Склади транс-кломіфену та їх застосування

Реферат: Винахід стосується фармацевтичної композиції для перорального введення, яка включає або яка отримана із застосуванням (і) 12,5 мг або 25 мг цитрату транс-кломіфену, причому цитрат транс-кломіфену знаходиться у вигляді частинок, при цьому зазначені частинки мають середній розмір частинок в інтервалі від 5 до 20 мікронів, причому щонайменше 90 % зазначених частинок мають розмір менше ніж 50 мікронів, і (іі) одного або більше фармацевтично прийнятних носіїв, розріджувачів або наповнювачів. UA 113324 C2 (12) UA 113324 C2 UA 113324 C2 ГАЛУЗЬ ТЕХНІКИ ПЕРЕХРЕСНЕ ПОСИЛАННЯ НА СПОРІДНЕНІ ЗАЯВКИ Дана заявка претендує на пріоритет на основі попередньої заявки на патент США № 61/691722, поданої 21 серпня 2012 року, зміст якої включено в даний документ за допомогою посилання. ГАЛУЗЬ ТЕХНІКИ Даний винахід стосується транс-кломіфену в дисперсній формі, що підходить для лікування різних гормонозалежних розладів. Більш конкретно, зазначений транс-кломіфен має такий діапазон розмірів частинок, що забезпечує поліпшену біодоступність. РІВЕНЬ ТЕХНІКИ Кломіфен являє собою селективний модулятор рецептора естрогену, споріднений тамоксифену. Кломіфен зв'язується з рецепторами естрогену та блокує нормальний естрогеновий зворотній зв'язок на гіпоталамусі та наступний негативний зворотній зв'язок на гіпофізі. Це призводить до підвищення лютеїнізуючого гормону (ЛГ) і фолікулостимулюючого гормону (ФСГ). У чоловіків такі підвищені концентрації гонадотропінів стимулюють клітини Лейдіга яєчок і призводять до вироблення більш високих концентрацій тестостерону. Наприклад, у публікаціях Tenover et al., J. Clin. Endocrinol. Metab. 64:1103, (1987) і Tenover et al., J. Clin. Endocrinol. Metab. 64:1118 (1987) описане підвищення ФСГ, ЛГ у молодих і дорослих чоловіків після лікування кломіфеном. У них описане також підвищення вільного та загального тестостерону в чоловіків, при цьому в молодих чоловіків відзначене значне збільшення. У цей час кломіфен схвалений для жінок у вигляді суміші цис- і транс-ізомерів, у якій цисізомер становить від близько 30 % до 50 % (керівництво Merck), для ініціації овуляції в жінок з ановуляцією. Збільшення ЛГ і ФСГ у жінок з ановуляцією після введення кломіфену призводить до росту фолікула та, в остаточному підсумку, до овуляції. Зазначені ліки рекомендовані для введення протягом 5 днів у дозі до 100 мг на добу. У публікації Ernst et al., J. Pharmaceut. Sci. 65:148 (1976) показано, що кломіфен являє собою суміш двох геометричних ізомерів, які згадують як цис, -Z-, кломіфен (цис-кломіфен або зукломіфен) і транс-,E-, кломіфен, (транс-кломіфен або енкломіфен). Згідно з Ernst, et al., транскломіфен HCI має температуру плавлення 149°C-150,5°C, тоді як цис-кломіфен HCI має температуру плавлення 156,5°C-158°C. Учені Ernst et al. відзначили також, що (транс-ізомер) є антиестрогенним (AE), тоді як цис-ізомер являє собою більш ефективну та більш естрогенну форму, і також був описаний як такий, що має антиестрогенну активність. Автори приписують вплив зазначених ліків на овуляторну активність обом формам, стверджуючи, що суміш більш ефективна, ніж тільки транс-кломіфен. Транс-ізомер сприяє овуляції на рівні гіпоталамуса. Естрогенний ізомер, цис-кломіфен, сприяє посиленню овуляції в інших місцях фізіологічного шляху, що призводить до овуляції. Описано також, що зазначені ізомери мають різний період напіввиведення in vivo. Було описано, що вміст цис-ізомеру знижується до значень нижче залишкових концентрацій у крові після закінчення більше одного місяця після введення однократної дози. Кломіфен пов'язаний з численними побічними ефектами, зокрема: нечіткий