Спосіб розмноження безплідної злакової рослини

Реферат: Винахід належить до способу розмноження безплідної злакової рослини шляхом (а) обробки незрілої стеблини безплідної злакової рослини або її сегмента in situ композицією, що містить ауксин, цитокінін та поліаспарагінову кислоту, збирання одержаної стеблини та її висадження; композиції для обробки безплідної злакової рослини in situ що містить ауксин, цитокінін та поліаспарагінову кислоту, (b) збирання стеблини на етапі (а) та висадження стеблини, зібраної на етапі (b). UA 112838 C2 (12) UA 112838 C2 UA 112838 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 Перехресне посилання на родинні заявки Дана заявка заявляє перевагу на підставі 35 U.S.C. § 119(e) попередньої заявки на патент США № 61/233713, поданої 13 серпня 2009 року, що включена посиланням у її повному обсязі. Передумови Область техніки Даний винахід стосується композицій, що підсилюють ріст, і поліпшених способів їх застосування для розмноження злакових рослин, таких як безплідні злакові рослини, класу Monocotyledonae, включаючи злакові рослини сімейства Poaceae. Опис рівня техніки Визначені однодольні злакові рослини серед інших застосувань придатні у якості культур для одержання біомаси. Одне однодольне, Arundo donax або арундо очеретяний, порядку Poales і сімейства Poaceae (Gramineae), є одним з найбільших злаків у світі і є привабливим, могутнім, багаторічним арундо (Tucker, J. Arnold Arb., 71:145-177, 1990). Дуже жорсткі, почасти дерев'янисті, зібрані в групи соломини, що ростуть з горизонтальних вузлуватих кореневищ, як відомо, виростають до 8-10 метрів у висоту (дивися, наприклад, Bailey, Manual of cultivated plants: Most commonly grown in the continental United States and Canada, Rev. Ed., MacMillan, New nd York, (1954); і Mabberley, The plant-book: a portable dictionary of the vascular plants, 2 Rev., Cambridge Univ. Press, Oxford, 1997). Арундо очеретяний являє собою один з найбільших трав'янистих злаків і має товсті повзучі кореневища, які утворюють щільні маси, які дають початок щільним розгалуженим кореням, що проникають глибоко в ґрунт. Соломини звичайно гілкуються протягом другого року росту і є порожніми зі стінками товщиною 2-7 мм. Рослина відома під різноманітними звичайними назвами, включаючи карризо, очерет бамбуковидний, данубиан рід, очерет гігантський, італіан рід, прованс кейн і спеніш рід. A. donax, ймовірно, виник з прісноводних рослин теплих регіонів Східної Азії. Його культивували в Азії, Північній Африці і на Середньому Сході протягом тисяч років, а також у Північній і Південній Америці, Австралії і Південній Африці протягом минулого сторіччя. Додаткову інформацію про культуру A. donax можна знайти, наприклад, у патенті США № 6389746; патенті США № 7303916; Bell, Ecology and management of Arundo donax, and approaches to riparian habitat restoration in Southern California; у Plant Invasions: Studies From North America and Europe, Brock et al., Eds. pp.103-113, Backhuys Publishers, Leiden (1997); Perdue, Econ. Bot. 12:368-404 (1958); Rossa et al., Bot. Acta, 111:216-221, 1998; Roys, Ethnobotany of the Maya: The Department of Middle American Research. M.A.R. Series Pub. 2, Tulane U., New Orleans (1931); Zahran et al., The vegetation of Egypt. Chapman & Hall, London (1992); і Zohary, Plant Life of Palestine. Ronald Press, New York (1962). Рослини з класу Monocotyledonae, такі як A. donax, є багатоцільовими рослинами. Арундо очеретяний, наприклад, застосовували протягом більш ніж 5000 років при створенні духових інструментів, і до теперешнього часу він залишається основним джерелом тростин для кларнетів, органних труб та інших дерев'яних духових інструментів. Арундо очеретяний також застосовують для боротьби з ерозією, й у нього великий потенціал для застосування у якості енергетичної культури (дивися, наприклад, Szabo et al., J. Anal. Appl. Pyrolysis. 36:179-190, 1996). Соломини також застосовують для вудилищ, тростин, матів і сіток у конструкціях глинобитних хатин. Арундо очеретяний також є джерелом промислової целюлози для виробництва паперу і віскози і для одержання інших полісахаридів (Neto et al., Ind. Crops & Prods. 6:51-58, 1997). Його також розглядали як джерело пульпи для виготовлення паперу. Арундо очеретяний росте дуже швидко. За сприятливих умов ріст зі швидкістю 0,3-0,7 метра на тиждень протягом декількох тижнів не є незвичайним. Молоді соломини, як правило, виростають до їх повного діаметра протягом початкового періоду вегетації, але їх стінки після цього збільшуються в товщину. За межами її природного ареалу і Середземномор'я, однак, рослина – безплідна; вона цвіте, але не дає життєздатне насіння. Замість цього її відтворюють вегетативно із фрагментів стеблин і стеблин і кореневищ (дивися, наприклад, Boose et al., Weed Res. 39:117-127, 1999). Отже, існували значні труднощі в надійному й ефективному розмноженні цих рослин. Традиційним садівничим розмноженням арундо очеретяного є розподіл кореневищ. Однак розмноження арундо очеретяного за допомогою або розподілу кореневища, або традиційної насіннєвої культури вимагає значної кількості часу і зусиль від початку поділу або посіву до успішного укорінення зростаючої рослини. Більш того, загальноприйняті способи розмноження дають обмежену можливість для маніпуляції з генами і, у випадку насіння, не дають можливості для генетичного контролю отриманого потомства. Такі загальноприйняті методики також 1 UA 112838 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 вимагають великих площ для одержання достатньої кількості рослин, щоб бути придатними в програмах з одержання палива або біомаси для застосування в програмах з біоремедіації. Був розроблений ряд конкретних способів розмноження для злакових рослин, таких як безплідні злакові рослини. Такі способи включають розмноження відростками, кущіння, ділення коренів, культивування тканин, розмноження живцями, культивування коренів і культивування з відділених ділянок з вузлами. Однак, незважаючи на те, що дані способи широко використовувалися протягом двох останніх десятиліть, вони не були ані ефективними, ані рентабельними частково внаслідок того, що цикли розмноження є занадто довгими, і за дану кількість часу й у даному обсязі простору можна створити лише обмежену кількість нащадків. Також, деякі з даних способів приводять до сомаклональної мінливості, серйозного недоліку при операціях, у яких необхідна клональна однорідність. Арундо очеретяний є лише одним з однодольних, які виявляють такі численні застосування. Незалежно від того, чи застосовуються вони у якості декоративних рослин, джерел енергії або у якості придатних засобів для здійснення виробничих процесів, такі трав'янисті рослини є важливими. Отже, буде корисним забезпечити спосіб, за допомогою якого злакові рослини класу Monocotyledonae можна розмножувати навіть в областях, у яких рослини цих родів безплідні, і способом, який вимагав би менше часу, менше зусиль і меншої території, ніж традиційні способи. Даний винахід забезпечує ці й інші переваги. Короткий опис Варіанти здійснення даного винаходу відносяться до поліпшених композицій, підсилюючих ріст, які включають, окрім інших інгредієнтів, цитокініни й ауксини, і способів їх застосування для розмноження злакових рослин класу Monocotyledonae, включаючи рослини сімейства Poaceae. Конкретні варіанти здійснення відносяться до способів і композицій для розмноження безплідних злакових рослин. Включено способи розмноження злакової рослини, які включають: (a) обробку стеблини злакової рослини або її сегмента композицією, яка містить: ауксин у кількості від приблизно 1 частини на мільйон до приблизно 10000 частин на мільйон, цитокінін у кількості від приблизно 1 частини на мільйон до приблизно 10000 частин на мільйон і поліаспарагінову кислоту в кількості від приблизно 1 частини на мільйон до приблизно 250000 частин на мільйон; (b) збирання стеблини, обробленої на етапі (a); і (c) висаджування стеблини, зібраної на етапі (b). У визначених варіантах здійснення етап (a) проводять in situ. У визначених варіантах здійснення, наприклад, на етапі (a), стеблина злакової рослини є незрілою стеблиною або її сегментом. У визначених варіантах здійснення незріла стеблина становить у висоту приблизно 10-25 дюймів і має приблизно 4-10 вузлів. У визначених варіантах здійснення незрілій стеблині – від приблизно 3 до приблизно 6 тижнів. У визначених варіантах здійснення, наприклад, на етапі (a), стеблина злакової рослини є сегментом зрілої стеблини. У визначених варіантах здійснення етап (b) проводять через приблизно 3-20 днів після проведення етапу (a). У визначених варіантах здійснення етап (b) проводять через приблизно 14 днів після проведення етапу (a). У визначених варіантах здійснення злакова рослина є безплідною злаковою рослиною. У конкретних варіантах здійснення безплідною злаковою рослиною є рослина Arundo donax або її культивар. У визначених варіантах здійснення злакова рослина належить до сімейства Poaceae. У визначених варіантах здійснення злаковою рослиною є рослина Arundo gigantium, Geranium sagitatum, Miscanthus x giganteus, Saccharum officianarum або інший Saccharum spp., Pennisetum purpereum або її культивар. У визначених варіантах здійснення описані вище композиції додатково включають концентрат морської водорості в кількості від 1 частини на мільйон до приблизно 500000 частин на мільйон. У визначених варіантах здійснення концентрат морської водорості складає від приблизно 100 частин на мільйон до приблизно 1000 частин на мільйон. У визначених варіантах здійснення концентратом морської водорості є екстракт з Ascophyllum nodosum. У визначених варіантах здійснення описані вище композиції додатково включають поверхнево-активну речовину в кількості від 1 частини намільйон до приблизно 250 частин на мільйон. У визначених варіантах здійснення поверхнево-активною речовиною є Tween 20. У визначених варіантах здійснення ауксином є індолілмасляна кислота (IBA), індол-3-оцтова кислота (IAA), нафталіноцтова кислота (NAA), 4-хлоріндол-3-оцтова кислота (4-CI-IAA), 2фенілоцтова кислота (PAA), 2,4-діхлорфеноксіоцтова кислота, 2-метоксі-3,6-дихлорбензойна кислота, 4-аміно-3,5,6-трихлорпіколінова кислота або їх суміш. У визначених варіантах здійснення цитокініном є бензиламінопурин (BA), кінетин, зеатин (Z), дигідрозеатин (DHZ) і ізопентеніладенозин (IPA), ортотополін (o), метатополін (m), ортометокситополін (Meo), метаметокситополін (Mem), бензиладенін (BA) або їх суміш. У визначених варіантах здійснення поліаспарагіновою кислотою є сополімер [(3-карбоксипропіонамід)(2-(карбоксиметил)ацетамід)]. 