антитіло або його антигензв'язуючий фрагмент містить варіабельну область легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 19 (CDR1-L); амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 20 (CDR2-L) і амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 21 (CDR3-L); і варіабельну область важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 66 (CDR1-H); амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 64 (CDR2-H) і амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 65 (CDR3-H). Одним з варіантів здійснення даного винаходу є також антитіло до IL-23p19 або його антигензв'язуючий фрагмент, де антитіло або його антигензв'язуючий фрагмент містить варіабельну область легкого ланцюга, що містить будь-яку з амінокислотних послідовностей SEQ ID NO: 158, 160, 162 або 164; і варіабельну область важкого ланцюга, що містить будь-яку з амінокислотних послідовностей SEQ ID NO: 166, 168, 170 або 172. 4 UA 112301 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Одним з варіантів здійснення даного винаходу є також антитіло до IL-23p19 або його антигензв'язуючий фрагмент, де антитіло або його антигензв'язуючий фрагмент містить варіабельну область легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 160, варіабельну область важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 166. Одним з варіантів здійснення даного винаходу є також антитіло до IL-23p19 або його антигензв'язуючий фрагмент, де антитіло або його антигензв'язуючий фрагмент містить варіабельну область легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 160, варіабельну область важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 168. Одним з варіантів здійснення даного винаходу є також антитіло до IL-23p19 або його антигензв'язуючий фрагмент, де антитіло або його антигензв'язуючий фрагмент містить варіабельну область легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 158, варіабельну область важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 166. Одним з варіантів здійснення даного винаходу є також антитіло до IL-23p19 або його антигензв'язуючий фрагмент, де антитіло або його антигензв'язуючий фрагмент містить варіабельну область легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 158, варіабельну область важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 168. В одному з варіантів здійснення винаходу антитіло до IL-23p19 представляє собою гуманізоване антитіло. В одному з варіантів здійснення винаходу антитіло до IL-23p19 являє собою моноклональних антитіл. В одному з варіантів здійснення винаходу антитіло до IL-23p19 являє собою повнорозмірне антитіло. В одному з варіантів здійснення винаходу антитіло до IL23p19 являє собою гуманізоване моноклональне антитіло, наприклад, повнорозмірне гуманізоване моноклональне антитіло. В одному з варіантів здійснення винаходу антигензв'язуючий фрагмент являє собою Fab-, F (ab ') 2 - або одноланцюговий Fv-фрагмент. В одному з варіантів здійснення винаходу антигензв'язуючий фрагмент містить варіабельну область легкого ланцюга і варіабельну область важкого ланцюга. Одним з варіантів здійснення даного винаходу є також антитіло, яке містить амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 166 або 168, пов'язану з константної областю важкого ланцюга людського IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgM, IgA або IgE. Антитіло містить амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 166 або 168, пов'язану з константної областю важкого ланцюга людського IgG1. Антитіло містить амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 158 або 160, пов'язану з константної областю людської легкого каппа-або лямбда-ланцюга. Антитіло містить амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 158 або 160, пов'язану з константної областю людської легкого каппа-ланцюга. Одним з варіантів здійснення даного винаходу є також антитіло, яке містить амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 166 або 168, пов'язану з константною областю важкого ланцюга людського IgG1; і амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 158 або 160, пов'язану з константної областю людської легкого каппа-ланцюга. Одним з варіантів здійснення даного винаходу є також гуманізоване моноклональне антитіло до IL-23p19, яке містить варіабельну область легкого ланцюга, що містить будь-яку амінокислотну послідовність, що вибрана з групи, що складається з SEQ ID NO: 158, 160, 162 і 164, і варіабельну область важкого ланцюга, що містить будь-яку амінокислотну послідовність, що вибрана з групи, що складається SEQ ID NO: 166, 168, 170 і 172. Одним з варіантів здійснення даного винаходу є також гуманізоване моноклональне антитіло до IL-23p19, яке містить варіабельну область легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 160, таваріабельну область важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 166. Одним з варіантів здійснення даного винаходу є також гуманізоване моноклональне антитіло до IL-23p19, яке містить варіабельну область легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 160, та варіабельну область важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 168. Одним з варіантів здійснення даного винаходу є також гуманізоване моноклональне антитіло до IL-23p19, яке містить варіабельну область легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 158, та варіабельну область важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 166. Одним з варіантів здійснення даного винаходу є також гуманізоване моноклональне антитіло до IL-23p19, яке містить варіабельну область легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 158, та варіабельну область важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 168. Одним з варіантів здійснення даного винаходу є також гуманізоване моноклональне антитіло до IL-23p19, яке містить легкий ланцюг, що містить амінокислотну послідовність SEQ 5 UA 112301 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 ID NO: 174 або 180, і важку ланцюг, що містить амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 176 або 178. Одним з варіантів здійснення даного винаходу є також гуманізоване моноклональне антитіло до IL-23p19, яке містить легкий ланцюг, що містить амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 174, і важкий ланцюг, що містить амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 176. Одним з варіантів здійснення даного винаходу є також гуманізоване моноклональне антитіло до IL-23p19, яке містить легкий ланцюг, що містить амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 174, і важкий ланцюг, що містить амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 178. Одним з варіантів здійснення даного винаходу є також гуманізоване моноклональне антитіло до IL-23p19, яке містить легкий ланцюг, що містить амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 180, і важкий ланцюг, що містить амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 176. Одним з варіантів здійснення даного винаходу є також гуманізоване моноклональне антитіло до IL-23p19, яке містить легкий ланцюг, що містить амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 180, і важкий ланцюг, що містить амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 178. Наступним варіантом здійснення даного винаходу є антитіло до IL-23p19 або його антигензв'язуючий фрагмент, яке / який містить варіабельну область гуманізованого легкого ланцюга, що містить CDR-ділянки з SEQ ID NO: 160, та каркасні ділянки, що мають амінокислотну послідовність, що щонайменше на 90 % ідентична амінокислотної послідовності каркасних ділянок варіабельної області легкого ланцюга, що має амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 160, та варіабельну область гуманізованого важкого ланцюга, що містить CDRділянки з SEQ ID NO: 166, та каркасні ділянки, що мають амінокислотну послідовність, яка за щонайменше на 90 % ідентична амінокислотної послідовності каркасних ділянок варіабельної області важкого ланцюга, що має амінокислотну послідовність SEQ ID NO 166. Відповідно до одного з варіантів здійснення винаходу антитіло до IL-23p19 являє собою гуманізоване моноклональне антитіло, наприклад, повнорозмірне гуманізоване моноклональне антитіло. Наступним варіантом здійснення даного винаходу є антитіло до IL-23p19 або його антигензв'язуючий фрагмент, яке / який містить варіабельну область гуманізованого легкого ланцюга, що містить CDR-ділянки з SEQ ID NO: 160, та каркасні ділянки, що мають амінокислотну послідовність, що щонайменше на 90 % ідентична амінокислотної послідовності каркасних ділянок варіабельної області легкого ланцюга, що має амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 160, та варіабельну область гуманізованого важкого ланцюга, що містить CDRділянки з SEQ ID NO: 168, та каркасні ділянки, що мають амінокислотну послідовність, яка за щонайменше на 90 % ідентична амінокислотної послідовності каркасних ділянок варіабельної області важкого ланцюга, що має амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 168. Відповідно до одного з варіантів здійснення винаходу антитіло до IL-23p19 являє собою гуманізоване моноклональне антитіло, наприклад, повнорозмірне гуманізоване моноклональне антитіло. Іншим варіантом здійснення даного винаходу є антитіло до IL-23p19 або його антигензв'язуючий фрагмент, яке / який містить варіабельну область гуманізованого легкого ланцюга, що містить CDR-ділянки з SEQ ID NO: 158, та каркасні ділянки, що мають амінокислотну послідовність, що щонайменше на 90 % ідентична амінокислотної послідовності каркасних ділянок варіабельної області легкого ланцюга, що має амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 158, та варіабельну область гуманізованого важкого ланцюга, що містить CDRділянки з SEQ ID NO: 166, та каркасні ділянки, що мають амінокислотну послідовність, яка за щонайменше на 90 % ідентична амінокислотної послідовності каркасних ділянок варіабельної області важкого ланцюга, що має амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 166. Відповідно до одного