Склади дезоксихолевої кислоти та її солей

Реферат: Винахід стосується водної фармацевтичної композиції, яка є стійкою до осадження і складається по суті з від 0,5 до 1 % (мас./об.) солі дезоксихолевої кислоти та фармацевтично прийнятної допоміжної речовини, при цьому величина рН зазначеної композиції підтримується на рівні від 8,2 до 8,5. UA 113522 C2 (12) UA 113522 C2 UA 113522 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 ОБЛАСТЬ ТЕХНІКИ [0001] Даний винахід відноситься до водних фармацевтичних складів, які містять дуже низькі концентрації солі дезоксихолевої кислоти ("ДХК"), при цьому pH зазначеного складу зберігається на рівні, при якому випадання ДХК в осад по суті пригнічується. Відповідно до переважного варіанту реалізації фармацевтична композиція буферизована для збереження фізіологічно прийнятних рівнів pH, так що зазначена композиція підходить для ін'єкцій. РІВЕНЬ ТЕХНІКИ [0002] У нещодавно опублікованих джерелах повідомляється, що водні розчини ДХК мають жироруйнувальні властивості при ін'єктуванні в жирові відкладення in vivo (див. WO 2005/117900 і WO 2005/112942, US2005/0261258; US2005/0267080; US2006/127468 і US2006/0154906). ДХК, ін'єктована в жирову тканину, руйнує жирові клітини за рахунок цитолітичного механізму із забезпеченням бажаного естетичного ефекту. [0003] Незважаючи на переваги водних складів ДХК було виявлено, що при низьких концентраціях ДХК (тобто менше ніж або приблизно 2 % мас./об.) у водних розчинах, які необов'язково містять бензиловий спирт, при зберіганні з часом утворюється осад. Несподівано було виявлено, що чим нижче концентрація ДХК, тим вище швидкість утворення осаду, незалежно від скільки-небудь істотних змін pH зазначеного розчину. Зазначене утворення осаду при дуже низьких концентраціях являє собою проблему для комерціалізації, так як наявність осаду протипоказана при підшкірних ін'єкціях ДХК. [0004] При кожній схемі лікування в поточних клінічних випробуваннях водних складів ДХК проводиться кілька ін'єкцій невеликих кількостей зазначеного водного складу в різні ділянки, які обмежують жирові відкладення, що підлягають впливу. [0005] Очевидно, що застосування водних складів ДХК для такого впливу пов'язано з проблемами, які зв'язані з випаданням ДХК в осад. Це означає, що в спочатку прозорому водному розчині ДХК з комерційно доцільними концентраціями ДХК при зберіганні з плином часу утворюється осад, незважаючи на той факт, що значення pH зазначених розчинів становлять від приблизно 7,50 до приблизно 8,0, що істотно вище pKa дезоксихолевої кислоти. [0006] Таким чином, існує потреба у стабілізації низькоконцентрованих водних розчинів дезоксихолевої кислоти або її солі для запобігання утворенню осаду протягом терміну зберігання, який становить щонайменше 2 місяці. КОРОТКИЙ ОПИС ВИНАХОДУ [0007] Несподівано було виявлено, що водні розчини солі дезоксихолевої кислоти з концентраціями від приблизно 0,4 % (мас./об.) до менше ніж приблизно 2 % (мас./об.) можуть бути стабілізовані шляхом доведення pH зазначеного розчину до значень, які перевищують приблизно 8, і переважно починаються від фізіологічно прийнятного pH, що становить від приблизно 8,1 до приблизно 8,5. Значення pH переважно зберігається в зазначеному діапазоні за рахунок застосування буферів. [0008] Відповідно, згідно з одним із аспектів запропонованих композицій, даний винахід відноситься до водних складів, що по суті складаються з солі дезоксихолевої кислоти в концентрації від приблизно 0,4 % (мас./об.) до менше ніж приблизно 2 % (мас./об.) і, необов'язково, ефективної як консерванту кількості бензилового спирту; зазначеним складам надають стійкість до осадження доведенням pH початково отриманого розчину, що не містить осаду, до значень, які становлять від приблизно 8,1 до приблизно 8,5. Відповідно до іншого варіанту реалізації даний винахід відноситься до водного складу, що по суті складається з солі дезоксихолевої кислоти в концентрації від приблизно 0,5 % (мас./об.) до приблизно 1 % (мас./об.) і, необов'язково, ефективної для консервації кількості бензилового спирту; при цьому зазначеним складам надана стійкість до осадження шляхом доведення pH початково отриманого розчину, що не містить осаду, до значень, які становлять від приблизно 8,1 до приблизно 8,5. [0009] Відповідно до іншого варіанту реалізації даний винахід відноситься до водного складу, що по суті складається з: стерильного водного розчину, забуференого до pH, що становить приблизно 8,3; приблизно 0,5 % (мас./об.) або приблизно 1 % (мас./об.) солі дезоксихолевої кислоти; необов'язково, ефективну для консервації кількість бензилового спирту; і приблизно 1 % (мас./об.) хлориду натрію, при цьому зазначена композиція стійка до осадження. [0010] Також в даній заявці запропонований спосіб стабілізації водної композиції солі дезоксихолевої кислоти проти осадження при зберіганні, причому концентрація зазначеної солі дезоксихолевої кислоти представлена кількістю, яка є ефективною для лізису жирових клітин, 1 UA 113522 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 за умови, що кількість зазначеної солі дезоксихолевої кислоти знаходиться в діапазоні від приблизно 0,4 % (мас./об.) до менше ніж 2 % (мас./об.); спосіб, який включає: отримання водного розчину солі дезоксихолевої кислоти при вихідному pH, що перевищує її pKa; доведення pH зазначеного водного розчину до pH, що становить від приблизно 8,1 до приблизно 8,5; і необов'язково, додавання достатньої кількості буферу для підтримки pH на рівні від приблизно 8,1 до приблизно 8,5. [0011] Також в даній заявці запропонований спосіб лізису жирової клітини, який включає введення у зазначену клітину композиції відповідно до даного винаходу. КОРОТКИЙ ОПИС КРЕСЛЕНЬ [0012] На Фіг. 1 видно (67-кратне збільшення), що водна композиція з води і 0,9 % (мас./об.) бензилового спирту і без дезоксихолату натрію містить тільки слідові кількості осаду, який імовірно представляє собою частки біопренових трубок. [0013] На Фіг. 2 видно (67-кратне збільшення), що водна композиція з води, 0,5 % (мас./об.) дезоксихолату натрію і 0,9 % (мас./об.) бензилового спирту містить значні кількості осаду, який імовірно представляє собою кристали дезоксихолату. [0014] На Фіг. 3 видно (67-кратне збільшення), що водна композиція з води, 1 % (мас./об.) дезоксихолату натрію і 0,9 % (мас./об.) бензилового спирту містить значні кількості осаду, хоча і менші, ніж при 0,5 % (мас./об.) дезоксихолату натрію. Як і раніше, осад імовірно являє собою кристали дезоксихолату. [0015] На Фіг. 4 видно (67-кратне збільшення), що водна композиція з води, 2 % (мас./об.) дезоксихолату натрію і 0,9 % (мас./об.) бензилового спирту містить значні кількості осаду, однак по суті менші, ніж на Фіг. 2 і 3. ДОКЛАДНИЙ ОПИС ВИНАХОДУ [0016] У даній заявці деякі терміни мають наступним чином визначені значення. [0017] Усі цифрові