зір, дискомфорт в зоні живота, гінекомастія, пухлини яєчок, судинорухові почервоніння, нудота та головні болі. Крім того, інші дослідження дозволяють припустити, що кломіфен має генотоксичну дію й ефект збільшення пухлин. Чистий результат цих спостережень полягає в тому, що кломіфен в існуючому вигляді, який містить від 30 % до 50 % цис-ізомеру, не підходить для тривалої терапії чоловіків для лікування нестачі тестостерону. Було показано, що пероральне введення транс-ізомеру кломіфену (транс-кломіфену або енкломіфену) ефективне при лікуванні множини розладів, що варіюються від вторинного гіпогонадизму в чоловіків до ініціації овуляції в жінок з ановуляцією. Поліпшення фізичних характеристик транс-кломіфену потенційно забезпечить більш ефективну терапію. КОРОТКИЙ ОПИС У даному винаході запропонований транс-кломіфен, який характеризується тим, що зазначений транс-кломіфен представлений у вигляді частинок, при цьому зазначені частинки мають середній розмір частинок менше,ніж близько 30 мікронів, і переважно від близько 5 до 20 мікронів. Крім того, даний винахід охоплює транс-кломіфен, у якому щонайменше 90 % частинок мають розмір частинок менше, ніж близько 50 мікронів. Запропоновані також фармацевтичні композиції, які містять або приготовлені з використанням транс-кломіфену у вигляді частинок. Зазначені композиції використовують для лікування різних розладів, включаючи, без обмеження, вторинний гіпогонадизм, діабет 2 типу, підвищений рівень холестерину, підвищений рівень тригліцеридів, виснаження, ліподистрофію, 1 UA 113324 C2 жіночу та чоловічу безплідність, доброякісну гіпертрофію передміхурової залози, рак передміхурової залози, рак молочної залози, рак матки та рак яєчників. КОРОТКИЙ ОПИС КРЕСЛЕНЬ ФІГ. 1 ілюструє хімічну структуру транс-кломіфену. ДОКЛАДНИЙ ОПИС Незважаючи на те, що даний винахід може бути реалізований в різних формах, нижче представлений опис декількох варіантів реалізації з урахуванням того, що даний опис потрібно розуміти як ілюстрацію даного винаходу, і він не призначений для обмеження винаходу до конкретних представлених варіантів реалізації. Заголовки представлені лише для зручності, і їх не потрібно вважати яким-небудь обмеженням даного винаходу. Варіанти реалізації, представлені під будь-яким заголовком, можуть бути комбіновані з варіантами реалізації, представленими під будь-яким іншим заголовком. Потрібно розуміти, що будь-які діапазони, співвідношення та діапазони співвідношень, які можуть бути отримані з будь-якої кількості даних, що містяться в даному документі, являють собою додаткові варіанти реалізації даного винаходу. Сюди входять діапазони, які можуть бути отримані й які включають або не включають кінцеві верхні та/або нижні граничні значення. Відповідно, фахівцям зрозуміло, що багато таких співвідношень, діапазони та діапазони співвідношень можуть бути однозначно отримані з даних і чисел, представлених у даному документі, і всі вони являють собою варіанти реалізації даного винаходу. Перед розкриттям й описом сполук, композицій і способів даного винаходу потрібно розуміти, що термінологія, яка використовується в даному документі, призначена лише для опису конкретних варіантів реалізації та не мається на увазі як обмежуюча. Потрібно зазначити, що використовувана в даному описі та прикладеній формулі винаходу однина включає посилання на множину, якщо з контексту очевидно не слідує інше. Термін "пероральне" введення означає, що активний агент представлений у вигляді складу, який призначений для проковтування, тобто створений для доставки в шлунково-кишкову систему для абсорбції. Термін "ефективна доза" означає кількість активного компонента в