2 UA 112838 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 У визначених варіантах здійснення ауксин складає від приблизно 100 частин на мільйон до приблизно 1000 частин на мільйон. У визначених варіантах здійснення цитокінін складає від приблизно 100 частин на мільйон до приблизно 1000 частин на мільйон. У визначених варіантах здійснення поліаспарагінова кислота складає від приблизно 500 частин на мільйон до приблизно 5000 частин на мільйон. Також включені композиції для обробки злакової рослини in situ, які містять: ауксин у кількості від 1 частини на мільйон до приблизно 10000 частин на мільйон, цитокінін у кількості від 1 частини на мільйон до приблизно 10000 частин на мільйон і поліаспарагінову кислоту в кількості від 1 частини на мільйон до приблизно 250000 частин на мільйон. У визначених варіантах здійснення ці композиції додатково включають концентрат морської водорості в кількості від 1 частини на мільйон до приблизно 500000 частин на мільйон. У визначених варіантах здійснення концентрат морської водорості присутній в кількості від приблизно 100 частин на мільйон до приблизно 1000 частин на мільйон. У визначених варіантах здійснення концентратом морської водорості є екстракт з Ascophyllum nodosum. У визначених варіантах здійснення описані вище композиції додатково включають поверхнево-активну речовину в кількості від 1 частини на мільйон до приблизно 250 частин на мільйон. У визначених варіантах здійснення поверхнево-активною речовиною є Tween 20. У визначених варіантах здійснення ауксином є індолілмасляна кислота (IBA), індол-3-оцтова кислота (IAA), нафталіноцтова кислота (NAA), 4-хлоріндол-3-оцтова кислота (4-CI-IAA), 2фенілоцтова кислота (PAA), 2,4-дихлорфеноксіоцтова кислота, 2-метоксі-3,6-дихлорбензойна кислота, 4-аміно-3,5,6-трихлорпіколінова кислота або їх суміш. У визначених варіантах здійснення цитокініном є бензиламінопурин (BA), кінетин, зеатин (Z), дигідрозеатин (DHZ) і ізопентеніладенозин (IPA), ортотополін (o), метатополін (m), ортометокситополін (Meo), метаметокситополін (Mem), бензиладенін (BA) або їх суміш. У визначених варіантах здійснення поліаспарагіновою кислотою є сополімер [(3-карбоксипропіонамід)(2-(карбоксиметил)ацетамід)]. У деяких з наведених у даному документі композиціях ауксин складає від приблизно 100 частин на мільйон до приблизно 1000 частин на мільйон. У визначених варіантах здійснення ауксин складає від приблизно 100 частин на мільйон до приблизно 300 частин на мільйон. У визначених варіантах здійснення ауксин складає від приблизно 300 частин на мільйон до приблизно 700 частин на мільйон. У визначених варіантах здійснення ауксин складає від приблизно 700 до приблизно 1000 частин на мільйон. У визначених варіантах здійснення ауксин складає від приблизно 200 частин на мільйон до приблизно 400 частин на мільйон. У визначених варіантах здійснення ауксин складає від приблизно 400 частин на мільйон до приблизно 600 частин на мільйон. У визначених варіантах здійснення ауксин складає від приблизно 600 частин на мільйон до приблизно 800 частин на мільйон. У визначених варіантах здійснення ауксин складає від приблизно 800 частин на мільйон до приблизно 1000 частин на мільйон. У визначених варіантах здійснення ауксин складає від приблизно 750 частин на мільйон до приблизно 1700 частин на мільйон. У деяких з наведених у даному документі композиціях цитокінін складає від приблизно 100 частин на мільйон до приблизно 1000 частин на мільйон. У визначених варіантах здійснення цитокінін складає від приблизно 100 частин на мільйон до приблизно 300 частин на мільйон. У визначених варіантах здійснення цитокінін складає від приблизно 300 частин на мільйон до приблизно 700 частин на мільйон. У визначених варіантах здійснення цитокінін складає від приблизно 700 до приблизно 1000 частин на мільйон. У визначених варіантах здійснення цитокінін складає від приблизно 200 частин на мільйон до приблизно 400 частин на мільйон. У визначених варіантах здійснення цитокінін складає від приблизно 400 частин на мільйон до приблизно 600 частин на мільйон. У визначених варіантах здійснення цитокінін складає від приблизно 600 частин на мільйон до приблизно 800 частин на мільйон. У визначених варіантах здійснення цитокінін складає від приблизно 800 частин на мільйон до приблизно 1000 частин на мільйон. У визначених варіантах здійснення ауксином є IBA. У визначених варіантах здійснення ауксином є IAA. У визначених варіантах здійснення ауксином є NAA. У визначених варіантах здійснення ауксином є суміш IAA і NAA. У визначених варіантах здійснення цитокініном є зеатин. У визначених варіантах здійснення цитокініном є BA. У визначених варіантах здійснення поліаспарагінова кислота складає від приблизно 500 частин на мільйон до приблизно 5000 частин на мільйон. У визначених варіантах здійснення поліаспарагінова кислота складає від приблизно 500 частин на мільйон до приблизно 1000 частин на мільйон. У визначених варіантах здійснення поліаспарагінова кислота складає від приблизно 1000 частин на мільйон до приблизно 2000 частин на мільйон. У визначених варіантах здійснення поліаспарагінова кислота складає від приблизно 2000 частин на мільйон 3 UA 112838 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 до приблизно 3000 частин на мільйон. У визначених варіантах здійснення поліаспарагінова кислота складає від приблизно 3000 частин на мільйон до приблизно 4000 частин на мільйон. У визначених варіантах здійснення поліаспарагінова кислота складає від приблизно 4000 частин на мільйон до приблизно 5000 частин на мільйон. Також включені способи одержання насіннєвих стеблин, які включають: (a) обробку незрілої стеблини злакової рослини або її сегмента наведеною в даному документі композицією; (b) збирання частини стеблини, обробленої на етапі (a), з одержанням насіннєвої стеблини; (c) вирощування частини стеблини, що залишилася, етапу (b) у незрілу стеблину; і (d) повторення етапів (a) і (b) щонайменше один раз з одержанням таким чином насіннєвих стеблин. У визначених варіантах здійснення етап (a) проводять in situ. У визначених варіантах здійснення незріла стеблина складає у висоту приблизно 10-25 дюймів і має приблизно 4-10 вузлів. У визначених варіантах здійснення незрілій стеблині – від приблизно 3 до приблизно 6 тижнів. У визначених варіантах здійснення етап (b) проводять через 3-20 днів після проведення етапу (a). У визначених варіантах здійснення етап (b) проводять через приблизно 14 днів після проведення етапу (a). У визначених варіантах здійснення етап (b) проводять до утворення несправжнього кореневища. У визначених варіантах здійснення етап (d) починають через приблизно 1-8 тижнів після проведення етапу (c). У визначених варіантах здійснення етап (d) починають через приблизно 3-6 тижнів після проведення етапу (c). У визначених варіантах здійснення рослиною є безплідна злакова рослина. У конкретних варіантах здійснення безплідною злаковою рослиною є рослина Arundo donax. У визначених варіантах здійснення злакова рослина належить до сімейства Poaceae. У визначених варіантах здійснення злаковою рослиною є рослина Arundo gigantium, Geranium sagitatum, Miscanthus x giganteus, Saccharum officianarum або інший Saccharum spp., Pennisetum purpereum або її культивар. Також включені стеблини або їх сегменти злакової рослини, обробленої in situ наведеною у даному документі композицією. Також включені незрілі стеблини або їх сегменти злакової рослини, які включають щонайменше один вузол, що має щонайменше один корінь і щонайменше один пагін, при цьому стеблина становить в діаметрі від приблизно 1/8 дюйма до приблизно 1/4 дюйма, і при цьому співвідношення мас кореня і пагона для щонайменше одного вузла складає від приблизно 1/1,5 до приблизно 1,5/1. У визначених варіантах здійснення співвідношення мас кореня і пагона для щонайменше одного вузла складає приблизно 1/1. У конкретних варіантах здійснення стеблина або сегмент являє собою такий від безплідної злакової рослини. Короткий опис декількох зображень графічних матеріалів На Фігурі 1 показаний фотознімок зрілої соломини (рамети) безплідної злакової рослини. На Фігурі 2 показаний фотознімок незрілої стеблини (рамети) безплідної злакової рослини. На Фігурі 3 показане скупчення незрілих стеблин, які були одержані зі зрілої стеблини. На Фігурі 4 показана оброблена незріла стеблина, у якої є як корені, так і пагони, що ростуть із щонайменше одного з її вузлів, і яка є готовою для збору. На Фігурі 5 показана зріла стеблина, яка була оброблена для одержання скупчення незрілих стеблин. Можна бачити корені і пагони, що ростуть з вузла обробленої зрілої стеблини. На Фігурі 6 показані зрілі стеблини, що були розрізані на окремі ділянки з вузлами або сегменти. На Фігурі 7 показані оброблені зрілі ділянки з вузлами, які вручну саджають у ґрунт. На Фігурі 8 показані розділені у вигляді ділянок незрілі рамети або мікровузли. На Фігурі 9 показані незрілі стеблини (або рамети) до розділу на ділянки. На Фігурі 10 показаний фотознімок несправжнього кореневища. На Фігурі 11 показане розростання коренів і пагонів з утворенням скупчення незрілих стеблин, які утворені зі зрілої стеблини (у лотку, що плаває). На Фігурі 12 показаний поперечний переріз системи з лотком, що плаває, для ілюстрації розвитку коренів у скупченнях незрілих стеблин. На Фігурі 13 показаний розвиток пагона з мікровузла в ємності для розмноження – мінімальні корені. На Фігурі 14 показане порівняння неопрацьованих мікровузлів з розвитком пагона, але без коренів (ліворуч від жовтого); і оброблених мікровузлів як із пагонами, так і з коренями (праворуч від жовтого). На Фігурі 15 показані незрілі стеблини (або рамети), які були оброблені сумішшю ауксин/цитокінін і які демонструють розвиток як пагонів, так і коренів. 4 UA 112838 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 На Фігурі 16 показані скупчення незрілих стеблин (чирамет) у лотках, що плавають, перед збиранням. У цих скупчень було приблизно 6-10 окремих стеблин із приблизно 5-8 вузлами у кожної стеблини. На Фігурі 17 показаний оброблений мікровузол (із незрілих стеблин), що демонструє розвиток мичкуватих коренів. На Фігурі 18 показані вузли, що були відділені з ділянками з оброблених незрілих стеблин (або рамет), і в який є як пагони, так і корені. На Фігурі 19 показані вузли рослин із заплави ріки Макиас, що обробляють ауксином/цитокініном/концентратом морської водорості/PEG перед висаджуванням. На Фігурі 20 показаний процес введення мікровузлів з обробкою в ґрунт за допомогою пристрою для підґрунтового висаджування. На Фігурі 21 показані деталі мікровузлів, що були висаджені в ґрунт із застосуванням пристрою для ґрунтопоглиблення. На Фігурі 22 показані рослини з заплави ріки Макиас через приблизно 5 місяців. На Фігурі 23 показані рослини з заплави ріки Макиас через приблизно 7 місяців. На Фігурі 24 показані вилучені із середовища стеблини (або рамети), що демонструють розвиток коренів і стеблин. На Фігурі 25 показаний приріст незрілих стеблин (рамет) через 16 днів після інтактних рамет. Докладний опис Варіанти здійснення даного винаходу в цілому відносяться до поліпшених композицій, які підсилюють ріст, і способів їх застосування для розмноження злакових рослин класу Monocotyledonae, включаючи рослини сімейства Poaceae. Конкретні варіанти здійснення відносяться до композицій і способів розмноження безплідних злакових рослин, таких як Arundo donax або її культивари. Як докладно описано у даному документі, дані варіанти здійснення засновані почасти на відкритті, що своєчасне нанесення in situ композицій, які підсилюють ріст, на меристематичні тканини злакових рослин значно прискорює цикл розмноження цих рослин. В основному, наведені в даному документі поліпшені способи розмноження включають обробку in situ незрілих стебел злакових рослин композиціями, які підсилюють ріст, що містять суміш щонайменше одного ауксину, щонайменше одного цитокініну і щонайменше однієї поліаспарагінової кислоти. У визначених варіантах здійснення ці композиції можуть додатково включати щонайменше один екстракт морської водорості, щонайменше одну поверхневоактивну речовину або і те, і інше. Не бажаючи прив'язуватися до будь-якої теорії, вважають, що композиції, які підсилюють ріст, даного винаходу порушують спокій меристематических тканин у вузлах стеблин злакової рослини, особливо у вузлах незрілих стеблин, і, таким чином, викликають утворення пагонів і коренів по краях вузла. Ці стеблини, що містять пагони і корені, утворені зі сплячих в іншому випадку вузлів по стеблині, можна потім висадити безпосередньо в поле з одержанням зрілих злакових рослин, використовувати у якості насіннєвих стеблин в розсадниках для збільшення фонду рослин, або і те, і інше, крім інших застосувань, описаних у даному документі й очевидних для фахівців у даній області. У випадку висаджування оброблені незрілі стеблини, у кінцевому підсумку, виростають у зрілі злакові рослини за менший час, ніж можна було б досягти за допомогою інших способів. Після збору зрілі злакові рослини потім можуть виявляти корисність у ряді застосувань. Наприклад, зрілі злакові рослини придатні в якості джерела або сировини при виробництві біоенергії. Композиції, які підсилюють ріст, і способи даного винаходу, що відносяться до них, забезпечують численні переваги над методиками розмноження злакових рослин рівня техніки. Наприклад, дані способи легкі для впровадження в існуючі практики переважно через те, що вони ґрунтуються