Спосіб визначення стрес-статусу свиней

Спосіб визначення стрес-статусу свиней, при якому підшкірно в середину зовнішньої поверхні вуха вводять скипидар (Oleum Terebinthinae), дослідження проводять шляхом заміру діаметра папули через заданий термін часу і поділяють свиней на категорії стрес-чутливи х або стрес-стійких, який відрізняється тим, що заміри діаметра папули проводять в чотири етапи - через 1 годину, 3 години, 6 годин і 24 години, причому свиней додатково поділяють ще на дві категорії гіпер-стресчутливи х та стрес-стійких з алергічними процеса C2 2 85791 1 3 85791 С.И. Плященко, А.С. Зеньков. - Мн.: «Ураджай». 1988. - С.114.]. Однак, галотанова проба потребує використання практично недоступного в умовах сучасного виробництва наркотичного газу галотану, дефіцитних апаратів інгаляційного наркозу або складноконструйованої маски; з боку тварин можливі небажані побічні явища та летальний вихід. Відомий спосіб визначення стрес-чутливості свиней А.І. Кузнецова та Ф.А. Сінагатуліна, при якому підшкірно в зовнішню поверхню вуха за допомогою МБІ-1 вводять 0,1мм 3 скипидару (Oleum Terebinthinае), дослідження проводять шляхом заміру діаметру папули через 24 години і поділяють свиней на категорії: діаметр папули 3,0см і більше - стрес-чутливі, діаметр папули 0,0-2,0см стрес-стійкї [див. Акимов С, Яценко Л., Оксинюк А. Оценка различных методов стрессчувствительности свиней// Свиноводство. - 1989. №22. - С.34-35.]. Однак, читка результатів досліджень через 24 години не дає можливості в повній мірі визначити до якої категорії можливо віднести кожну тварину, оскільки визначити тварин із категорії стресчутливи х можливо лише протягом 6 годин, наслідком цього є високий відсоток недостовірності. Крім того, така інтерпретація результатів є помилковою і не відповідає патогенетичним механізмам розвитку стресу та запальної реакції в організмі тварин. Завданням, на рішення якого направлений спосіб визначення стрес-статусу свиней, є підвищення відсотку достовірності досліджень розподілу тварин на категорії з одночасним зменшенням терміну дослідження, розширення варіантів можливого подальшого лікування або зоотехнологічних заходів по утриманню, догляду та розведенню тварин. Вказане завдання вирішується за рахунок того, що при здісненні способу визначення стресстатусу свиней, при якому підшкірно в зовнішню поверхню вуха вводять скипидар (Oleum Terebinthinae), проводять дослідження шляхом заміру діаметру папули через заданий термін часу і поділяють свиней на категорії стрес-чутливих або стрес-стійких, згідно з винаходом заміри діаметру папули проводять в чотири етапи - через 1 годину, 3 години, 6 годин і 24 години, причому свиней додатково поділяють ще на дві категорії гіпер-стресчутливи х та стрес-стійких, але з алергічними процесами в організмі, при цьому послідовно після кожного заміру визначають стрес-статус свиней, після першого вимірювання: якщо діаметр папули 0-1см - роблять висновок, що тварина гіпер-стресчутлива, якщо діаметр папули - 1-2см - роблять висновок, що тварина стрес-чутлива, якщо діаметр папули - 2см і більше - проводять подальше дослідження, після другого вимірювання: діаметр папули - 0-2см - роблять висновок, що тварина стрес-чутлива, якщо діаметр папули - 2-4см - проводять подальше дослідження, якщо діаметр папули -4см і більше - роблять висновок, що тварина стрес-стійка, після третього вимірювання: якщо діаметр папули - 0-1см - роблять висновок, що тварина стрес-чутлива, якщо діаметр папули - 13см - роблять висновок, що тварина стрес-стійка, 4 якщо діаметр папули - 3см і більше - проводять подальше дослідження, після четвертого вимірювання: якщо діаметр папули - 0-3,5см - роблять висновок, що тварина стрес-стійка, якщо діаметр папули - 3,5см і більше - роблять висновок, що тварина стрес-стійка, але с алергічними процесами в організмі, при тому якщо на одному із етапів досліджень тварину можливо віднести до однієї із категорій стрес-статусу, то подальше дослідження припиняють. Застосування пропонованого способу визначення стрес-статусу свиней дозволяє забезпечити наступний технічний результат: - з’являються більш чіткі критерії оцінювання результатів; - з’являється можливість визначення тварин з алергічними процесами в організмі, що важливо при плануванні проведення вакцинацій та щеплень; - скорочується термін проведення досліджень, зокрема, категорія стрес-чутливих тварин формується максимально у 6 годинний термін. Окрім того: - підвищується відсоток достовірності досліджень поділу тварин на категорії через розробку чітких критеріїв оцінювання результатів; - результати досліджень відповідають патогенетичним механізмам розвитку стресу та запальної реакції в організмі тварин. Сутність способу визначення стрес-статусу свиней пояснюється блок-схемою, див. Фіг.1. Патогенетичні основи способу визначення стрес-чутливості свиней та принципи розподілу тварин на категорії стрес-статусу: введення скипидару, як антигену-гаптену, провокує неспецифічну місцеву реакцію клітинного імунітету, процедура введення та власне скипидар є стрес-факторами для організму тварин. Таким чином, активується механізм стресової реакції організму та протилежний йому місцево запальної реакції. Стрес-чутливі свині мають підвищену активність системи гіпоталамус-гіпофіз-наднирники (ГГН), що позначається підвищеним рівнем гормонів кори наднирників та, як наслідок, гіпореактивністю імунної системи. Таким чином, місцева запальна реакція на введення скипидару у стрес-чутливи х тварин є маловираженою (діаметр папули не більше 2,0см впродовж 36 годин після введення). У стресстійких тварин система ГГН більш інертно реагує на дію стресфакторів, не виділяючи підвищену кількість глюкокортикостероїдів та не знижуючи імунну (місцеву запальну) реакцію організму. Таким чином, місцева реакція на введення у стрес-стійких тварин буде значно вираженою (діаметр папули впродовж 24 годин буде на рівні 2,0-3,0см). Про стан гіперреактивності імунної системи та наявності аутоімунних хвороб буде свідчити діаметр папули більше 3,5см через 24 години від моменту постановки реакції, що характеризує ослаблену активність системи ГГН. Додатковим підтвердженням ефективності розподілу свиней на категорії стрес-чутливості згідно запропонованого способу є експериментально досліджене нами (паралельно із застосуванням способу визначення стрес-статусу свиней) 5 85791 зниження кількості еозинофілів у стрес-чутливих тварин (у порівнянні зі стрес-стійкими): на стресфактор ці клітини відповідають загибеллю через апоптоз та припинення синтезу глюкокортикостероїдами факторів росту еозинофілів IL-5 (інтерлейкін-5), GM-CSF. Послідовність дій: після фіксації свиней їм за допомогою ін’єкційного пристрою вводиться 0,1мм 3 скипидару (Oleum Terebinthinae) підшкірно 6 в середину зовнішньої поверхні вуха, далі через 1 годину проводиться вимірювання діаметру папули, оцінка ступеня гіперемії та запального процесу у місці введення скипидару, стрес-статус тварини визначається, якщо результат реакції входить у визначені межі, якщо ні, то визначення стресстатусу здійснюється аналогічним чином через 3, 6 або 24 години. Читку результатів реакції зведено до таблиці 1. Таблиця 1 Стрес-статус Гіпер-стресчутливі Стрес-чутливі Стрес-стійкі Стрес-стійкі з алергічними процесами в організмі Необхідність у проведенні подальших досліджень 1 година 0,0-1,0 1,0-2,0 не визначається Діаметр папули, см 3 години 6 годин не визначається не визначається 0,0-2,0 0,0-1,0 4,0 і більше 1,0-3,0 не визначається не визначається не визначається більше 3,5 більше 2,0 2,0-4,0 більше 3,0 немає Здійснення способу є простим, для нього не використовуються дефіцитні та дорогі прилади і матеріали, потребуються лише:прилади: 24 години , не визначається не визначається 0,0-3,5 ін’єкційний пристрій (ін’єктор МБІ-1, шприць з голкою), кутиметр або лінійка;матеріал: скипидар (терпентинова олія - Oleum Terebinthinae) 7 Комп’ютерна в ерстка В. Клюкін 85791 8 Підписне Тираж 28 прим. Міністерство осв іт и і науки України Держав ний департамент інтелектуальної в ласності, вул. Урицького, 45, м. Київ , МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислов ої в ласності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601