композиції, достатню для лікування конкретного стану. Термін "лікувати" або "лікування", який використовується у даному документі, стосується будь-якого лікування будь-якого залежного від прогестерону розладу або захворювання та включає, але не обмежується ними, пригнічення розладу або захворювання, зупинку розвитку розладу або захворювання; полегшення розладу або захворювання, наприклад, ініціацію регресії розладу або захворювання; або полегшення стану, обумовленого захворюванням або розладом, полегшення симптомів захворювання або розладу. Термін "попереджати" або "попередження" відносно залежного від прогестерону розладу або захворювання означає запобігання початку розвитку розладу або захворювання, якщо ще немає жодного з них, або запобігання подальшому розвитку розладу або захворювання, якщо розлад або захворювання вже присутнє. Термін "фармацевтично прийнятна сіль" стосується солі, отриманої з фармацевтично прийнятної нетоксичної неорганічної або органічної кислоти. Неорганічні кислоти включають, але не обмежуються ними, хлороводневу, бромоводневу, йодоводневу, азотну, сірчану й фосфорну. Органічні кислоти включають, але не обмежуються ними, аліфатичні, ароматичні, карбонові та сульфонові органічні кислоти, включаючи, але не обмежуючись ними, мурашину, оцтову, пропіонову, бурштинову, бензойну, камфорсульфонову, лимонну, фумарову, глюконову, ізетіонову, молочну, яблучну, муцинову, винну, пара-толуолсульфонову, гліколеву, глюкуронову, малеїнову, фуранкарбонову, глютамінову, бензойну, антранілову, саліцилову, фенілоцтову, мигдальну, ембонову (памоєву), метансульфонову, етансульфонову, пантотенову, бензолсульфонову, стеаринову, сульфанілову, альгінову й галактуронову кислоту. Переважна сіль являє собою цитратну сіль. Термін "сольват" являє собою комплекс, який містить одну або більше молекул розчиненої речовини, транс-кломіфену, з молекулою розчинника. Термін "середній розмір частинок" визначають як еквівалентний сферичний діаметр, визначений дифракційним розсіюванням лазерного випромінювання. У різних варіантах реалізації даного винаходу запропонований транс-кломіфен із розміром частинок у межах визначеного вузького діапазону. Регулювання розміру частинок у певному вузькому діапазоні забезпечує ефективну біодоступність in vivo. Середній розмір частинок транс-кломіфену відповідно до даного винаходу становить менше, ніж близько 30 мікронів, переважно від близько 5 до близько 20 мікронів. Крім того, даний винахід охоплює транс-кломіфен, у якому щонайменше 90 % частинок мають розмір частинок 2 UA 113324 C2 менше, ніж близько 50 мікронів. Більш переважно, діапазон середнього розміру частинок становить від близько 5 до близько 20 мікронів, при цьому щонайменше 90 % частинок мають розмір менше, ніж близько 35 мікронів. У даному винаході запропоновані також фармацевтичні композиції, які містять або приготовлені з використанням транс-кломіфену з розміром частинок у межах зазначеного вузького діапазону й один або більше фармацевтично прийнятних носіїв. Хімічна назва транс-кломіфену - транс-2-(п-(2-хлор-1,2-дифенілвініл)фенокси)триетиламін (або 2-[4-(2-хлор-1,2-дифенілетеніл)фенокси]-N,N-діетилетанамін). Хімічна структура зображена на Фігурі 1. Назва "транс-кломіфен" охоплює також його солі та сольвати, при цьому переважна цитратна сіль. Транс-кломіфен являє собою селективний модулятор рецептора естрогену (SERM), який можливо перешкоджає на рівні гіпоталамуса пригніченню секреції гонадотропіну у відповідь на стероїди, зі збільшенням за допомогою цього вивільнення ФСГ і ЛГ. Транс-кломіфен може бути отриманий відповідно до відомих методик. Одержання кломіфену описане у патенті США № 2914563, який включений