на високоефективних, технічно нескладних, нестерильних способах, які можна відтворювати в нормальних польових умовах. Також, дані способи зменшують або усувають сомаклональну мінливість, що робить їх придатними при операціях, у яких необхідна клональна однорідність. Крім того, приведені в даному документі композиції і способи роблять можливим створення надзвичайно великого числа нащадків і зрілих рослин у відносно малому просторі і за відносно короткий час. Наприклад, застосування молодих або незрілих стебел в якості основних засобів збільшення фонду рослин вимагає мало простору для розмноження й обробки. Також, вважаючи, що частини оброблених незрілих стеблин можна не тільки висадити з одержанням зрілих стеблин, але можна також застосовувати у якості насіннєвого фонда для одержання нового покоління незрілих стебел для обробки, наведені в даному документі способи можна застосовувати для швидкого й експоненційного збільшення фонду рослин. На додаток, шляхом 5 UA 112838 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 скорочення загального циклу розмноження злакових рослин на приблизно 12 тижнів згодом можна одержати більшу кількість зрілого продукту. Дані способи також є рентабельними. За одною оцінкою, згідно дійсних витрат, витрати на створення зрілих злакових рослин можна скоротити з приблизно 1,38$/одиницю до приблизно $0,03/одиницю. За іншою оцінкою, витрати на розмноження злакових рослин можна скоротити з приблизно 5-6000$ на акр до приблизно $300 на акр, почасти в зв'язку з більш низькими витратами на одиницю в розмірі приблизно $0,001 на одиницю (або вузол). У цілому, шляхом застосування існуючих сільськогосподарських технологій для забезпечення засадження великих площ землі в акрах даний винахід можна застосовувати для легкої раціоналізації великомасштабної посадки злакових рослин, таких як безплідна злакова рослина Arundo donax, і, таким чином, створення рентабельної виробничої системи для цих економічно цінних і корисних рослин. Усі публікації, патенти і патентні заявки, процитовані в даному документі, включені в ций документ за допомогою посилання в їх повному обсязі. Якщо не визначено інакше, то усі технічні і наукові терміни, що використані в даному документі, мають такі самі значення, які звичайно розуміються рядовими фахівцями в даній області, до якої належить даний винахід. Незважаючи на те, що при практичному здійсненні або випробуванні даного винаходу можна використовувати будь-які способи і матеріали, які подібні або еквівалентні способам і матеріалам описаним у даному документі, описані вереважні способи і матеріали. Для цілей даного винаходу нижче наведені визначення наступним термінам. Визначення Використана в даному документі форма однини відноситься до одного або до більш ніж одного (тобто до щонайменше одного) граматичного об'єкту в даному числі. Наприклад, "елемент" означає один елемент або більше одного елемента. Під "приблизно" мають на увазі кількість, рівень, величину, число, частоту, відсоткову частку, лінійний розмір, розмір, суму, вагу або довжину, що змінюється на до 30, 25, 20, 25, 10, 9, 8, 7, 6, 5, 4, 3, 2 або 1 % від початкового рівня, величини, числа, частоти, відсоткової частки, лінійного розміру, розміру, суми, ваги або довжини. По всьому даному опису, якщо тільки контекст не вимагає зворотнього, слова "включають", "включає" і "включаючий" будуть розумітися як такі, що припускають включення заданого етапу, або елемента, або групи етапів або елементів, але не виключення будь-якого іншого етапу, або елемента, або групи етапів або елементів. Під "складається з" розуміють включаючий й обмежений будь чим з того, що йде після фрази "складається з". Таким чином, фраза "складається з" вказує на те, що перераховані елементи необхідні або обов'язкові, і що ніякі інші елементи не можуть бути присутніми. Під "складається, головним чином, з" розуміють включаючий будь-які елементи, перераховані після фрази, і обмежений до інших елементів, що не вступають у конфлікт із або вносять вклад у активність або дію, встановлені в розкритті для перерахованих елементів. Таким чином, фраза "складається, головним чином, з" вказує на те, що перераховані елементи є необхідними або обов'язковими, а інші елементи є факультативними і можуть бути присутніми або можуть не бути присутнім у залежності від того, чи впливають вони на активність або дію перерахованих елементів. "Ауксини" у цілому відносяться до класу рослинних ростових речовин, які також називаються фітогормонами або рослинними гормонами, що відіграють центральну роль у координуванні росту рослин, і в більш загальному сенсі характеризуються їх здатністю індукувати подовження клітин в стеблинах. Однак ауксини також впливають на інші процеси, пов'язані з ростом і розвитком рослин, такі як стимуляція клітинного розподілу у камбії, диференціювання флоеми і ксилеми, закладка коренів на стеблиневих черешках і розвиток бокових коренів у тканинній культурі (тобто in vitro). Ауксини можуть також регулювати біосинтез цитокінінів. На молекулярному рівні ауксини, як правило, характеризуються ароматичним кільцем і групою карбонової кислоти. Приклади ауксинів включають, але без обмежень, індол-3-оцтову кислоту (IAA), індол-3-масляну кислоту (IBA), нафталіноцтову кислоту (NAA), 4-хлоріндол-3оцтову кислоту (4-CI-IAA), 2-фенілоцтову кислоту (PAA), 2,4-дихлорфеноксіоцтову кислоту, 2метоксі-3,6-дихлорбензойну кислоту і 4-аміно-3,5,6-трихлорпіколинову кислоту. "Цитокініни" в цілому відносяться до класу рослинних ростових речовин (тобто рослинних гормонів), що стимулюють клітинне ділення. Додатково, окрім інших клітинних процесів ці ростові речовини стимулюють морфогенез (закладка пагона/утворення бруньки) у культурі тканин, стимулюють ріст пазушних бруньок-відключення апікального домінування, стимулюють 6 UA 112838 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 розгортання листя, що відбувається в результаті росту клітин, і сприяють перетворенню етіопластів у хлоропласти за допомогою стимуляції синтезу хлорофілу. Цитокініни були виявлені майже у всіх вищих рослин, а також мохів, грибів і бактерій. Концентрації цитокінінів найбільш високі в меристематичних областях і зонах зі здатністю постійного росту, таких як корені, молоде листя, плоди і насіння, що розвиваються. Ці ростові речовини, як у цілому вважають, синтезуються в коренях і переміщюються по ксилемі в пагони. Природний біосинтез цитокінінів відбувається в основному за допомогою біохімічної модифікації аденіну; отже, більшість цитокінінів мають структуру, що подібна до аденіну. Приклади таких цитокінінів включають, але без обмеження, кінетин, зеатин (Z), дигідрозеатин (DHZ) і ізопентеніладенозин (IPA), бензиламінопурин (BA), ортотополін (o), метатополін (m), ортометокситополін (Meo), метаметокситополін (Mem) і бензиладенін (BA). Також включені цитокініни типу фенілсечовини, такі як дифенілсечовина і тідіазурон (TDZ). "Поліаспарагінові кислоти (PASP)» у цілому відносяться до класу синтетичних поліамідів, що є структурними і функціональними аналогами субдоменів визначених білків, що контролюють біомінерализацію. Різні PASP можна охарактеризувати і синтезувати відповідно до відомих методик з рівня техніки (дивися, наприклад, патенти США №№ 6380350; 5688902, 5457176; 5830985; 5391764; 5319145; 5380817; 5484945; 5756595, кожний з який включений посиланням). PASP також є комерційно доступними. У визначених варіантах здійснення поліаспарагіновою кислотою є Amisorb™ (Amilar Corp., Чикаго, Іллінойс), який також зветься "карпрамід" або сополімер [(3-карбоксиіпропіонамід)(2-(карбоксиметил)ацетамід)] (дивися, наприклад, Bernardz et al., Journal of Plant Nutrition. 21:2417-2427', 1998, включений у даний документ посиланням). Не бажаючи прив'язуватися до будь-якої теорії, вважають, що Amisorb™ збільшує поглинання поживних речовин в основному за допомогою переміщення інших хімічних речовин або засобів (наприклад, цитокінінів, ауксинів) до місця активації, такого як меристематичні тканини. Використана в даному документі "поверхнево-активна речовина" у цілому відноситься до змочувального засобу, що знижує поверхневий натяг рідини і, таким чином, уможливлює більш легке розтікання такої рідини. Поверхнево-активні речовини, як правило, являють собою амфіфільні органічні сполуки, що містять як щонайменше одну гідрофобну групу, так і щонайменше одну гідрофільну групу. З цими характеристиками поверхнево-активні речовини часто є розчинними як в органічних розчинниках, так і у воді. Включено іонні та неіонні поверхнево-активні речовини. Приклади іонних поверхневоактивних речовин включають, але без обмежень, аніонні поверхнево-активні речовини (наприклад, на основі сульфатних, сульфонатних або карбоксилатних аніонів), такі як перфтороктаноат (PFOA або PFO), перфтороктансульфонат (PFOS), натрію додецилсульфат (SDS), амонію лаурилсульфат і інші алкілсульфатні солі, лауретсульфат натрію (тобто лауриловий ефір сульфату натрію (SLES)) і алкілбензолсульфонат; катіонні поверхнево-активні речовини (наприклад, на основі катіонів четвертинного амонію), такі як цетилтриметиламонію бромід (CTAB), цетилпіридинію хлорид (CPC), поліетоксильований таловий амін (POEA), бензалконію хлорид (BAC) і бензетонію хлорид (BZT); і цвітеріонні або амфотерні поверхневоактивні речовини, такі як додецилбетаїн, кокамідопропілбетаїн і кокоамфогліцинат. Приклади неіонних поверхнево-активних речовин включають, але без обмежень, алкіл-полі(етиленоксид), алкілфенол-полі(етиленоксид), сополімери полі(етиленоксид)у і поли(пропиленоксид)у (тобто полоксамери або полоксаміни), алкилполіглюкозиди, такі як октилглюкозид і децилмальтозид, жирні спирти, такі як цетиловий спирт і олеїловий спирт, кокамід MEA, кокамід DEA і полісорбати, такі як Tween 20, Tween 80 і додецилдиметиламіну оксид. "Концентрат морської водорості" у цілому відноситься до добрива, що екстрагували з однієї або декількох морських водоростей, включаючи макроскопічну, багатоклітинну і бентосну морську водорість, а також члени червоних, бурих і зелених водоростей, крім інших відомих з рівня техніки. Визначені ціанобактерії також розглядають у якості морських водоростей. Як правило, екстрагують тільки цілком розчинну частину рослини морської водорості, тому що дана частина містить необхідні мінерали й активні інгредієнти. Продукти з висушеної морської водорості включають борошно грубого помелу з морських водоростей (наприклад, розмелена і висушена свіжа морська водорість), здрібнений у порошок екстракт морської водорості, що найчастіше одержують шляхом кип'ятіння морської водорості і випарювання її рідкого вмісту, залишаючи концентрований твердий екстракт, який подрібнюють у порошок. Також включені рідкі екстракти морських водоростей, які найчастіше одержують зі свіжої морської водорості шляхом водяної екстракції. Багато концентратів морської водорості комерційно доступні в рідких або порошкоподібних формах. Приклади комерційно доступних концентратів морських водоростей включають, але без обмежень, Kelpak™, Sea Magic™, Natrakelp™, Alg-A-Mic™, Neptune's Harvest™ і DynaKelp™, крім інших відомих в області техніки. У визначених варіантах 7 UA 112838 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 здійснення концентрат морської водорості являє собою такий з Ascophyllum nodosum, такий як Maxicrop™ (Maxicrop USA, Inc., Елк Гров Віллідж, Іллінойс). "Збільшують" або "збільшення", або "підвищують" або "підвищення", або "стимулюють" або "стимуляція" у цілому відноситься до здатності однієї або декількох композицій даного винаходу або викликати більшу фізіологічну відповідь у рослини, незрілої стеблини, зрілої стеблини або їх сегмента в порівнянні з відповіддю, викликаною або без композиції, або контрольною композицією. Вимірна фізіологічна відповідь може включати, наприклад, підвищений гістогенез (наприклад, підвищений ріст коренів, або пагонів, або і того, й іншого) з країв вузла найчастіше за більш короткий період, ніж в іншому випадку, крім інших очевидних з рівня техніки й опису в даному документі. "Підвищена" або "збільшена" величина є, як правило, "статистично значимою" величиною і може включати підвищення, що у 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 15, 20, 30 більше разів кратне (наприклад, 500-, 1000-кратне) (включаючи всі цілі числа і коми в десяткових дробах між ними і більше 1, наприклад, 1,5, 1,6, 1,7, 1,8 тощо) щодо величини, отриманої без композиції або із контрольною композицією. Обробка злакової рослини "in situ" відноситься до приведення в контакт інтактної стеблини (тобто стеблини, що прикріплена до інших частин рослини) або її сегмента (тобто ділянки стеблини, що була відщеплена від інших частин рослини) композицією даного винаходу, наприклад, у камері штучного клімату, теплиці, лотку, що плаває, розсаднику, ґрунті (всередини або зовні) тощо. Обробка in situ повинна відрізнятися від обробки рослинних клітин у культурі тканин. Використовувана в даному документі "злакова рослина" відноситься до квіткових рослин або покритонасінних класу Monocotyledonae, включаючи "справжні трави" сімейства Poaceae, осоки сімейства Cyperaceae і сітники сімейства Juncaceae. Злакові рослини сімейства Poaceae включають продовольчі зернові і злаки, бамбукові і трави газонів і лугу. Також у сімейство Poaceae включені підсімейства, такі як Anomochlooideae, систематична гілка широколистяних трав, що включає два роди (Anomochloa, Streptochaeta); Pharoideae, систематична гілка, що включає три роди, включаючи Pharus і Leptaspis; Puelioideae, систематична гілка, що включає африканський рід Puelia; Pooideae, включаючи пшеницю, ячмінь, овес, стоколос (Bromus) івейники (Calamagrostis); Bambusoideae, включаючи бамбук; Ehrhartoideae, включаючи рис та дикий рис; Arundinoideae, включаючи арундо очеретяний і очерет звичайний; Centothecoideae, підсімейство із приблизно дюжини родів, що іноді включають у Panicoideae; Chloridoideae, включаючи полевички (наприклад, Eragrostis, teff), спороболуси (Sporobolus), просо пальчасте (Eleusine coracana) і мюленбергії (Muhlenbergia); Panicoideae, включаючи куряче просо, маїс, сорго, цукровий очерет, більшість видів проса, фоніо і бородаті трави; Micrairoideae; Danthonioideae, включаючи пампасну траву; і Poa, рід із приблизно 500 видів трав, природних для регіонів помірного клімату обох півкуль. Використовувана у даному документі "безплідна злакова рослина" відноситься до злакової рослини, що розмножується клонуванням або розподілом ділянок кореневища, і яка не дає життєздатну зав'язь насіння. Ілюстративні приклади безплідних злакових рослин включають, але без обмежень, рослину Arundo donax, Arundo gigantium, Geranium sagitatum, Miscanthus x giganteus, Saccharum officianarum і інші Saccharum spp., Pennisetum purpereum, Juncus spp., Scirpus spp., Cyperus spp., Carex spp., Erianthus spp., Typha spp. і її культивари. "Культивар" відноситься до культивованої рослини, яка була піддана селекції і якій дали унікальну назву за її конкретний фенотип або характеристики, і вона звичайно відрізняється деяким чином від спорідненних рослин або рослини, від якої вона була отримана. Культивар, як правило, при розмноженні зберігає ці характеристики, що відрізняються. Присвоєння назв культивару варто узгоджувати з Міжнародним кодексом номенклатури культурних рослин (ICNCP, звичайно відомим як Кодекс культурних рослин). Для узгодження з цим кодексом культивар повинен не тільки відрізнятися від інших культиварів, але бути надійним для розмноження способом, передбаченим для цього конкретного культивару, або статевим, або безстатевим способом. Включені культивари злакових рослин із Середнього Сходу, Гаваїв, з Каліфорнії і з Далекого Сходу, крім інших відомих в області техніки. Приклади культиварів Arundo donax включають, без обмеження, арундо очеретяний смугастий (A. donax var. versicolor), також відомий як культивар "Variegata", що має листя з виразними білими смугами і який виростає до висоти приблизно 8 футів (2,4 м)), і культивар "Macrophylla", у якого листя ще більше, шириною приблизно 3 дюйми (7,6 см), сіруватого або блакитнувато-зеленого кольору. "Стеблина" відноситься до однієї з двох основних структурних осей судинної рослини, що у нормі поділяється на "вузли" і "міжвузловини". Вираз "вузол" відноситься до зчленування або борозні на стеблині або соломині, у точці якої може прикріплюватися або вище якої може бути 8 UA 112838 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 присутня одна вузлова брунька. Вузли, як правило, містять бруньки, які виростають в один або кілька листків або квіток інших стеблин. "Меристематична тканина" відноситься до групи тканиноутворюючих клітин, що здатні до подальшого розвитку в органи рослини. "Зріла" стеблина (або соломина) злакової рослини, як правило, характеризується тим, що має діаметр від приблизно ½ до приблизно 1½ до приблизно 3 дюймів або більш (дивися, наприклад, Фігуру 1), хоча передбачаються і менші варіанти. Використаний у даному документі "сегмент" зрілої стеблини може складати приблизно ½, 1, 1½, 2, 2½, 3, 3½, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15 або більше дюймів у довжину і може включати щонайменше 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 або більше вузлів або зчленувань. У визначених варіантах здійснення сегмент зрілої стеблини складає приблизно 1½ дюйма в довжину і включає один вузол. У визначених варіантах здійснення сегмент зрілого стебла складає в діаметрі від приблизно ½ дюйма до приблизно ¾ дюйма. "Незріла" стеблина (або рамета) злакової рослини, як правило, характеризується тим, що 3 1 8 8 має діаметр від приблизно до приблизно ¼ до приблизно дюйма, можливий до приблизно ½ дюйма (дивися, наприклад, Фігуру 2), хоча передбачаються і менші варіанти. Незріла стеблина або її сегмент, наприклад, незріла стеблина, яка готова до обробки композицією даного винаходу, як правило, складає у висоту (або довжину) приблизно 6-25, 10-25, 12-16 або 15-25 дюймів, включаючи всі цілі числа між ними (наприклад, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25 дюймів у висоту). Незріла стеблина, як правило, містить від приблизно 4 до приблизно 10 або 12 меристематичних вузлових ділянок (тобто вузлів), що включають приблизно 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 або 12 вузлів. У визначених варіантах здійснення, як правило, у залежності від необхідного циклу збору, місця розташування або пори року незріла стеблина може бути довше 25 дюймів, включаючи до приблизно 6-10 футів у довжину (наприклад, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12 або більше футів у довжину) і все ж таки зберігати діаметр незрілої стеблини. "Сегмент" незрілої стеблини може також включати мікросегмент або мікровузол, який може бути приблизно ½, 1, 1½, 2, 2½, 3 або 3½ дюймів довжиною і який, як правило, містить один меристематичний вузол. Як використовується в даному документі, "материнська" стеблина або "материнська" рослина відноситься до цілих стеблин або соломин або їх сегментів, які можна використовувати, часто неодноразово, у якості посадкових матеріалів для створення насіннєвих стеблин або насіннєвих рослин. Материнська рослина може включати, наприклад, скупчення незрілих стеблин. "Насіннєва" стеблина або "насіннєва" рослина відноситься до незрілої стеблини або її частини, яка, як правило, містить щонайменше один вузол, що часто відщеплений від верхньої частини материнської рослини і яку потім можна посадити в ґрунт. "Кореневище" або "кореневий пагін" звичайно являє собою горизонтальну стеблину рослини, що звичайно виявляють під землею, яка часто випускає корені і пагони зі своїх вузлів. У судинних рослин "корінь" являє собою орган рослини, який, як правило, залягає нижче поверхні ґрунту, хоча корені також можуть бути повітряними (які ростуть над землею) або дихальними (які ростуть вгору над землею особливо над водою). Як правило, корінь можна визначити як частину рослинного організму, що не несе листя, а також позбавлена вузлів. Пагони є новою, незрілою порослю на рослині, яка виростає в стеблини, гілки або листя. Композиції Як відзначено вище, варіанти здійснення даного винаходу відносяться до композицій, що підсилюють ріст, для розмноження злакових рослин, таких як безплідні злакові рослини, способів їх застосування. У визначених варіантах здійснення ці композиції включають щонайменше один ауксин, щонайменше один цитокінін і щонайменше одну поліаспарагінову кислоту. Факультативно, композиції можуть додатково включати щонайменше один концентрат морської водорості, щонайменше одну поверхнево-активну речовину або і те, і інше. Приклади ауксинів включають, без обмеження, індол-3-оцтову кислоту (IAA), індол-3масляну кислоту (IBA), нафталіноцтову кислоту (NAA), 4-хлоріндол-3-оцтову кислоту (4-CI-IAA), 2-фенілоцтову кислоту (PAA), 2,4-дихлорфеноксіоцтову кислоту, піклорам, 2-метоксі-3,6дихлорбензойну кислоту і 4-аміно-3,5,6-трихлорпіколинову кислоту окремо, або в комбінаціях, або їх суміші. У визначених варіантах здійснення ауксини можуть бути присутніми у діапазонах від приблизно 1 частини на мільйон до приблизно 10000 частин на мільйон, включаючи приблизно 20-8000 частин на мільйон, приблизно 30-7000 частин на мільйон, приблизно 406000 частин на мільйон, приблизно 50-5000 частин на мільйон, приблизно 60-4000 частин на мільйон, приблизно 70-3000 частин на мільйон, приблизно 80-2000 частин на мільйон, приблизно 100-1000 частин на мільйон, 100-2000 частин на мільйон, 100-3000 частин на 9 UA 112838 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 мільйон, 100-4000 частин на мільйон, 100-5000 частин на мільйон, 100-6000, 100-8000 частин на мільйон, 1000-8000 частин на мільйон, 1000-7000 частин на мільйон, 1000-6000 частин на мільйон, 1000-5000 частин на мільйон, 1000-4000 частин на мільйон, 1000-3000 частин на мільйон, 1000-2000 частин на мільйон, 100-300 частин на мільйон, 300-700 частин на мільйон, 700-1000 частин на мільйон, 200-400 частин на мільйон, 400-600 частин на мільйон, 600-800 частин на мільйон, 800-1000 частин на мільйон, 1000-1200 частин на мільйон, 1200-1400 частин на мільйон, 1400-1800 частин на мільйон, 1800-2200 частин на мільйон, 2000-2200 частин на мільйон, 2200-2400 частин на мільйон, 2400-2600 частин на мільйон, 2600-2800 частин на мільйон, 2800-3000 частин на мільйон, 3000-3200 частин на мільйон, 3200-3400 частин на мільйон, 3400-3600 частин на мільйон, 3600-3800 частин на мільйон, 3800-4000 частин на мільйон, 4000-4200 частин на мільйон, 4200-4400 частин на мільйон, 4400-4600 частин на мільйон, 4600-4800 частин на мільйон, 4800-5000 частин на мільйон, 1-100 частин на мільйон, 100-400 частин на мільйон, 200-800 частин на мільйон, 300-1000 частин на мільйон, 1-500 частин на мільйон, 500-1000 частин на мільйон, 750-1700 частин на мільйон, 1000-1500 частин на мільйон, 1500-2000 частин на мільйон, 2000-2500 частин на мільйон, 2500-3000 частин на мільйон, 3000-3500 частин на мільйон, 3500-4000 частин на мільйон, 4000-4500 частин на мільйон, 4500-5000 частин на мільйон і іншіх діапазонах, очевидних фахівцям у даній області. У визначених варіантах здійснення, ауксини можуть бути присутніми у кількості приблизно 1, 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 110, 120, 130, 140, 150, 160, 170, 180, 190, 200, 215, 235, 250, 275, 295, 300, 315, 335, 350, 375, 395, 400, 450, 500, 600, 700, 800, 900, 1000, 1200, 1400, 1500, 1600, 1800, 2000, 2200, 2400, 2500, 2600, 2800, 3000, 3200, 3400, 3500, 3600, 3800, 4000, 4300, 4400, 4500, 4600, 4800, 5000, 5500, 6000, 7500, 8000, 9500 або 10000 частин на мільйон, включаючи всі цілі числа між ними. Деякі конкретні композиції можуть включати суміш IAA (наприклад, у кількості приблизно 450-800 частин на мільйон, включаючи всі цілі числа між ними) і NAA (наприклад, у кількості приблизно 300-900 частин на мільйон, включаючи всі цілі числа між ними) для загальної концентрації ауксину від приблизно 750 частин на мільйон до приблизно 1700 частин на мільйон. Деякі конкретні композиції можуть включати IBA (наприклад, у кількості приблизно 200-1000 частин на мільйон, 200-400 частин