позначення, наприклад, pH, температура, час, концентрація, і молекулярна маса, включаючи діапазони, являють собою наближені значення з похибкою ±0,1. Слід розуміти, що, хоча це не завжди прямо зазначено, всім чисельним значенням передує термін "приблизно". Термін "приблизно" включає також точне значення "X", а також значення, що незначно відрізняються від "X", такі як "X+0,1" або "X-0,1". Також слід розуміти, що, хоча це не завжди прямо зазначено, описані в даній заявці реагенти є виключно ілюстративними, і що в даній області техніки відомі їх еквіваленти. [0018] У даній заявці термін "що містить/включає" має на увазі, що зазначені композиції і способи містять/включають перераховані елементи, але не виключає наявності інших елементів. [0019] Термін "що по суті складається з" при використанні для визначення композицій і способів означає виключення будь-яких активних інгредієнтів. "Активний інгредієнт" являє собою речовину, яка призначена для надання фармакологічної активності або забезпечення іншого безпосереднього ефекту при діагностиці, виліковуванні, полегшенні, лікуванні або запобіганні захворювання, або впливає на структуру або будь-яку функцію організму людини. Таким чином, наприклад, композиція, що по суті складається з елементів відповідно до визначення в даній заявці, не виключає наявності слідових кількостей домішок обумовлених способом виділення та очищення, і фармацевтично прийнятних носіїв, таких як забуферений фосфатом сольовий розчин, консерванти і т.п., але виключає наявність ферментів, таких як фосфатази, і білків. Не обмежуючі приклади таких білків представлені гепарином, альбуміном і т.п. [0020] Термін "що складається з" означає виключення більш ніж слідових кількостей елементів інших інгредієнтів і значущих стадій способу введення композиції відповідно до даного винаходу. Варіанти реалізації, які визначаються кожним із зазначених перехідних термінів, включені в обсяг даного винаходу. [0021] У даній заявці термін "сіль дезоксихолевої кислоти" або "її сіль" відноситься до фармацевтично прийнятної солі (4R)-4-((3R,5R,10S,12S,13R,17R)-3,12-дигідрокси-10,13диметилгексадекагідро-1H-циклопента[a]фенантрен-17-іл)пентаноату, яка містить лужний метал або іон амонію як катіону. Переважними є солі лужних металів, при цьому найбільш переважні солі натрію. 2 UA 113522 C2 + O - Na O OH HO 5 10 15 20 25 30 35 H [0022] Дезоксихолат натрію або (4R)-4-((3R,5R,10S,12S,13R,17R)-3,12-дигідрокси-10,13диметилгексадекагідро-1H-циклопента[a]фенантрен-17-іл)пентаноат натрію може бути отриманий відповіднодо способів, описаних в PCT/US2010/061150, під заголовком "Methods for the Purification of Deoxycholic Acid" ("Способи очищення дезоксихолевої кислоти"), поданої 17 грудня 2010 р. [0023] У даній заявці термін "водний фармацевтичний склад" відноситься до композиції дезоксихолевої кислоти або її солі у воді, яка підходить для введення пацієнтові, переважно за допомогою підшкірної ін'єкції за допомогою шприца. [0024] У даній заявці термін "буфер" відноситься до водного розчину, що містить суміш слабкої кислоти і її сполученої основи, або слабкої основи та її сполученої кислоти. Властивості буферу такі, що pH розчину змінюється дуже незначно при додаванні невеликої кількості кислоти або основи. Буферні розчини використовують у різноманітних хімічних додатках як засіб підтримання pH на приблизно постійному рівні. Приклади відповідних буферів включають фосфатні буфери і описані в літературі буфери (див., наприклад, Troy, DB, ed. (2005) Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 21st ed., Lippincott Williams & Wilkins). [0025] У даній заявці термін "основа" відноситься до різних, як правило, водорозчинних сполук, молекул або іонів, значення pH яких в розчині вище 7. Такі сполуки, молекули або іони здатні захоплювати протон кислоти або здатні віддавати нерозділену пару електронів кислоті. Приклади відповідних основ включають карбонати і бікарбонати металів, наприклад, карбонат натрію, карбонат кальцію, карбонат магнію, карбонат цинку, бікарбонат натрію тощо; та гідроксиди металів, наприклад гідроксид натрію, гідроксид калію, тощо, такі як відомо з літератури (див., наприклад, Troy, DB, ed.(2005) Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 21st ed., Lippincott Williams & Wilkins). 2[0026] У даній заявці термін "карбонати металів" відноситься до солі металу з CO 3 . Наприклад, карбонат натрію, карбонат кальцію, карбонат магнію, карбонат цинку і т.п. ¯ [0027] У даній заявці термін "бікарбонати металів" відноситься до солі металу з HCO 3 . Наприклад, бікарбонат натрію і т.п. [0028] У даній заявці термін "гідроксиди металу" відноситься до солі металу з -OH. Наприклад, гідроксид натрію, гідроксид калію і т.п. [0029] У даній заявці терміни "стерильна вода" або "вода для ін'єкцій" відносяться до стерильного, апірогенного препарату води для ін'єкцій, що не містить бактеріостатичних засобів, протимікробного агенту або доданого буферу. Як правило, осмолярна концентрація добавок становить в цілому щонайменше 112 мОсм/л (2/5 від нормальної осмолярності позаклітинної рідини - 280 мОсм/л). [0030] У даній заявці термін "бензиловий спирт" відноситься до сполуки OH 40 45 . [0031] У даній заявці термін "випадання в осад/утворення осаду/осадження" відноситься до утворення твердої речовини в розчині, яке легко відрізнити від утворення гелю. [0032] У даній заявці термін "розчин" відноситься до по суті гомогенного ступеню суміші, що містить дві або більше речовин, які розчинені в розчиннику. [0033] У даній заявці терміни "по суті пригнічувати осадження" і "пригнічує осадження" означають майже повне або повне пригнічення видимого утворення осаду для підтримки гомогенності протягом періоду часу в діапазоні від щонайменше 1 місяця до щонайменше 1 року. [0034] У даній заявці термін "відносне стандартне відхилення гомогенності" або "H E" відноситься до значення, яке отримують діленням стандартного відхилення зазначеної гомогенності на абсолютне значення середнього. Значення HE менше 10 вказує на дуже високу гомогенність. 