Препарат для підвищення імунного потенціалу і антиоксидантного захисту у сільськогосподарських тварин “антоксан”

Винахід належить до галузі ветеринарної медицини, зокрема, ветеринарної фармакології, а саме до створення імунотропних лікарських засобів пролонгованої дії, які корегують імунодефіцитний стан та посилюють напруженість поствакцинального імунітету у тварин. Заявлений препарат може бути використаний у тваринницьких господарствах з різними формами власності для здійснення комплексної терапії запальних інфекційних і неінфекційних захворювань у тварин, для підвищення імуногенності засобів специфічної імунопрофілактики, для підвищення опірності та імунного потенціалу у тварин, для активізації функцій системи антиоксидантного захисту. Відомі імунотропні препарати, які використовуються для профілактики і лікування інфекційних і неінфекційних захворювань у тварин: - імуномодулятори; - імуностимулятори - імуносупресори (Хаитов P.M., Пинегин Б.В. Основные представления об иммунотропных лекарственных средствах // Иммунология. -1996, №6. -С.4-9). Недоліками більшості відомих препаратів є короткотривала експозиція їх терапевтичної дії, створення додаткового антигенного навантаження на організм тварин. Найбільш близьким, по суті, до препарату, що заявляється є спленоцитарний інтерферон (спленоферон) ВРХ ТУУ 4615645, 2002. Відомий препарат забезпечує антивірусну дію. Недолік використання його, як лікувально-профілактичного засобу, полягає в тому, що зазначений препарат доцільно використовувати лише при спалаху вірусних інфекцій (епізоотій, панзоотій), володіє короткотривалою експозицією терапевтичної дії і не володіє антиоксидантними властивостями. Заявлений нами препарат усуває недоліки прототипу і забезпечує продовження експозиції терапевтичної дії сумарного інтерферону, підвищення його ефективності, зменшення кратності введення препарату за рахунок пролонгованої дії, сприяє відновленню метаболічних процесів та нормальному функціонуванню імунекомпетентних клітин. В основу винаходу поставлена задача створити ефективний препарат пролонгованої дії для корекції імунодефіцитів та підвищення специфічного захисту тварин, економічно вигідний і зручний при використанні. Поставлену задачу вирішують шляхом додавання до сумарного інтерферону (сухий очищений інтерферон свиней або ВРХ), селеніту натрію та розчину біосинтетичного b - каротину в очищеній рослинній олії при такому співвідношенні компонентів в 1мл препарату: Сумарний інтерферон - не менше 4 Л0 50; Селеніт натрію - 150-250мкг; b - каротин - не менше 0,2мг; Олія рослинна очищена - до 1мл. Препарат фасують в 2 флакони: 1-й містить інтерферон у суміші з селенітом натрію, а 2-й розчин біосинтетичного b - каротину в очищеній рослинній олії. Вміст обох флаконів перед застосуванням змішують і вводять тваринам внутрішньом’язово з профілактичною метою - через день, а з лікувальною - щоденно, протягом 6-8 днів у дозі 0,9-1,1мл на 10кг живої маси тварин. Ефективність заявленого препарату забезпечується механізмом впливу його складових компонентів на обмін речовин в організмі тварин. Селеніт натрію - препарат антиоксидантної дії. Введення його в новий препарат активує Se-залежну глутатіонпероксидазу, яка неспецифічно розщеплює гідроперекиси (Гусейнов Т.М., 1990), що важливо для контролю перекисів ліпідів мембран імунокомпетентних клітин. b - каротин - провітамін вітаміну А. Підвищує імунний статус, як попередник вітаміну А має антиоксидантні властивості. Використовується в формі масляної емульсії. Додавання b - каротину , отриманого за біотехнологією мікробного синтезу, до інтерферону ефективно знижує рівень перекисного окиснення ліпідів як в еритроцитах, так і в суспензіях клітин селезінки з одночасним позитивним впливом на активність ключового ферменту антиоксидантної системи захисту - супероксиддисмутази. Антоксан у формі суспензії вводять тваринам внутрішньом’язово у дозі 1мл на 10кг маси тіла через день (з профілактичною метою) або щоденно (з лікувальною метою). Препарат застосовують, як імуномодулюючий і нормалізуючий метаболічні процеси засіб у комплексній терапії запальних інфекційних і неінфекційних захворювань тварин, при імунодефіцитах, розладах травлення, порушеннях обміну