на мільйон, 400-600 частин на мільйон, 600-800 частин на мільйон, 800-1000 частин на мільйон, 1000-1200 частин на мільйон, 1200-1400 частин на мільйон, 1400-1600 частин на мільйон, 1600-1800 частин на мільйон, 1800-2000 частин на мільйон, включаючи всі цілі числа між ними) у якості єдиного ауксину. У визначених варіантах здійснення ауксином є IBA у кількості приблизно 1, 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 110, 120, 130, 140, 150, 160, 170, 180, 190, 200, 215, 235, 250, 275, 295, 300, 315, 335, 350, 375, 395, 400, 450, 500, 600, 700, 800, 900, 1000, 1200, 1400, 1500, 1600, 1800, 2000, 2200, 2400, 2500, 2600, 2800, 3000, 3200, 3400, 3500, 3600, 3800, 4000, 4300, 4400, 4500, 4600, 4800, 5000, 5500, 6000, 7500, 8000, 9500 або 10000 частин на мільйон, включаючи всі цілі числа між ними. У визначених варіантах здійснення ауксином є IAA у кількості приблизно 1, 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 110, 120, 130, 140, 150, 160, 170, 180, 190, 200, 215, 235, 250, 275, 295, 300, 315, 335, 350, 375, 395, 400, 450, 500, 600, 700, 800, 900, 1000, 1200, 1400, 1500, 1600, 1800, 2000, 2200, 2400, 2500, 2600, 2800, 3000, 3200, 3400, 3500, 3600, 3800, 4000, 4300, 4400, 4500, 4600, 4800, 5000, 5500, 6000, 7500, 8000, 9500 або 10000 частин на мільйон. У визначених варіантах здійснення ауксином є NAA у кількості приблизно 1, 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 110, 120, 130, 140, 150, 160, 170, 180, 190, 200, 215, 235, 250, 275, 295, 300, 315, 335, 350, 375, 395, 400, 450, 500, 600, 700, 800, 900, 1000, 1200, 1400, 1500, 1600, 1800, 2000, 2200, 2400, 2500, 2600, 2800, 3000, 3200, 3400, 3500, 3600, 3800, 4000, 4300, 4400, 4500, 4600, 4800, 5000, 5500, 6000, 7500, 8000, 9500 або 10000 частин на мільйон. Приклади цитокінінів включають, без обмеження, кінетин, зеатин (Z) (цис і транс), дигідрозеатин (DHZ) і ізопентеніладенозин (IPA), бензиламінопурин (BA), ортотополін (o), метатополін (m), ортометокситополін (Meo), метаметокситополін (Mem) і бензиладенін (BA). Також включені цитокініни типу фенілсечовини, такі як дифенілсечовина і тідіазурон (TDZ). У визначених варіантах здійснення цитокініни можуть бути присутні у діапазонах приблизно 1 частини на мільйон до приблизно 10000 частин на мільйон, включачи приблизно 20-8000 частин на мільйон, приблизно 30-7000 частин на мільйон, приблизно 40-6000 частин на мільйон, приблизно 50-5000 частин на мільйон, приблизно 60-4000 частин на мільйон, приблизно 703000 частин на мільйон, приблизно 80-2000 частин на мільйон, приблизно 100-1000 частин на мільйон, 100-2000 частин на мільйон, 100-3000 частин на мільйон, 100-4000 частин на мільйон, 100-5000 частин на мільйон, 100-6000, 100-8000 частин на мільйон, 1000-8000 частин на мільйон, 1000-7000 частин на мільйон, 1000-6000 частин на мільйон, 1000-5000 частин на 10 UA 112838 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 мільйон, 1000-4000 частин на мільйон, 1000-3000 частин на мільйон, 1000-2000 частин на мільйон, 100-300 частин на мільйон, 300-700 частин на мільйон, 700-1000 частин на мільйон, 200-400 частин на мільйон, 400-600 частин на мільйон, 600-800 частин на мільйон, 800-1000 частин на мільйон, 1000-1200 частин на мільйон, 1200-1400 частин на мільйон, 1400-1800 частин на мільйон, 1800-2200 частин на мільйон, 2000-2200 частин на мільйон, 2200-2400 частин на мільйон, 2400-2600 частин на мільйон, 2600-2800 частин на мільйон, 2800-3000 частин на мільйон, 3000-3200 частин на мільйон, 3200-3400 частин на мільйон, 3400-3600 частин на мільйон, 3600-3800 частин на мільйон, 3800-4000 частин на мільйон, 4000-4200 частин на мільйон, 4200-4400 частин на мільйон, 4400-4600 частин на мільйон, 4600-4800 частин на мільйон, 4800-5000 частин на мільйон, 1-100 частин на мільйон, 100-400 частин на мільйон, 200-800 частин на мільйон, 300-1000 частин на мільйон, 1-500 частин на мільйон, 5001000 частин на мільйон, 750-1700 частин на мільйон, 1000-1500 частин на мільйон, 1500-2000 частин на мільйон, 2000-2500 частин на мільйон, 2500-3000 частин на мільйон, 3000-3500 частин на мільйон, 3500-4000 частин на мільйон, 4000-4500 частин на мільйон, 4500-5000 частин на мільйон і інших діапазонах, очевидних фахівцям у даній області техніки. У визначених варіантах здійснення цитокініни можуть бути присутні у кількості приблизно 1, 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 110, 120, 130, 140, 150, 160, 170, 180, 190, 200, 215, 235, 250, 275, 295, 300, 315, 335, 350, 375, 395, 400, 450, 500, 600, 700, 800, 900, 1000, 1200, 1400, 1500, 1600, 1800, 2000, 2200, 2400, 2500, 2600, 2800, 3000, 3200, 3400, 3500, 3600, 3800, 4000, 4300, 4400, 4500, 4600, 4800, 5000, 5500, 6000, 7500, 8000, 9500 або 10000 частин на мільйон, включаючи всі цілі числа між ними. У визначених варіантах здійснення цитокініном є зеатин у кількості приблизно 1, 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 110, 120, 130, 140, 150, 160, 170, 180, 190, 200, 215, 235, 250, 275, 295, 300, 315, 335, 350, 375, 395, 400, 450, 500, 600, 700, 800, 900, 1000, 1200, 1400, 1500, 1600, 1800, 2000, 2200, 2400, 2500, 2600, 2800, 3000, 3200, 3400, 3500, 3600, 3800, 4000, 4300, 4400, 4500, 4600, 4800, 5000, 5500, 6000, 7500, 8000, 9500 або 10000 частин на мільйон, включаючи всі цілі числа між ними. У визначених варіантах здійснення цитокініном є BA у кількості приблизно 1, 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 110, 120, 130, 140, 150, 160, 170, 180, 190, 200, 215, 235, 250, 275, 295, 300, 315, 335, 350, 375, 395, 400, 450, 500, 600, 700, 800, 900, 1000, 1200, 1400, 1500, 1600, 1800, 2000, 2200, 2400, 2500, 2600, 2800, 3000, 3200, 3400, 3500, 3600, 3800, 4000, 4300, 4400, 4500, 4600, 4800, 5000, 5500, 6000, 7500, 8000, 9500 або 10000 частин на мільйон, включаючи всі цілі числа між ними. Приклади поліаспарагінових кислот (PASP) включають без обмеження Amisorb™ (Amilar Corp., Чикаго, Іллінойс), також називаний "карпрамід", або сополімер [(3карбоксипропіонамід)(2-(карбоксиметил)ацетамід)]. Одна або декілька PASP, наприклад Amisorb™, можуть бути присутні у діапазонах від приблизно 1 частини на мільйон до приблизно 250000 частин на мільйон, 10-225000 частин на мільйон, 20-200000 частин на мільйон, 30150000 частин на мільйон, 40-100000 частин на мільйон, 50-90000 частин на мільйон, 60-80000 частин на мільйон, 70-70000 частин на мільйон, 80-60000 частин на мільйон, 90-50000 частин на мільйон, 100-40000 частин на мільйон, 90-30000 частин на мільйон, 100-20000 частин на мільйон, 100-10000 частин на мільйон, 100-5000 частин на мільйон, 100-3000 частин на мільйон, 200-15000 частин на мільйон, 200-10000 частин на мільйон, 200-5000 частин на мільйон, 30010000 частин на мільйон, 400-5000 частин на мільйон, 500-5000 частин на мільйон, 500-2500 частин на мільйон, 500-1000 частин на мільйон, 5000-25000 частин на мільйон, 100000-200000 частин на мільйон, 220-1200 частин на мільйон, 1200-2200 частин на мільйон, 2200-3200 частин на мільйон, 3200-4200 частин на мільйон, 4200-5200 частин на мільйон, 1000-2000 частин на мільйон, 2000-3000 частин на мільйон, 3000-4000 частин на мільйон, 4000-5000 частин на мільйон, крім інших діапазонів, очевидних фахівцям у даній області техніки. У визначених варіантах здійснення одна або декілька PASP можуть бути присутні окремо або в загальній кількості приблизно 1, 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 120, 140, 150, 160, 180, 200, 250, 300, 350, 400, 450, 500, 600, 700, 800, 900, 1000, 1200, 1400, 1500, 1600, 1800, 2000, 2200, 2400, 2500, 2600, 2800, 3000, 3200, 3400, 3500, 3600, 3800, 4000, 4200, 4400, 4500, 4600, 4800, 5000, 5500, 6000, 7500, 8000, 9500 або 10000, 20000, 30000, 40000, 50000, 60000, 70000, 80000, 90000, 100000, 150000, 200000, 250000 частин на мільйон, включаючи усі цілі числа між ними. У визначених варіантах здійснення концентрати морських водоростей можуть включати комерційно доступні продукти, такі як Kelpak™, Sea Magic™, Natrakelp™, Alg-A-Mic™, Neptune's Harvest™ і DynaKelp™, окрім інших, відомих в області техніки. У визначених варіантах здійснення концентрат морської водорості є таким з Ascophyllum Nodosum, наприклад, Maxicrop™ (Maxicrop USA, Inc., Элк Гров Виллидж, Іллінойс). У визначених варіантах здійснення, при наявності, один або кілька концентратів морських водоростей можуть бути присутнім у діапазонах від приблизно 1 частини на мільйон до приблизно 500000 частин на 11 UA 112838 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 мільйон, 10-400000 частин на мільйон, 20-300000 частин на мільйон, 30-400000 частин на мільйон, 40-300000 частин на мільйон, 50-200000 частин на мільйон, 60-100000 частин на мільйон, 70-90000 частин на мільйон, 80-80000 частин на мільйон, 90-70000 частин на мільйон, 100-60000 частин на мільйон, 150-50000 частин на мільйон, 200-40000 частин на мільйон, 25030000 частин на мільйон, 300-20000 частин на мільйон, 350-15000, 400-10000 частин на мільйон, 450-5000, 500-2500 частин на мільйон, 500-1000 частин на мільйон, 50000-500000 частин на мільйон, 100000-400000 частин на мільйон, 200000-300000 частин на мільйон, 10003000 частин на мільйон, 1000-2000 частин на мільйон, 100-300 частин на мільйон, 300-700 частин на мільйон, 700-1000 частин на мільйон, 200-400 частин на мільйон, 400-600 частин на мільйон, 600-800 частин на мільйон, 800-1000 частин на мільйон, 1000-1200 частин на мільйон, 1200-1400 частин на мільйон, 1400-1800 частин на мільйон, 1800-2200 частин на мільйон, 20002200 частин на мільйон, 2200-2400 частин на мільйон, 2400-2600 частин на мільйон, 2600-2800 частин на мільйон, 2800-3000 частин на мільйон, 3000-3200 частин на мільйон, 3200-3400 частин на мільйон, 3400-3600 частин на мільйон, 3600-3800 частин на мільйон, 3800-4000 частин на мільйон, 4000-4200 частин на мільйон, 4200-4400 частин на мільйон, 4400-4600 частин на мільйон, 4600-4800 частин на мільйон, 4800-5000 частин на мільйон, 1-100 частин на мільйон, 100-400 частин на мільйон, 200-800 частин на мільйон, 300-1000 частин на мільйон, 1500 частин на мільйон, 500-1000 частин на мільйон, 750-1700 частин на мільйон, 1000-1500 частин на мільйон, 1500-2000 частин на мільйон, 2000-2500 частин на мільйон, 2500-3000 частин на мільйон, 3000-3500 частин на мільйон, 3500-4000 частин на мільйон, 4000-4500 частин на мільйон, 4500-5000 частин на мільйон, включаючи інші діапазони, очевидні для фахівців у даній області. У визначених варіантах здійснення один або декілька концентратів морських водоростей, наприклад Maxicrop™, можуть бути присутні у сумі в кількості приблизно 1, 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 120, 140, 150, 160, 180, 200, 250, 300, 350, 400, 450, 500, 600, 700, 800, 900, 1000, 1200, 1400, 1500, 1600, 1800, 2000, 2200, 2400, 2500, 2600, 2800, 3000, 3200, 3400, 3500, 3600, 3800, 4000, 4200, 4400, 4500, 4600, 4800, 5000, 5500, 6000, 7500, 8000, 9500 або 10000, 20000, 30000, 40000, 50000, 60000, 70000, 80000, 90000, 100000, 150000, 200000, 250000, 300000, 350000, 400000, 450000 або 500000 частин на мільйон, включаючи всі цілі числа між ними. Приклади поверхнево-активних речовин включають без обмеження перфтороктаноат (PFOA або PFO), перфтороктансульфонат (PFOS), натрію додецилсульфат (SDS), амонію лаурилсульфат і інші алкілсульфатні солі, лауретсульфат натрію (тобто лауриловий ефір сульфату натрію (SLES)), алкілбензолсульфонат, цетилтриметиламонію бромід (CTAB), цетилпіридинію хлорид (CPC), поліетоксильований таловий амін (POEA), бензалконію хлорид (BAC) і бензетонію хлорид (BZT), додецилбетаїн, кокамідопропілбетаїн, кокоамфогліцинат, алкіл-полі(етиленоксид), алкілфенол-полі(етиленоксид), сополімери полі(етиленоксид)у і полі(пропиленоксид)у (тобто полоксамери або полоксаміни), алкілполіглюкозиди, такі як октилглюкозид і децилмальтозид, жирні спирти, такі як цетиловий спирт і олеїловий спирт, кокамід MEA, кокамід DEA і полісорбати, такі як Tween 20, Tween 80 і додецилдиметиламіну оксид. Поверхнево-активні речовини можуть бути присутні у кількості від приблизно 1 частини на мільйон до