3 UA 113522 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 Склади [0035] Дані відносно хімічної та фізичної стабільності лікарської композиції в потрібному середовищі для доставки мають велике значення. В довгостроковій перспективі стабільність зазначеної композиції визначає термін придатності комерційного продукту. Бажано, щоб активний інгредієнт містився у фармацевтичній композиції в потрібній концентрації при введенні пацієнту. [0036] У наведеному нижче обговоренні дезоксихолат натрію згадується виключно в ілюстративних цілях; слід розуміти, що й інші фармацевтично прийнятні солі дезоксихолевої кислоти можуть застосовуватися взаємозамінно з сіллю натрію. [0037] Існуючі клінічні способи введення дезоксихолату натрію пацієнту для руйнування жирової тканини включають введення за допомогою підшкірних ін'єкцій низькоконцентрованого (тобто < 2 % (мас./об.)) водного розчину солі дезоксихолевої кислоти, кількість солі дезоксихолевої кислоти в якому достатня для лізису жирових клітин (приблизно 0,4 % (мас./об.) і вище). За таких концентрацій, як було показано, низька концентрація сприятлива для ефективного і безпечного видалення жирових відкладень в організмі. Тим не менш, утворення осаду спостерігалося і за таких відносно низьких концентрацій дезоксихолату натрію у водному середовищі. Зазначене утворення осаду призводить до обмеження терміну придатності водних розчинів дезоксихолату натрію навіть при низьких температурах (3-5 °C). Відповідно до одного варіанту реалізації зазначена сіль натрію може бути заміщена сіллю іншого лужного металу. [0038] Таку нестабільність водних розчинів дезоксихолату натрію можна обійти шляхом приготування водного розчину дезоксихолату натрію в концентрації від приблизно 5 % до приблизно 16 % (мас./об.) і розведення фармацевтичної композиції зазначеного розчину дезоксихолату натрію безпосередньо перед використанням, що здійснюється спеціалістом. Хоча спосіб з розведенням є ефективним як для забезпечення стабільності при зберіганні, так і для ефективного дозування пацієнта, він не є ідеальним як спосіб для рутинного використання, зокрема якщо необхідний об'єм стерильного ін'єктувального розчину не перевищує приблизно 2 мл. Крім того, існуючі клінічні програми включають проведення до 50 ін'єкцій за один курс лікування. [0039] Було виявлено, що водні склади дезоксихолату натрію в концентраціях, що варіюють від приблизно 0,4 % (мас./об.) до менше ніж приблизно 2 % (мас./об.) можуть бути стабілізовані корекцією pH зазначеного розчину. Даний винахід відноситься до водного складу, що по суті складається з солі дезоксихолевої кислоти в концентрації, яка варіює від приблизно 0,4 % (мас./об.) до менше ніж приблизно 2 % (мас./об.), і, необов'язково, фармацевтично прийнятної допоміжної речовини, такої як ефективна в якості консерванту кількість бензилового спирту, та/або pH-коректуючого буферу, причому pH зазначеного складу зберігається на рівні від приблизно 8,1 до приблизно 8,5. [0040] Відповідно до іншого варіанту реалізації зазначений водний склад ліофілізують для отримання стабільної композиції, готової для відновлення додаванням належної кількості води. Відповідно до зазначеного варіанту реалізації зазначений винахід включає ліофілізовані композиції відповідно до наведеного вище опису, які необов'язково містять також допоміжний агент для ліофілізації. [0041] Відповідно до одного варіанту реалізації зазначений водний склад містить приблизно 0,5 % (мас./об.) солі дезоксихолевої кислоти. Відповідно до іншого варіанту реалізації зазначений водний склад містить приблизно 1 % (мас./об.) солі дезоксихолевої кислоти. [0042] Відповідно до ще одного варіанту реалізації вода, що використовується у зазначеному водному складі, являє собою стерильну воду. Відповідно до ще одного варіанту реалізації ефективна як консервант кількість бензилового спирту становить приблизно 0,9 % (мас./об.) бензилового спирту, а pH зазначеного складу становить приблизно 8,3. Відповідно до одного варіанту реалізації зазначена сіль являє собою сіль лужного металу. Відповідно до іншого варіанту реалізації зазначена сіль являє собою сіль натрію. [0043] Відповідно до одного варіанту реалізації фармацевтичні склади відповідно до опису в даній заявці підходять для ін'єктування людині. Спосіб ін'єктування може бути будь-яким, наприклад, являти собою підшкірні ін'єкції, а також інші типи ін'єкцій. [0044] В одному переважному аспекті даного винаходу утворення осаду солі дезоксихолевої кислоти в зазначеному водному складі пригнічується протягом періоду, який становить щонайменше приблизно шість місяців. Відповідно до іншого аспекту утворення осаду пригнічується протягом періоду, який становить щонайменше приблизно один рік. Відповідно до ще одного аспекту утворення осаду пригнічується протягом періоду, який становить щонайменше приблизно два роки. 4 UA 113522 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 [0045] Припускається, що при зберіганні при різних температурах, наприклад, при кімнатній або при низькій температурі, термін придатності зазначеного складу може збільшуватися. Відповідно до певних варіантів реалізації зазначену композицію зберігають при температурі від приблизно 17 °C до приблизно 27 °C. Відповідно до деяких варіантів реалізації температуру зазначеного складу підвищують приблизно до 25 °C - приблизно до 37 °C. Відповідно до інших варіантів реалізації зазначений склад зберігають при температурі від приблизно 2 °C до приблизно 8 °C. [0046] Відповідно до певних варіантів реалізації pH зазначеного складу знаходиться в діапазоні від приблизно 8,1 до приблизно 8,5. Відповідно до одного варіанту реалізації pH зазначеної композиції становить приблизно 8,1, або, як варіант, приблизно 8,2, або, як варіант, приблизно 8,3, або, як варіант, приблизно 8,4, або, як варіант, приблизно 8,5. Відповідно до переважного варіанту реалізації pH зазначеного складу становить приблизно 8,3. [0047] Відповідно до одного варіанту реалізації pH задають за рахунок застосування основи. Припускається, що будь-яка основа може застосовуватися для підвищення pH зазначеної композиції за умови, що вона не вступає в реакцію з дезоксихолатом натрію і не заподіює шкоди пацієнтові. Відповідно до деяких варіантів реалізації основу вибирають з групи, що складається з карбонатів металів, бікарбонатів металів, гідроксидів металів або їхньої суміші. Приклади основ включають, не обмежуючись перерахованими, основи, вибрані з групи, що складається з карбонату натрію, карбонату кальцію, карбонату магнію, карбонату цинку, бікарбонату натрію, гідроксиду натрію і гідроксиду калію, або їхньої суміші. Відповідно до одного варіанту реалізації основа представляє собою гідроксид натрію. [0048] У певних випадках pH зазначеної композиції при зберіганні може зберігатися на потрібному рівні за рахунок застосування буферу. В даній області техніки відомі різні буфери, і припускається, що будь-який буфер, який має буферну ємність при потрібних значеннях pH, може застосовуватися у складах відповідно до опису в даній заявці. Відповідно до одного варіанту реалізації зазначений буфер являє собою фосфатний буфер. Кількість фосфату, необхідну для отримання потрібних значень pH і концентрації солі в композиції, може бути визначено. Відповідно до одного варіанту реалізації зазначена композиція містить приблизно 10 мМ фосфатного буферу. Відповідно до переважного варіанту реалізації зазначена композиція містить приблизно 10 мМ двоосновного натрій-фосфатного буферу. [0049] Відповідно до деяких варіантів реалізації зазначена композиція містить щонайменше одну допоміжну речовину, яка сприяє наданню композиції потрібних властивостей, таких