Спосіб прискореного розмноження сортів картоплі в умовах in vitro

Реферат: Спосіб прискореного розмноження сортів картоплі включає термотерапію бульб картоплі, виділення апікальної меристеми з паростків, пересадку на поживне середовище, живцювання рослин in vitro. Додатково в середовище Мурасіге-Скуга додають 0,001 % розчин онієвих похідних дигідропіридину, який прискорює ріст рослин в 2,5 рази. UA 88208 U (12) UA 88208 U UA 88208 U 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Корисна модель належить до галузі сільського господарства, зокрема до способів розмноження картоплі. В картоплярстві відомі багато способів розмноження сортів картоплі в умовах in vitro та in vivo. Останньою тенденцією сучасного насінництва картоплі є використання вихідного матеріалу, оздоровленого шляхом термотерапії та культури меристемної тканини, у поєднані із клональним розмноженням [5]. Вони відпрацьовані відповідно їх призначенням і відрізняються між собою [1, 2, 3]. Найближчим аналогом є спосіб розмноження картоплі в умовах in vitro [6, 7]. Найближчий аналог включає в себе виділення меристеми до утворення рослин з 5-6 листочками, яке складає 25-30 днів, регенерація рослини із меристеми відбувається кожні 10-15 днів з пересадкою на нову порцію поживного середовища. Для культивування рослин in vitro використовували поживне середовище з основою Мурасіге-Скуга модифіковане Інститутом картоплярства НААН. В якості стимулятору росту додається 0,001 % індолілоцтова кислота [6]. Коли рослина утворювала 5-6 листочків, її живцювали. Живці включають в себе частину стеблі з листочком і пазуховою брунькою. Кожен з яких пересаджували у пробірки із середовищем на глибину міжвузля так, щоб пазухова брунька живця була дещо вище рівня середовища, для регенерації рослин. Згадані способи та спосіб-прототип мають такі недоліки: 1. Вони є трудомісткими. 2. Їх використання пов'язане з затратою часу. Дослідженнями науковців [4], які б у повній мірі охоплювали поведінку онієвих похідних дигідропіридину відсутні, тому було поставлено задачу вивчити їх стимулюючу дію на ріст рослин картоплі в умовах in vitro і розробити спосіб прискореного розмноження сортів картоплі в даних умовах. Поставлена задача вирішується тим, що у запропонованому способі після додання в поживне середовище Мурасіге-Скуга 0,001 % розчину онієвих похідних дигідропіридину, через 10 днів з кожної рослини вдається живцювати нових 6 живців і отримати нові рослини. 1. Запропонований спосіб не трудомісткий. 2. Використання даної речовини стимулює ріст живцьованих рослин в 2,5 рази. Отже, спосіб, що заявляється, відповідає критерію корисної моделі "новизна" та "суттєві відміни". ПРИКЛАДИ ЗДІЙСНЕННЯ СПОСОБІВ Приклад 1. Закладали бульби сортів картоплі Слов'янка, Червона рута, Серпанок, Калинівська та Поліське джерело на термотерапію із розрахунку продуктивних вічок, які є потенційним матеріалом для вичленення найбільш життєздатних апікальних меристем [5]. Період від виділення меристеми до утворення рослин з 5-6 листочками складав 25-30 днів. Деякі меристеми регенерували рослину за 2-8 місяців. Протягом періоду регенерації рослини з меристеми кожні 10-15 днів пересаджували на нову порцію живильного середовища. Для культивування рослин in vitro використовували поживне середовище з основою Мурасіге-Скуга модифіковане Інститутом картоплярства [6, 7]. Коли рослина утворювала 5-6 листочків, її живцювали. Живці включають в себе частину стебла з листочком і пазуховою брунькою. Кожен з яких пересаджували у пробірки із середовищем на глибину міжвузля так, щоб пазухова брунька живця була дещо вище рівня середовища, для регенерації рослин. На 3-4-й день після садіння живців починався ріст стебла і коренів. Через 20 днів рослини повністю відростали і утворювали повноцінну рослину. Режими культивування: температура - 22±30 °C, вологість повітря -70-75 %, освітленість - 23 тис. люкс, фотоперіод - 16 годин освітлення. За даний період розмножено по 36 рослин сортів картоплі Слов'янка, Калинівська, Серпанок, Поліське джерело та 25 рослин сорту Червона рута (таблиця 1, додаток 1; рис. 1, додаток 2). Рис. 1: Сорти картоплі, розмножені на поживне середовище Мурасіге-Скуга (найближчий аналог). Приклад 2. Закладка бульб сортів картоплі Слов'янка, Червона рута, Серпанок, Калинівська та Поліське джерело на термотерапію та виділення меристем проводили за способом прототипом. Після живцювання рослин їх переносили на поживне середовище Мурасіге-Скуга і додавали 0,001 % розчин онієвих похідних дигідропіридину. Через 10 днів знову проводили живцювання 1 UA 88208 U 5 10 15 20 25 30 рослин при такому ж режимі культивування: температура - 22±30 °C, вологість повітря - 7075 %, освітленість - 2-3 тис. люкс, фотоперіод - 16 годин освітлення. Таким чином, після додавання в поживне середовище Мурасіге-Скуга 0,001 розчину онієвих похідних дигідропіридину через 10 днів з кожної рослини вдалось живцювати нових 5-6 живців і отримати нові рослини. У результаті живцювання сорту картоплі Слов'янка, Серпанок, Поліське джерело отримано 72 пробіркових рослин; Червона рута - 62; Калинівська - 68 рослин (таблиця 1, додаток 1; рис. 2, додаток 3). Рис. 2: Сорти картоплі, розмножені на середовище Мурасіге-Скуга з додаванням 0,001 % розчину похідних дигідропіридину. Процес розмноження сортів картоплі Слов'янка, Червона рута, Серпанок, Калинівська, Поліське джерело склав 10-15 днів, а способом прототипом - 20-25 днів. Запропонований нами спосіб забезпечує прискорене розмноження сортів картоплі і отримання здорового насіннєвого матеріалу. Джерела інформації: 1. Калинин Ф.Л. Технология микроклонального размножения растений / Ф.Л. Калинин, Г.П. Кушнир, В.В. Сарнацкая. - К.: Наук. думка, 1992. - 232 с. 2. Картопля / За ред. В.В. Кононученка, М.Я. Молоцького. - Біла церква, 2002. - T. 1. - С. 379435. 3. Кушнір Г.П. Мікроклональне розмноження рослин. Теорія і практика. / Г.П Кушнір, В.В Сарнацкая, - К.: Наук. думка, 2005. - 242 с. 4. Кушнір О В. Електрофільні гетероциклізації єнамінів та споріднених реагентів / О.В. Кушнір, М.В. Вовк. //Журнал органічної та фармацевтичної хімії. - 2013. - Т. 11, Вип. 2(42). С. 2028. 5. Мельник П.О Оптимізація середовища для культивування рослин картоплі / П.О. Мельник, Г.М Шевага // Актуальне проблемы иммунитета и защиты сельскохозяйственных культур от болезней и вредителей: Тезисы докладов международной научно-практической конференции 11-14 сентября 2007. - Одесса, 2007. - С. 53. 6. Методичні рекомендації щодо проведення досліджень з картоплею / Інститут картоплярства. Немішаєве, 2002. - 182с. 7. Методичні рекомендації. Оздоровлення сортів картоплі методом культури апікальних меристем. / [Т. М. Олійник, К. А. Слободян, О. О. Шевченко та ін.]: Ін-т картоплярства НААН. Немішаєве. - К.:ТОВ "КВІЦ", 2012. - 28 с. Таблиця 1 Кількість живцьованих рослин сортів картоплі в умовах in vitro, отриманих різними способами (2013 р.) № п/п 1. 2. 3. 4. 5. Сорти картоплі Слов'янка Червона рута Серпанок Калинівська Поліське джерело Кількість отриманих рослин (шт.) Способом прототипом Способом, що заявляється 36 72 25 62 36 72 36 74 36 72 35 ФОРМУЛА КОРИСНОЇ МОДЕЛІ 40 Спосіб прискореного розмноження сортів картоплі, що включає термотерапію бульб картоплі, виділення апікальної меристеми з паростків, пересадку на поживне середовище, живцювання рослин in vitro, який відрізняється тим, що в середовище Мурасіге-Скуга додають 0,001 % розчин онієвих похідних дигідропіридину, який прискорює ріст рослин в 2,5 рази. 2 UA 88208 U Комп’ютерна верстка І. Скворцова Державна служба інтелектуальної власності України, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 3