з варіантів здійснення винаходу антитіло до IL-23p19 являє собою гуманізоване моноклональне антитіло, наприклад, повнорозмірне гуманізоване моноклональне антитіло. Іншим варіантом здійснення даного винаходу є антитіло до IL-23p19 або його антигензв'язуючий фрагмент, яке / який містить варіабельну область гуманізованого легкого ланцюга, що містить CDR-ділянки з SEQ ID NO: 158, та каркасні ділянки, що мають амінокислотну послідовність, що щонайменше на 90 % ідентична амінокислотної послідовності каркасних ділянок варіабельної області легкого ланцюга, що має амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 158, та варіабельну область гуманізованого важкого ланцюга, що містить CDRділянки з SEQ ID NO: 168, та каркасні ділянки, що мають амінокислотну послідовність, яка за щонайменше на 90 % ідентична амінокислотної послідовності каркасних ділянок варіабельної області важкого ланцюга, що має амінокислотну послідовність SEQ ID NO: 168. Відповідно до одного з варіантів здійснення винаходу антитіло до IL-23p19 являє собою гуманізоване моноклональне антитіло, наприклад, повнорозмірне гуманізоване моноклональне антитіло. Відповідно до одного з об'єктів винаходу гуманізоване антитіло до IL-23p19, пропоноване в даному винаході, може відрізнятися також величиною KD щодо людського IL-23, рівною або 6 UA 112301 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 нижчою ніж 1пM. Відповідно до одного з об'єктів винаходу відсутній зсув швидкості реакції асоціації в 50 %-ній людській сироватці. Відповідно до одного з об'єктів винаходу гуманізоване антитіло до IL-23p19, пропоноване в даному винаході, може відрізнятися також тим, що воно блокує зв'язування IL-23 з людським IL23R/Fc in vitro. Відповідно до одного з об'єктів винаходу гуманізоване антитіло до IL-23p19, пропоноване в даному винаході, може відрізнятися також тим, що воно не зв'язується з людським IL-12. Відповідно до одного з об'єктів винаходу гуманізоване антитіло до IL-23p19, пропоноване в даному винаході, може відрізнятися також тим, що воно інгібує індуковане людським IL-23 виробництво IL-17 у мишачих спленоцитах, що характеризується величиною IC50 рівною або нижчою ніж 20пM. Відповідно до одного з об'єктів винаходу гуманізоване антитіло до IL-23p19, пропоноване в даному винаході, може відрізнятися також тим, що воно інгібує індуковане людським IL-23 фосфорилювання STAT3 в людських DB-клітинах, що характеризується величиною IC50 рівною або нижчою ніж 40пM. Відповідно до одного з об'єктів винаходу гуманізоване антитіло до IL-23p19, пропоноване в даному винаході, може відрізнятися також тим, що у нього не прогнозується наявність ADCC / CDC-активності. Відповідно до одного з об'єктів винаходу гуманізоване антитіло до IL-23p19, пропоноване в даному винаході, може відрізнятися також величиною KD щодо IL-23 мавп ціномолгус, рівною або нижчою ніж 1пM. Відповідно до одного з об'єктів винаходу гуманізоване антитіло до IL-23p19, пропоноване в даному винаході, може відрізнятися також тим, що воно не дає перехресну реакцію з мишачим або щурячим IL-23. Відповідно до одного з об'єктів винаходу гуманізоване антитіло до IL-23p19, пропоноване в даному винаході, може відрізнятися також тим, що воно при застосуванні в дозі 1 мг / кг інгібує індуковане людським IL-23 виробництво обох цитокінів IL-17 і IL-22 у вухах мишей на 80 % або більше. Відповідно до одного з об'єктів винаходу гуманізоване антитіло до IL-23p19, пропоноване в даному винаході, може відрізнятися також тим, що має температуру плавлення 83° C за даними вимірювань за допомогою диференціальної скануючої калориметрії. Відповідно до одного з об'єктів винаходу гуманізоване антитіло до IL-23p19, пропоноване в даному винаході, може відрізнятися також тим, що має розчинність, що дорівнює або перевищує 100 мг / мл за даними вимірювань за допомогою УФ-спектроскопії та моніторингу мутності. Відповідно до одного з об'єктів винаходу гуманізоване антитіло до IL-23p19, пропоноване в даному винаході, може відрізнятися також тим, що воно присутнє в буфері щонайменше на 90 % в мономерній формі або щонайменше на 92 % в мономерній формі, чи з меншою міру на 95 % в мономерній формі. Відповідно до одного з об'єктів винаходу гуманізоване антитіло до IL-23p19, пропоноване в даному винаході, може відрізнятися також тим, що зберігається в буфері щонайменше на 90 % в мономерній формі або щонайменше на 92 % в мономерній формі, або щонайменше на 95 % в мономерній формі протягом 1 місяця або протягом 4 місяців. Відповідно до одного з об'єктів винаходу гуманізоване антитіло до IL-23p19 являє собою гуманізоване моноклональне антитіло, наприклад, повнорозмірне гуманізоване моноклональне антитіло. Іншими варіантами здійснення винаходу є молекула ДНК, що кодує зазначену вище варіабельну область легкого ланцюга, молекула ДНК, що кодує зазначену вище варіабельну область важкого ланцюга, молекула ДНК, що кодує зазначену вище область легкого ланцюга, або молекула ДНК, що кодує зазначену вище область важкого ланцюга. Іншими варіантами здійснення винаходу є експресійний вектор, що містить зазначену вище молекулу ДНК. Відповідно до одного з варіантів здійснення винаходу експресійний вектор містить молекулу ДНК, що кодує константну область важкого ланцюга і / або константну область легкого ланцюга відповідно, пов'язану з молекулою ДНК, що кодує варіабельну область важкого ланцюга і / або варіабельну область легкого ланцюга відповідно. Іншими варіантами здійснення винаходу є клітина-господар, несуча один або кілька зазначених вище векторів. Відповідно до одного з варіантів здійснення винаходу господар являє собою клітину ссавця. Іншими варіантами здійснення винаходу є спосіб отримання вищевказаного антитіла або його антигензв'язуючого фрагмента, що полягає в тому, що трансфектують клітину-господаря з 7 UA 112301 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 організму ссавця одним або кількома описаними вище векторами, культивують клітинугосподаря і виділяють і очищають антитіло або його антигензв'язуючий фрагмент. Іншими варіантами здійснення винаходу є спосіб отримання вищевказаного антитіла або його антигензв'язуючого фрагмента, що полягає в тому, що отримують клітину-господаря з організму ссавця, що містить один або кілька зазначених вище векторів, і культивують клітинугосподаря. В одному з варіантів здійснення винаходу спосіб полягає також у тому, що виділяють і очищають антитіло або його антигензв'язуючий фрагмент. Одним з варіантів здійснення даного винаходу є вказане / зазначений вище антитіло або його антигензв'язуючий фрагмент, призначене / призначений для застосування в медицині. Відповідно до одного з варіантів здійснення винаходу застосування являє собою лікування запального захворювання, аутоімунного захворювання, респіраторного захворювання, метаболічного порушення або раку. Відповідно до одного з варіантів здійснення винаходу застосування являє собою лікування псоріазу, запального захворювання кишечнику (хвороба Крона, неспецифічний виразковий коліт), псоріатичного артриту, розсіяного склерозу, ревматоїдного артриту або анкілозуючого спондиліту. Відповідно до одного з варіантів здійснення винаходу застосування являє собою лікування псоріазу. Відповідно до одного з варіантів здійснення винаходу застосування являє собою лікування запального захворювання кишечника. Одним з варіантів здійснення даного винаходу є також фармацевтична композиція, що містить зазначену / зазначений вище молекулу антитіла або його антигензв'язуючий фрагмент і фармацевтично прийнятний носій. Одним з варіантів здійснення даного винаходу є також спосіб лікування запального захворювання, аутоімунного захворювання, респіраторного захворювання, метаболічного порушення або раку, що полягає в тому, що вводять індивідууму, який потребує цього, наприклад, пацієнту, в ефективній кількості антитіло до IL-23p19 або фармацевтичну композицію, що містить антитіло або його антигензв'язуючий фрагмент. Відповідно до одного з варіантів здійснення винаходу антитіло або його антигензв'язуючий фрагмент вводять, використовуючи парентеральний шлях введення, або вводять внутрішньовенно або підшкірно. Відповідно до одного з варіантів здійснення винаходу антитіло або його антигензв'язуючий фрагмент вводять підшкірно. Відповідно до одного з варіантів здійснення винаходу хвороба являє собою запальне захворювання кишечнику (хвороба Крона, неспецифічний виразковий коліт), псоріатичний артрит, розсіяний склероз, ревматоїдний артрит або анкілозуючийспондиліт. Відповідно до одного з варіантів здійснення винаходу хвороба являє собою псоріаз. Відповідно до одного з варіантів здійснення винаходу хвороба являє собою запальне захворювання кишечника. Одним з варіантів здійснення даного винаходу є також спосіб інгібування зв'язування IL-23 з рецептором IL-23 на клітці ссавця, що полягає в тому, що вводять в клітину зазначену / зазначений вище молекулу антитіла або його антигензв'язуючий фрагмент, інгібуючи тим самим передачу сигналів, опосередковувану рецептором IL-23. Одним з варіантів здійснення даного винаходу є також спосіб лікування індивідуума, який має асоційоване з IL-23 порушення, що полягає в тому, що вводять індивідууму вказане / зазначений вище антитіло або його антигензв'язуючий фрагмент, де вказане / зазначений антитіло або його антигензв'язуючий фрагмент зв'язується з людським IL-23. Одним з варіантів здійснення даного винаходу є також спосіб виявлення та / або кількісної оцінки рівнів IL-23 в біологічному зразку, що полягає в тому, що приводять у контакт зразок із зазначеним вище антитілом або його антигензв'язуючим фрагментом і виявляють зв'язування антитіла або його фрагмента з IL-23p19. Цю інформацію можна застосовувати для діагностування асоційованого з IL-23 порушення. Таким чином, розроблені способи діагностування асоційованого з IL-23 порушення або визначення того, чи має індивідуум підвищений ризик розвитку асоційованого з IL-23 порушення, де спосіб полягає в тому, що приводять у контакт біологічний зразок з організму індивідуума з зазначеним вище антитілом або його