як підвищена розчинність, збереженість, або для отримання ізотонічного розчину. Такі допоміжні речовини відомі в даній області техніки. Відповідно до одного варіанту реалізації зазначена композиція містить приблизно 1 % (мас./об.) хлориду натрію. Відповідно до іншого варіанту реалізації зазначена композиція містить приблизно 0,9 % (мас./об.) бензилового спирту. Відповідно до деяких варіантів реалізації зазначена композиція містить приблизно 0,9 % (мас./об.) бензилового спирту та приблизно 1 % (мас./об.) хлориду натрію. [0050] Відповідно до деяких варіантів реалізації pH зазначеної композиції задають за рахунок застосування основи і необов'язково підтримують за рахунок застосування буферу. [0051] Відповідно до переважного варіанту реалізації в даному винаході запропонована стабілізована композиція, що містить: фосфатний буфер з pH, що становить приблизно 8,3; приблизно 0,5 % (мас./об.) або приблизно 1 % (мас./об.) дезоксихолату натрію; ефективну як консервант кількість бензилового спирту; і приблизно 1 % (мас./об.) хлориду натрію, при цьому зазначеній композиції надана стійкість до осадження. [0052] Відповідно до ще одного варіанту реалізації фосфатний буфер представляє собою 10 мМ двоосновний натрій-фосфатний буфер. [0053] Відповідно до одного варіанту реалізації ефективна як консервант кількість бензилового спирту становить приблизно 0,9 % (мас./об.). [0054] Склади відповідно до опису в даній заявці складаються з приблизно 0,4 % (мас./об.) менше ніж приблизно 2 % (мас./об.) солі дезоксихолевої кислоти у воді, з pH, що зберігається на рівні, достатньому для істотного пригнічення утворення осаду солі дезоксихолевої кислоти. Ступінь осадження або гомогенність зазначеної композиції можуть бути виміряні із застосуванням різних способів. Наприклад, вони можуть бути виміряні кількісно за світлорозсіюванням при освітленні композиції в спектрофотометрі. Або, як варіант, гомогенність може бути виміряна якісно з оцінкою візуальної прозорості зазначеного розчину на око. Відповідно до деяких варіантів реалізації відносне стандартне відхилення для гомогенності зазначеної композиції складає менше ніж приблизно 5 %. Як варіант, відносне стандартне 5 UA 113522 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 відхилення для гомогенності зазначеної композиції складає менше ніж приблизно 4 %, або, як варіант, приблизно 3 %, або, як варіант, приблизно 2 %, або, як варіант, приблизно 1 %. [0055] Відповідно до іншого варіанту реалізації даний винахід відноситься до композиції, що по суті складається з: стерильного водного розчину, забуференого до pH, що становить приблизно 8,3; приблизно 0,5 % (мас./об.) або 1 % (мас./об.) дезоксихолату натрію; приблизно 0,9 % (мас./об.) бензилового спирту; і приблизно 1 % (мас./об.) хлориду натрію, при цьому зазначена композиція стійка до осадження. [0056] Відповідно до іншого варіанту реалізації даний винахід відноситься до композиції, що складається з: водного розчину, забуференого до pH, що становить приблизно 8,3; приблизно 0,5 % (мас./об.) або приблизно 1 % (мас./об.) дезоксихолату натрію; приблизно 0,9 % (мас./об.) бензилового спирту; і приблизно 1 % (мас./об.) хлориду натрію, при цьому зазначена композиція стійка до осадження. [0057] Відповідно до деяких варіантів реалізації розчини згідно з даним описом не включають ліпіди, фосфоліпіди або фосфатидилхолін. Відповідно до деяких варіантів реалізації розчини згідно з даним описом включають до 5 % (маса/маса, мас./об. або об'єм/об'єм) ліпідів, зокрема, фосфоліпідів, або, більш конкретно, фосфатидилхоліну. Переважно, використовується кількість ліпідів менша, ніж кількість дезоксихолату натрію або іншої солі дезоксихолевої кислоти. [0058] Відповідно до деяких варіантів реалізації водна фармацевтична композиція згідно з даним винаходом може також містити другий терапевтичний агент, вибраний з групи, що складається з: антимікробних агентів, судинозвужувальних агентів, антитромботичних агентів, антикоагулянтів, які пригнічують піноутворення агентів, протизапальних агентів, анальгетиків, дисперсійних агентів, антидисперсійних агентів, речовин, які сприяють проникненню, стероїдів, транквілізаторів, міорелаксантів та протидіарейних агентів. Відповідно до деяких варіантів реалізації розчин знаходиться в контейнері, що містить до 500 мл розчину. Такий контейнер може являти собою шприц або відповідний для наповнення шприца контейнер. [0059] Відповідно до деяких варіантів реалізації зазначені склади також містять молекулу, яка, за наявними відомостями, викликає загибель жирової тканини за рахунок ортогонального механізму. Такі молекули включають антагоністи нейропептиду Y (NPY), включаючи, але не обмежуючись перерахованими, антагоністи рецепторів NPY, такі як BIBP-3226 (Amgen), BIBO3304 (Boehringer Ingleheim), BMS-192548 і AR-H040922 (Bristol-Myers Squibb), LY-357897 (Eli Lilly), 1229U91 і GW438014S (GlaxoSmithKline), JNJ-5207787 (Johnson & Johnson), Lu-AA-44608 (Lundbeck), MK-0557 (Merck NPY), NGD-95-1 (Neurgogen), NLX-E201 (Neurologix), CGP-71683 (Novartis), PD-160170 (Pfizer), SR-120819A, BIIE0246 і SA0204 (Sanofi Aventis), S-2367 (Shiongli), дигідропіридин та похідні дигідропіридину, які представляють собою антагоністів рецепторів NPY, біцикличні сполуки, які представляють собою антагоністів рецепторів NPY, карбазольні антагоністи рецепторів NPY і трициклічні сполуки, які представляють собою антагоністів рецепторів NPY (див., наприклад, WO 2006/133160 і US 6313128). Також включені націлені на жирову тканину проапоптотичні пептиди, такі як CKGGRAKDC-пептид, який спрямовано мігрує в судини білої жирової тканини (див. Kolonin MG et al., Nat. Med., 2004, 10 (6): 625-32). [0060] Інший аспект винаходу відноситься до змішування жироспалювальних жовчних кислот, таких як дезоксихолева кислота (ДХК), з агентами, які призводять до загибелі жирових клітин. Відповідно до одного аспекту даний винахід охоплює способи підвищення естетичних ефектів ін'єктування дезоксихолату за допомогою введення в ін'єктат дезоксихолату молекули, яка викликає загибель жирової тканини за рахунок ортогонального механізму. Приклади таких кандидатних молекул включають, не обмежуючись перерахованими, антагоністи нейропептиду Y (NPY) і націлені на жирову тканину проапоптотичні пептиди. Оскільки кілінг жирових клітин може бути необхідним для опосередкування необхідних ефектів, ефекти агенту, здатного руйнувати жирову тканину, можуть бути посилені за рахунок додавання молекули, якій властиві потужні кілінг-ефекти відносно жирових клітин. Крім того, молекули, яким для кілінга потрібний доступ до судинної системи (такі як певні проапоптотичні пептиди, що зв'язуються з білками, які експресуються на люмінальній поверхні капілярів), можуть отримувати доступ до вказаних білків, оскільки дезоксихолат може викликати пропотівання через стінки судин. Таким чином, такі агенти можуть діяти синергетично з дезоксихолатом, що дає потенційно більш дієвий спосіб перетворення контурів тіла за меншу кількість терапевтичних сеансів. 