Спосіб підвищення виходу гаплоїдних рослин цукрових буряків

Корисна модель відноситься до галузі сільського господарства, зокрема біотехнології і може бути використаний в селекції рослин цукрових буряків. Відомий спосіб отримання гаплоїдних рослин при опиленні цукрових буряків пилком Beta webbiana, Beta Procumbens [Melzer R., Behrens И.О. Nutzung vor In zuehtlinien in der. Zuckerrubenzuchlung // Fortschriftsberichte fur die Landwirtschaft und Nahrungsguterwirtschaff. - 1980. - Bd. 18, N 4. - S.1-24]. Проте недоліком даного способу є низький вихід гаплоїдних матеріалів, який не перевищує 0,09%, що не забезпечує отримання достатньої кількості гаплоїдних матеріалів для ведення селекції. Відомо що пилок виду Beta Avebbiana L. нездатний запліднювати рослини виду В. vulgaris L. але він має гормональний вплив на яйцеклітину та центральне ядро зародкового мішка, пробуджуючи їх до розвитку [Красочкин В.Т., Сечкарёв Б.И., Сазонова Л.В., Левандовская Л.И. Корнеплодные растения // Культурная флора СССР. - Ленинград.: Колос, 1971.-С.184]. Найбільш близьким за сукупністю суттєвих ознак до пропонованого способу є спосіб отримання гаплоїдних рослин цукрових буряків з використанням культури ізольованих насіннєвих зачатків та зав'язей в культурі in vitro [Білоус В.Е., Ильенко И.И., Редько В.И., Бабяк И.А. и др. Применение метода культури изолированих семяпочек и зародишей для получения гаплоидов сахарной свекли. - Киев: ВНИС, 1988.-С.140-148], що включає виділення незапліднених насіннєвих зачатків або зародків, культивування їх на живильному середовищі, отримання макроструктур (калюс, проростки), оцінка плоїдності і відбір гаплоїдних матеріалів. Ці спільні суттєві ознаки мають відомий і пропонований способи, проте при використанні відомого способу вихід гаплоїдних рослин складає 2-4% від загальної кількості висаджених експлантів, що є недостатнім для ведення селекції з використанням гаплоїдних форм. В основу корисної моделі поставлена задача удосконалити спосіб підвищення виходу гаплоїдних рослин цукрових буряків, шляхом стимуляції гаплоїдії незапліднених насіннєвих зачатків, що підвищує вихід гаплоїдних та диплоїдних рослин, калюсної біомаси. Поставлена задача вирішується тим, що у відомому способі підвищення виходу гаплоїдних рослин цукрових буряків, що включає виділення незапліднених насіннєвих зачатків або зародків, культивування їх на живильному середовищі, отримання макроструктур, оцінка плоїдності і відбір гаплоїдних матеріалів, згідно з корисною моделлю в якості донора використовують рослини опиленні пилком Beta webbiana L. для введення в культурі in vitro. Таким чином, новими ознаками корисної моделі є: використання донорів рослин опиленних пилком Beta webbiana L. для введення в культурі in vitro. При використанні запропонованого способу підвищується вихід гаплоїдних рослин 7,4 рази і в 3,8 рази калюсної біомаси, що в результаті морфогенезу також може слугувати об'єктом ініціації гаплоїдних матеріалів. Даний спосіб є ефективним прийомом стимулювання гаплоїдії. Використання запропонованого винаходу в загальній селекційній схемі цукрових буряків скоротить час та затрати праці на створення нових гетерозисних гібридів при використанні гомозиготних матеріалів, отриманих на основі гаплоїдів. Результати досліджень зі стимуляції гаплоїдії наведені в Таблиці. Таблиця Кількість сформованих стр уктур з насіннєвих зачатків при запиленні донорних рослин цукрових буряків пилком В. webbiana L Варіанти досліду Прототип На сіннєві зачатки із рослин запилених пилком В. webbiana L. Кількість висаджених Повторности насіннєвих зачатків, шт. 1 200 2 280 3 322 4 235 5 279 x 263 1316 S 1 200 2 746 3 831 4 706 5 540 x 605 3023 S Всього Сформовані структури Проростки Калюс гаплоїдні диплоїдні шт. % шт. % шт. % ШТ. % 12 22 16 20 19 18 89 66 263 246 228 179 199 992 6,0 7,9 4,9 8,5 6,8 6,8 6,8 33,0 35,2 29,6 32,3 33,1 32,9 32,8 8 17 13 16 15 14 69 36 172 157 146 108 124 619 4,0 6,1 4,0 6,8 5,4 5,3 5,2 18,0 23,1 18,9 20,7 20,0 20,5 20,5 3 4 2 2 3 3 14 18 61 50 52 44 45 225 1,5 1,4 0,6 0,8 1,0 1,1 1,1 9,0 8,2 6,0 7,4 8,1 7,4 7,4 1 1 1 2 1 1 1 12 30 39 34 33 30 148 0,5 0,4 0,3 0,8 0,4 0,4 0,4 6,0 4,0 4,7 4,8 6,1 5,0 4,9 Примітка: х - середній показник за повторностями; S - загальна кількість за повторностями В прототипі кількість сформованих структур з насіннєвих зачатків, в середньому за повторностями, склала 6,9% з яких 5,5% калюс, 1% гаплоїдних та 0,5% диплоїдних проростків. В запропонованому способі, при опиленні рослини-донора експлантів пилком В. webbiana L., отримали вищий відсоток формувань: 20,7% висаджених насіннєбруньок регенерували калюсну тканину, 7,4% гаплоїдних та 4,8% диплоїдних проростків. Запропонований спосіб здійснюється наступним чином. Рослини цукрових буряків поміщають під ізолятор і в період цвітіння спилюють пилком виду В. webbiana L. Отриманні рослини слугують донорами насіннєвих зачатків для введення в культур у in vitro,висаджують на регенераційні середовища і культивують при температурі 20-25°С і відносній вологості 75% до появи макроструктур.