Спосіб знезараження гною в тваринницких господарствах

Реферат: UA 85722 U UA 85722 U 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Корисна модель належить до ветеринарії і може бути використана для знищення у гною патогенної мікрофлори, личинок гельмінтів і ооцист еймерій в тваринницьких господарствах. Ця галузь народного господарства швидко набирає оберти. Безвигульний спосіб утримання тварин і густота посадки призводить до того, що технологія вирощування суперечить фізіологічним особливостям свиней. Тому ризик передачі збудника інфекції від хворої тварини здоровій безумовно зростає. Для того, щоб зменшити мікробний тиск на свиней у приміщенні необхідно застосовувати ефективні і малотоксичні дезінфектанти. Як аналог вибрано винахід (патент RU2379236), що належить до способу утилізації стічних вод у сільському господарстві для підготування рідких відходів тваринницьких комплексів і ферм для зрошення і оброблення сільськогосподарських угідь, який містить 10 % суспензію 3 3 шламу карбіду кальцію в кількості 0,5-2,0 г/дм або 10 % вапняне молоко у кількості 0,1-1,0 г/дм та суміш суспензії дигідрату сульфату кальцію з ортофосфорною кислотою у співвідношенні 3 500:1 в кількості 6,0-15,0 г/дм . Для підтримання реакції використовують магнітну індукцію. Технологія отримання концентрату дезінфікуючої речовини відрізняється складністю і тривалістю процесу з застосуванням спеціального обладнання, що унеможливлює його використання в умовах сільського господарства. Крім того, такі складові концентрату, як вапняне молоко або ортофосфорна кислоти є достатньо токсичними сполуками, які потім потрапляють у ґрунт і можуть знищувати нормальну ґрунтову мікрофлору. На відміну від вказаного концентрату в нашому випадку концентрат дезінфікуючої речовини своєму складі не має токсичних та небезпечних речовин. Відомий також винахід (патент RU2391820) належить до засобів для дезінфекції може застосовуватись для дезінфекції у лікувально-профілактичних закладах, дезінфекційних станціях, у ветеринарії для очищення каналізації і т. п. Дезінфектант складається з четвертинної амонійної сполуки додоцеламіну 0,2-20,0, неіоногенного або амфотерної ПАР 0,1-10,0, багатоатомного спирту 0,1-20,0 і води до 100 %. До недоліків цього засобу належить те, що змішування діючих речовин може призводити до значного зниження дезінфікуючих властивостей. Також складові цього засобу достатньо дорогі, а для знищення личинок глистів та ооцист еймерій необхідно збільшити концентрацію препарату, що може призвести до економічно не виправданих витрат (Федорова Л.С. Научнометодические основы совершенствования и оптимизации выбора дезинфицирующих средств. Материалы Всероссийской научной конференции, посвященной 70-летию научноисследовательского института дезинфектологии Министерства здравоохранения Российской Федерации 22-24 октября 2003 года. - с. 44-46). За найближчий аналог вибрано засіб, що застосовується для дезінфекції туалетів та стічних вод (пат. РФ 2263708, МПК C11D 3/48, Б.И. 31, 2005 г.). при наступному співвідношенні компонентів, мас. %: неіонна поверхнево-активна речовина 5,0-20,0; ялицева олія 2,2-3,0; фарба водорозчинна 0,001-0,2 та вода - решта. До недоліків засобу належить недостатня бактерицидна активність, тому що ялицева олія не має вираженого дезінфікуючого ефекту. В основу корисної моделі поставлена задача створення способу ефективного знищення патогенної мікрофлори, личинок гельмінтів та ооцист еймерій свиней у гною, що дозволяє скоротити економічні збитки від цього захворювання та розробити ефективний спосіб дезінфекцій та дезінвазії щодо культури яєць гельмінтів і ооцист еймерій. Поставлена задача вирішується тим, що запропонований в нашому випадку препарат при поєднанні обох біоцидних компонентів в зазначеному співвідношенні забезпечує синергічну дію та суттєво відтерміновує можливість розвитку резистентності мікроорганізмів до цього комплексного дезінфектанту. Обидві діючі речовини (полігексан і додицилдипропілен триамін) повністю зберігають свої