приблизно 250 частин на мільйон, 5-225, 10-200, 15-175, 20-150, 25-100, 30-175, 40-150, 50-125, 60-100 частин на мільйон, включаючи інші діапазони, очевидні для фахівців у даній області. У визначених варіантах здійснення поверхнево-активна речовина, при наявності, складає приблизно 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 120, 140, 150, 160, 180, 200, 215, 225, 235 або 250 частин на мільйон, включаючи всі цілі числа між ними. У визначених варіантах здійснення поверхнево-активну речовину, таку як Tween 20 або Tween 80, можна додати в кількості приблизно 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 або 10 крапель на літр 0,1, 0,25, 0,5, 0,75, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 60, 70, 80, 90 або 100 % вихідного розчину. Крапля може складати приблизно 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 110, 120, 130, 140, 150 мкл або більше, включаючи всі цілі числа між ними, наприклад приблизно 51 мкл (тобто приблизно 1/80 чайної ложки), приблизно 62 мкл (тобто приблизно 1/60 рідкої драхми 1 США або 1/80 чайної ложки), приблизно 83 /3 мкл (тобто медична крапля, приблизно 1/12 мл), приблизно 99 мкл (тобто крапля за британською системою мір, приблизно 1/36 рідкої драхми) або приблизно 78 мкл. Кожну концентрацію або її діапазон для кожної конкретної сполуки ауксину можна об'єднати з кожною концентрацією або її діапазоном для кожного конкретного цитокініну, яку можна також об'єднати з кожною конкретною концентрацією або її діапазоном для кожної конкретної поліаспарагінової кислоти. Ці комбінації потім можна факультативно об'єднати з кожною 12 UA 112838 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 концентрацією або її діапазоном для кожного конкретного концентрату морської водорості і кожної конкретної поверхнево-активної речовини. Способи застосування Як позначено вище, визначені варіанти здійснення даного винаходу відносяться до поліпшених способів культивування і розмноження злакових рослин, включаючи рослини сімейства Poaceae, такі як безплідні однодольні Arundo donax і їх культивари. Головним чином, дані способи включають своєчасну обробку in situ зрілих або незрілих стеблин або їх сегментів композиціями, які підсилюють ріст, як описано в даному документі. Не бажаючи прив'язуватися до будь-якої теорії, вважають, що дані композиції порушують спокій меристематичних тканин у вузлах стеблин і, таким чином, викликають утворення пагона і коренів по краях вузла. Пагони і корені, утворені з цих сплячих в іншому випадку вузлів по стеблині, можна висадити безпосередньо на поля або використовувати для створення насіннєвих стеблин у розсадниках або лотках, що плавають, (або інших пристроях) для збільшення фонду рослин, окрім інших застосувань, описаних у даному документі й очевидних для фахівців у даній області. Ці способи включають, наприклад, способи розмноження злакової рослини, що включають: (a) обробку стеблини злакової рослини або її сегмента композицією, що містить: ауксин у кількості від приблизно 1 частини на мільйон до приблизно 10000 частин на мільйон, цитокінін у кількості від приблизно 1 частини на мільйон до приблизно 10000 частин на мільйон і поліаспарагінову кислоту в кількості від приблизно 1 частини на мільйон до приблизно 250000 частин на мільйон; (b) збирання стеблини, обробленої на етапі (a), і (c) висадження стеблини, зібраної на етапі (b). У визначених варіантах здійснення композиція може додатково містити щонайменше один концентрат морської водорості в кількості від приблизно 1 частини на мільйон до приблизно 500000 частин на мільйон, щонайменше одну поверхнево-активну речовину в кількості від приблизно 1 частини на мільйон до приблизно 250 частин на мільйон або і те, і інше. У конкретних варіантах здійснення злаковою рослиною є безплідна злакова рослина. Стеблина наведеного вище етапу (a) може бутинезрілою стеблиною або зрілою стеблиною або її сегментом, як описано в даному документі, і відомою в області техніки. У визначених переважних варіантах здійснення стеблина наведеного вище етапу (a) є незрілою стеблиною або її сегментом, який, як правило, застосовують, наприклад, або для збільшення фонду рослин, або для висадження безпосередньо в ґрунт і одержання таким чином зрілої рослини, або як для першого, так і для другого. У визначених варіантах здійснення стеблина на вищеописаному етапі (a) є зрілою стеблиною або її сегментом, який, як правило, застосовують, наприклад, для одержання незрілої стеблини або скупчення незрілих стеблин для подальшої обробки або для висадження безпосередньо в ґрунт і одержання таким чином зрілої рослини, або як для першого, так і для другого. Для обробки на вищенаведеному етапі (a) незрілі стеблини можна одержати відповідно до низки методик, що описані в даному документі і відомі в області техніки. У якості одного приклада, незрілі стеблини або скупчення незрілих стеблин можна одержати з факультативно оброблених зрілих стеблин або їх сегментів (дивися Фігуру 3). Однак варіанти здійснення даного винаходу не обмежені одержанням незрілих стеблин за допомогою даного способу. У визначених варіантах здійснення, наприклад, незрілі стеблини можна одержати безпосередньо з молодої рослини, або молодої стеблини зрілої рослини, або з попередньо обробленої незрілої стеблини (наприклад, материнської стеблини), окрім інших джерел, очевидних для фахівців у даній області. Ці незрілі стеблини можна факультативно розділити на ділянки необхідної довжини, помістити в ґрунт, або розсадник, або лоток, що плаває, або інший пристрій і або безпосередно обробити композиціями, що підсилюють ріст, при готовності, або інкубувати протягом періоду часу для того, щоб дозволити їм вирости до необхідної довжини і/або розвити необхідну кількість меристематичних вузлових ділянок, як описано нижче. Для того, щоб бути готовим до обробки композицією, яка підсилює ріст, скупчення або інші джерела незрілих стеблин, як правило, вирощують доти, поки окремі незрілі стеблини не будуть складати приблизно 10-25 або 15-25 дюймів у висоту, включаючи приблизно 10, 11, 12, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25 дюймів у висоту. У визначених варіантах здійснення незрілі стебла можуть мати від приблизно 4-10 або 5-10 до 12 меристематичних вузлових стеблин, включаючи приблизно 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 або 12 вузлових стеблин, і, як правило, складають у 1 3 діаметрі від приблизно /8 дюйма до приблизно ¼ дюйма до приблизно /8 дюйма до приблизно ½ дюйма. Цю стадію можна назвати приростом або розростанням незрілої стеблини (або рамети) і, у залежності від вихідного матеріалу, вона може займати, наприклад, приблизно 6-15 днів (включаючи всі цілі числа між ними), приблизно 1-8 тижнів, приблизно 2-6 тижнів, приблизно 3-4 тижня, включаючи приблизно 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7 або 8 тижнів. Отже, у момент 13 UA 112838 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 початкової обробки незрілим стеблинам може бути приблизно 6-15 днів або 1-8 тижнів, включаючи 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7 або 8 тижнів. У визначених варіантах здійснення незрілим стеблинам – приблизно 3-6 тижнів. Після приросту незрілі стеблини потім можна обробити композицією, що підсилює ріст (дивися описаний вище етап (a)), яка описана в даному документі, наприклад, шляхом нанесення композицій у вигляді аерозоля для листів до початку стікання з поверхні, включаючи інші способи, що будуть очевидні фахівцям у даній області. Цю початкову обробку при необхідності можна повторити. Також, обробку композиціями, що підсилюють ріст, можна, при необхідності, проводити в стерильних або нестерильних навколишніх умовах. Після початкової обробки і до збору (дивися описаний вище етап (b)) незрілі стеблини можна вирощувати або інкубувати протягом обраного періоду часу для підготовки сплячих в іншому випадку вузлів (і їх меристематичних тканин) для того, щоб викликати необхідний ступінь формування пагона і кореня, що може, у кінцевому рахунку, відбуватися перед або після висадження в ґрунт. У визначених варіантах здійснення оброблені незрілі стеблини вирощують протягом від приблизно 3 днів до приблизно 21 дня, включаючи приблизно 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21 день до збирання. У визначених варіантах здійснення незрілі стеблини вирощують протягом приблизно 14 днів (приблизно двох тижнів) до збирання і висадження. В обробленої незрілої стеблини, що готова для збирання (і висадження), можуть бути як корені, так і пагони, що ростуть із щонайменше одного з її вузлів, або вона ще може не демонструвати видимий розвиток коренів і пагонів, але зате випустить корені і пагони протягом приблизно 3 днів після висадження в ґрунт, якщо не раніше (дивися Фігуру 4). У визначених варіантах здійснення співвідношення мас кореня і пагона для даного вузла обробленої незрілої стеблини складає приблизно 1:1, але може також складати приблизно 1,1/1, 1,2/1, 1,3/1, 1,4/1, 1,5/1, 1/1,1, 1/1,2, 1/1,3, 1/1,4 або 1/1,5. На відміну від оброблених незрілих стеблин, в іншому випадку сплячи вузли неопрацьованих незрілих стеблин розвивають тільки пагони і не містять корені або до, або після висадження. Ці неопрацьовані незрілі стеблини гинуть після висадження в ґрунт. Оброблені незрілі стеблини найчастіше виростають у рослини нормального розміру за приблизно 12 місяців. Як відмічено вище, дані способи також включають обробку in situ зрілих стеблин цілої або не цілої рослини або розділеної на ділянки з вузлами зрілої стеблини. Ці варіанти здійснення в основному застосовують для одержання незрілих стеблин, які можна потім додатково обробити відповідно до наведених в даному документі способів. У визначених варіантах здійснення, однак, оброблені зрілі стеблини або їх сегменти можна безпосередньо висадити в ґрунт з одержанням зрілої рослини. У визначених варіантах здійснення можна факультативно обробити зрілу стеблину або її сегмент з одержанням скупчення незрілих стеблин (дивися Фігуру 5). В одному переважному варіанті здійснення скупчення незрілих стеблин одержують у результаті приросту рамети з використанням зрілих стеблин в якості вихідного матеріалу, в основному, за допомогою методики лотка, що плаває, і обробки композицією, що підсилює ріст, яка описана у даному документі. У якості одного ілюстративного прикладу одержання незрілих стеблин зі зрілих стеблин або підготовки зрілих стеблин до висадження, зрілі стеблини можна розрізати на окремі ділянки з вузлами або сегменти, наприклад, сегменти, що складають у діаметрі приблизно ½ дюйма (у залежності від діаметра стеблини) і від приблизно 1 дюйма до приблизно 1½ дюйма до приблизно 2 дюймів до приблизно 3 дюймів у довжину або довше, і які містять щонайменше один вузол (дивися Фігуру 6). У визначених варіантах здійснення дикі рослини культивари злакової рослини, такої як A. donax, можна зібрати, розрізати на ділянки з вузлами або сегменти і поверхово продезинфікувати або простерилізувати четвертинним амонієм. Якщо необхідно, можна задіяти інші методики стерилізації, наприклад, шляхом занурення стеблин у 10 % в об'ємному співвідношенні етанол і 0,1 % Tween 80 на приблизно 15 хвилин з наступним промиванням стерильною водою. Хоча це і не потрібно, стерилізація може зменшити зараження бактеріями з навколишнього середовища. Ці сегменти потім можна вставити в лоток, що плаває, (дивися, наприклад, патент США № 7052912, включений у даний документ посиланням) або інші пристрої для стимуляції подовження пагона і інкубувати із придатним середовищем. Як правило, і лише в якості ілюстрації, умови системи з лотком, що плаває, включають підтримку температури від приблизно 60 °F до приблизно 80 °F, воду з добривом (таким як NPK з незначними кількостями заліза, цинку, марганцю, міді, бору, молібдену і сірки) і, факультативно, гормонів утворення коренів(у залежності від потреб використаної рослини або клону). Такі гормони утворення коренів включають, наприклад, індолілоцтову кислоту, 1нафталіноцтову кислоту, і індол-3-масляну