антигензв'язуючих фрагментом і виявляють зв'язування антитіла або його антигензв'язуючого фрагмента з IL-23p19, для визначення експресії або концентрації IL-23. Одним з варіантів здійснення даного винаходу є також спосіб інгібування зв'язування IL-23 з рецептором IL-23 на клітці, що полягає в тому, що обробляють клітину або оточення клітини зазначеним вище антитілом або його антигензв'язуючим фрагментом, інгібуючи тим самим передачу сигналів, опосередковувану рецептором IL-23. Короткий опис креслень На кресленнях показано: 8 UA 112301 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 на фіг. 1 - порівняльний аналіз первинної структури мишачої і гуманізованих варіабельних областей. На фіг. 1а - антитіло до IL-23p19 6B8 зі сконструйованими Vk-областями. На фіг. 1б антитіло до IL-23p19 6B8 зі сконструйованими VH-областями. Нумерація амінокислот відповідає стандартній системі нумерації Кебота. Звичайним шрифтом позначені ділянки людської послідовності; курсивом / підкресленим шрифтом ділянки мишачої послідовності; затемненим шрифтом ділянки синтетичної послідовності; жирним шрифтом / курсивом / підкресленим шрифтом позначені CDR; на фіг. 2 - результати аналізу зв'язування в конкурентних умовах людського IL-23 с IL23R/Fc. Детальний опис винаходу Субодиниця p19 IL-23 (яку позначають також як "IL-23p19" і "субодиниця p19") являє собою що складається з 189 амінокислот поліпептид, що містить що складається з 21 амінокислоти (ак) лідерну послідовність (Oppmann та ін, Immunity 13, 2000, с. 715, SEQ ID NO: 181). Біологічну активність молекули можна виявити тільки після її спарювання з субодиницею IL-12p40 з утворенням IL-23. IL-23 експресується переважно активованими дендритними клітинами (DC) і фагоцитарними клітинами. Встановлено, що рецептор IL-23 складається з субодиниці IL-12Rβ1 IL-12-рецептора, спареної з унікальною субодиницею, позначеної як IL-23R (Parham та ін, J. Immunol. 168, 2002, с. 5699). Експресія рецептора головним чином має місце на T-клітинах пам'яті і NK-клітинах. Таким чином, експресія зазначеної пари цитокін: рецептор, ймовірно, обмежена конкретними популяціями імунних клітин. Хоча спочатку передбачалося, що IL-12 і IL23 можуть мати загальні функції, отримані дані, що свідчать про те, що картина є іншою. У той час як IL-12 відіграє основну роль у виробництві Th1-клітин, встановлено, що IL-23 грає вирішальне значення у виробництві і підтримці нещодавно виявленої підпопуляціі Th-клітин, позначених як Th17 (Kikly та ін, Curr. Opin. Immunol. 18, 2006, с. 670, Kastelein та ін, Ann. Rev. Immunol. 25, 2007, с. 221). Ці клітини продукують IL-17A, IL-17F, IL-22 і інші прозапальні цитокіни, такі як IL-6 і TNF-α. Як буде описано нижче, вивчення на тваринних моделях ролі зазначених Th17-клітин продемонструвало їх важливість як "рушійної сили" при хронічному запаленні і аутоімунітеті. У даному винаході запропоновані антитіла, які зв'язуються з субодиницею p19 IL-23, зокрема людською IL-23p19. У цьому винаході запропоновані також гуманізовані антитіла, які розпізнають субодиницю p19 IL-23. Згідно конкретних варіантів здійснення винаходу послідовність зазначених гуманізованих антитіл ідентифікували на основі послідовностей деяких найбільш бажаних ("лідерних") мишачих антитіл. "Лідерні » мишачі антитіла, запропоновані в даному винаході, виводили з мишачих гібридом. Імунізацію мишей здійснювали з використанням різних методик. Наприклад, антитіла, специфічні щодо людських білків IL-23p19 або їх фрагментів, можуть вироблятися проти імуногенного антигену, такого як виділений білок IL-23p19, виділений білок IL-23, виділений гібридний білок IL-23 і / або фрагмент будь-якого із зазначених вище білків (включаючи синтетичні пептиди). Наприклад, для імунізації мишей використовують гібридний білок IL-23, що містить мишачу субодиницю IL-23p40 і людську субодиницю IL-23p19. Для отримання імуногенних антигенів і виробництва моноклональних антитіл можна застосовувати будь-яку прийнятну методику, відому в даній галузі. "Лідерні" мишачі антитіла вибирали на основі їх високої афінності до людського IL-23. Таким чином, одним з об'єктів даного винаходу є антитіло, яке зв'язується з людським IL-23 з високою афінністю. Відібрані мишачі антитіла гуманізували з отриманням гуманізованих антитіл. Гуманізовані антитіла, запропоновані в даному винаході, зв'язуються з людським IL-23 з високою афінністю. Таким чином, іншим об'єктом даного винаходу є гуманізоване антитіло, яке зв'язується з людським IL-23 з високою афінністю. Таким чином, одним з варіантів здійснення даного винаходу є антитіло до IL-23p19, що характеризує величиною KD, становить менш ніж 40пM. Наступним варіантом даного винаходу є антитіло до IL-23p19, що характеризує величиною KD, становить менш ніж 20пM. Наступним варіантом даного винаходу є антитіло до IL-23p19, що характеризує величиною KD, що становить менше ніж 10пM. Наступним варіантом даного винаходу є антитіло до IL-23p19, що характеризує величиною KD, що становить менше ніж 1пM. Згідно іншому об'єкту винаходу антитіло, пропоноване в даному винаході, зв'язується з IL23p19 з високою афінністю у відсутності людської сироватки або в присутності 50 % людської сироватки. Згідно іншому об'єкту винаходу гуманізоване антитіло, пропоноване в даному винаході, зв'язується також з IL-23 мавп ціномолгус з високою афінністю. 9 UA 112301 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Згідно іншому об'єкту винаходу антитіло, пропоноване в даному винаході, зв'язується з IL23, але не зв'язується з IL-12. Згідно іншому об'єкту винаходу антитіло, пропоноване в даному винаході, не надає інтерферуючого впливу на біологічну активність IL-12, який є близькоспорідненим до IL-23 представником сімейства. Згідно іншому об'єкту винаходу антитіло, пропоноване в даному винаході, інгібує стимульоване IL-23 виробництво IL-17 мишачими спленоцитами. Згідно іншому об'єкту винаходу гуманізоване антитіло, пропоноване в даному винаході, інгібує індуковане IL-23 фосфорилювання STAT3 в DB-клітинах. Згідно іншому об'єкту винаходу гуманізоване антитіло, пропоноване в даному винаході, антагонізує дію IL-23 за допомогою зв'язування з субодиницею p19 IL-23, наприклад, при оцінці по інгібуванню цитокінів, таких як IL-17 і IL-22, виробництво яких стимулюється IL-23, і що визначають щодо зниження рівнів зазначених цитокінів. Згідно іншому об'єкту винаходу гуманізоване антитіло, пропоноване в даному винаході, має прийнятний фармакокінетичний (ФК) профіль, наприклад, часом напівжиття in vivo в організмі мавп ціномолгус. Згідно наступного об'єкта винаходу гуманізоване моноклональне антитіло, пропоноване в даному винаході, має переважні біофізичні властивості, такі, наприклад, як якість, стабільність чи розчинність. Відповідно до одного з об'єктів винаходу антитіло до IL-23p19 представляє собою гуманізоване антитіло. Відповідно до одного з об'єктів винаходу антитіло до IL-23p19 являє собою моноклональне антитіло. Відповідно до одного з об'єктів винаходу антитіло до IL-23p19 являє собою повнорозмірне антитіло. Відповідно до одного з об'єктів винаходу антитіло до IL23p19 являє собою гуманізоване моноклональне антитіло, наприклад, повнорозмірне гуманізоване моноклональне антитіло. Антитіло або його антигензв'язуючий фрагмент, пропоноване / пропонований в даному винаході, специфічно розпізнає "антигенний епітоп IL-23p19" або "епітоп IL-23p19". У контексті даного опису ці поняття належать до молекули (наприклад, пептиду) або фрагменту молекули, що / який має здатність до імунологічної реакції з антитілом до IL-23p19, і, наприклад, включає антигенну детермінанту IL-23p19, розпізнавану будь-яким з антитіл, які мають наступну комбінацію послідовностей легкого ланцюга / важкого ланцюга: SEQ ID NO: 84/121, 86/123, 88/125, 90/127, 91/128, 93/130, 95/132, 97/134, 99/136, 101/138, 103/140, 105/142, 107/144, 109/146, 111/148, 113/150, 115/152, 117/154, 119/156, 160/166, 160/168, 158/166 або 158/168. Антигенні епітопи IL-23p19 можуть бути включені в білки, білкові фрагменти, пептиди і т.п. Епітопи в більшості випадків являють собою білки, короткі олігопептиди, міметики олігопептидів (наприклад, органічні сполуки, які імітують зв'язуючу здатність антигену IL-23p19) або їх комбінації. Вважається, що мінімальний розмір пептидного або поліпептидного епітопу для антитіла повинен становити приблизно 4-5 амінокислот. Пептидні або поліпептидні епітопи містять, наприклад, щонайменше сім амінокислот, або, наприклад, щонайменше дев'ять амінокислот, або, наприклад, від приблизно 15 до приблизно 20 амінокислот. Оскільки антитіло може розпізнавати антигенний пептид або поліпептид в його третинній формі, то не потрібно, щоб амінокислоти, що входять до епітоп, були суміжними, в деяких випадках вони можуть навіть не перебувати на одному і тому ж пептидному ланцюзі. Епітопи можна визначати за допомогою різних методик, відомих в даній області, таких як рентгенівська кристалографія, масспектрометрія дейтеро / водневого обміну (HXMS), сайтнаправленний мутагенез, аланінскануючий мутагенез і методи пептидного скринінгу. Загальна структура антитіл або імуноглобуліну добре відома фахівцям в даній області. Ці молекули є гетеротетрамерні глікопротеїни, як правило з молекулярною масою приблизно 150000 Да що складаються з двох ідентичних легких (L) ланцюгів і двох ідентичних важких (H) ланцюгів, і, як правило, їх позначають як повнорозмірні антитіла. Кожен легкий ланцюг ковалентно пов'язаний з важким ланцюгом за допомогою одного дисульфідного зв'язку з утворенням гетеродимера, і гетеротетрамерна молекула утворюється за допомогою ковалентного дисульфідного зв'язку між двома ідентичними важкими ланцюгами гетеродимерів. Хоча легкі і важкі ланцюги пов'язані з допомогою одного дисульфідного зв'язку, кількість дисульфідних зв'язків між двома важкими ланцюгами варіюється залежно від ізотипу імуноглобуліну. Кожен важкий і легкий ланцюг має також рівномірно розподілені внутрішньоланцюгові дисульфідні містки. Кожен важкий ланцюг має амінокінцевий варіабельний домен (VH), за яким розташовані три або чотири