6 UA 113522 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 [0061] Приклади антагоністів NPY включають, не обмежуючись перерахованими, антагоністи рецепторів NPY, такі як BIBP-3226 (Amgen), BIBO-3304 (Boehringer Ingleheim), BMS-192548 і ARH040922 (Bristol-Myers Squibb), LY-357897 (Eli Lilly), 1229U91 і GW438014S (GlaxoSmithKline), JNJ-5207787 (Johnson & Johnson), Lu-AA-44608 (Lundbeck), MK-0557 (Merck NPY), NGD-95-1 (Neurgogen), NLX-E201 (Neurologix), CGP-71683 (Novartis), PD-160170 (Pfizer), SR-120819A, BIIE0246 і SA0204 (Sanofi Aventis), S-2367 (Shiongli), похідні дигідропіридину і дигідропіридин, що представляють собою антагоністів рецепторів NPY, біциклічні сполуки, що представляють собою антагоністів рецепторів NPY, карбазольні антагоністи рецепторів NPY і трициклічні сполуки, що представляють собою антагоністів рецепторів NPY. Див., наприклад, WO 2006/133160 і US 6313128. [0062] Типові націлені на жирову тканину проапоптотичні пептиди включають, не обмежуючись зазначеним, пептид CKGGRAKDC, який спрямовано мігрує в судини білої жирової тканини. Див. Kolonin M.G. et al., Nat. Med. June 10 (6):625-32 (2004). [0063] Дезоксихолат натрію, або натрію (4R)-4-((3R,5R,10S,12S,13R,17R)-3,12-дигідрокси10,13-диметилгексадекагідро-1H-циклопента[a]фенантрен-17-іл)пентаноат може бути отриманий відповідно до способів, описаних в PCT/US2010/061150, під заголовком "Methods for the Purification of Deoxycholic Acid" ("Способи очищення дезоксихолевої кислоти"), поданої 17 грудня 2010 р. Інші солі дезоксихолевої кислоти можуть бути отримані подібним чином спеціалістом в даній області техніки. Способи [0064] Запропоновано способи стабілізації водного складу солі дезоксихолевої кислоти для запобігання утворенню осаду при зберіганні, який відрізняються тим, що концентрація солі являє собою кількість, ефективну для лізису жирових клітин, за умови, що вказана кількість солі знаходиться в діапазоні від приблизно 0,4 % (мас./об.) до приблизно менше ніж 2 % (мас./об.); зазначений спосіб включає: отримання водного розчину солі дезоксихолевої кислоти при вихідному pH вище її pKa; доведення pH зазначеного водного розчину до pH, що становить від приблизно 8,1 до приблизно 8,5; і необов'язково, включення достатньої кількості буфера для підтримки pH на рівні від приблизно 8,1 до приблизно 8,5. [0065] Відповідно до одного з аспектів даного винаходу способи згідно опису в даній заявці забезпечують істотну стабілізацію складу з сіллю дезоксихолевої кислоти, запобігаючи утворенню осаду протягом періоду часу, який переважно становить щонайменше приблизно шість місяців. Відповідно до іншого аспекту зазначені способи забезпечують стабілізацію складу з сіллю дезоксихолевої кислоти, запобігаючи утворенню осаду протягом періоду, який становить щонайменше приблизно один рік. Відповідно до ще одного аспекту зазначені способи забезпечують стабілізацію складу з сіллю дезоксихолевої кислоти, запобігаючи утворенню осаду протягом періоду, який становить щонайменше приблизно два роки. [0066] Було виявлено, що pH зазначеного розчину може пригнічувати утворення осаду дезоксихолевої кислоти або її солі при концентраціях від приблизно 0,4 % (мас./об.) до менше ніж приблизно 2 % (мас./об.) у воді, забезпечуючи підтримання дезоксихолевої кислоти або її солі в розчині. Відповідно до одного варіанту реалізації pH задають за рахунок застосування основ. Припускається, що будь-яка основа може застосовуватися для підвищення pH зазначеної композиції за умови, що вона не вступає в реакцію з дезоксихолевою кислотою або її сіллю. Відповідно до деяких варіантів реалізації основу вибирають з групи, що складається з карбонатів металів, бікарбонатів металів і гідроксидів металів, або їх суміші. Приклади основ включають, не обмежуючись перерахованими, основи, вибрані з групи, що складається з карбонату натрію, карбонату кальцію, карбонату магнію, карбонату цинку, бікарбонату натрію, гідроксиду натрію і гідроксиду калію або їхньої суміші. Відповідно до одного варіанту реалізації вказана основа представляє собою гідроксид натрію. [0067] Відповідно до певних варіантів реалізації pH знаходиться в діапазоні від приблизно 8,1 до приблизно 8,5. Відповідно до одного варіанту реалізації pH зазначеної композиції становить приблизно 8,1, або, як варіант, приблизно 8,2, або, як варіант, приблизно 8,3, або, як варіант, приблизно 8,4, або, як варіант, приблизно 8,5. Відповідно до переважного варіанту реалізації pH зазначеного водного розчину становить приблизно 8,3. [0068] У певних випадках може бути необхідно підтримувати pH зазначеної композиції за рахунок застосування буферу. Різні буфери відомі в даній області техніки і припускається, що будь-який буфер, який має буферну ємність при потрібних значеннях pH, може застосовуватися у складах відповідно до опису в даній заявці. Відповідно до одного варіанту реалізації зазначений буфер являє собою фосфатний буфер. Кількість фосфату, необхідну для 7 UA 113522 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 отримання потрібних значень pH і концентрації солі можуть бути розраховані із застосуванням способів, загальновідомих у даній області техніки. Відповідно до одного варіанту реалізації зазначена композиція містить приблизно 10 мМ фосфатного буферу. Відповідно до іншого варіанту реалізації фосфатний буфер представляє собою 10 мМ двоосновного натрійфосфатного буферу. [0069] У певних випадках pH задають за рахунок застосування основи і необов'язково підтримують за рахунок застосування буферу. [0070] Відповідно до одного варіанту реалізації із застосуванням способів згідно з описом в даній заявці отримують склади, які підходять для ін'єктування людині. Спосіб ін'єктування може бути будь-яким, наприклад, являти собою підшкірну ін'єкцію, а також інші типи ін'єкцій. Відповідно, згідно з деякими варіантами реалізації зазначений водний розчин містить стерильну воду або воду для ін'єкцій (WFI). [0071] Відповідно до одного аспекту може застосовуватися одна або більше допоміжна речовина для підтримання розчинності або підвищення збереженості солі дезоксихолевої кислоти, яка наявна у зазначеному складі. Відповідно до одного варіанту реалізації зазначений спосіб включає додавання приблизно 1 % (мас./об.) бензилового спирту. Відповідно до деяких варіантів реалізації зазначений склад також містить щонайменше одну допоміжну речовину, яка сприяє отриманню ізотонічного розчину. Такі допоміжні речовини відомі в даній області техніки. Відповідно до одного варіанту реалізації зазначений спосіб включає додавання приблизно 1 % (мас./об.) хлориду натрію. Відповідно до деяких варіантів реалізації зазначений спосіб включає додавання і 1 % (мас./об.) бензилового