речовин, інтоксикаціях, пов'язаних з накопиченням вільно радикальних метаболітів, отруєннях токсичними кормами. Профілактично препарат використовують для підвищення імунного потенціалу та неспецифічної опірності організму тварин. При проведенні патентно-інформаційного пошуку заявником і авторами виявлено технічне рішення, що містить ряд суттєвих ознак, спільних із заявленим технічним рішенням - наявність в препараті сухого сумарного інтерферону ВРХ (спленоферон), який отримано за ТУУ 4615645, 2002. Однак, наявність зазначеної, спільної з прототипом ознаки недостатня для отримання технічного результату, який забезпечує заявлений препарат. У патентній і науково-технічній інформації не знайдено технічних рішень, в яких були б описані відомості про ознаки, що відрізняють заявлений препарат від прототипу і забезпечують досягнення технічного результату препарат додатково містить селеніт натрію, b - каротин , рослинну олію та досягає найвищого терапевтичного ефекту при такому співвідношенні компонентів у 1мл препарату: Сумарний інтерферон не менше 4 ЛО 50 Селеніт натрію 150-250мкг b - каротин не менше 0,2мг Олія рослинна очищена до 1мл. При цьому препарат фасують в 2 флакони: перший - містить сумарний інтерферон в суміші з селенітом натрію, а другий - розчин біосинтетичного b - каротину в очищеній рослинній олії, перед застосуванням вміст обох флаконів поєднується і вводиться тваринам внутрішньом'язово з профілактичною метою через день, а з лікувальною - щоденно протягом 6-8 днів у дозі 1мл на 10кг живої маси тварин. Заявлене технічне рішення відноситься до галузі ветеринарної медицини, зокрема, ветеринарної фармакології, а саме до імунотропних лікувально-профілактичних засобів пролонгованої дії для тварин і може бути використане в тваринницьких господарствах з різними формами власності для нормалізації глибинних механізмів обміну речовин, підвищення антиоксидантного статусу та імунного потенціалу, що забезпечує підвищення продуктивності і збереженості тварин та покращення якості продукції тваринництва. Для виготовлення “Антоксану” використовують фармакологічні препарати інтерферон спленоцитарний ВРХ, селеніт натрію ЧДА, які фасують у флакони (флакон №1) ємністю 10, 50 і 100мл, ємністю по 0,2; 1,0 та 2,0г, з похибкою фасування ±3%; b - каротин , рослинна олія очищена у флакони (флакон №2) по 10, 50 і 100мл, з похибкою фасування ±3%. Флакони щільно закриті гумовими корками за ТУ 38-006-108084 та алюмінієвими ковпачками за ДОСТ 64-00986. Препарат зберігають у темному сухому приміщенні при температурі +4-20°С, 2 роки. Вміст флакону №1 розводять за допомогою шприца вмістимим флакону №2. Отриману суспензію вводять через день (профілактично) або щоденно (з лікувальною метою) внутрішньом'язово протягом 6-8 днів у дозі 1мл на 10кг живої маси тварини. Ефективність заявленого препарату, переваги його перед прототипом, а також визначення оптимального співвідношення компонентів представлена в прикладах конкретного виконання винаходу - у дослідах на сільськогосподарських тваринах. Приклад 1 В умовах лабораторії імунології Інституту біології тварин УААН було виготовлено 3 партії препарату “Антоксан” з різною кількістю складових компонентів у 1мл препарату: Перша партія препарату - при максимальній дозі компонентів містила: спленоцитарного інтерферону 4 ЛО 50; селеніту натрію 250мкг; b - каротину 0,2мг; рослинної олії до 1мл. Друга партія препарату - при середній дозі компонентів містила: спленоцитарного інтерферону не менше 4 ЛО 50; селеніту натрію не менше 200мкг; b - каротину не менше 0,2мг; олії рослинної очищеної до 1мл. Третя партія препарату - при мінімальній дозі компонентів містила: спленоцитарного інтерферону менше 4 ЛО 50; селеніту натрію 150мкг; b - каротину менше 0,2мг; олії рослинної очищеної до 1мл. У дослідному господарстві "Оброшино" Пустомитівського району, Львівської області проведено апробацію зазначених партій “Антоксану” на молодняку великої рогатої худоби. Для апробації підібрано 3 групи телят чорнорябої породи за принципом аналогів за віком, живою масою, по 10 голів у групі. Тварини утримувались в однакових умовах типового телятника груповим методом безприв'язно, з однаковими умовами годівлі. Кожній групі телят вводили “Антоксан” у дозі 