властивості після замерзання та відтаювання. Для цього здійснюють обробку зовнішнього середовища (підлоги, підстилки, гною) дезінфектантом. Як дезінфектант використовують препарат БІ-ДЕЗ™, який містить, мас. %: полігексан - 6,5 додицилдипропілен триамін - 6,5 та допоміжні компоненти: глютамінову кислоту, кокоамідопропіл-бетаїн та демінералізовану воду - до 100 %. Дезінфектант використовують 2 дозою 0,5 л на 1 м . Полігексан є біоцидом широкого спектра антимікробної активності щодо грампозитивних і грамнегативних бактерій, вірусів та грибів. Оброблені поверхні наділяє пролонгованимбактерицидним ефектом (Лисица А. В. Влияние полигексаметиленгуанидина гидрохлорида на плазматическую мембрану фибробластов куриных ембрионов и на искусственную двухслойную липидную мембрану / А. В. Лисица, П. Ю. Кривошея, О. Я. Шатурский // Институт эпизоотологии УААН, Ровно - 2010. - № 2 - С. 51-56.) Додицилдипропілен триамін - біоцид з чудовими антимікробними, антивірусними, фунгіцидними, альгіцидними та дезодоруючими властивостями. Виконує роль антибіотика, 1 UA 85722 U 5 10 15 20 25 фунгіциду і альдегіду. Триамін є активною домішкою для використання у дезінфікуючих композиціях і суміщається з аніонними, неіоногенними і катіонними поверхнево-активними речовинами (Норманский В.Е. О туберкулоицидном действии некоторых дезинфицирующих средств / В.Е. Норманский, Л.П. Мартынова, Л.Н. Черноусова, Д.Е. Те, Е.К. Логинова // ЦНИИ туберкульоза РАМН, Москва - 2008. - №4 - С. 106-107.). Поєднання даних антимікробної дезінфікуючої речовини (АДР) із застосованими допоміжними компонентами додатково забезпечує високу мийну здатність робочих розчинів. Дослідження біоцидної активності проводили усталеними мікробіологічними методами (Методичні рекомендації щодо випробування і застосування засобів дезінфекції та дезінвазії у ветеринарній медицині /Завгородній А.І., Павленко С.В., Луценко Л.І. та ін. / ННЦ Ін-т експерим. і клініч. вет. мед. - X., 2005.-17 с.; Справочное пособие / А.Н. Головко, В.А. Ушкалов, В.Г. Скрыпник, Б.Т. Стегний и др.; Под ред. А.Н. Головко. - X. "НТМТ", 2007.-512 с.; Експериментальне визначення дезінвазійних властивостей препарату Септодор-форте/ Дахно І.С., Негреба Ю.В., Лазоренко Л.М., Дахно Г.П. // Вет. медицина між від. Темат. Наук. 36. - X., 2008. - Вип. 91. - С. 179-183.) Серед 290 досліджених проб фекалій від домашніх тварин і птиці 200 проб були інвазовані яйцями гельмінтів. У пробах фекалій від великої рогатої худоби виявлено яйця та личинки стронгілідного типу (родина Strongylidae spp.); у пробах фекалій від кіз - Nematodirus spathiger та яйця стронгілідного типу; у фекаліях від свиней - аскариди (Ascaris suum) та езофагостоми збудник Oesophagostomum dentatum (родина Trichonematidae); від качок - капілярії Thominx contorta; від курей - аскаридії (Ascaridia galli). Для проведення досліджень відібрали 200 інвазованих проб. Для постановки досліду по кожному виду тварин і птиці, в яких були виявлені яйця гельмінтів, сформували по 3 дослідні і 1й контрольній групі по 10 тварин в кожній групі. Пропонований препарат БІ-ДЕЗ™ для дезінфекцію гною містить такі компоненти, мас. %: Полігексан Додицилдипропілен триамін та допоміжні компоненти: глютамінову кислоту, кокоамідопропіл-бетаїн та демінералізовану воду Дослід № 1 1,0 % (100 мл на 10 л води) Дослід № 2 1,5 % (150 мл на 10 л води) Дослід № 3 2,0 % (200 мл на 10 л води) 30 35 6,5 6,5 до 100 %. Для отримання личинок проби фекалій поміщали в чашки Петрі на 4-6 діб при температурі 26 °C. В чашки Петрі до проб фекалій 3-х дослідних груп тварин додавали теплі (18 °C) розчини 3 3 2 дезінфектанту відповідно із розрахунку 1,4 см на одну чашку Петрі (200 см /м ) та залишали в термостаті на 1 та 2 год. 3 До фекалій від контрольної групи тварин додавали 1,4 см водопровідної води кімнатної температури. При досліджені проб фекалій від контрольних і дослідних груп тварин, інвазованих личинками гельмінтів, було встановлено наступні результати: у кожній з проб фекалій від великої рогатої худоби інтенсивність інвазії складала від 45 до 85 личинок стронгілідного типу; у пробах від кіз - по 5-10 личинок нематовірусів; у кожній пробі фекалій від свиней виявлено по 25-50 личинок аскарид та по 45-50 личинок езофагостом; у кожній пробі від качок - по 12-15 капілярій та по 10-20 аскаридій від курей. Результати дії дезінфектанту на личинки нематод наведено в таблиці 1. 