спирту і 1 % (мас./об.) хлориду натрію. Відповідно до деяких варіантів реалізації зазначений спосіб включає додавання і 0,9 % (мас./об.) бензилового спирту, і 0,9 % (мас./об.) хлориду натрію. Із застосуванням способів відповідно до опису в даній заявці значення pH водного розчину, що містить менше ніж приблизно 2 % (мас./об.) солі дезоксихолевої кислоти, підтримують на рівні, достатньому для істотного пригнічення утворення осаду солі дезоксихолевої кислоти. Ступінь осадження або гомогенність зазначеної композиції можуть бути виміряні з застосуванням різних способів. Наприклад, вони можуть бути виміряні кількісно вимірюванням за допомогою спектрофотометра світлорозсіювання при освітленні. Або, як варіант, гомогенність може бути виміряна якісно за допомогою оцінки візуальної прозорості зазначеного розчину безпосередньо на око. Відповідно до деяких варіантів реалізації зазначений спосіб забезпечує отримання фармацевтичної композиції з відносним стандартним відхиленням для гомогенності, що становить менше ніж приблизно 5 %. Як варіант, вказане відносне стандартне відхилення для гомогенності становить менше ніж приблизно 4 %, або, як варіант, приблизно 3 %, або, як варіант, приблизно 2 %, або, як варіант, приблизно 1 %. [0072] Температура зберігання може сприяти підтримці розчинності солі дезоксихолевої кислоти в зазначеному складі. Відповідно до певних варіантів реалізації температура зберігання становить від приблизно 17 °C до приблизно 27 °C. Відповідно до деяких варіантів реалізації температура зберігання становить приблизно 25 °C до приблизно 37 °C. Відповідно до інших варіантів реалізації температура зберігання становить від приблизно 2 °C до приблизно 8 °C. [0073] Припускається, що концентрація солі дезоксихолевої кислоти в зазначеному складі становить приблизно 0,5 % (мас./об.), або, як варіант, приблизно 0,7 % (мас./об.), або, як варіант, приблизно 1 % (мас./об.), або, як варіант, приблизно 1,2 % (мас./об.), або, як варіант, приблизно 1,4 % (мас./об.), або, як варіант, менше ніж приблизно 2 % (мас./об.). Відповідно до переважного варіанту реалізації зазначена сіль дезоксихолевої кислоти являє собою дезоксихолат натрію. Відповідно до іншого переважного варіанту реалізації зазначена композиція містить 0,5 % (мас./об.) дезоксихолату натрію. Відповідно до іншого переважного варіанту реалізації зазначена композиція містить 1 % (мас./об.) дезоксихолату натрію. [0074] Відповідно до одного варіанту реалізації зазначений водний склад розділений на кілька окремих розчинів, які окремо вводять в жирові клітини. Наприклад, водний склад розділений на 5, 10, 15, 20, 25 або 30 окремих розчинів і, в деяких випадках, до 50 окремих розчинів. [0075] Відповідно до переважного варіанту реалізації зазначена сіль дезоксихолевої кислоти являє собою дезоксихолат натрію. Оскільки способи, запропоновані в даному винаході, включають підшкірні ін'єкції, також запропонований шприц, що містить камеру, плунжер та ін'єкційну голку, причому камера містить склад відповідно до даного винаходу. Переважно, зазначена камера має достатній об'єм, щоб вміщати щонайменше 2 мл і переважно не більше 4 мл зазначеного складу. [0076] Відповідно до іншого варіанту реалізації в даному винаході запропонований синтез ДХК із захищеного комерційно доступного 9-,17--дигідрокси-5--андростан-3-ону відповідно до наведеної нижче схеми 1. 8 UA 113522 C2 Схема 1: Синтез ДХК 5 10 15 20 25 30 [0077] 9-,17- гідроксильні групи комерційно доступного 9-,17--дигідрокси-5--андростан3-ону диференційно захищені гідроксильними захисними групами, які можуть бути видалені в умовах, коли одну із зазначених гідроксильних груп регенерують, у той час як інша гідроксильна група залишається захищеною. Такий диференціальний захист називають ортогональним захистом, і для нього використовують загальновідомі реагенти та умови реакції. Відповідно до одного прикладу одна гідроксильна група захищена як ацетильна група, при цьому інша гідроксильна група захищена як бензильна група. Кожна група може бути вибірково видалена в таких умовах реакції, які дозволяють зберегти інші гідроксильні захисні група інтактними. [0078] Припускається, що відносно захищена стерично 9--гідроксильна група може не мати потреби в захисті, оскільки реакції, проведення яких передбачено перед елімінуванням цієї групи, у зазначеному положенні імовірно інгібовані через стеричні ускладненості. Проте, захист гідроксильної групи надійно гарантує інтактність зазначеної групи до тих пір, поки не буде потрібно елімінування зазначеної гідроксильної групи за допомогою дегідратації. [0079] 3-онову групу ортогонально захищеного 9-,17--дигідрокси-5- андростан-3-ону, сполуки 1, відновлюють стандартним поновлювальним агентом, таким як борогідрид натрію, для отримання 3--гідрокси-похідного, яке потім захищають ще однією групою ортогонального захисту для отримання сполуки 2. [0080] Гідроксильну захисну групу в положенні 17 сполуки 2 потім вибірково видаляють; регенеровану таким чином гідроксильну групу потім окислюють підходящим реагентомокислювачем, таким як CrO3, для отримання 17-кетопохідного, сполуки 3. 17-кетогрупу сполуки 3 захищають як кетальну групу в стандартних умовах кеталізації, таких як реакція з 1,2дигідроксиетаном або 1,3-дигідроксипропаном, з отриманням сполуки 4 (отримання таким чином кетальної групи з 1,2-дигідроксиетаном представлено виключно в ілюстративних цілях). [0081] Після зняття належним чином захисту 9--гідроксильної групи проводять дегідратацію зазначеної гідроксильної групи в таких умовах, як каталізоване кислотою елімінування, що дає 9,10-ненасичену похідну, сполуку 5. Синтез 12-кетогрупи здійснюють за допомогою алільного окислення сполуки 5 реагентами-окислювачами, такими як хромова кислота або ТБГП (третбутил гідропероксид), і NaOCl, з отриманням сполуки 6. Див., наприклад, заявку на патент США сер. № 61/348 686. Як варіант, алільне окислення здійснюють із застосуванням приблизно 2-5 еквівалентів ТБГП і приблизно 0,3-0,5 еквівалентів CuI як каталізатора. Зазначену реакцію 9 UA 113522 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 проводять в розчиннику, такому як ацетонітрил, при 40 °C протягом приблизно 40-55 годин. Повільне додавання ТБГП окремими порціями призводить до більш ефективного окислення. Утворений продукт містить суміш сполуки 6 і відповідного алільного спирту. Отриману суміш потім окислюють ПХХ з отриманням сполуки 6. [0082] Гідрування сполуки 6 в стандартних умовах, таких як 10 % Pd/C і H2, дає сполуку 7. t Відновлення 12-кетогрупи сполуки 7 такими реагентами, як LiAl(OBu )3H, дає 12-гідроксипохідне, сполука 8. Олефінування сполуки 8 в стандартних умовах реакції Віттіга, наприклад, із застосуванням броміду етилтрифенілфосфонію за наявністю основи, такої як трет-бутоксид калію, дає сполуку 9. Додавання алкілакрилату, такого як метилакрилат, за наявністю