кислоту. На стадії утворення коренів ауксини можна 14 UA 112838 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 застосовувати з цитокінінами або без них. NM, наприклад, звичайно застосовують при культивуванні рослин у концентрації від 0,1 до 10 мг/л, більш переважно не перевищуючи приблизно 3 мг/л. Конкретний ауксин і його точна концентрація будуть залежати від клону Arundo donax, який культивують, або іншої злакової рослини, і ці концентрації IAA, NAA і IBA можна визначити експериментально. pН рідини у лотку, що плаває, складає, як правило, від приблизно 4,5 до приблизно 7,5, переважно приблизно 6,5. У визначених варіантах здійснення для інкубації сегментів зрілої стеблини в лотку, що плаває, можна використовувати деіонізовану воду. У визначених варіантах здійснення зрілі стеблини або їх сегменти можна факультативно обробити описаною в даному документі композицією, яка підсилює ріст, для додаткової стимуляції закладки коренів і для стимуляції розвитку і розростання коренів і пагонів. Незважаючи на те, що обробка зрілих стеблин є факультативною, вона може забезпечити підвищену життєздатність, яку вимірюють за синхронним або майже синхронним ростом кореня і пагона. Наприклад, було показано, що обробка зрілих стеблин композиціями, що підсилюють ріст, під час даної стадії підвищує життєздатність від приблизно 30 % до приблизно 70 %, 75 %, 80 %, 85 %, 90 %, 95 % або 100 %. У визначених варіантах здійснення ( на п р ик л а д, приблизно 1-8 тижнів) ці оброблені сегменти зрілої стеблини, як правило, дають скупчення незрілих стеблин, які можна обробити відповідно до наведених в даному документі способів. Альтернативно, у визначеному варіанті здійснення, почасти внаслідок їх підвищеної життєздатності, оброблені зрілі стеблини можна безпосередньо висадити в ґрунт з одержанням зрілої рослини, як правило, через приблизно 3-21 (на пр и к л а д, приблизно 14 днів) днів або тижнів після початкової обробки композиціями, що підсилюють ріст, і вони можуть дати зрілу рослину за приблизно 8 місяців. Приблизний діапазон температур повітря для росту зрілих або незрілих стеблин – від приблизно 15 °C до приблизно 35 °C, або від приблизно 20 °C до приблизно 30 °C, або від приблизно 24 °C до приблизно 28 °C. Зрілі або незрілі стеблини можна також вирощувати при приблизно 25 °C. У визначених варіантах здійснення незрілі і зрілі стеблини можна інкубувати у деіонизованій воді або ґрунті на основі мінералів до і після того, як їх піддали впливу композиціями, що підсилюють ріст. Після збирання оброблені незрілі або зрілі стеблини потім можна висадити відповідно до методик, відомих в області техніки. Крім інших методик розглядають механізовані системи, або системи для ручного висадження, або і ті, і інші ( д ив ис я Фігуру 7). Альтернативно, у визначених варіантах здійснення оброблені незрілі стеблини можна зберігати (розділені у вигляді ділянок або нерозділені у вигляді ділянок), наприклад, для перевезення, і висадити в більш пізній час. У визначених варіантах здійснення оброблені стеблини можна висадити безпосередньо в ґрунт, наприклад, на поле, або в ємність. У визначених варіантах здійснення оброблені стеблини можна висадити одразу або спочатку розділити на менші фрагменти для полегшення висадження, включаючи частини від приблизно ½ дюйма до приблизно 1½ д ю й ма до приблизно 2½ дюйма до приблизно 3 дюймів до приблизно 4 дюймів або більше у довжину (д и вис я Фігури 7 і 8). Як правило, відділені у вигляді ділянок фрагменти включають щонайменше один вузол, іноді вузол, у якого є як корені, так і пагони до висадження, або іноді вузол, що здатний дати корені і пагони за кілька днів після висадження. У визначених варіантах здійснення оброблені стеблини або їх сегменти можна висадити безпосередньо в ґрунт без будь-яких додаткових обробок, наприклад, стерилізації або очищення, і без будь-яких фітосанітарних проблем через те, що частки ґрунту, як правило, не прикріплюються до стеблин. Або, при необхідності, оброблені стебла можна спочатку піддати обробці після збору (перед висадженням) фунгіцидами, що містять віск, в основному для уповільнення втрати вологи або інгібування росту грибків. У визначених варіантах здійснення, наприклад, безпосередньо перед висадженням, оброблені стеблини або вузли можна додатково обробити ростовою композицією, наприклад, композицією, що містить ауксин/цитокінін/концентрат морської водорості/поліетиленгліколь (PEG). Лише у якості ілюстрації і без обмеження, оброблені стебла або їх ділянки можна горизонтально помістити в ґрунт (наприклад, у полі або ємності) на глибини, що варіюють у діапазоні від приблизно ¼ дюйма до приблизно 6 дюймів нижче поверхні ґрунту, включаючи глибини від приблизно 1 до приблизно 3 дюймів нижче поверхні, і рядами з відстанню між рослинами, що варіює від безупинного до приблизно 8 дюймів між рослинами. У визначених варіантах здійснення відстань між рядами може бути від суміжної до приблизно 8 дюймів між рослинами. Інші способи висадження будуть очевидні фахівцям у даній області. 15 UA 112838 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 У визначених варіантах здійснення замість висадження оброблених стеблин у ґрунт ці стеблини можна зібрати, обрізати або розділити у вигляді ділянок на фрагменти, що містять щонайменше один, або два, або три, або більше вузлів, і потім висадити або вирощувати в розсаднику або іншому пристрої (наприклад, лотку, що плаває). Крім інших застосувань, дані варіанти здійснення можна застосовувати для збільшення або розширення фонду рослин і, почасти, вони відносяться до способів одержання насіннєвих стеблин, що включають (a) обробку незрілої стеблини злакової рослини або її сегмента композицією, що містить: ауксин у кількості від приблизно 1 частини на мільйон до приблизно 10000 частин на мільйон, цитокінін у кількості від приблизно 1 частини на мільйон до приблизно 10000 частин на мільйон і поліаспарагінову кислоту в кількості від приблизно 1 частини на мільйон до приблизно 250000 частин на мільйон; (b) збирання частини стеблини, обробленої на етапі (a), з одержанням насіннєвої стеблини; (c) вирощування залишившоїся частини стеблини етапу (b) у незрілу стеблину; і, факультативно, (d) повторення етапів (a) і (b) щонайменше ще раз з одержанням таким чином насіннєвих стеблин. У визначених варіантах здійснення композиція може додатково містити щонайменше один концентрат морської водорості в кількості від приблизно 1 частини на мільйон до приблизно 500000 частин на мільйон, щонайменше одну поверхневоактивну речовину в кількості від приблизно 1 частини на мільйон до приблизно 250 частин на мільйон або і те, і інше. Лише у якості ілюстрації, незрілі стеблини на наведеному вище етапі (a) можна спочатку одержати шляхом вирощування факультативно оброблених зрілих стеблин у лотку, що плаває, протягом приблизно 1-8 тижнів, як описано в даному документі, хоча можна використовувати інші способи, такі як або обрізання або розділення на ділянки попередньо обробленого незрілої стеблини. Після обробки композицією, що підсилює ріст, як на наведеному вище етапі (a), частину обробленої незрілої стеблини на наведеному вище етапі (b) можна збирати в відповідний час (наприклад, через приблизно 3-21 день після обробки) відповідно до різних ілюстративних способів. У якості одного прикладу такого способу, оброблені незрілі стеблини можна зібрати, просто обрізаючи верхні частини незрілої стеблини і зберігаючи нижні частини, наприклад, нижні один, або два, або три, або чотири вузли. Верхні частини (тобто "насіннєві стеблини") потім, якщо необхідно, можна висадити в ґрунт (розділені у вигляді ділянок або не розділені у вигляді ділянок). У визначених варіантах здійснення насіннєві стеблини можна зібрати або обрізати до утворення несправжнього кореневища. "Несправжнє кореневище" відноситься до покритого м'ясистою оболонкою кореневища, яке ще не розвило епідерміс або жорстку захисну плівку зрілого кореневища. У цілому, несправжнє кореневище становить від приблизно 2 до 6 сантиметрів у діаметрі (дивися Фігуру 10). Нижні частини обрізаних стеблин потім можна повторно виростити в незрілі стеблини, як описано в даному документі (наприклад, стеблини приблизно 10-25 дюймів висотою та які мають приблизно 4-10 вузлів), і, таким чином, вони служать в якості материнської рослини. Подібно до вищеописаного, даний етап може займати приблизно 6-15 днів (включаючи всі цілі числа між ними), приблизно 1-8 тижнів, приблизно 2-6 тижнів, приблизно 3-4 тижня, включаючи приблизно 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7 або 8 тижнів. Ці повторно вирощені незрілі стеблини потім можна обробити композицією, що підсилює ріст, (дивися описаний вище етап (d)), дати їм рости протягом обраного періоду часу (наприклад, приблизно 3-21 день) і потім знову зібрати відповідно до приведеного вище етапу (b), наприклад, обрізаючи або видаляючи верхні ділянки незрілих стеблин з одержанням іншої партії насіннєвих стеблин. Зібрані насіннєві стеблини потім можна висадити, а нижні частини материнської рослини повторно виростити в незрілі стеблини. Як описано вище, етапи даного способу, за бажанням, можна повторити ( д и в ис я ви щ е оп ис ан и й етап (d)), головним чином для збереження фонду насіннєвих стебелин і для швидкого збільшення або розширення фонду рослин. У визначених варіантах здійснення насіннєві фонди можна збирати через 4-10-тижневий інтервал. У будь-який момент визначені оброблені незрілі стеблини можна висадити або безпосередньо в ґрунт (розділеними у вигляді ділянок або не розділеними у вигляді ділянок), або зберігати для більш пізнішого використання, або і те, і інше. Як інший приклад, оброблені незрілі стеблини можна зібрати шляхом нарізання стеблин з етапу (a) на мікросегменти або мікровузли (нап р и к ла д, від приблизно ½ до приблизно 1½ дюйма до приблизно 2 дюймів або більше у довжину і які мають щонайменьше один або два вузли). Ці мікровузли потім можна помістити в розсадник або інший пристрій, факультативно обробити або інкубувати з рослинними гормонами (на пр и к л ад , композицією, що підсилює ріст, за даним винаходом) і виростити у незрілі стеблини (д ив ис я оп ис ан и й в и щ е етап (c)), як описано в даному документі (н ап р и к ла д, стеблини приблизно 10-25 дюймів висотою і які 16 UA 112838 C2 5 10 15 20 25 мають приблизно 4-12 вузлів). Цей етап може зайняти приблизно 6-15 днів (включаючи всі цілі числа між ними), приблизно 1-8тижнів, приблизно 2-6 тижнів, приблизно 3-4 тижня, включаючи приблизно 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7 або 8 тижнів. Коли вони будуть готові, ці незрілі стеблини потім можна обробити композицією, що підсилює ріст, (ди в ис я етап (d)), наприклад, шляхом розпилення до початку стікання з поверхні, дозволити рости протягом обраного періоду часу (нап р и к ла д, приблизно 3-21 день) і потім знову зібрати відповідно до етапу (b). Даний процес за бажанням можна повторити. При застосуванні наведених у даному документі способів оброблені незрілі стеблини, як правило, виявляють утворення коренів і пагонів через приблизно 3 дні після висадження в ґрунт, якщо не раніше. Також, висаджені стеблини, як правило, виростають до розміру цілком розвитої рослини за приблизно 12-16 місяців, після чого вони готові до збирання. Цей швидкий ріст до визрівання скорочує звичайний цикл розмноження злакових рослин (на пр и к л а д, безплідних злакових рослин) на приблизно 12 тижнів. Також, як було вказано в даному документі, ці рослини досягають стійкого росту при мінімальних витратах і зберігають повний генетичний набір батьківських рослин за відсутності сомаклональної мінливості, що робить їх ідеальними для застосувань, у яких необхідна клональна однорідність. Різні описані вище варіанти здійснення можна комбінувати з одержанням додаткових варіантів здійснення. Усі патенти США, публікації заявок на патенти США, заявки на патент США, іноземні патенти, заявки на іноземні патенти і непатентні публікації, на які дається посилання в даному описі і/або які перераховані у формі для подачі заявки, включені в даний документ посиланням в їх повному обсязі. Аспекти варіантів здійснення можна модифікувати, якщо необхідно задіяти ідеї різних патентів, заявок і публікацій для одержання інших додаткових варіантів здійснення. У світлі описаного вище в деталях опису можна здійснити ці й інші зміни у відношенні варіантів здійснення. У цілому, у наступній формулі винаходу терміни, які застосовують, не слід тлумачити як обмежуючи формулу винаходу до конкретних варіантів здійснення, розкритих в описі винаходу і пунктах формули винаходу, але варто тлумачити як включаючи усі можливі варіанти здійснення поряд з повним обсягом еквівалентів, на які такі пункти формули винаходу надають право. Отже, пункти формули винаходи не обмежені даним розкриттям. 