константних домени (C H1, CH2, CH3 і CH4), а також шарнірну ділянку між CH1 і CH2. Кожен легкий ланцюг має два домени, амінокінцевий варіабельний домен (VL) і карбоксикінцевий константний домен (CL). VL-домен нековалентно пов'язаний з VH-доменом, а CL-домен, як правило, ковалентно пов'язаний з CH1-доменом 10 UA 112301 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 через дисульфідні зв'язки. Вважається, що певні амінокислотні залишки утворюють поверхню розділу між варіабельними областями легких і важких ланцюгів (Chothia та ін, J. Mol. Biol. 186, 1985, сс. 651-663). У контексті даного опису варіабельні домени позначають також як варіабельні області. Певні ділянки в варіабельних доменах значно розрізняються у різних антитіл, тобто вони є "гіперваріабельні". Ці гіперваріабельні ділянки містять залишки, які безпосередньо беруть участь у зв'язуванні і визначають специфічність кожного конкретного антитіла щодо специфічної для нього антигенної детермінанти. Гіперваріабельність в варіабельних доменах як легкого ланцюга, так і важкого ланцюга, концентрується в трьох сегментах, які позначають як визначальні компліментарність ділянки (гіперваріабельні ділянки) (CDR) або гіперваріабельні петлі (HVL). CDR визначають шляхом порівняння послідовностей згідно методу, описаного у Kabat та ін в: Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5-е вид., Вид-во Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, Md., 1991, а HVL (які позначають також як CDR) структурно визначають на основі тривимірної структури варіабельного домена згідно методу, описаного у Chothia d Lesk, J. Mol. Biol. 196, 1987, сс. 901-917. Ці два методи приводять до деяких відмінностей при ідентифікації CDR. Згідно номенклатурі Кебота CDR-L1 розташований приблизно на залишках 24-34, CDR-L2 приблизно на залишках 50-56 і CDR-L3 приблизно на залишках 89-97 в варіабельному домені легкого ланцюга; CDR-H1 розташований приблизно на залишках 31-35, CDR-H2 приблизно на залишках 50-65 і CDR-H3 приблизно на залишках 95-102 в варіабельному домені важкого ланцюга.Точні номери залишків, які утворюють конкретний CDR, повинні змінюватись в залежності від послідовності та розміру CDR. Фахівці в даній області можуть на основі амінокислотної послідовності варіабельної області антитіла з використанням загальноприйнятих методів визначати, які залишки містяться в конкретному CDR. Таким чином, CDR1, CDR2, CDR3 важких і легких ланцюгів визначають унікальні і функціональні властивості, специфічні для даного антитіла. Три CDR в кожній з важких і легких ланцюгів розділені каркасними ділянками (FR), які містять послідовності, меншою мірою мають тенденцію до варіабельності. Починаючи з амінокінця у напрямку до карбоксікінця варіабельних доменів важких і легких ланцюгів FR і CDR впорядковані наступним чином: FR1, CDR1, FR2, CDR2, FR3, CDR3 і FR4. У значному ступені βскладчаста конформація FR дозволяє CDR у кожному з ланцюгів перебувати в безпосередній близькості один з одним, а також з СDR з іншого ланцюга. Отримана конформація притаманна антигензв'язуючому центру (див. Kabat та ін, NIH Publ. № 91-3242, т. I, 1991, сс. 647-669), хоча не є необхідною умовою, щоб всі залишки CDR безпосередньо брали участь у зв'язуванні антигену. Залишки FR і константні домени Ig не залучені безпосередньо в зв'язування антигену, але беруть участь у пов'язаній з антигеном і / або опосередкованій антигеном ефекторній функції. Деякі залишки FR, ймовірно, надають виражений вплив на зв'язування антигену щонайменше трьома шляхами: шляхом нековалентного зв'язування безпосередньо з епітопом, шляхом взаємодії з одним або кількома залишками CDR і шляхом впливу на поверхню розділу між важкими і легкими ланцюгами. Константні домени не беруть участь безпосередньо у зв'язуванні антигену, але опосередковують різні ефекторні функції Ig, такі як участь антитіла в антитілообумовленій клітинозалежній цитотоксичності (ADCC), комплементзалежній цитотоксичності (CDC) і антитіло-обумовленому клітинному фагоцитозі (ADCP). Легкі ланцюги імуноглобулінів хребетних тварин відносять до одного з двох чітко помітних класів, каппа (κ) і лямбда (λ), на основі амінокислотної послідовності константного домена. Для порівняння, важкі ланцюги імуноглобулінів ссавців відносять до одного з п'яти основних класів з урахуванням послідовності константних доменів: IgA, IgD, IgE, IgG і IgM. IgG та IgA додатково підрозділяють на підкласи (ізотипи), наприклад, IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgA1 і IgA2. Константні домени важких ланцюгів, які відповідають різним класам імуноглобулінів, позначають як α, δ, ε, γ і μ відповідно. Структури субодиниць і тривимірні конфігурації класів нативних імуноглобулінів добре відомі. Поняття "антитіло", "антитіло до IL-23p19", "гуманізоване антитіло до IL-23p19", "гуманізоване антитіло до епітопу IL-23p19" і "варіант гуманізованого антитіла до епітопу IL23p19" відносяться, зокрема, до моноклональних антитіл (включаючи повнорозмірні моноклональні антитіла), поліклональних антитіл, мультіспеціфічних антитіл (наприклад, біспеціфічних антитіл) і фрагментів антитіл, таких як варіабельні домени і інші ділянки антитіл, які мають необхідну біологічну активність, наприклад, здатність зв'язуватися з IL-23p19. Поняття "моноклональне антитіло" (МАт) відноситься до антитіла, яке є високоспецифічним, його мішенню є індивідуальна антигенна детермінанта, "епітоп". Таким чином, прикметник "моноклональні" вказує на відмітну ознаку антитіл, мішенню яких є ідентичний епітоп, і воно не 11 UA 112301 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 пов'язане з вимогою до отримання антитіл за допомогою якого-небудь конкретного методу. Повинно бути очевидно, що моноклональні антитіла можна отримувати за допомогою будь-якої техніки або методології, відомої в даній області; включаючи, наприклад, метод гібридом (Kohler і ін, Nature 256, 1975, с. 495), або методи рекомбінантної ДНК, відомі в даній галузі (див., наприклад, US № 4816567), або методи виділення моноклональних отриманих за допомогою рекомбінантної ДНК антитіл з використанням фагових бібліотек антитіл за допомогою методик, які описані у Clackson та ін, Nature 352, 1991, сс. 624-628 і у Marks та ін., J. Mol. Biol. 222, 1991, сс. 581-597. Поняття "мономер" відноситься до гомогенної форми антитіла. Наприклад, у разі повнорозмірного антитіла мономер означає мономерне антитіло, яке має два ідентичні важкі ланцюги і два ідентичні легкі ланцюги. Химерні антитіла складаються з варіабельних областей важких і легких ланцюгів антитіл з одного виду (наприклад, з ссавця крім людини, такого як миша) і константних областей важкого і легкого ланцюга антитіла з інших видів (наприклад, людини), і їх можна отримувати шляхом з'єднання послідовностей ДНК, що кодують варіабельні області антитіла з першого виду (наприклад, миші), з послідовностями ДНК константних областей антитіла з другого виду (наприклад, людини), і трансформації господаря експресійним вектором, що містить пов'язані послідовності, що дозволяє господареві продукувати химерне антитіло. В альтернативному варіанті химерне антитіло може також являти собою антитіло, в якому одна чи кілька областей або доменів важкого і / або легкого ланцюга ідентичні, гомологічні або є варіантом відповідної послідовності в моноклональному антитілі з іншого класу або ізотипу імуноглобуліну або з консенсусної послідовності, або послідовності зародків лінії. Химерні антитіла можуть включати фрагменти зазначених антитіл за умови, що фрагмент антитіла має необхідну біологічну активність батьківського антитіла, наприклад, здатність зв'язуватися з одним і тим же епітопом (див., наприклад, US № 4816567; і Morrisonта ін., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 81, 1984, сс. 68516855). Поняття "фрагмент антитіла", "фрагмент антитіла до IL-23p19", "фрагмент антитіла до епітопу IL-23p19", "фрагмент гуманізованого антитіла до IL-23p19", "фрагмент гуманізованого антитіла до епітопу IL-23p19", "фрагмент варіанту гуманізованого антитіла до епітопу IL-23p19 »відносяться до частини повнорозмірного антитіла до IL-23p19, в якому зберігається варіабельна область або її функціональна здатність, наприклад, специфічність зв'язування з епітопом IL-23p19. Прикладами фрагментів антитіл є (але не обмежуючись лише ними) Fab-, Fab'-, F (ab ') 2 -, Fd-, Fv-, scFv-і scFv-Fc-фрагмент, димерне антитіло (діабоді), лінійне антитіло, одноланцюгове антитіло, мінітіло, димерне антитіло, утворене з фрагментів антитіла, і мультіспеціфічні антитіла, утворені з фрагментів антитіл. Повнорозмірні антитіла можна обробляти ферментами, такими як папаїн або пепсин, з отриманням необхідних фрагментів антитіл. Розщеплення папаїном застосовують для отримання двох ідентичних антигензв'язуючих фрагментів антитіл, які називають "Fab" фрагментами, кожен з одним антигензв'язуючим центром, при цьому частину позначають як "Fc" -фрагмент. Fab-фрагмент містить також константний домен легкого ланцюга і CH1-домен важкого ланцюга. Після обробки пепсином отримують F (ab ') 2-фрагмент, який несе два антигензв'язуючих центра і все ще зберігає здатність до перехресного зшивання з антигеном. Fab'-фрагменти відрізняються від Fab-фрагментів присутністю додаткових залишків, включаючи один або кілька залишків цистеїну з шарнірної області антитіла на C-кінці CH1домена. F (ab ') 2-фрагменти антитіл являють собою пари Fab'-фрагментів, пов'язаних з допомогою залишків цистеїну у шарнірної області. Відомі інші хімічні поєднання фрагментів антитіл. "Fv» -фрагмент містить повний антиген-що розпізнає і антиген-зв'язуючий центр, що складається з димеру, що включає варіабельний домен однієї важкого і одного легкого ланцюга, які перебувають у тісній нековалентній асоціації. У цій конфігурації три CDR кожного варіабельного домена взаємодіють з певним антигензв'язуючим центром на поверхні димеру VH-VL. В цілому, шість CDR обумовлюють специфічність антитіла щодо зв'язування антигену. "Одноланцюговий Fv »або« scFv » -фрагмент антитіла являє собою одноланцюговий Fvваріант, що містить VH-і