кислоти Льюїса, дає сполуку 10, де R являє собою алкільну групу, таку як метил. Відновлення подвійного зв'язку сполуки 10 також відбувається в стандартних умовах гідрування, таких як Pd/C і H2, з отриманням сполуки 11. Зняття захисту 3-OR3 з подальшим гідролізом основою, такою як LiOH, дає ДХК, сполуку 12. [0083] Сполуку 12 (неочищену ДХК) потім очищували, промиваючи метиловим спиртом, і рекристалізували з етанолу. Розбавляли 2 % (молярні %) MeOH в CH2Cl2 (25 об.) і нагрівали до 35-37 °C протягом 1 години. Цій масі давали охолонути до 28-30 °C і фільтрували. Фільтраційний осад промивали CH2Cl2 (5 об.) і висушували під вакуумом при 40 °C з отриманням ДХК. [0001] ДХК розчиняли в 10 % деіонізованій воді/EtOH (12 об.), проводили тонку фільтрацію через целіт і промивали 10 % деіонізованою водою/EtOH (3 об.). Отримані 15 об'ємів фільтрату додавали в деіонізовану воду (30 об.) і отримували тонкодисперсну білу масу. Зазначену масу витримували протягом 24 годин, фільтрували, промивали деіонізованою водою (20 об.) і висушували під вакуумом при 40 °C з отриманням ДХК. [0002] Перетворення ДХК в фармацевтично прийнятну сіль, таку як дезоксихолат натрію, протікає в стандартних умовах. І навпаки, перетворення фармацевтично прийнятної солі ДХК, такої як дезоксихолат натрію, в ДХК також протікає в стандартних умовах. [0003] Відповідно до іншого варіанту реалізації в даному винаході запропонований стабілізований склад, що містить: забуферений водний розчин з pH, яке становить приблизно 8,1 до приблизно 8,5, що містить також приблизно 0,5 % дезоксихолату натрію і приблизно 0,9 % бензилового спирту, при цьому зазначеному складу надана стійкість до осадження, і дезоксихолат натрію отримують відповідно до схеми 1. [0004] Відповідно до іншого варіанту реалізації в даному винаході запропонований стабілізований склад, що містить: забуферений водний розчин з pH, яке становить від приблизно 8,1 до приблизно 8,5, що містить також приблизно 1 % дезоксихолату натрію і приблизно 0,9 % бензилового спирту, при цьому зазначеному складу надана стійкість до осадження, і дезоксихолат натрію отримують відповідно до схеми 1. Приклади [0005] У прикладах і скрізь в тексті даного опису скорочення мають такі значення: мг = Міліграм мл = Мілілітр мм = Міліметр мМ = Мілімоль T = Час УФ = Ультрафіолет за = Об'єм/Об'єм об'ємом (мас./об.) = Маса/об'єм (г/мл) за масою = Маса/маса WFI = Вода для ін'єкцій мОсм = Міліосмоль [0006] Нижче даний винахід пояснюється докладніше на прикладах, призначених виключно для ілюстрування даного винаходу. Приклад 1 Залежне від концентрації випадання осаду в розчині дезоксихолату натрію [0007] Утворення осаду оцінювали в розчинах різних концентрацій дезоксихолату натрію після 1 тижня зберігання. Результати наведені на Фіг. 1-4, і вони вказують на те, що при приблизно 0,5 % і при приблизно 1 % (мас./об.) концентрації дезоксихолату натрію у водному 10 UA 113522 C2 розчині, що містить тільки воду і 0,9 % (мас./об.) бензилового спирту, утворюється значна кількість осаду, що перешкоджає застосуванню зазначеного розчину як композиції для підшкірного ін'єктування. За допомогою візуального огляду Фіг. 1-4 можна отримати оцінки ступеню утворення осаду, наведені в таблиці 1 нижче. Таблиця 1 % (мас./об.) дезоксихолату натрію 0 Ступінь осадження 0,5 1,0 10 7 2,0 2 1 Коментарій Утворення осаду практично неможливо помітити неозброєним оком Значні кількості осаду можна помітити неозброєним оком Неозброєним оком можна помітити значні кількості осаду, але менше ніж для концентрації 0,5 % (мас./об.) Утворення осаду можна помітити неозброєним оком, але кількість осаду значно менше в порівнянні з наведеними вище 0,5 % і 1 % розчинами 5 10 15 [0091] При оцінці ступеню осадження вважають, що "0" відноситься до розчину, який не містить осаду, а "10" означає, що в суміші спостерігається утворення істотної кількості осаду, який легко помітний неозброєним оком. [0092] Такі спостереження показують, що в протестованих діапазонах концентрацій на утворення осаду істотно впливає концентрація дезоксихолату. Для уточнення впливу pH на утворення осаду були виміряні значення pH зазначених розчинів, наведені в Таблиці 2, в результаті чого було показано, що значення pH зазначених розчинів по суті були однаковими, зокрема в 1 % і 2 % розчинах. Інверсна водорозчинність дезоксихолату натрію, за рахунок якої в більш розбавленому розчині (0,5 % або 1 %) утворюється більше осаду, ніж у більш концентрованому розчині (2 %), являє собою несподіване спостереження, і також вказує на те, що явище утворення осаду не пов'язане безпосередньо з pH, оскільки значення pH зазначених розчинів були також по суті однакові, зокрема в 1 % і 2 % розчинах. Таблиця 2 % (мас./об.) дезоксихолату натрію 0 0 0,5 0,5 1 1 2 2 20 25 30 Вимірювання № Температура/°C pH 1 2 1 2 1 2 1 2 24,0 24,1 24,7 24,5 24,6 24,5 24,9 24,7 7,75 7,58 7,77 7,71 7,93 7,97 8,07 8,06 [0093] Відповідно, в даному винаході запропонований спосіб пригнічення несподіваного утворення осаду в розведених розчинах, що містять від 0,4 % до менше ніж 2 % (мас./об.) солі дезоксихолевої кислоти, до ступеню, який дозволяє застосовувати такі розчини для підшкірних ін'єкцій, за рахунок підвищення pH розчину. Приклад 2 Склади дезоксихолату натрію (АФІ), що містять бензиловий спирт і склади, які не містять бензилового спирту 1. Отримували композицію дезоксихолату натрію (0,5 % і 1 %), що містить фосфат натрію (10 мМ), хлорид натрію (75-90 мМ), бензиловий спирт (0,9 %), дезоксихолеву кислоту, з pH 8,3. 2. Отримували ізотонічну композицію дезоксихолату натрію без бензилового спирту із застосуванням вільної кислоти, а саме, дезоксихолевої кислоти, наступним чином. a. Отримання ізотонічних партій об'ємом по 100 мл з концентрацією 10 мг/мл [0094] 1,0 г дезоксихолевої кислоти (ДХК) додавали в зазначений розчин тільки після отримання основного розчину з 70 мл води, 142 мг безводного двоосновного фосфату натрію і 11 UA 113522 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 267 мкл 10M NaOH. Розчинення АФІ займало приблизно 20 хвилин. Значення pH зазначеного розчину становило 11,1. Відомо, що швидке додавання HCl викликає деяке осадження, так що 225 мкл 1M HCl додавали повільно для доведення pH до 8,3 зазначеного розчину. Розчин залишали для змішування ще на 15 хвилин. Після доведення об'єму до 100 мл водою спостерігалося значення осмоляльності 51 мОсм. Додаванням 859 мг NaCl осмоляльність доводили до 305 мОсм. [0095] Отриманий таким чином розчин може необов'язково бути ліофілізований для отримання ліофілізованого продукту, який може бути відновлений додаванням належної кількості стерильної води. Відповідно, в даному винаході запропоновані також ліофілізовані продукти розчинів відповідно до опису в даній заявці. b. Отримання ізотонічних партій об'ємом по 1000 мл з концентрацією 10 мг/мл [0096] Результати, описані