Спосіб виготовлення гістологічних зрізів із тонкого фрагмента тканини

Реферат: Спосіб виготовлення гістологічних зрізів із тонкого фрагмента тканини включає фіксацію об'єкта у розчині формаліну. Потім зневоднюють у спиртах висхідної концентрації. Після цього занурюють об'єкт у суміш спирту та ксилолу, а потім у чистий ксилол. Після здійснюють заливку у парафін та фарбування. UA 77210 U (12) UA 77210 U UA 77210 U 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 Корисна модель належить до клінічної та експериментальної медицини, а саме до діагностики патологічних процесів у тканинах залоз, і може бути використана при виготовленні гістологічних зрізів з тонких фрагментів тканини, що залишились після проведення експресбіопсії. Субопераційна експрес-діагностика вузлових новоутворень у щитоподібній залозі є надійним способом, що забезпечує адекватне хірургічне лікування при доброякісних та злоякісних процесах. Процес діагностики вузлів при субопераційній експрес-біопсії передбачає подальше гістологічне дослідження частини вузла, що залишилась. Для цього виготовляються гістологічні зрізи за звичайною методикою [1-3]: - фіксація шматочків тканини у 10 % розчині формаліну протягом 24-48 годин; - зневоднення у спиртах висхідної концентрації протягом 1-2 діб; - підготовка до заливки у парафін шляхом занурення об'єкта на 3-4 години у суміш 96 % спирту та ксилолу у співвідношенні 1:1, а потім ще на добу у чистий ксилол; - заливка у парафін; - виготовлення гістологічних зрізів на мікротомі; - фарбування гістологічних зрізів за стандартною методикою гематоксиліном і еозином; - накладення покривного скла на зріз. Такий порядок дослідження є можливим, якщо розміри вузлів більше ніж 1 см. Тканини такого вузла достатньо для виготовлення гістологічних зрізів при субопераційній експрес-біопсії та для звичайній методиці виготовлення гістологічних зрізів. Новоутворення, розміри яких 0,3-0,9 см, вимагають економного ставлення до них: необхідно одну частину вузла відправити на субоперційну експрес-біопсію, а другу частину вузла зберегти для звичайної методики виготовлення гістологічних зрізів. Якщо розміри вузла 0,3-0,5 см, увесь вузол направляється на експрес-діагностику. У таких випадках виникає необхідність зберегти частину замороженого фрагмента, що залишилась після проведення експрес-біопсії та виготовити з неї гістологічні зрізи для подальшої діагностики. Ця частина замороженого фрагмента дуже тонка, її товщина не перевершує 1,0-1,5 мм і звичайна методика виготовлення гістологічних зрізів в цьому випадку не забезпечує зображення високої якості. Задача корисної моделі - розробка способу виготовлення гістологічних зрізів із тонких фрагментів тканини, що залишилась після експрес-діагностики, який дозволяє отримати гістологічні препарати високої якості. Поставлена задача вирішується тим, що для виготовлення гістологічних зрізів з тонких фрагментів тканини, що залишилась після проведення експрес-біопсії об'єкт фіксують у розчині формаліну протягом 3-5 годин, з наступним зневодненням у спиртах висхідної концентрації протягом 1 години, а підготовка до заливки у парафін полягає у зануренні об'єкта на 15 хвилин у суміш 96 % спирту та ксилолу у співвідношенні 1:1, а потім ще на 15 хвилин у чистий ксилол. Запропонований спосіб виготовлення гістологічних зрізів здійснюється наступним чином: - фіксація фрагмента вузла, що залишився після експрес-біопсії, занурюють у 10 % розчин формаліну, не допускаючи його відтаювання. Фіксація проходить повільно, протягом 3-5 години, що дає можливість уникнути грубого коагулювання білків; - зневоднення тонкого фрагмента проводять у спиртах висхідної концентрації у короткий час, що попереджує структурні зміни. Спочатку об'єкт занурюють у 70 % спирт на 30 хвилин, потім у 96 % спирт ще на 30 хвилин; - підготовка до заливки у парафін: перед заливкою у парафін об'єкт занурюють у суміш 96 % спирту з ксилолом (1:1) на 15 хвилин, потім у чистий ксилол ще на 15 хвилин. Перетримка тонких фрагментів у ксилолі недопустима, так як це робить шматочки тканини крихкими; - заливку у парафін та фарбування проводять за стандартною методикою. Технічний результат - підвищення точності діагностики патологічних процесів у тканинах за рахунок високої якості гістологічних препаратів. Спосіб апробовано у клініці Інституту Проблем ендокринної патології ім. В.Я. Данилевського НАМИ України. На кресленнях представлені зображення гістологічних препаратів з папілярними структурами, що виготовлені за стандартною (фіг. 1) та розробленою методикою (фіг. 2). На фіг. 1 можна бачити папілярні структури зі стромою, що набрякла, фолікулярний епітелій збережений лише осередками, поверхнева частина клітинної мембрани пошкодження. Такі пошкодження виникають при тривалій фіксації в формаліні. Тривале перебування тонкого фрагмента тканини в ксилолі призвело до таких структурних змін, як розволокнення строми. На фіг. 2 зображені папілярні структури зі збереженим фолікулярним епітелієм і стромою. 1 UA 77210 U 5 10 Таким чином, розроблений спосіб виготовлення гістологічних препаратів із тонких фрагментів тканини, що залишилась після проведення експрес-біопсії (замороження) дозволяє отримати зображення високої якості і дає змогу уникнути діагностичної помилки. Джерела інформації: 1. Меркулов, Г.А. Курс гистологической техники [Текст] / Г.А. Меркулов. - М.: Медицина, 1969. - С. 23-39. 2. Автандилов, Г.Г. Введение в количественную патологическую морфологию [Текст]. - М.: Медицина, 1980. - С. 29-42. 3. Елисеев, В.Г. Основы гистологии и гистологической техники [Текст] / В.Г. Елисеев, М.Я. Суботин, Ю.Л. Афанасьев. - М.: Медицина, 1967. - С. 40-60. 4. Пинский, С.Б. Качественных опухолей головы и шеи / С.Б. Пинский, И.М. Кругляков, О.В. Рижков; под ред. О.В. Ольшанского. - М.: 1991. С. 102-119. ФОРМУЛА КОРИСНОЇ МОДЕЛІ 15 20 Спосіб виготовлення гістологічних зрізів із тонкого фрагмента тканини шляхом фіксації об'єкта, його зневоднення, заливки у парафін та фарбування, який відрізняється тим, що фіксація у розчині формаліну триває 3-5 годин, зневоднення у спиртах висхідної концентрації проводять протягом 1 години, а підготовка до заливки у парафін полягає у зануренні об'єкта на 15 хвилин у суміш 96 % спирту та ксилолу у співвідношенні 1:1, а потім ще на 15 хвилин у чистий ксилол. 2 UA 77210 U Комп’ютерна верстка С. Чулій Державна служба інтелектуальної власності України, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 3