у даний документ за допомогою посилання у повному об'ємі. Спосіб поділу цис- і транс-ізомерів кломіфену описаний у патенті США № 3848030, який включений у даний документ за допомогою посилання у повному об'ємі. Транс-кломіфен із середнім розміром частинок менше, ніж близько 30 мікронів, переважно від близько 5 до близько 20 мікронів, може бути введений різними способами, включаючи, але не обмежуючись ними, внутрішньовенний, підшкірний, букальний, трансмукозальний, інтратекальний, інтрадермальний, інтрацистернальний, внутрішньом'язовий, трансдермальний, внутрішньочеревинний, епідуральний, вагінальний, ректальний, інтраназальний, сублінгвальний, внутрішньосуглобний, інтрацереброспінальний та інтрасиновіальний, хоча пероральне введення являє собою переважний спосіб. Таким чином, інший аспект даного винаходу являє собою фармацевтичну композицію, яка містить ефективну кількість транскломіфену або його фармацевтично прийнятної солі та фармацевтично прийнятний носій, розріджувач або допоміжну речовину. Транс-кломіфен може міститися у фармацевтичній композиції в кількості від 0,1 % до 99,9 % за вагою складу, і може бути єдиним активним агентом у композиції або може бути комбінований з одним або більше додатковими активними агентами, залежно від призначеного застосування композиції. Композиція може містити транс-кломіфен у дозі від близько одного мг до близько 200 мг (хоча визначення оптимальних доз зазвичай виконує фахівець у даній галузі техніки). Композиція може містити транс-кломіфен у дозі близько 1 мг, 2 мг, 3 мг, 4 мг, 5 мг, 10 мг, 15 мг, 20 мг, 25 мг, 30 мг, 35 мг, 40 мг, 45 мг, 50 мг, 55 мг, 60 мг, 65 мг, 70 мг, 75 мг, 80 мг, 85 мг, 90 мг, 95 мг, 100 мг, 110 мг, 120 мг, 130 мг, 140 мг, 150 мг, 160 мг, 170 мг, 180 мг, 190 мг, 200 мг або значення між ними. Переважно, композиція містить транс-кломіфен у дозі приблизно від 5 до 100 мг, наприклад, у дозі 12,5 мг, 25 мг або 50 мг. Під "фармацевтично прийнятним" мається на увазі, що зазначений носій, розріджувач, допоміжна речовина та сіль повинні бути сумісні з іншими інгредієнтами складу та не повинні бути шкідливими для реципієнта. Фармацевтичні композиції даного винаходу можуть бути отримані будь-яким способом, відомим у даній галузі техніки, з використанням легкодоступних і загальновідомих інгредієнтів. Наприклад, транс-кломіфен може бути приготовлений у вигляді складу з загальновідомими допоміжними речовинами, розріджувачами або носіями, і може бути представлений у формі таблеток, капсул, суспензій, порошків і тому подібних. Приклади допоміжних речовин, розріджувачів і носіїв, які підходять для таких складів, включають, без обмеження, наповнювачі та сухі розріджувачі, такі, як крохмаль, цукри, маніт і кремнієві похідні; зв'язувальні агенти, такі, як карбоксиметилцелюлоза й інші похідні целюлози, альгінати, желатин і полівінілпіролідон; зволожуючі агенти, такі як гліцерин; агенти для поліпшення розпадання таблеток, такі, як карбонат кальцію, бікарбонат натрію та поперечно-зшитий повідон; агенти для вповільнення розчинення, такі, як парафін; прискорювачі розсмоктування, такі, як четвертинні амонієві сполуки; поверхнево-активні агенти, такі, як цетиловий спирт, полісорбат 80, моностеарат гліцерину; адсорбуючі носії, такі, як каолін і бентоніт; і змащувальні речовини, такі, як тальк, стеарат кальцію та магнію, і тверді поліетиленгліколі. Фармацевтичні композиції підходять для збільшення рівня тестостерону, наприклад, у чоловіків із вторинним гіпогонадизмом, для лікування вторинного гіпогонадизму або для лікування розладу, пов'язаного з ним, такого, як, без обмеження, олігоспермія, азооспермія, виснаження та депресія, як описано у патенті