в розділі (a) (вище), не відтворюються ідеально при збільшенні масштабу в 10 разів. До 900 мл води додавали 1,4 г безводного двоосновного фосфату натрію, 8,6 г NaCl і 2,7 мл 10 M NaOH. Потім додавали 10,0 г ДХК і залишали для перемішування до прозорості протягом 30 хвилин. Значення pH зазначеного розчину становило 10,4. Повільно додавали 1,5 мл 1 M HCl і залишали для перемішування на 5 хвилин. Кінцеве значення pH становило 8,1. Додатково необхідно було додати 20 мкл 10 М NaOH для доведення рН до 8,3. Після доведення обсягу до 1000 мл водою осмоляльність становила 314 мОсм. [0097] На основі спостережень за зміненням pH в ході додавання 1 M HCl було встановлено, що для 1000 мл партії при концентрації АФІ 10 мг/мл на самому початку необхідно додавати лише 1,0 мл 1M HCl, а потім повільно проводити титрування, додаючи невеликі об'єми кислоти. Пропонований порядок додавання для 1000 мл з концентрацією АФІ 10 мг/мл наведено в Таблиці 3. c. Отримання ізотонічних партій по 100 мл з концентрацією 5 мг/мл [0098] 0,50 г дезоксихолевої кислоти (ДХК) додавали до розчину тільки після отримання основного розчину з 70 мл води, 142 мг безводного двоосновного фосфату натрію і 134 мкл 10M NaOH. Розчинення АФІ займало приблизно 20 хвилин. Значення pH становило 10,7. Відомо, що швидке додавання HCl викликає деяке осадження, тому 115 мкл 1 M HCl додавали повільно для доведення pH розчину до 8,3. Зазначений розчин залишали для перемішування ще на 15 хвилин. Після доведення об'єму до 100 мл водою спостерігалося значення осмоляльності 39 мОсм. Додаванням 859 мг NaCl доводили значення осмоляльності до 294 мОсм. d. Отримання ізотонічних партій по 1000 мл з концентрацією 5 мг/мл [0099] Результати, описані в розділі (с) (вище), не відтворюються ідеально при збільшенні масштабу в 10 разів. До 900 мл води додавали 1,4 г безводного двоосновного фосфату натрію, 8,6 г NaCl і 1,3 мл 10M NaOH. Потім додавали 5,0 г ДХК і залишали на 30 хвилин для змішування до прозорості. Значення pH становило 8,6. Після додавання всього 350 мкл 1M HCl значення pH падало до 8,0. Додатково необхідно було додати 25 мкл 10M NaOH для доведення pH до 8,4. Після доведення об'єму до 1000 мл водою осмоляльність становила 305 мОсм. На основі спостережень за зміненням pH в ході додавання 1 M HCl було встановлено, що для партії об'ємом 1000 мл при концентрації АФІ 5 мг/мл необхідно повільно проводити титрування, додаючи невеликі об'єми 1M HCl. Пропонований порядок додавання для 1000 мл з концентрацією АФІ 5 мг/мл наведено в Таблиці 3. Таблиця 3 Порядок додавання (зліва направо) для 1000 мл ізотонічного складу, що не містить бензилового спирту Концентрація АФІ 10M NaOH ДХК NaCl 1M HCl pH 10 мг/мл Двоосновний фосфат натрію 1,4 г 2,7 мл 10,0 г 8,6 г 8,3 5 мг/мл 1,4 г 1,3 мл 5,0 г 8,6 г 1,0 мл + поступове додавання до досягнення кінцевого pH поступове додавання 12 8,3 UA 113522 C2 Таблиця 3 Порядок додавання (зліва направо) для 1000 мл ізотонічного складу, що не містить бензилового спирту Концентрація АФІ Двоосновний фосфат натрію 10M NaOH ДХК NaCl 1M HCl pH до досягнення кінцевого pH ФОРМУЛА ВИНАХОДУ 5 10 15 20 25 30 35 40 45 1. Водна фармацевтична композиція, яка є стійкою до осадження і складається по суті з від 0,5 до 1 % (мас./об.) солі дезоксихолевої кислоти та фармацевтично прийнятної допоміжної речовини, при цьому величина рН зазначеної композиції підтримується на рівні від 8,2 до 8,5. 2. Водна фармацевтична композиція за п. 1, яка має початкову величину рН 8,3. 3. Водна фармацевтична композиція за п. 1, у якій суттєве інгібування осадження солі дезоксихолевої кислоти відбувається протягом періоду часу, який становить щонайменше шість місяців. 4. Спосіб інгібування осадження солі дезоксихолевої кислоти у водній фармацевтичній композиції, де зазначена водна фармацевтична композиція складається по суті з водного розчину, який містить від 0,5 до 1 % (мас./об.) солі дезоксихолевої кислоти та принаймні одну фармацевтично прийнятну допоміжну речовину і/або носій, де зазначений спосіб включає підтримання величини рН водного розчину на рівні від 8,2 до 8,5. 5. Спосіб стабілізації водної фармацевтичної композиції солі дезоксихолевої кислоти від осадження впродовж терміну її зберігання, який включає приготування водного розчину солі дезоксихолевої кислоти з первинною величиною рН вище рKа солі дезоксихолевої кислоти та встановлення величини рН водного розчину 8,2 до 8,5, де водний розчин містить від 0,5 до 1 % (мас./об.) солі дезоксихолевої киcлоти та фармацевтично прийнятну допоміжну речовину. 6. Водна фармацевтична композиція за будь-яким з пп. 1-3, яка призначена для застосування у розчиненні жиру. 7. Водна фармацевтична композиція за будь-яким з пп. 1-3, яка призначена для застосування у приготуванні лікарського засобу для застосування у розчиненні жиру. 8. Водна фармацевтична композиція, яка складається по суті з: водного розчину, забуференого до величини рН, що становить 8,3; 0,5 % (мас./об.) дезоксихолату натрію; необов'язково 0,9 % (мас./об.) бензилового спирту; і 1 % (мас./об.) хлориду натрію, де композиція є стійкою до осадження. 9. Водна фармацевтична композиція, яка складається по суті з: водного розчину, забуференого до величини рН, що становить 8,3; 1 % (мас./об.) дезоксихолату натрію; необов'язково 0,9 % (мас./об.) бензилового спирту: і 1 % (мас./об.) хлориду натрію, де композиція є стійкою до осадження. 10. Водна фармацевтична композиція за п. 1, у якій сіль дезоксихолевої кислоти є наявною у кількості, що становить 0,5 % (мас./об.). 11. Водна фармацевтична композиція за п. 1, у якій сіль дезоксихолевої кислоти є наявною у кількості, що становить 1 % (мас./об.). 12. Водна фармацевтична композиція за будь-яким з пп. 1 та 10-11, у якій допоміжна речовина являє собою розчинник, буфер, консервант, допоміжний агент для ліофілізації або будь-яку їхню комбінацію. 13. Водна фармацевтична композиція за п. 12, у якій допоміжна речовина являє собою стерильну воду. 14. Водна фармацевтична композиція за п. 12, у якій допоміжна речовина являє собою консервант. 13 UA 113522 C2 5 15. Водна фармацевтична композиція за п. 14, у якій консервант являє собою бензиловий спирт. 16. Водна фармацевтична композиція за п. 14, у якій консервант являє собою 0,9 % бензиловий спирт. 17. Водна фармацевтична композиція за будь-яким з пп. 1 та 10-16, рН якої становить 8,3. 18. Водна фармацевтична композиція за будь-яким з пп. 1 та 10-16, у якій сіль являє собою сіль лужного металу. 19. Водна фармацевтична композиція за п. 18, у якій сіль лужного металу являє собою натрієву сіль. 14 UA 113522 C2 15 UA 113522 C2 16 UA 113522 C2 Комп’ютерна верстка О. Гергіль Державна служба інтелектуальної власності України, вул. Василя Липківського, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут інтелектуальної власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 17