Спосіб діагностики демодекозу

Реферат: Винахід належить до медицини, зокрема паразитології і косметології, а також біофізики, і може бути використаний в практиці лабораторних досліджень, у тому числі паразитологічної діагностики. Спосіб діагностики демодекозу включає етап взаємодії на адгезивній плівці виділеного із шкіри пацієнта збудника демодекозу - кліща Demodex folliculorum - із водним розчином декасану під оптично прозорою адгезивною плівкою на предметному склі впродовж 23 год. при температурі 18-22 °C із наступним виявленням у полі зору поляризаційного мікроскопа закристалізованих у формі тетраедра паразитів. UA 99803 C2 (12) UA 99803 C2 UA 99803 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 Винахід належить до медицини, зокрема паразитології і косметології, а також біофізики, а саме фізики поверхонь біологічних і небіологічних об'єктів, і може бути використаний в практиці лабораторних досліджень, у тому числі паразитологічної діагностики. Відомий спосіб діагностики демодекозу, що включає етап взаємодії на адгезивній плівці виділеного із шкіри пацієнта кліща Demodex folliculorum - збудника демодекозу з наступним дослідженням у полі зору поляризаційного мікроскопа [1]. За відомим способом фіксованого на адгезивній оптично прозорій плівці збудника демодекозу, а саме кліща, виявляють за характерними ознаками його форми та картиною поляризованої флуоресценції. Недоліком відомого способу є недостатній рівень точності та інформативності, що випливає з невиразності структуральних особливостей кліща на поверхні мікропрепарату, нестійкості анатомічної форми нефіксованого (нативного) тіла збудника в результаті контакту його з газовим середовищем поза організмом людини. При цьому слід взяти до уваги поліморфність кліща в окремі стадії його розвитку за короткий проміжок часу, що обмежується годинами. В основу винаходу поставлена задача вдосконалити відомий спосіб, в якому шляхом зміни технології виготовлення мікропрепарату, спрямованої на ініціацію вимушених структуральних перетворень кліща з одночасною фіксацією його форми без втрат оптичної активності досягають підвищення точності та інформативності. При вирішенні технічного завдання було взято до уваги те, що антисептичний засіб декасан забезпечує протимікробну, противірусну і фунгіцидну активність шляхом деструкції мембранних структур вказаних мікрооб'єктів на молекулярному рівні, що супроводжується їх знерухомленням та кристалізацією при висиханні. Цілком зрозумілою з наведеного постає здатність декасану викликати аналогічний денатураційний вплив на такий живий мікрооб'єкт як кліщ Demodex folliculorum. Попередніми експериментальними дослідженнями було встановлено деструктивну дію на вказаного кліща водного розчину декасану у 0,02 % концентрації, що супроводжується його знерухомленням та подальшою кристалізацією у вигляді крупних кристалів у формі тетраедра. Останнім притаманна висока оптична активність у поляризованому світлі. Беручи до уваги наведені вище міркування, у відомому способі діагностики демодекозу, що включає етап взаємодії на адгезивній плівці виділеного із шкіри пацієнта кліща D. folliculorum збудника демодекозу - з наступним дослідженням у полі зору поляризаційного мікроскопа, відповідно до винаходу на предметному склі під плівку вводять принаймні 10 мкл 0,02 % водного розчину декасану, витримують мікропрепарат упродовж 2-3 год. при температурі 18-22 °C, після чого у полі зору мікроскопа виявляють закристалізованих у формі тетраедра паразитів. Перелік фігур. Фіг. 1. Кристалізований збудник демодекозу всередині кристалу декасану. Поляризована флуоресценція. ЛЮМАМ Р 8: Об. Х9; ок. Х15 Фіг. 2. Вигляд збудника демодекозу у полі зору поляризаційного мікроскопа в контрольному мікропрепараті. ЛЮМАМ Р 8: Об. Х9; ок. Х15 Спосіб здійснюють наступним чином. Щойно зняту з шкірної поверхні пацієнта адгезивну оптично прозору плівку обережно переносять на предметне скло, а під плівку відразу вводять принаймні 10 мкл 0,02 % водного розчину декасану, витримують мікропрепарат упродовж 2-3 год. при температурі 18-22 °C, після чого у полі зору мікроскопа виявляють закристалізованих у формі тетраедра паразитів. Приклад 1 Зі шкіри пацієнтки Н., 30 років, обережно зняли раніше накладену оптично прозору адгезивну плівку і перенесли її на предметне скло. Під плівку за допомогою шприца відразу ввели 10 мкл 0,02 % водного розчину декасану, витримали упродовж 2 год. при температурі 20 °C і досліджували у полі зору мікроскопа за методом поляризованої флуоресценції. Спостерігали вмонтованих всередину кристалу декасану у формі тетраедра кліщів (фіг. 1), тоді як в контрольному препараті, виготовленому за відомим способом (фіг. 2), збудник характеризувався менш виразною структурою і флуоресценцією. Приклад 2 За запропонованим способом проведено дослідження фіксованого на адгезивній оптично прозорій плівці біометеріалу від 6 пацієнтів. У 5 з них виявлено наявність кристалізованих кліщів, які значно контрастніше висвічували у полі зору мікроскопа. Таким чином, запропонований спосіб забезпечує вищий, ніж за способом-прототипом, рівень точності та інформативності паразитологічного дослідження, і може бути використаний як в лабораторній діагностичній практиці, так і наукових дослідженнях. Джерело інформації: 1 UA 99803 C2 1. Пат. 91611 UА. А61В10/00, G01N 33/483. Діагностикум для виявлення шкірних паразитів збудників демодекозу/ Андрейчин М.А., Ковальчук М.Т., Дем'яненко В.В (UA). - № a200813068 від 10.08.2010; опубл. 10.08.2010; Бюл. 15. 5 10 ФОРМУЛА ВИНАХОДУ Спосіб діагностики демодекозу, що включає етап взаємодії на адгезивній плівці виділеного із шкіри пацієнта кліща Demodex folliciilorum - збудника демодекозу, з наступним дослідженням у полі зору поляризаційного мікроскопа, який відрізняється тим, що на предметному склі під плівку вводять принаймні 10 мкл 0,02 % водного розчину декасану, витримують мікропрепарат упродовж 2-3 год. при температурі 18-22 °C, після чого у полі зору мікроскопа виявляють закристалізованих у формі тетраедра паразитів. Комп’ютерна верстка В. Мацело Державна служба інтелектуальної власності України, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 2