VL-домени антитіла, при цьому домени присутні в одному поліпептидному ланцюзі. Одноланцюговий Fv має здатність розпізнавати антиген і зв'язуватися з ним. Поліпептид scFv необов'язково може містити також поліпептидний лінкер, розташований між VH-і VL-доменами, для полегшення утворення тривимірної структури, необхідну для зв'язування scFv з антигеном (див., наприклад, Pluckthun, в: The Pharmacology of monoclonal Antibodies, т. 113, під ред. Rosenburg і Moore, вид-во Springer-Verlag, New York, 1991, сс. 269315). Поняття "димерне антитіло (діабоді)» відноситься до невеликих фрагментів антитіла з 12 UA 112301 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 двома антигензв'язуючими центрами, при цьому фрагменти містять варіабельний домен важкого ланцюга (VH), зчеплений з варіабельним доменом легкого ланцюга (VL) у одному й тому ж поліпептидному ланцюзі (VH-VL або VL-VH). Димерні антитіла описані більш детально наприклад, у Holliger та ін., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90, 1993, сс. 6444-6448. Інші що мають здатність до розпізнавання фрагменти антитіл включають фрагменти, які містять пару розташованих у вигляді тандему Fd-сегментів (VH-CH1-VH-CH1), що утворюють пару антигензв'язуючий ділянок. Зазначені "лінійні антитіла" можуть бути біспеціфічними або моноспецифічними, що описано, наприклад, у Zapata та ін., Protein Eng. 8(10), 1995, сс. 10571062. Гуманізоване антитіло або фрагмент гуманізованого антитіла є специфічний тип химерного антитіла, яке включає варіант амінокислотної послідовності імуноглобуліну або його фрагмента, який має здатність зв'язуватися з попередньо визначеним антигеном і який містить один або кілька FR, який (і) має (ють) амінокислотну послідовність, практично відповідну послідовності людського імуноглобуліну, і один або декілька CDR, який (і) має (ють) амінокислотну послідовність, що практично відповідає амінокислотній послідовності нелюдського імуноглобуліну. Вказану нелюдську амінокислотну послідовність, яку часто позначають як "імпортна" послідовність, як правило, отримують з "імпортного" домена антитіла, зокрема, варіабельного домена. У цілому, гуманізоване антитіло включає щонайменше CDR або HVL нелюдського антитіла, вбудовані між FR варіабельного домена людської важкої або легкого ланцюзі. У даному винаході описані специфічні гуманізовані антитіла до IL-23p19, які містять CDR, виведені з мишачих моноклональних антитіл, або гуманізовані CDR, які представлені в таблицях 3 і 4, вбудовані між FR в послідовностях варіабельних доменів важкого і легкого ланцюга людської зародкової лінії. Повинно бути очевидно, що певні залишки мишачого FR можна імпортувати для забезпечення функції гуманізованих антитіл, і отже, певні залишки послідовностей варіабельних доменів важкого і легкого ланцюга людської зародкової лінії модифікують для того, щоб вони були такими ж як у відповідній мишачій послідовності. У іншому об'єкті винаходу гуманізоване антитіло до IL-23p19 містить практично повністю щонайменше один і, як правило, два варіабельних домена (таких, наприклад, як входять до Fab-, Fab'-, F (ab ') 2 -, Fabc-і Fv-фрагменти), в яких всі або практично всі CDR відповідають CDR нелюдських імуноглобулінів, і згідно з цим винаходом все CDR являють собою мишачі або гуманізовані послідовності, докладно описані в представлених нижче таблицях 1-4, і все або практично все FR являють собою FR, які мають консенсусну послідовність або послідовність зародкової лінії людського імуноглобуліну. У іншому об'єкті винаходу гуманізоване антитіло до IL-23p19 включає також щонайменше частина Fc-області імуноглобуліну, як правило, людського імуноглобуліну. Як правило, антитіло повинно містити як легкий ланцюг, так і щонайменше варіабельний домен важкого ланцюга. Антитіло може включати також при необхідності один або декілька з наступних ділянок: CH1, шарнірна область, CH2, CH3 і / або CH4 важкого ланцюга. Гуманізоване антитіло до IL-23p19 можна вибирати з будь-якого класу імуноглобулінів, включаючи IgM, IgG, IgD, IgA та IgE, і будь-якого ізотипу, включаючи IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgA1 і IgA2. Наприклад, константний домен може являти собою комплементфіксірующій константний домен, якщо потрібно, щоб гуманізоване антитіло мало цитотоксичну активність, і ізотип, як правило, являє собою IgG1. Якщо зазначена цитотоксична активність не потрібна, то константний домен може відноситися до іншого ізотипу, наприклад, IgG2. В альтернативному варіанті гуманізоване антитіло до IL-23p19 може містити послідовності більш ніж з одного класу або ізотипу імуноглобулінів, і вибір конкретних константних доменів для оптимізації необхідних ефекторних функцій знаходиться в компетенції звичайного фахівця в даній області. Конкретними варіантами здійснення даного винаходу є антитіла, які представляють собою антитіла ізотипу IgG1 і більш конкретно антитіла ізотипу IgG1, в яких "вимкнені" ефекторні функції. FR- і CDR-або HVL-ділянки гуманізованого антитіла до IL-23p19 не обов'язково повинні точно відповідати батьківським послідовностям. Наприклад, один або кілька залишків в імпортному CDR або HVL або в консенсусній послідовності або послідовності зародкової лінії FR можна змінювати (наприклад, за допомогою мутагенезу) шляхом заміни, інсерції або делеції, в результаті чого отриманий амінокислотний залишок стає ідентичним вихідному залишку у відповідному положенні буд-якої батьківського послідовності, але, тим не менш, антитіло зберігає функцію, таку як здатність зв'язуватися з IL-23p19. Вказана зміна, як правило, не повинна бути великим і має представляти собою консервативні зміни. Як правило, щонайменше 75 % залишків, частіше щонайменше 90 % і найбільш часто більше 95 % або більше 98 %, або 13 UA 112301 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 більше 99 %, гуманізованого антитіла повинно відповідати залишкам батьківської консенсусної послідовності або послідовності FR зародкової лінії і імпортних послідовностей CDR. Залишки імуноглобуліну, які впливають на поверхню розділу між варіабельними областями важкого і легкого ланцюга ("поверхня розділу VL-VH"), являють собою залишки, які впливають на близькість або орієнтацію двох ланцюгів відносно один одного. Конкретними залишками, які можуть брати участь у взаємодіях між ланцюгами, є залишки VL 34, 36, 38, 44, 46, 87, 89, 91, 96 і 98 і залишки VH 35, 37, 39, 45, 47, 91, 93, 95, 100 і 103 (відповідно до системи нумерації, запропонованої Kabat та ін, Sequences of Proteins of Immunological Interest (National Institutes of Health, Bethesda, Md., 1987)). У US № 6407213 обговорюється також, що у вказаному взаємодії можуть брати участь такі залишки, як залишки VL 43 і 85 і залишки VH 43 і 60. Хоча ці залишки вказані тільки для людського IgG, їх можна розглядати і для інших видів. Важливі залишки антитіла, які, як очікується, можуть брати участь у взаємодіях між ланцюгами, відбирають для заміни в консенсусній послідовності. Поняття "консенсусна послідовність" і "консенсусне антитіло" відносяться до амінокислотної послідовності, що містить найбільш часто зустрічається амінокислотний залишок в кожному положенні у всіх імуноглобулінах будь-якого класу, ізотипу або в будь-якій суб'одиничній структурі, наприклад, варіабельному домені людського імуноглобуліну. Консенсусна послідовність може базуватися на імуноглобулінах конкретних видів або безлічі видів. Під "консенсусною / консенсусним" послідовністю, структурою або антитілом увазі консенсусну людську послідовність, зазначену в конкретних варіантах здійснення винаходу, і поняття відноситься до амінокислотної послідовності, що містить найбільш часто зустрічаються залишки в кожному положенні у всіх людських імуноглобулінах конкретного класу, ізотипу або субодиничної структури. Таким чином, консенсусна послідовність містить амінокислотну послідовність, що має в кожному положенні амінокислоту, яка присутня в одному або декількох відомих імуноглобулінах, але що може не представляти собою точну копію повної амінокислотної послідовності будь-якого індивідуального імуноглобуліну. Варіабельну область консенсусної послідовності не отримують з якого-небудь що зустрічається в природних умовах антитіла або імуноглобуліну (Kabat та ін, Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5-е вид., вид-во Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, Md., 1991) і його варіантів. Консенсусні послідовності FR важкого і легкого ланцюга та їх варіанти представляють собою цінні послідовності для отримання гуманізованих антитіл до IL-23p19 (див., наприклад, US №№ 6037454 і 6054297). Послідовності людської зародкової лінії присутні в природних умовах в популяції людських антитіл. Комбінація цих генів зародкової лінії створює різноманітність антитіл. Послідовності зародкової лінії антитіла легкого ланцюга антитіла отримують з консервативних v-генів і j-генів людської зародкової лінії каппа або лямбда. Аналогічно цьому послідовності важкого ланцюга отримують з v-, d-і j-генів зародкової лінії (LeFranc MP і LeFranc G, "The Immunoglobulin Facts Book", вид-во Academic Press, 2001). У контексті даного опису кожне з понять "варіант", "варіант антитіла до IL-23p19", "гуманізований варіант антитіла до IL-23p19" або "варіант гуманізованого антитіла до IL-23p19" відноситься до гуманізованого антитілу до IL-23p19, яке має щонайменше послідовність мишачого CDR варіабельної області легкого ланцюга, вибрану з будь-яких послідовностей, представлених в таблиці 1, або послідовність мишачого CDR важкого ланцюга, виведену з мишачого моноклонального антитіла, представленого в таблиці 2. До варіантів відносяться послідовності, що мають одну або кілька амінокислотних замін в варіабельних областях однієї або обох легенів ланцюгів або важких ланцюгів, за умови, що амінокислотна заміна не робить істотного впливу на зв'язування антитіла з IL-23p19. Прикладами гуманізованих антитіл, отриманих згідно з даним винаходом, є антитіла, позначені як Антитіло A, Антитіло B, Антитіло C і Антитіло D і їх різні важкі і легкі ланцюги, представлені в SEQ ID NO: 174 і 180 і SEQ ID NO: 176 і 178 відповідно. "Виділене » антитіло являє собою антитіло, яке ідентифіковане і відокремлене і / або очищене від компонента його природного оточення. Забруднюючі компоненти природного оточення антитіла представляють собою субстанції, які можуть впливати на діагностичне або терапевтичне застосування антитіла і можуть являти собою ферменти, гормони або інші білкові або небілкові розчинені речовини. В одному з об'єктів винаходу виділене антитіло має представляти собою антитіло, очищене до ступеня, що перевищує 95 мас. %. Виділене антитіло являє собою антитіло in situ всередині рекомбінантних клітин, в яких воно продукувало, якщо в ньому не присутній жоден компонент природного оточення антитіла. Однак, як правило, виділене антитіло отримують за допомогою щонайменше однієї стадії очищення, під час якої видаляють рекомбінантний клітинний матеріал. 