30 ФОРМУЛА ВИНАХОДУ 35 40 45 50 55 60 1. Спосіб розмноження безплідної злакової рослини, який включає: (a) обробку незрілої стеблини безплідної злакової рослини або її сегмента in situ композицією, що містить: ауксин у кількості від приблизно 1 частини на мільйон до приблизно 10000 частин на мільйон, цитокінін у кількості від приблизно 1 частини на мільйон до приблизно 10000 частин на мільйон і поліаспарагінову кислоту в кількості від приблизно 1 частини на мільйон до приблизно 250000 частин на мільйон, причому вік незрілої стеблини складає від приблизно 1 до 8 тижнів; (b) збирання стеблини, обробленої на етапі (a); і (c) висадження стеблини, зібраної на етапі (b). 2. Спосіб за п. 1, де незріла стеблина складає від приблизно 25,4 до 63,5 сантиметрів у висоту і має від приблизно 4 до 10 вузлів. 3. Спосіб за п. 1, де вік незрілої стеблини складає від приблизно 3 до приблизно 6 тижнів. 4. Спосіб за будь-яким з пп. 1-3, де етап (b) проводять через приблизно 3-20 днів після проведення етапу (a). 5. Спосіб за будь-яким з пп. 1-3, де етап (b) проводять через від приблизно 12 до 16 днів після проведення етапу (a). 6. Спосіб за п. 1, де безплідною злаковою рослиною є рослина Arundo donax або її культивар. 7. Спосіб за будь-яким з пп. 1-5, де злакова рослина належить до родини Poaceae. 8. Спосіб за будь-яким з пп. 1-5, де злаковою рослиною є рослина Arundo gigantium, Geranium sagitatum, Miscanthus x giganteus, Saccharum officianarum або інший Saccharum spp., Pennisetum purpereum або її культивар. 9. Спосіб за будь-яким з пп. 1-8 з додатковим включенням концентрату морської водорості в кількості від 1 частини на мільйон до приблизно 500000 частин на мільйон. 10. Спосіб за будь-яким з пп. 1-8 з додатковим включенням концентрату морської водорості в кількості від приблизно 100 частин на мільйон до приблизно 1000 частин на мільйон. 11. Спосіб за п. 7 або п. 10, де концентратом морської водорості є екстракт із Ascophyllum nodosum. 12. Спосіб за будь-яким з пп. 1-11 з додатковим включенням поверхнево-активної речовини в кількості від 1 частини на мільйон до приблизно 250 частин на мільйон. 17 UA 112838 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 13. Спосіб за п. 12, де поверхнево-активною речовиною є Tween 20. 14. Спосіб за будь-яким з пп. 1-13, де ауксином є індолілмасляна кислота (IBA), індол-3-оцтова кислота (IAA), нафталіноцтова кислота (NAA), 4-хлоріндол-3-оцтова кислота (4-Cl-IAA), 2фенілоцтова кислота (PAA), 2,4-дихлорфеноксіоцтова кислота, 2-метокси-3,6-дихлорбензойна кислота, 4-аміно-3,5,6-трихлорпіколінова кислота або їх суміш. 15. Спосіб за будь-яким з пп. 1-14, де цитокініном є бензиламінопурин (BA), кінетин, зеатин (Z), дигідрозеатин (DHZ) і ізопентеніладенозин (IPA), ортотополін (oT), метатополін (mT), ортометокситополін (MeoT), метаметокситополін (MemT), бензиладенін (BA) або їх суміш. 16. Спосіб за будь-яким з пп. 1-15, де поліаспарагінова кислота являє собою співполімер [(3карбоксипропіонамід)(2-(карбоксиметил)ацетамід)]. 17. Спосіб за будь-яким з пп. 1-16, де ауксин складає від приблизно 100 частин на мільйон до приблизно 1000 частин на мільйон. 18. Спосіб за будь-яким з пп. 1-17, де цитокінін складає від приблизно 100 частин на мільйон до приблизно 1000 частин на мільйон. 19. Спосіб за будь-яким з пп. 1-18, де поліаспарагінова кислота складає від приблизно 500 частин на мільйон до приблизно 5000 частин на мільйон. 20. Композиція для обробки безплідної злакової рослини in situ, яка містить: ауксин у кількості від 1 частини на мільйон до приблизно 10000 частин на мільйон, цитокінін у кількості від 1 частини на мільйон до приблизно 10000 частин на мільйон і поліаспарагінову кислоту в кількості від 1 частини на мільйон до приблизно 250000 частин на мільйон. 21. Композиція за п. 20, яка додатково містить концентрат морської водорості в кількості від 1 частини на мільйон до приблизно 500000 частин на мільйон. 22. Композиція за п. 20, яка додатково містить концентрат морської водорості в кількості від приблизно 100 частин на мільйон до приблизно 1000 частин на мільйон. 23. Композиція за п. 21 або п. 22, де концентратом морської водорості є екстракт із Ascophyllum nodosum. 24. Композиція за будь-яким з пп. 20-23, яка додатково містить поверхнево-активну речовину в кількості від 1 частини на мільйон до приблизно 250 частин на мільйон. 25. Композиція за п. 24, де поверхнево-активною речовиною є Tween 20. 26. Композиція за будь-яким з пп. 20-25, де ауксином є індолілмасляна кислота (IBA), індол-3оцтова кислота (IAA), нафталіноцтова кислота (NAA), 4-хлоріндол-3-оцтова кислота (4-Cl-IAA), 2-фенілоцтова кислота (PAA), 2,4-дихлорфеноксіоцтова кислота, 2-метокси-3,6-дихлорбензойна кислота, 4-аміно-3,5,6-трихлорпіколінова кислота або їх суміш. 27. Композиція за будь-яким з пп. 20-26, де цитокініном є бензиламінопурин (BA), кінетин, зеатин (Z), дигідрозеатин (DHZ) і ізопентеніладенозин (IPA), ортотополін (oT), метатополін (mT), ортометокситополін (MeoT), метаметокситополін (MemT), бензиладенін (BA) або їх суміш. 28. Композиція за будь-яким з пп. 20-27, де поліаспарагінова кислота являє собою співполімер [(3-карбоксипропіонамід)(2-(карбоксиметил)ацетамід)]. 29. Композиція за будь-яким з пп. 20-28, де ауксин складає від приблизно 100 частин на мільйон до приблизно 1000 частин на мільйон. 30. Композиція за будь-яким з пп. 20-29, де ауксин складає від приблизно 100 частин на мільйон до приблизно 300 частин на мільйон. 31. Композиція за будь-яким з пп. 20-29, де ауксин складає від приблизно 300 частин на мільйон до приблизно 700 частин на мільйон. 32. Композиція за будь-яким з пп. 20-29, де ауксин складає від приблизно 700 до приблизно 1000 частин на мільйон. 33. Композиція за будь-яким з пп. 20-29, де ауксин складає від приблизно 200 частин на мільйон до приблизно 400 частин на мільйон. 34. Композиція за будь-яким з пп. 20-29, де ауксин складає від приблизно 400 частин на мільйон до приблизно 600 частин на мільйон. 35. Композиція за будь-яким з пп. 20-29, де ауксин складає від приблизно 600 частин на мільйон до приблизно 800 частин на мільйон. 36. Композиція за будь-яким з пп. 20-29, де ауксин складає від приблизно 800 частин на мільйон до приблизно 1000 частин на мільйон. 37. Композиція за будь-яким з пп. 20-29, де ауксин складає від приблизно 750 частин на мільйон до приблизно 1700 частин на мільйон. 38. Композиція за будь-яким з пп. 20-37, де цитокінін складає від приблизно 100 частин на мільйон до приблизно 1000 частин на мільйон. 39. Композиція за будь-яким з пп. 20-38, де цитокінін складає від приблизно 100 частин на мільйон до приблизно 300 частин на мільйон. 18 UA 112838 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 40. Композиція за будь-яким з пп. 20-38, де цитокінін складає від приблизно 300 частин на мільйон до приблизно 700 частин на мільйон. 41. Композиція за будь-яким з пп. 20-38, де цитокінін складає від приблизно 700 до приблизно 1000 частин на мільйон. 42. Композиція за будь-яким з пп. 20-38, де цитокінін складає від приблизно 200 частин на мільйон до приблизно 400 частин на мільйон. 43. Композиція за будь-яким з пп. 20-38, де цитокінін складає від приблизно 400 частин на мільйон до приблизно 600 частин на мільйон. 44. Композиція за будь-яким з пп. 20-38, де цитокінін складає від приблизно 600 частин на мільйон до приблизно 800 частин на мільйон. 45. Композиція за будь-яким з пп. 20-38, де цитокінін складає від приблизно 800 частин на мільйон до приблизно 1000 частин на мільйон. 46. Композиція за будь-яким з пп. 20-45, де ауксином є IBA. 47. Композиція за будь-яким з пп. 20-45, де ауксином є IAA. 48. Композиція за будь-яким з пп. 20-45, де ауксином є NAA. 49. Композиція за будь-яким з пп. 20-45, де ауксином є суміш IAA і NAA. 50. Композиція за будь-яким з пп. 20-49, де цитокініном є зеатин. 51. Композиція за будь-яким з пп. 20-49, де цитокініном є BA. 52. Композиція за будь-яким з пп. 20-51, де поліаспарагінова кислота складає від приблизно 500 частин на мільйон до приблизно 5000 частин на мільйон. 53. Композиція за будь-яким з пп. 20-52, де поліаспарагінова кислота складає від приблизно 500 частин на мільйон до приблизно 1000 частин на мільйон. 54. Композиція за будь-яким з пп. 20-52, де поліаспарагінова кислота складає від приблизно 1000 частин на мільйон до приблизно 2000 частин на мільйон. 55. Композиція за будь-яким з пп. 20-52, де поліаспарагінова кислота складає від приблизно 2000 частин на мільйон до приблизно 3000 частин на мільйон. 56. Композиція за будь-яким з пп. 20-52, де поліаспарагінова кислота складає від приблизно 3000 частин на мільйон до приблизно 4000 частин на мільйон. 57. Композиція за будь-яким з пп. 20-52, де поліаспарагінова кислота складає від приблизно 4000 частин на мільйон до приблизно 5000 частин на мільйон. 58. Спосіб одержання насіннєвих стеблин, який включає: (a) обробку незрілої стеблини злакової рослини або її сегмента композицією за будь-яким з пп. 20-55; (b) збирання частини стеблини, обробленої на етапі (a), з одержанням насіннєвої стеблини; (c) вирощування частини стеблини, що залишилася з етапу (b) у незрілу стеблину; і (d) повторення етапів (a) і (b) щонайменше ще раз з одержанням таким чином насіннєвих стеблин. 59. Спосіб за п. 58, де етап (a) проводять in situ. 60. Спосіб за п. 58 або п. 59, де незріла стеблина складає від приблизно 25,4 до 63,5 сантиметрів у висоту і має від приблизно 4 до 10 вузлів. 61. Спосіб за п. 58 або п. 59, де вік незрілої стеблини складає від приблизно 3 до приблизно 6 тижнів. 62. Спосіб за будь-яким з пп. 58-61, де етап (b) проводять через 3-20 днів після проведення етапу (a). 63. Спосіб за будь-яким з пп. 58-61, де етап (b) проводять через приблизно 14 днів після проведення етапу (a). 64. Спосіб за будь-яким з пп. 58-61, де етап (b) проводять до утворення несправжнього кореневища. 65. Спосіб за будь-яким з пп. 58-64, де етап (d) починають через від приблизно 1 до 8 тижнів після проведення етапу (c). 66. Спосіб за будь-яким з пп. 58-64, де етап (d) починають через від приблизно 3 до 6 тижнів після проведення етапу (c). 67. Спосіб за будь-яким з пп. 58-66, де безплідною злаковою рослиною є рослина Arundo donax. 68. Спосіб за будь-яким з пп. 58-66, де злакова рослина належить до родини Poaceae. 69. Спосіб за будь-яким з пп. 58-66, де злаковою рослиною є рослина Arundo gigantium, Geranium sagitatum, Miscanthus x giganteus, Saccharum officianarum або інший Saccharum spp., Pennisetum purpereum або її культивар. 70. Незріла стеблина або її сегмент безплідної злакової рослини, що містить щонайменше один вузол, що має щонайменше один корінь і щонайменше один пагін, де стеблина складає від приблизно 0,3 сантиметра до приблизно 0,6 сантиметра в діаметрі, і де вагове співвідношення кореня і пагона для щонайменше одного вузла складає від приблизно 1/1,5 до приблизно 1,5/1, 19 UA 112838 C2 причому незріла стеблина або її сегмент отримані згідно з етапами (a) та (b) способу за будьяким з пп. 1-5 та 7-19 або згідно зі способом за будь-яким з пп. 58-69. 71. Стеблина або сегмент за п. 70, де співвідношення мас кореня і пагона для щонайменше одного вузла складає приблизно 1/1. 20 UA 112838 C2 21 UA 112838 C2 22 UA 112838 C2 23 UA 112838 C2 24 UA 112838 C2 25 UA 112838 C2 26 UA 112838 C2 27 UA 112838 C2 28