40 2 UA 85722 U Таблиця 1 Відсоток загибелі личинок гельмінтів у пробах фекалій сільськогосподарських тварин і птиці, M±m, n=10 Проби від великої рогатої худоби і кіз Strongylidae spp. Проби від кіз Проби від свиней Проби від качок Проби від курей Nematodirus Oesophagosto Thominx Ascaris suum Ascaridia galli spathiger mum dentatum contorta К-ть К-ть К-ть К-ть К-ть К-ть личин личино личино личино личино личино % ок, % % % % % к к к к к загибл взяти загибли загибл загибли загибл загибли взятих взятих взятих взятих взятих их ху х их х их х у у у у у дослі дослід дослід дослід дослід дослід д Експозиція 60 хв. 40,2±0, 90,0±1 6,2±0, 95,5±1,1 26,9±1, 88,0±2, 52,7±1, 91,5±1, 8,1±0,7 98,0±2 15,3±0, 95,6±1, 1 75 ,8 32 5** 63 8 43 67* 2 ,2* 7 7* 69,6±1, 5,7±0, 27,6±0, 47,2±1, 5,9±1,6 15,2±1, 2 100 100 100 100 100 100 35 74 45 39 4 0 45,8±1, 7,5±1, 40,6±1, 46,8±1, 17,9±1, 17,8±1, 3 100 100 100 100 100 100 24 81 30 58 32 04 Контро 70,1±1, 5,6±0, 30,7±1, 60,6±1, 16,2±0, 0 0 0 0 8,5±1,1 0 0 ль 29 75 42 41 88 Експозиція 120 хв. 40,2±0, 96,6±1 6,2±0, 97,8±1,0 26,9±1, 93,7±1, 52,7±1, 95,8±1, 8,1±0,7 15,3±0, 99,5±0, 1 100 75 ,2* 32 5** 63 85 43 27* 2 7 5*** 69,6±1, 5,7±0, 27,6±0, 47,2±1, 5,9±1,6 15,2±1, 2 100 100 100 100 100 100 3574 45 39 4 0 45,8±1, 7,5±1, 40,6±1, 46,8±1, 17,9±1, 17,8±1, 3 100 100 100 100 100 100 24 81 30 58 32 04 Контро 70,1±1, 5,6±0, 30,7±1, 60,6±1, 16,2±0, 0 0 0 0 8,5±1,1 0 0 ль 29 75 42 41 88 № дослід у Примітка. Вірогідність різниці: *Р0,05; **Р0,01; ***Р0,001 відносно контролю 5 10 15 20 З результатів, наведених в таблиці 1, видно, що у досліді № 1 дезінфектант через 1 год. знищує 90 % личинок Strongylidae spp., а через 2 год. - 96,6 %; личинок Nematodirus spathiger через 1 год. на 95,5 %, через 2 год. - 97,8 %; нематод Ascaris suum через 1 год. - 88 %, через 2 год. - 93,7 %; Oesophagostomum dentatum - 91,5 % та відповідно 95,8 %; Thominx contorta відповідно 98 % та 100 %; Ascaridia galli 95,6 % та 99,5 % відповідно. У досліді № 2 і № 3 дезінфектант повністю інактивує збудників всіх досліджених видів личинок вже через 1 год. Отже, розчин дезінфектанту у досліді № 3 може бути використаний для дезінвазії тваринницьких приміщень. Для визначення бактерицидної активності суміші для дезінфекції гною застосовували наступний метод. Для дослідження проб фекалій в пробірках готували методом послідовних розведень. До дослідних пробірок додавали дезінфектант в різних концентраціях. Частину пробірок залишали 3 для контролю. Готували наступні розведення таким чином: 10 см суспензії брали стерильною 3 градуйованою піпеткою, переливали у пробірку і додавали 9 см стерильної дистильованої води. Таким чином отримували розведення 1:100. Аналогічним чином отримали розведення 1:1000. Після приготування останнього розведення проводили посів спочатку на м'ясопептонний 3 бульон, а потім пересівали у три чашки Петрі на МЛА по 1 см . Експозиція зразків у термостаті тривала 48 діб при температурі 22 °C (табл. 2). 3 UA 85722 U Таблиця 2 Бактерицидні властивості препарату для дезінфекції гною № досліду 1 2 3 контроль Птиця + Свині + ВРХ + Примітки: "+" - наявний ріст; "-" - ріст відсутній. 