14 UA 112301 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Поняття "характеристика антитіла" відноситься до факторів, які беруть участь у розпізнаванні антитілом антигену або ефективності антитіла in vivo. Зміни в амінокислотної послідовності антитіла можуть впливати на властивості антитіла, такі як фолдінг, і можуть впливати на фізичні фактори, такі як початкова швидкість зв'язування антитіла з антигеном (ka), константа дисоціації антитіла від антигену (kd), константа афінності антитіла до антигену (Kd), конформація антитіла, стабільність білка і час напівжиття антитіла. У контексті даного опису поняття "епітопне мічення" відноситься до антитіла до IL-23p19, злитому з "епітопною міткою". "Епітопна мітка" являє собою поліпептид, що складається з достатньої кількості амінокислот для створення епітопу для виробництва антитіла, при цьому її створюють так, щоб вона не чинила впливу на необхідну активність гуманізованого антитіла до IL-23p19. Епітопна мітка, як правило, є в значній мірі унікальною, в результаті чого антитіло, яке утворюється проти епітопної мітки, не дає виражену перехресну реакцію з іншими епітопами. Прийнятні поліпептиди-мітки, як правило, містять щонайменше 6 амінокислотних залишків і, як правило, містять приблизно 8-50 амінокислотних залишків або приблизно 9-30 залишків. Прикладами епітопних міток і антитіл, які зв'язуються з епітопом, є поліпептид-мітка flu HA (HA вірусу грипу) і відповідне йому антитіло 12CA5 (Field та ін, Mol. Cell. Biol. 8, 1988 2159-2165); cmyc -мітка і відповідні їй антитіла 8F9, 3C7, 6E10, G4, B7 і 9E10 (Evan та ін, Mol. Cell. Biol. 5 (12), 1985,, сс. 3610-3616); і мітка, що включає глікопротеїн D (gD) вірусу герпесу простого, і відповідне їй антитіло (Paborsky та ін Protein Engineering 3 (6), 1990, сс. 547-553). У конкретних варіантах здійснення винаходу епітопна мітка являє собою "епітоп, що зв'язується з рецептором порятунку". У контексті даного опису поняття "епітоп, що зв'язується з рецептором порятунку" відноситься до епітопу Fc-області молекули IgG (такий як IgG1, IgG2, IgG3 або IgG4), відповідальному за подовження часу напівжиття молекули IgG in vivo в сироватці. У деяких варіантах здійснення винаходу антитіла, запропоновані в даному винаході, можна кон'югувати з цитотоксичним агентом. Він може являти собою будь-яку субстанцію, що інгібує або перешкоджає функції клітин і / або викликає деструкцію клітин. Під поняття підпадають радіоактивні ізотопи (такі як I131, I125, Y90, і Re186), хіміотерапевтичні засоби і токсини, такі як володіючі ферментативною активністю токсини, отримані з бактерій, грибів, рослин або тварин, і їх фрагменти. Зазначені цитотоксичні агенти можна зшивати з гуманізованими антитілами, запропонованими в даному винаході, за допомогою стандартних процедур і застосовувати, наприклад, для лікування пацієнта, якому показана терапія на основі антитіла. "Хіміотерапевтичний засіб » представляє собою хімічну сполуку, яку можна застосовувати для лікування раку. Відомі численні приклади хіміотерапевтичних засобів, які можна кон'югувати з терапевтичними антитілами, запропонованими в даному винаході. Прикладами зазначених хіміотерапевтичних засобів є алкілуючі засоби, такі як тіотепа і циклофосфамід; алкілсульфонати, такі як бусульфан, імпросульфан і піпосульфан; азиридин, такі як бензодопа, карбоквон, метуредопа і уредопа; етиленіміну і метіламеламіни, включаючи алтретамін, тріетіленмеламін, тріетіленфосфорамід, тріетілентіофосфорамід і тріметілоломеламін; ацетогеніни (насамперед буллатацін і буллатацінон); камптотецин (включаючи синтетичний аналог топотекан); бріостатін; каллістатін; CC-1065 (включаючи його синтетичні аналоги адозелесін, карзелесін і бізелесін); кріптофіціни (насамперед кріптофіцін 1 і кріптофіцін 8); доластатін, аурістатіни (включаючи такі аналоги, як монометал-аурістатін E і монометалаурістатін F); дуокарміцін (включаючи синтетичні аналоги KW-2189 і CBI-TMI); елеутeробін; панкратістатін; саркодіктіін; спонгістатін; азотні аналоги гірчичного газу (іприту), такі як хлорамбуцил, хломафазін, хлорфосфамід, естрамустин, іфосфамід, мехлоретамін, гідрохлорид оксиду мехлорметаміна, мелфалан, новембіхін, фенестерін, преднімустін, трофосфамід, урамустін (азотістоіпрітовое похідне урацилу); нітрозмочевіни, такі як кармустин, хлорзотоцін, фотемустін, ломустін, німустін, ранімустін; антибіотики, такі як енедііновие антибіотики (наприклад, каліхеамінцін, насамперед каліхеаміцином гамма 1I і каліхеамінцін phiI1 (див., наприклад, Agnew, Chem. Intl. Ed. Engl., 33, сс. 183-186); дінеміцін, включаючи дінеміцін A; бісфосфонати, такі як клодронат; еспераміцін; а також неокарзіностатіновий хромофор і споріднений хромопротеїн хромофоров енедіінових антибіотиків), аклаціномізіни, актиноміцин, аутраміцін, азасерін, блеоміцин, кактіноміцін, карабіцін, карміноміціна, карзінофелін, хромомицина, дактіноміцін, даунорубіцин, деторубіцін, 6-Діаза-5-оксо-L-норлейцін, доксорубіцин (Adriamycin ™) (включаючи морфоліно-доксорубіцин, ціанморфоліно-доксорубіцин, 2-пірролінодоксорубіцин і дезоксідоксорубіцін), епірубіцин, езорубіцін, ідарубіцин, марцелломіцін, мітоміцин, такі як мітоміцін C, микофенольная кислота, ногаламіцін, Олівоміцін, пепломіцін, потфіроміцін, пуромицин, хеломіцін, родарубіцін, стрептонігрін, стрептозоцином, туберцідін, убенімекс, зіностатін, зорубіцін; антіметаболіти, такі як метотрексат і 5-фторурацил (5-ФУ); аналоги фолієвої кислоти, такі як деноптерін, метотрексат, птероптерін, триметрексат; пуринові 15 UA 112301 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 аналоги, такі як флударабін, 6-меркаптопурин, тіамітрін, тіогуанін; пірімідіновиє аналоги, такі як анцітабін, азацітідін, 6-азаурідін, кармофур, цитарабін, дідезоксіуредін, доксіфлурідін, еноцітабін, флоксурідін; андрогени, такі як калустерон, дромостанолонпропіонат, епітіостанол, мепітіостан, тестолактон; антіадренергетікі, такі як аміноглутетимід, мітотан, трілостан; замінник фолієвої кислоти, такий як фроліновая кислота; ацеглатон; альдофосфамідглікозід; амінолевулінова кислота; енілураціл; амсакрин; бестрабуціл; бісантрен; едатраксат; дефофамін; демоколцін; діазіхон; елформітін; елліптінія ацетат; епотілон; етоглюцід; нітрат галію; гидроксимочевина; лентинан; лонідамін; майтансіноіди, такі як майтансін і ансамітоціни; мітогуазон; мітоксантрон; мопідамол; нітракрін; пентостатином; фенамед; пірарубіцін; лосоксантрон; подафілліновая кислота; 2-етілгідразід; прокарбазін; PSK ®; разоксан; різоксін; сізофуран; спірогерманій; тенуазонова кислота; тріазіхон; 2,2 ', 2''-тріхлортріетіламін; тріхотецени (насамперед токсин T-2, верракурін A, рорідін A і ангуідін); уретан; віндесін; дакарбазін; манномустін; мітобронітол; мітолактол; піпоброман; гацітозін; арабінозід ("Ara-С"); циклофосфамід; тіотепа; таксоіди, наприклад паклітаксел (TAXOL ®, фірма Bristol-Myers Squibb Oncology, Прінстон, штат Нью-Джерсі) і доцетаксел (TAXOTERE ®, фірма Rhone-Poulenc Rorer, Ентоні, Франція); хлорамбуцил; гемцітабін (Gemzar ™); 6-тіогуанін; меркаптопурин; метотрексат; аналоги платини, такі як цисплатин і карбоплатин; вінбластин; платина; етопозид (VP-16); іфосфамід; мітоксантрон; вінкристин; винорелбин (Navelbine™); новантрон; тенипозид; едатрексат; дауноміцин; аміноптерин; кселода; ібандронат; СРТ-11; інгібітор топоізомерази RFS-2000; діфторметілорнітін (ДМПО); ретиноїди, такі як ретиноевая кислота; капецитабін, і їх фармацевтично прийнятні солі, кислоти або похідні будь-якого із зазначених вище сполук. Також під обсяг цього визначення підпадають антігормональние агенти, які регулюють або інгібують дію гормону на пухлини, такі як антиестрогени і селективні модулятори рецепторів естрогену (SERM), включаючи, наприклад, тамоксифен (включаючи Nolvadex™), ралоксіфен, дролоксіфен, 4-гідроксітамоксіфен, тріоксіфен, кеоксіфен, LY117018, онапрістон і тореміфен (Fareston ™); інгібітори ароматази, які інгібують фермент ароматазу, регулюють виробництво естрогену надпочечниками, такі, наприклад, як 4 (5)-імідазолу, аміноглутетимід, мегестрола ацетат (Megace™), ексеместан, форместан, фадрозол, ворозол (Rivisor™), летрозол (Femara™) і анастрозол (Arimidex™); і антіандрогени, такі як флутамід, нілутамід, бікалутамід, леупролід і госерелін, а також фармацевтично прийнятні солі, кислоти і похідні будь-якого із зазначених вище сполук. Будь-яке одне або кілька цих коштів можна кон'югувати з гуманізованими антитілами, запропонованими в даному винаході, з отриманням цінного терапевтичного засобу, який можна застосовувати для лікування різних порушень. Антитіла можна кон'югувати також з проліками. "Проліки" являє собою попередник або похідне фармацевтично активної субстанції, яке є менш цитотоксичнимть щодо пухлинних клітин в порівнянні з вихідним лікарським засобом і має здатність активуватися або перетворюватися в більш активну вихідну форму за допомогою ферментів (див., наприклад, Wilman в: "Prodrugs in Cancer Chemotherapy », Biochemicals Society Transactions, 14, 1986, сс. 375-382, 615-й симпозіум у Белфасті (1986); і Stella та ін в:« Prodrugs: A Chemical Approach to Targeted Drug Delivery », Directed Drug Delivery, під ред. Borchardt та ін, вид-во