1мл на 10кг живої маси протягом 7 днів, щоденно. Оптимальну партію препарату визначали за впливом імуномодуляторів на формування імунобіологічної реактивності, концентрацію циркулюючих імунних комплексів (ЦІК), концентрацію імуноглобулінів класу G (Ig G) та класу М (Ig М), бактерицидну активність сироватки крові (БАСК), лізоцимну активність (ЛА), фагоцитарну активність (ФГ) та фагоцитарний індекс (ФІ). Для цього у дослідних телят на початку і в кінці досліду відбирали проби крові, в яких визначали зазначені показники імунобіологічної реактивності організму. Одержані результати наведені у таблиці 1. Результати досліду 1: Таблиця 1 Вплив досліджуваних препаратів на продуктивність і резистентність телят Показники, од. вим. Групи тварин 2 1 3 Схема досліду Кількість тварин у групі, гол. Середн, ж. м. на початку досліду,кг/гол. Середн, ж. м. в кінці досліду,кг/гол. Середньодобовий приріст за дослід, г/гол/добу ЦІК, ммоль/л IgG 10 10 10 33,0 32,75 32,5 53,23 55,0 55,75 737,0+24,48 749,0+11,90 Показники імунобіологічної реактивності 1. На початку досліду 41,00+1,00 38,00+1,22 13,90+0,48 14,20+1,32 642,0+18,87 37,5+1,19 14,7+0,70 IgM БАСК,% Лізоц. акт., % ФА, % ФІ, % 2,00+0,48 19,93+1,78 27,60+0,65 89,00+0,57 19,10+1,03 2. В кінці досліду 46,33+2,03 14,9+0,81 1,48+0,67 24,60+1,77 32,00+1,00 94,20+0,41 23,40+0,33 ЦІК, ммоль/л IgG IgM БАСК, % Лізоц. акт., % ФА, % ФІ, % 1,92+0,20 20,7+1,30 28,0+1,15 90,0+0,63 18,7+0,83 1,80+0,23 17,00+1,13 27,90+0,88 91,30+0,67 18,20+1,15 47,00+1,15 15,80+0,75 1,53+0,62 30,50+1,21 33,60+1,20 96,50+1,30 24,30+1,22 41,50+0,96 14,80+1,07 1,29+0,43 20,00+0,70 30,30+0,66 89,00+0,50 19,30+0,75 Наведені в таблиці 1 дані свідчать про те, що співвідношення компонентів у 2-й партії препарату “Антоксан” виявились найбільш оптимальними, оскільки у тварин 2-ої групи, що одержували “Антоксан” цієї партії спостерігали найбільш високі середньодобові прирости і найбільш ефективним виявився вплив препарату цієї партії на показники крові, що характеризують стан імунобіологічної реактивності. Приклад 2 Для підтвердження ефективності заявленого препарату і його переваги над прототипом проведено дослід в умовах господарства Рівненського інституту епізоотології. У досліді, вивчали порівняльну ефективність імуномодуляторів для підвищення резистентності організму телят. Для досліду відібрали за принципом аналогів 30гол. телят у віці 1міс., які були поділені на 2 групи. Телята 1-ої групи (15гол.), одержували прототип - препарат сумарний інтерферон ВРХ ТУУ 4615645, 2002 згідно інструкції по застосуванню у дозі 5мл на голову протягом 7 діб, щоденно. Телята 2-ої групи (новий препарат) одержували “Антоксан” (при середній дозі компонентів) з профілактичною метою: 1мл на 10кг живої маси протягом 7 днів, через день. На початку і в кінці досліду тварин зважували і двічі за дослід брали кров із яремної вени. У крові тварин обох груп визначали показники резистентності на початку і в кінці досліду. Одержані дані представлені у таблиці 2. Результати досліду 2: Таблиця 2 Вплив досліджуваних препаратів на продуктивність, резистентність і захворюваність телят Показники, од. виміру 1 Групи тварин Прототип 2 Схема досліду 15 1 Кількість тварин у групі, гол. Вік телят на початку досліду, міс. Середн, ж. м. телят на початку досліду, кг/гол. 55,75+2,17 Тривалість досліду, дні 50 Середн, ж. м. телят в кінці досліду, кг/гол. 86,15 Середньодобовий приріст за дослід, г/гол/добу 608,0+17,7 Внутрішньомязове введення імуномодуляторів, мл/гол.: спленоферон 5 “Антоксан“, мл/10кг ж. м. Показники резистентності На початку досліду ЦІК, ммоль/л 58,33+3,10 IgG 20,18+0,59 IgM 1,89+0,81 БАСК, % 21,40+0,13 Лізоц. акт., % 36,00+0,57 В кінці досліду ЦІК, ммоль/л 64,25+2,95 IgG 21,30+2,01 IgM 2,80+0,77 БАСК, % 22,10+1,24 Лізоц. акт., % 39,00+1,32 Захворюваність телят на протязі досліду, в т.ч.: Респіраторні захворювання, гол. 7 Шлунково-кишкові захворювання, гол. 8 “Антоксан” 3 15 1 55,25+1,89 50 88,1 657,0+10,7 1,0 58,66+1,76 21,00+1,10 2,00+0,77 20,20+1,06 37,30+0,66 65,26+1,45 23,80+1,56 2,50+0,66 23,10+0,70 43,30+0,48 5 4 Наведені у таблиці 2 дані свідчать про перевагу заявленого препарату “Антоксан“ перед прототипом при застосуванні молодняку великої рогатої худоби.