США № 7759360, повний зміст якого включено в даний документ за допомогою посилання. Зазначені фармацевтичні композиції підходять також для зниження рівнів холестерину, як описано у патенті США № 7368480, повний зміст якого включено в даний документ за допомогою посилання. Зазначені фармацевтичні композиції також можуть бути використані для попередження або лікування стану, вибраного з групи, яка 3 UA 113324 C2 складається з доброякісної гіпертрофії передміхурової залози, раку передміхурової залози та підвищеного вмісту тригліцеридів, як описано у публікації заявки на патент США № 2008/0242726, повний зміст якої включено в даний документ за допомогою посилання. Фармацевтичні композиції також можуть бути використані для попередження переходу від метаболічного синдрому до діабету 2 типу або для лікування діабету 2 типу, або для зниження рівнів глюкози натще, як описано у публікації заявки на патент США № 2009/0099265, повний зміст якої включено в даний документ за допомогою посилання. Фармацевтичні композиції також можуть бути використані для лікування жіночої безплідності, у цьому випадку композицію переважно вводять жінці з ановуляцією у вигляді добової дози на ранній фолікулярній фазі менструального циклу протягом п'яти послідовних днів. Фармацевтичні композиції також підходять для лікування та/або запобігання раку молочної залози й/або як допоміжна терапія після первісного хірургічного лікування для мінімізації можливості рецидиву. Фармацевтичні композиції також підходять для лікування раку ендометрія (або матки) і раку яєчників. Всі посилання, розглянуті в даному документі, включені за допомогою посилання у повному об'ємі. Наступні Приклади ілюструють даний винахід, і вони не призначені для обмеження об'єму даного винаходу, викладених у прикладеній формулі винаходу. ПРИКЛАД 1 Одержання цитрату транс-кломіфену Цитрат кломіфену одержували наступним чином: 3 Суміш 20 г 1-[п-(β-діетиламіноетокси)феніл]-1,2-дифенілетанолу в 200 см етанолу, що містить надлишок хлороводню, кип'ятили зі зворотним холодильником протягом 3 годин. Розчинник і надлишок хлороводню видалили під вакуумом, а залишок розчинили в суміші етилацетату й метиленхлориду. Одержали 1-[п-(β-діетиламіноетокси)феніл]-1,2дифенілетилену гідрохлорид з температурою плавлення від 148 до 157 °C. Цю гідрохлоридну сіль обробляли N-хлорсукцинімідом у сухому хлороформі при зворотному кип'ятінні. Потім отриманий продукт перетворили у вільну основу й обробили лимонною кислотою. Одержали дигідроцитратну сіль 1-[п-(β-діетиламіноетокси)феніл]-1,2-дифенілхлоретилену з температурою плавлення від 116,5 до 118 °C. Цитрат кломіфену, отриманий за цим способом, містить від 30 до 50 % цис-ізомеру та від 70 до 50 % транс-ізомеру. Потім транс-кломіфен виділили з рацемічної суміші ізомерів кломіфену за способом, описаним у Прикладах 31 і 32 патенту США № 3848030. ПРИКЛАД 2 Аналіз розміру частинок Транс-кломіфен характеризували за розміром за допомогою приладу, виконаного з можливістю вимірювання еквівалентного сферичного об'ємного діаметра, такого, як лазерний дифракційний аналізатор розміру частинок Malvern Mastersizer 2000, або аналогічного приладу. Після проведення характеристики за розміром транс-кломіфен, за необхідності, подрібнювали, переважно за допомогою штифтового млина у придатних умовах швидкості обертання млина та швидкості подачі матеріалу, щоб довести значення розміру частинок до вищезгаданих меж відповідно до даного винаходу. Ефективність подрібнювання перевіряли відбором зразків за допомогою лазерного дифракційного аналізатора розміру частинок Malvern Mastersizer 2000, і у такий самий спосіб перевіряли кінцевий розмір частинок. Транс-кломіфен