Humana Press, 1985, сс. 247-267). Придатні проліки включають (але не обмежуючись ними) фосфатвмісні проліки, тіофосфатвмісні проліки, сульфатвмісні проліки, пептідвмісні проліки, модифіковані Dамінокислотою проліки, глікозильовані проліки, β-лактамвмісні проліки, проліки, що містять необов'язково заміщений феноксіацетамід, або проліки, що містять необов'язково заміщений фенілацетамід, 5-фторцітозін-та інші 5-фторурідіновмісні проліки, які можуть перетворюватися у більш активну цитотоксичну вільну лікарську форму. Приклади цитотоксичних лікарських засобів, які можуть утворювати похідні у вигляді проліків, включають (але не обмежуючись ними) описані вище хіміотерапевтичні засоби. Для діагностичних цілей, а також для моніторингу лікування антитіла, пропоновані у винаході, можна кон'югувати також з міткою, або тільки з міткою, або з міткою в поєднанні з додатковим другим агентом (проліки, хіміотерапевтичний засіб тощо). Мітка на відміну від другого додатково агента являє собою субстанцію, яка є виявляємою сполукою або виявляємою композицією, і її можна кон'югувати прямо або побічно з гуманізованим антитілом, запропонованим у даному винаході. Мітка сама по собі може являти собою субстанцію що виявляється (наприклад, радіоізотопні мітки або флуоресцентні мітки) або, як у випадку ферментативної мітки, вона може каталізувати хімічну зміну сполуки або композиції, що представляє / представляє собою субстрат, яке можна виявляти. Мічені гуманізоване антитіло до IL-23p19 можна приготовляти і застосовувати для різних цілей, включаючи діагностику in vitro і in vivo. 16 UA 112301 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Антитіла, запропоновані в даному винаході, можна приготовляти таким чином, щоб вони представляли собою частину препарату у вигляді ліпосоми, для їх ефективного введення in vivo. "Ліпосома" являє собою невеликий пухирець, що складається з різного типу ліпідів, фосфоліпідів і / або поверхнево-активних речовин. Ліпосоми можна застосовувати для введення ссавцю сполуки або композиції, наприклад, гуманізованого антитіла до IL-23p19, представленого в даному описі, необов'язково в поєднанні або в комбінації з одним або кількома фармацевтичними діючими речовинами та / або мітками. Компоненти ліпосом зазвичай впорядковані у вигляді двошарової структури, аналогічної ліпідній структурі біологічних мембран. Конкретними об'єктами даного винаходу є виділені нуклеїнові кислоти, які кодують один або декілька доменів гуманізованих антитіл, пропонованих в даному винаході. "Виділена" молекула нуклеїнової кислоти являє собою молекулу нуклеїнової кислоти, що ідентифікована і відділена щонайменше від однієї молекули нуклеїнової кислоти-домішки, з якою вона зазвичай пов'язаний в природному джерелі нуклеїнової кислоти антитіла. Виділена молекула нуклеїнової кислоти відрізняється від молекули нуклеїнової кислоти, яка існує в зустрічаються в природних умовах клітинах. Згідно різних об'єктів даного винаходу можна здійснювати рекомбіновану експресію одного або декількох доменів гуманізованих антитіл. Для здійснення зазначеної рекомбінантної експресії можна застосовувати одну або кілька контролюючих послідовностей, тобто полінуклеотидних послідовностей, необхідних для експресії функціонально пов'язаної кодуючої послідовності в конкретному організмі-хазяїні. Придатні для прокаріотів клітин контролюючі послідовності включають, наприклад, послідовності промотора, оператора і сайту зв'язування рибосоми. У еукаріотичних клітинах контролюючі послідовності включають (але не обмежуючись лише ними) промотори, сигнали поліаденілювання і енхансери. Зазначені контролюючі послідовності можна застосовувати для експресії та виробництва гуманізованого антитіла до IL-23p19 в прокаріотичних і еукаріотичних клітинах-господарях. Нуклеїнова кислота "функціонально пов'язана", якщо вона знаходиться у функціональному зв'язку з іншою нуклеотидною послідовністю. Наприклад, нуклеїнова кислота передпослідовності або секреторного лідера функціонально пов'язана з нуклеїновою кислотою, кодуючою поліпептид, якщо вона експресується у вигляді предпротеіна, який бере участь у секреції поліпептиду; промотор або енхансер функціонально пов'язаний з кодуючою послідовністю, якщо він надає дію на транскрипцію послідовності; або сайт зв'язування рибосоми функціонально пов'язаний з кодуючою послідовністю, якщо він розташований так, що може полегшувати трансляцію. Як правило, "функціонально пов'язані" позначає, що пов'язані послідовності ДНК є суміжними, а в разі секреторного лідера, є суміжними і знаходяться в рамці зчитування. Однак енхансери не обов'язково повинні бути суміжними. Зв'язування здійснюють шляхом вбудовування лігуванням у відповідні сайти рестрикції. Якщо такі сайти не існують, то можна застосовувати синтетичні олігонуклеотидні адаптери або лінкери. У контексті даного опису поняття "клітина", "лінія клітин" і "культура клітин" використовуються взаємозамінно, і всі такі поняття містять потомство. Так, поняття "трансформанти" і "трансформовані клітини" включають первинну що представляє інтерес клітину і отримані з неї культури, незалежно від кількості пересівань. Поняття "ссавець", що підлягає лікуванню, відноситься до будь-якої тварині, яке належить до класу ссавців, включаючи людей, домашніх і сільськогосподарських тварин, а також живуть у зоопарку тварин, призначених для спорту або кімнатних тварин, таких як собаки, коні, кішки, корови і т.п. Переважно ссавець являє собою людину. У контексті даного опису поняття "порушення" означає будь-який стан, який можна полегшувати за допомогою лікування гуманізованим антитілом до IL-23p19, представленим в даному описі. Воно включає хронічні та гострі порушення або захворювання, зокрема патологічні стани, які призводять до схильності ссавця до розглянутого порушення. Прикладами порушень, які можна лікувати згідно винаходу, є (але не обмежуючись лише ними) запальні, ангіогенні, аутоімунні та імунологічні порушення, респіраторні порушення, рак, гематологічні злоякісні захворювання, доброякісні та злоякісні пухлини, лейкози і лімфоїдні злоякісні захворювання. Поняття "рак" і "раковий" відносяться або описують фізіологічний стан у ссавця, який, як правило, відрізняється нерегульованим зростанням клітин. Прикладами раку є (але не обмежуючись лише ними) карцинома, лімфома, бластома, саркома і лейкоз. У контексті даного опису поняття "асоційоване з IL-23 порушення" або "асоційоване з IL-23 захворювання" відноситься до стану, при якому активність IL-23 бере участь у захворюванні, і, як правило, відбувається аномальна експресія IL-23. Асоційоване з IL-23 порушення включає 17 UA 112301 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 захворювання і порушення імунної системи, такі як аутоімунні порушення і запальні порушення. Зазначені стану включають (але не обмежуючись лише ними) ревматоїдний артрит (RA), системний червоний вовчак (SLE), склеродермії, синдром Шегрена, розсіяний склероз, псоріаз, псоріатичний артрит, запальне захворювання кишечника (наприклад, неспецифічний виразковий коліт і хвороба Крона), запалення легенів, астму і ідіопатичну тромбоцитопенічна пурпура (ITP) і анкілозуючий спондиліт. Поняття "внутрішньовенна інфузія" відноситься до інтродукції агента у вену хворої тварини або людини протягом періоду часу, що перевищує приблизно 15 хв, як правило, протягом приблизно 30-90 хв. Поняття "внутрішньовенний болюс" або "внутрішньовенний імпульс" відноситься до введення лікарського засобу тварині чи людині таким чином, щоб лікарський засіб надходив в організм протягом приблизно 15 хв або менше, як правило, 5 хв або менше. Поняття "підшкірне введення" відноситься до інтродукції агента під шкіру хворої тварини або людини, переважно в кишеню між шкірою і низлежачою тканиною, шляхом відносно повільного пролонгованої введення з містить лікарський засіб резервуара. Шляхом прищипування або відтягування шкіри вгору і вбік від низлежачої тканини можна створювати кишеню. Поняття "підшкірна інфузія" відноситься до інтродукції лікарського засобу під шкіру хворої тварини або людини, переважно в кишеню між шкірою і низлежачою тканиною, шляхом відносно повільного пролонгованого введення з таким що містить лікарський засіб резервуара протягом періоду часу, що складає (але не обмежуючись тільки зазначеним) 30 хв або менше або 90 хв або менше. Інфузію необов'язково можна здійснювати шляхом підшкірної імплантації насоса для введення лікарського засобу, імплантованого під шкіру хворої тварини або людини, при цьому насос забезпечує введення лікарського засобу в попередньо певній кількості протягом попередньо визначеного періоду часу, що складає 30 хв, 90 хв або періоду часу, відповідного тривалості схеми лікування. Поняття "підшкірний болюс" відноситься до введення лікарського засобу під шкіру хворої тварини або людини, при цьому тривалість введення лікарського засобу у вигляді болюс становить менше приблизно 15 хв; в іншому об'єкті винаходу менше 5 хв, а ще в одному об'єкті винаходу протягом менше 60 с. У наступному об'єкті винаходу введення здійснюють в кишеню між шкірою і низлежачою тканиною, де кишеню можна створювати шляхом прищипування або відтягування шкіри вгору і вбік від низлежачої тканини. У контексті даного опису поняття "терапевтично ефективна кількість" відноситься до кількості діючої речовини, при використанні якої відбувається ослаблення або ендаумент одного або декількох симптомів порушення, на яке спрямоване лікування. У іншому об'єкті винаходу терапевтично ефективна кількість відноситься до концентрації в сироватці пацієнта, при якій, як встановлено, діюча речовина є ефективним щодо уповільнення розвитку хвороби. Ефективність можна оцінювати загальноприйнятими шляхами залежно від такого, що підлягає лікуванню стану. У контексті даного опису поняття "лікування" і "терапія" і т.