5 10 15 20 25 30 35 Виходячи з отриманих даних, можна зробити висновок, що дезінфектант в концентрації відповідно досліду № 1, № 2, № 3 проявляє бактерицидні властивості у фекаліях, так як у чашках Петрі на МЛА росту мікроорганізмів не виявлені. У контрольних зразках, до яких не додавали дезінфектант виділяли суцільний ріс мікроорганізмів на МЛА. Запропонований спосіб дозволяє знешкоджувати мікроорганізми навіть у найменших концентраціях розчину, тому дозволяє його використовувати для дезінфекції гною. Проведені дослідження спрямовані на встановлення ефективності дії препарату БІ-ДЕЗ™ на ооцисти еймерій свиней. Дослідження проведені на базі Сумської регіональної державної лабораторії ветеринарної медицини. Проби матеріалу були відібрані від спонтанно заражених поросят 1-2-х місячного віку в підсобному господарстві Сумського національного аграрного університету. Діагноз на еймеріоз встановлювали за результатами лабораторних обстежень екскрементів поросят за методом Фюллеборна. Об'єкт досліджень - ооцисти кокцидії: Eimeria debliecki (Dowoes, 1921) - були вилучені з екскрементів поросят шляхом комбінування методів флотації та послідовного промивання, з наступним п'ятикратним відмиванням у водогінній воді. Як діючу речовину використано препарат БІ-ДЕЗ™ в концентрації 2 та 3 % та при експозиціях 2, 3 та 4 год. Завись ооцист, що сплили відціджували через ситечко у інший стаканчик, потім мікропіпеткою по 0,1 мл завись переносили у комірки потім підраховували кількість ооцист. У чашки Петрі вміщували по 10-15 екземплярів ооцист та доливали робочий розчин. Таким чином було сформовано 5 дослідних варіантів. В окремих чашках Петрі, для контролю, розміщували аналогічну кількість ооцист, до яких додавали 5 см дистильованої води. Кожний дослідний та контрольний варіанти при конкретній експозиції ставили в трьох повторностях. Після закінчення терміну експозиції ооцисти п'ятикратно відмивали та ставили проби на споруляцію. Для цього чашки Петрі дослідних та контрольного варіантів витримували п'ять діб у термостаті при температурі 26 °C, щоденно контролюючи в них рівень вологи. До досліду та впродовж культивування стан ооцист оцінювали за морфологічними ознаками (форма, розмір, колір, локалізація зародкового шару, наявність полярної гранули та мікропіле), спостерігаючи нативні препарати під малим (ок.10 х об. 8) та великим (ок.10 х об. 20) збільшеннями мікроскопа. Дезінвазійний ефект впливу колоїдів наночасток оцінювали на 5-у добу після постановки дослідних зразків на споруляцію. При дослідженні впливу дезінфектанту на еймерії свиней було встановлено, що при обробці ооцист препаратом БІ-ДЕЗ™ в концентрації 2 % при експозиції 2 години з наступним їх відмиванням у ооцистах припиняється процес споруляції, спостерігали протягом 5 діб, але зовнішніх змін у кокцидіях не було виявлено. При обробці ооцист кокцидій 2 та 3 % розчином препарату БІ-ДЕЗ™ при експозиції 3 години спостерігали припинення процесу споруляції та стискання цитоплазми. 40 4 UA 85722 U Таблиця 3 Дезінвазійна ефективність препарату БІ-ДЕЗ™ на ооцисти еймерій свиней Eimeria debliecki Концентрація препарату 2% 3% 5 10 Експозиція, год. Кількість споруляції, % 2 3 4 2 3 4 3 0 0 Кількість ооцист з морфологічними змінами, % 47 9 7 Лізис ооцист, % 53 91 100 93 100 З результатів, наведених у таблиці 3, видно, що при використанні 2 % концентрації дезінфектанту БІ-ДЕЗ™ через 2 години кількість споруляції була 3 %, кількість ооцист еймерій, у яких відбулись морфологічні зміни, такі як зморщування та розрив цитоплазми 47 %, та лізис 53 %. Через 3 години експозиції 0 % споруляції 9 % морфологічних змін у ооцистах та 91 % лізису. Експозиція 4 години викликає 100 % лізис ооцист еймерій свиней. При обробці ооцист 3 % розчином препарату БІ-ДЕЗ™ через 2 години експозиції кількість споруляції дорівнювалась 0 %, ооцист з морфологічними змінами було виявлено 7 %, та 93 % лізис. Експозиція 3 години призводить до 100 % лізису ооцист еймерій свиней. ФОРМУЛА КОРИСНОЇ МОДЕЛІ 15 Спосіб знезараження гною в тваринницьких господарствах, що включає знищення в ньому патогенної мікрофлори, личинок гельмінтів і ооцист еймерій дезінфектантом, який відрізняється тим, що як дезінфектант використовують препарат БІ-ДЕЗ™, який містить, мас. %: полігексан - 6,5, додицилдипропілен триамін - 6,5 та допоміжні компоненти: глютамінову кислоту, кокоамідопропіл-бетаїн та демінералізовану воду - до 100 %. Комп’ютерна верстка Л. Бурлак Державна служба інтелектуальної власності України, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 5