Спосіб одержання ліофілізованого фітоекстракту кореневищ герані болотної з інтерфероніндукуючою дією

Реферат: Спосіб одержання ліофілізованого фітоекстракту кореневищ герані болотної з інтерфероніндукуючою дією, який включає екстрагування сировини. Сухі, подрібнені (розміри частинок 1,0-2,0 мм) кореневища герані болотної екстрагують водою очищеною при температурі 90-95 °C у співвідношенні (сировина-екстрагент) 1:20-1:30 протягом 30-45 хвилин 3-4 рази, об'єднані витяжки відстоюють при 8-10 °C протягом 12-15 годин, фільтрують і проводять ліофільне висушування. UA 76238 U (12) UA 76238 U UA 76238 U 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 Корисна модель належить до галузі фармації і може використовуватися для удосконалення способу одержання фітоекстракту кореневищ герані болотної та створення на його основі ефективного індуктора інтерферону з противірусною, антибактеріальною, протипухлинною, в'яжучою, протизапальною дією для профілактики та лікування багатьох поліетіологічних інфекцій. У народній медицині використовуються настої та відвари кореневищ герані болотної як протизапальні, антисептичні, в'яжучі засоби [1]. Відомий спосіб одержання таких засобів, основні умови виконання якого включають кип'ятіння 2 чайних ложок сухих подрібнених кореневищ у 200 мл води протягом 7 хвилин, настоювання (1 година) і проціджування, не забезпечує максимальної екстракції основних діючих речовин з рослинної сировини, а самі фітопрепарати мають короткий термін зберігання. Недоліком вказаного способу є також те, що він не дає можливості одержати стабільну, стандартизовану субстанцію для створення лікарського засобу, придатного до застосування в медичній практиці і який виявляє слабкі інтерфероніндукуючі властивості. В основу корисної моделі поставлено задачу удосконалення способу одержання фітоекстракту кореневищ герані болотної, в якому шляхом проведення багатократного екстрагування рослинної сировини можна буде забезпечити повноту екстракції та високий вихід готового продукту, за рахунок чого буде досягнута його стабільність протягом 2-3 років і здатність стимулювати утворення інтерферону в макроорганізмі. Поставлена задача вирішується тим, що в способі одержання фітоекстракту кореневищ герані болотної, який включає екстрагування сировини, згідно з корисною моделлю, сухі, подрібнені кореневища герані болотної екстрагують водою очищеною при температурі 90-95 °C у співвідношенні (сировина-екстрагент) 1:20-1:30 упродовж 30-45 хвилин 3-4 рази, об'єднані витяжки відстоюють, фільтрують і проводять ліофільне висушування. Запропонований спосіб здійснюють таким чином. Сухі, подрібнені (розміри частинок 1,0-2,0 мм) кореневища герані болотної екстрагують водою очищеною при температурі 90-95 °C у співвідношенні (сировина-екстрагент) 1:20-1:30 упродовж 30-45 хвилин 3-4 рази, об'єднані витяжки відстоюють при 8-10 °C протягом 12-15 годин, фільтрують і проводять ліофільне висушування. Одержаний ліофілізований фітоекстракт являє собою комплекс біологічно активних речовин у вигляді гігроскопічного аморфного порошку світло-коричневого кольору без запаху із терпким в'яжучим смаком. Вихід готового продукту становить 40,0-43,0 % від вихідної сировини. Ліофілізат містить дубильні речовини, полісахариди, фенолкарбонові, органічні і аскорбінову кислоти та інші сполуки. Спосіб ілюструється наступними прикладами. Приклад 1 50 г подрібнених (розміри частинок 1,0-2,0 мм) сухих кореневищ герані болотної заливають 1000 мл киплячої води очищеної у співвідношенні (сировина-екстрагент) 1:20 і настоюють впродовж 30 хвилин на водяній лазні при температурі 90 °C. Екстракцію в круглодонній колбі ємністю 2000 мл повторюють тричі, після чого витяжки об'єднують, відстоюють 12 годин при температурі 8-10 °C і фільтрують. Фільтрат заливають у флакони по 250 мл і висушують за допомогою сублімаційного апарату, наприклад, КС-30. Вихід готового продукту становить 40,0 %. Приклад 2 50 г подрібненої (розміри частинок 1,0-2,0 мм) рослинної сировини кореневищ герані болотної заливають в круглодонній колбі ємністю 2000 мл киплячою водою очищеною у співвідношенні (сировина-екстрагент) 1:30 і настоюють упродовж 40 хвилин на водяному нагрівнику при температурі 92 °C. Екстрагування проводять ще 3 рази, після чого об'єднані витяжки відстоюють 14 годин при температурі 8-10 °C, фільтрують і проводять ліофільне висушування. Вихід ліофілізованого екстракту становить 42,0 %. Приклад 3 50 г сухих, подрібнених (розміри частинок 1,0-2,0 мм) кореневищ герані болотної вносять у круглодонну колбу ємністю 2000 мл, заливають 1500 мл киплячої води очищеної у співвідношенні (сировина-екстрагент) 1:30, настоюють впродовж 45 хвилин при температурі 95 °C на водяній бані та проціджують. Таку ж екстракцію проводять ще 3 рази. Одержані витяжки об'єднують, відстоюють 15 годин, фільтрують та ліофільно висушують. Вихід готового продукту становить 43,0 %. Для підтвердження інтерфероніндукуючої активності були проведені порівняльні дослідження фітоекстрактів одержаних за допомогою запропонованого способу і відомого 1 UA 76238 U 5 10 15 комерційного препарату аміксину на мишах лінії СВА, згідно з вимогами та методами, рекомендованими для оцінки індукторів інтерферону [2]. Отримані фітоекстракти з різним виходом готового продукту вводили тваринам масою 12-15 г внтрішньоочеревинно одноразово в дозах 100 мг/кг, що відповідали 1/3-1/6 ЛД50. Через 5, 24, 48, 72 год. у кожної з чотирьох піддослідних мишей проводили забір крові. У пробах сироваток крові визначали рівень інтерферону мікрометодом в культурі клітин L-929 по затримці цитопатичної дії тест-вірусу енцефаломіокардиту мишей. Препарат аміксин вводили перорально в дозі 200 мг/кг у відповідності до типової схеми його призначення. Результати вивчення інтерфероніндукуючої активності, які наведені в таблиці, свідчать про те, що запропоновані фітоекстракти в дозі 100 мг/кг індукують у мишей інтерферон в титрах 1280-5120 од/мл з піком активності через 24 год. після введення, натомість аміксин за аналогічних умов експерименту викликає подібне інтерфероноутворення в кількості 640-1280 од/мл. Проведені дослідження вказують на високу інтерфероніндукуючу активність одержаних ліофілізованих фітоекстрактів з кореневищ герані болотної, які за інтенсивністю стимуляції інтерферонової системи переважають відомий комерційний препарат аміксин у 3 рази. Таблиця Порівняльна оцінка інтерфероніндукуючої активності ліофілізованих фітоекстрактів з кореневищ герані болотної та аміксину Доза, мг/кг Препарат Фітоекстракт кореневищ герані болотної (Приклад 1) Фітоекстракт кореневищ герані болотної (Приклад 2) Фітоекстракт кореневищ герані болотної (Приклад 3) Аміксин 20 25 30 Титри інтерферону, од/мл в крові мишей через: 5 год. 24 год. 48 год. 72 год. 100 10 1280-2560 40