п. відносяться до терапевтичних, а також профілактичних або переважним заходам щодо захворювання або порушення, які призводять до будь-якого клінічно важливої або сприятливої дії, включаючи (але не обмежуючись лише ними) полегшення або ослаблення одного або декількох симптомів, регрес, уповільнення або припинення розвитку захворювання або порушення. Таким чином, наприклад, під поняття "лікування" підпадає введення агента до або після початку прояву симптому захворювання або порушення, що призводить до попередження або усунення одного або кількох ознак захворювання або порушення. В іншому прикладі поняття відноситься до введення агента після клінічного прояву хвороби для боротьби з симптомами хвороби. Крім того, в контексті даного опису поняття "лікування" або "терапія" належить до введення агента після виникнення і після розвитку клінічних симптомів, де введення надає дію на клінічні параметри захворювання або порушення, такі як ступінь пошкодження тканини або кількість і поширення метастазів, не залежно від того, призводить чи ні лікування до полегшення захворювання. Крім того, якщо застосування композицій, запропонованих у винаході, або індивідуально, або в поєднанні з іншим терапевтичних засобом купірує або полегшує щонайменше один з симптомів підлягає лікуванню порушення в порівнянні з вказаним симптомом без застосування містить гуманізоване антитіло до IL-23p19 композиції, то результат слід розглядати як ефективне лікування необхідного порушення незалежно від того, відбувається чи ні полегшення всіх симптомів порушення. Поняття "листівка-вкладиш в упаковці" відноситься до інструкцій, які прийнято включати в призначені для продажу упаковки терапевтичних продуктів, які містять інформацію про 18 UA 112301 C2 5 10 15 20 25 свідчення, методи застосування, вступу, протипоказання і / або запобіжні заходи при застосуванні зазначених терапевтичних продуктів. Антитіла У даному винаході описані і запропоновані гуманізовані антитіла до IL-23, зокрема гуманізовані антитіла до IL-23p19, і композиції і отримані вироби, що містять одне або кілька антитіл до IL-23, зокрема одне або декілька гуманізованих антитіл до IL-23p19, пропонованих в даному винаході. Описано також пов'язуючі агенти, які включають антигензв'язуючий фрагмент антитіла до IL-23, зокрема, гуманізоване антитіло до IL-23p19. Гуманізовані антитіла до IL-23p19 і пов'язуючі агенти можуть інгібувати виробництво асоційованих з Th17 цитокінів, які беруть участь у хронічних аутоімунних і запальних захворюваннях. Таким чином, гуманізовані антитіла до IL-23p19 і пов'язуючі агенти можна застосовувати для лікування різних захворювань або порушень. І гуманізоване антитіло до IL-23p19, і IL-23p19-зв'язуючий агент, включають щонайменше ділянку, що специфічно розпізнає епітоп IL-23p19 (тобто антигензв'язуючий фрагмент). При здійсненні первинної оцінки відбирали мишачі антитіла на основі їх характеристик зв'язування IL-23p19. Таким чином, відповідно до одного з об'єктів винаходу антитіло, пропоноване в даному винаході, характеризується величиною KD щодо IL-23, зокрема щодо людського IL-23, що становить менше ніж 100пM. Згідно іншому об'єкту винаходу антитіло, пропоноване в даному винаході, характеризується величиною KD, що становить менше ніж 40пM. Згідно іншому об'єкту винаходу антитіло, пропоноване в даному винаході, характеризується величиною KD, що становить менше ніж 20пM. Згідно іншому об'єкту винаходу антитіло, пропоноване в даному винаході, характеризується величиною KD, що становить менше ніж 10пM. Згідно іншому об'єкту винаходу антитіло, пропоноване в даному винаході, характеризується величиною KD, що становить менше ніж 1пM. Відібрані мишачі антитіла мають варіабельні області легких ланцюгів і варіабельні області важких ланцюгів, які представлені нижче в таблицях 1 і 2: 30 19 UA 112301 C2 20 UA 112301 C2 21 UA 112301 C2 22 UA 112301 C2 23 UA 112301 C2 24 UA 112301 C2 25 UA 112301 C2 5 Послідовності людських каркасних ділянок відбирали для кожного мишачого "лідерного" антитіла на основі гомології каркасних ділянок, структури CDR, консервативних канонічних залишків, консервативних залишків, що утворюють поверхню розділу, та інших параметрів. CDR мишачих важких ланцюгів і легких ланцюгів різних мишачих антитіл представлені в таблиці 3 та таблиці 4 відповідно. У таблиці 4 представлені також три CDR важких ланцюгів, виведених з мишачого антитіла 6B8 при здійсненні процесу гуманізації. Таблиця 3 Послідовності CDR легких ланцюгів 18C4 18E5 18D3 20E8 22E2 24A5 L-CDR1 RASQSISEYLH (SEQ ID NO: 1) RASQSISDYLY (SEQ ID NO: 4) RASQSISDYLY (SEQ ID NO: 4) RASQSISEYLH (SEQ ID NO: 1) RASQSISVYLH (SEQ ID NO: 6) RASQSISDYLH (SEQ ID NO: 7) L-CDR2 YASQSIS (SEQ ID NO: 2) FASQSIS (SEQ ID NO: 5) FASQSIS (SEQ ID NO: 5) YASQSIS (SEQ ID NO: 2) YASQSIS (SEQ ID NO: 2) YASQSIS (SEQ ID NO: 2) 10 26 L-CDR3 QNGHSFPFT (SEQ ID NO: 3) QNGHSFPFT (SEQ ID NO: 3) QNGHSFPFT (SEQ ID NO: 3) QNGHSFPFT (SEQ ID NO: 3) QNGHSFPFT (SEQ ID NO: 3) QNGHSFPFT (SEQ ID NO: 3) UA 112301 C2 Продовження таблиці 3 15C11 43F5 27G8 31H9 2D1 9D12 6B8 73H10 74H3 35H8 26F7 34G3 34D9 RSSQSLVHSNGNTYLH (SEQ ID NO: 8) RSSQSLVHSNGNTYLH (SEQ ID NO: 8) RASKSVSTSGYSYIH (SEQ ID NO: 11) RASQSISDYLH (SEQ ID NO: 7) RTSESVYSYGQNFIH (SEQ ID NO: 15) RASETINFYGTSFMH (SEQ ID NO: 18) KASRDVAIAVA (SEQ ID NO: 19) RASENIDSYLA (SEQ ID NO: 22) RASENIDSYLA (SEQ ID NO:22) RSSQSLVHSNGNTYLH (SEQ ID NO: 8) RASKSVRFSDYFYMH (SEQ ID NO: 27) RSSQSLVHSNGNTYLH (SEQ ID NO:8) KASQDVGNAVV (SEQ ID NO: 30) KVSNRFS (SEQ ID NO: 9) KVSNRFS (SEQ ID NO: 9) LASNLDS (SEQ ID NO: 12) YASQSIS (SEQ ID NO: 2) RASNLES (SEQ ID NO: 16) RASNLES (SEQ ID NO: 16) WASTRHT (SEQ ID NO: 20) AARNLAD (SEQ ID NO: 23) AATNLAD (SEQ ID NO: 25) KVSNRFS (SEQ ID NO: 9) LASNLES (SEQ ID NO: 28) KVSNRFS (SEQ ID NO: 9) WASTRHI (SEQ ID NO: 31) SQSTHVPYT (SEQ ID NO: 10) SQSTHVPYT (SEQ ID NO: 10) QHSRELPYT (SEQ ID NO: 13) QNGHSFPYT (SEQ ID NO: 14) QQTNEDPYT (SEQ ID NO: 17) QQTNEDPYT (SEQ ID NO: 17) HQYSSYPFT (SEQ ID NO: 21) QHYYSTPFT (SEQ ID NO: 24) LHYYSTPFT (SEQ ID NO: 26) SQSTHVPYT (SEQ ID NO: 10) QNSRELPYT (SEQ ID NO: 29) SQSTHVPYT (SEQ ID NO: 10) QQYSSYLT (SEQ ID NO: 32) Таблиця 4 Послідовності CDR важких ланцюгів 18C4 18E5 18D3 20E8 22E2 24A5 15C11 43F5 27G8 31H9 2D1 9D12 H-CDR1 GYTFTSSVIH (SEQ ID NO: 33) GYTFTRYLIH (SEQ ID NO: 36) GYTFTRYLIH (SEQ ID NO: 36) GYTFTSSVMH (SEQ ID NO: 38) GYTFTSSIIH (SEQ ID NO: 40) GYTFTTSIMH (SEQ ID NO: 43) GYTFTDYYMN (SEQ ID NO: 45) GYSFTGYYMN (SEQ ID NO: 48) GYTFTDHTIH (SEQ ID NO: 51) GYTFTRYLMH (SEQ ID NO: 54) GFSLTTYAIS (SEQ ID NO: 57) GFSLNNFAIS (SEQ ID NO: 60) H-CDR2 YINPYNDGTKYNEKFKG ID NO: 34) YINPYNDGTKYNEKFKG ID NO: 34) YINPYNDGTKYNEKFKG ID NO: 34) YINPYNDGTQYNEKFKG ID NO: 39) YINPYDDVTKYNEKFKG ID NO: 41) YINPYDDVTKYNEKFKG ID NO: 41) VIIPYNGGTSYNQKFKG ID NO: 46) EIIPTTGGTSYNQKFKA ID NO: 49) YIYPRDGYPKFNEKFKG ID NO: 52) YINPYNDGTNYNEKFKG ID NO: 55) VIWTGGGTKYNSALKS ID NO: 58) AIWTGGGTNYNSALKS ID NO: 61) 27 H-CDR3 (SEQ RLDEAY (SEQ ID NO: 35) (SEQ NWDLDY (SEQ ID NO: 37) (SEQ NWDLDY (SEQ ID NO: 37) (SEQ RLDEAY (SEQ ID NO: 35) (SEQ RWDESY (SEQ ID NO: 42) (SEQ RWDEAY (SEQ ID NO: 44) (SEQ DGHRWYFDV (SEQ ID NO: 47) (SEQ ESGGFYWYFDV (SEQ ID NO: 50) (SEQ RPPYYAMDY (SEQ ID NO: 53) (SEQ NWDYAY (SEQ ID NO: 56) (SEQ KDYNYGGAMDY (SEQ ID NO: 59) (SEQ KDYSYGGAMDY (SEQ ID NO: 62) UA 112301 C2 Продовження таблиці 4 6B8 Hu_6B8-2 Hu_6B8-5 Hu_6B836/65 73H10 74H3 35H8 26F7 34G3 34D9 5 10 15 20 25 GNTFTDQTIH (SEQ ID NO: 63) GYTFTDQTIH (SEQ ID NO: 66) GFTFTDQTIH (SEQ ID NO: 67) GGTFTDQTIH (SEQ ID NO: 68) GYTFTRYVMH (SEQ ID NO: 69) GYTFTRYLMH (SEQ ID NO: 54) GYTFTDYYMN (SEQ ID NO: 45) GYTFTDYYMN (SEQ ID NO: 45) GYSFTDYNMN (SEQ ID NO: 77) GYTFTDYNMD (SEQ ID NO: 80) YIYPRDDSPKYNENFKG ID NO: 64) YIYPRDDSPKYNENFKG ID NO: 64) YIYPRDDSPKYNENFKG ID NO: 64) YIYPRDDSPKYNENFKG ID NO: 64) YINPYNDVTKYNEKFKG ID NO: 70) YINPYNDGTKYNERFKG ID NO: 72) VIIPYNGGISYNQKFKG ID NO: 73) DFNHNNDVITYNPKFKG ID NO: 75) VIIPNYGFTSYNQNFKG ID NO: 78) DINPHNGGTIYNQKFKG ID NO: 81) (SEQ PDRSGYAWFIY (SEQ ID NO: 65) (SEQ PDRSGYAWFIY (SEQ ID NO: 65) (SEQ PDRSGYAWFIY (SEQ ID NO: 65) (SEQ PDRSGYAWFIY (SEQ ID NO: 65) (SEQ NWDVPY (SEQ ID NO: 71) (SEQ NWDVPY (SEQ ID NO: 71) (SEQ NDYDWYFDV (SEQ ID NO: 74) (SEQ GLRGYYAMDY (SEQ ID NO: 76) (SEQ DGGILLWYLDV (SEQ ID NO: 79) (SEQ NYYGSSYGWYFDV (SEQ ID NO: 82) CDR, представлені вище в таблицях 3 і 4, визначені згідно з номенклатурою Хотіа (AlLazikani та ін., JMB 273, 1997, сс. 927-948). Fab-фрагменти, для яких виявлено покращене або еквівалентне зв'язування в порівнянні з химерним батьківським Fab-фрагментом, відбирали для конверсії у формат IgG. 6B8 перетворювали на формат IgG1KO. IgG1KO ("виключення" (knock-out) ефекторних функцій) має дві мутації в Fc-області, а саме, Leu234Ala і Leu235Ala, які знижують ефекторну функцію, таку як зв'язування FcγR і комплементу. IgG-формат описаний в літературі (див., наприклад, Hezareh та ін, Journal of Virology 75, 2001, сс. 12161-12168). У прикладі 1 більш детально описаний процес гуманізації. У результаті здійснення зазначеної гуманізації вдалося створити послідовності гуманізованих антитіл. Репрезентативні приклади варіабельних областей легкого ланцюга і важкого ланцюга, виведених з мишачого антитіла 6B8, представлені в таблицях 5 і 6. Порівняльний аналіз первинної структури гуманізованих варіабельних областей легкого ланцюга і важкого ланцюга, виведених з мишачого антитіла 6B8, і варіабельних областей легкого ланцюга і важкого ланцюга з мишачого антитіла 6B8, представлений на фіг. 1. Відібрані комбінації гуманізованих варіабельних областей легкого ланцюга і важкого ланцюга, виведених з мишачого антитіла 6B8, дозволили створити Антитіла A, B, C і D: Антитіло A: 6B8-IgG1KO-2 з IgK-66 (варіабельна область важкого ланцюга 6B8CVH-02 і варіабельна область легкого ланцюга 6B8CVK-66); Антитіло B: 6B8-IgG1KO-5 з IgK-66 (варіабельна область важкого ланцюга 6B8CVH-05 і варіабельна область легкого ланцюга 6B8CVK-66); Антитіло C: 6B8-IgG1KO-2 з IgK-65 (варіабельна область важкого ланцюга 6B8CVH-02 і варіабельна область легкого ланцюга 6B8CVK-65); Антитіло D: 6B8-IgG1KO-5 з IgK-65 (варіабельна область важкого ланцюга 6B8CVH-05 і варіабельна область легкого ланцюга 6B8CVK-65). Антитіла A, B, C і D мають послідовності важких і легких ланцюгів, які представлені в таблиці 7. 28