в його дисперсній формі з вищезгаданими межами відповідно до даного винаходу, за необхідності, можна потім змішувати з допоміжною речовиною або носієм і використовувати, наприклад, для наповнення капсул. Оскільки частинки до або після подрібнювання мають неправильну форму, необхідно характеризувати їх за допомогою вимірювання властивостей частинок щодо еталонних властивостей, які мають теоретичні сферичні частинки. Тому частинкам призначають "еквівалентний сферичний діаметр". Значення, знайдені при характеристиці великої кількості "невідомих" частинок, можуть бути нанесені на графік поширеності частинок залежно від діаметра. Це призводить до одержання характеристичної кривої, що демонструє розподіл зразка за розміром, тобто сумарний відсоток під кривою розподілу за розміром. Ці значення можуть бути лічені прямо або можуть бути нанесені на логарифмічний імовірнісний папір із одержанням відповідної прямої лінії. Середній еквівалентний сферичний об'ємний діаметр становить 50 % значення меншого розміру. Таким чином, знайдений середній еквівалентний сферичний об'ємний діаметр є статистичним поданням теоретичної частинки, що має таку саму властивість, що й "невідома" частинка. Наступний опис представлений як приклад. Аналізували розмір частинок цитрату транс-кломіфену з Прикладу 1. Показник заломлення цитрату транс-кломіфену вимірювали за допомогою мікроскопа за допомогою способу лінії 4 UA 113324 C2 Бекке, описаного у публікації McCrone W.C. et al., Polarized Light Microscopy, McCrone Research Institute, Чикаго, 1984, сторінки 126-127. Показник заломлення зразка за цим способом становив, за оцінками, 1,62. Як диспергатори для цитрату транс-кломіфену оцінювали 0,1 % (мас./об.) лецитину в Isopar G™, 0,1 % (мас./об.) Span™ 85 (сорбітан триолеат) у гексані та 0,01 % (мас./об.) Tween® 20 (полісорбат 20) у воді. Зразки легко суспендувалися у кожному з двох органічних диспергаторів і повільно випали в осад із суспензії. Спостерігали часткове розчинення в зразку, суспендованому у водному диспергаторі, тому 0,01 % (мас./об.) Tween® 20 у воді виявився непридатним. Зразки, дисперговані в диспергаторах на основі Isopar G™ і на основі гексану, вивчали за допомогою мікроскопа. Склад і морфологія зразків були однаковими, що показують кристалічні пластини та голки довжиною від 10 до 150 мкм, а розходження в агломерації були незначними, при цьому спостерігали декілька неміцних агломератів розміром більше 400 мкм. Для подальшого аналізу вибрали 0,1 % (мас./об.) Span™ 85 у гексані. Поглинання зразка, або уявна частина показника заломлення, являє собою міру кількості світла, поглиненого зразком, і являє собою важливий параметр при розрахунку розподілу частинок за розміром за виміряною діаграмою розсіювання. Поглинання зразка не може бути виміряне експериментально, тому його необхідно оцінити методом "спроб і помилок", використовуючи діаграму розсіювання для конкретної сполуки. Первісне вимірювання розміру частинок виконували з використанням наступних параметрів, а розподіл частинок за розміром розрахували за даними розсіювання за допомогою різних значень поглинання зразка: Показник заломлення Поглинання частинок за замовчуванням Час вимірювання зразка Час вимірювання фону Частота обертання за замовчуванням Час рециркуляції Модель Чутливість Форма частинок 1,62 0,01 10 секунд 20 секунд 1000 об./хв. 60 секунд Загальне призначення Нормальна Неправильна Зважений залишок являє собою міру критерію згоди між вимірюваними даними та математичною моделлю, яка дозволяє перетворити ці дані в розподіл частинок за розміром. Коефіцієнт поглинання зразка, який дорівнює 0,01, привів до найкращого збігу та був обраний для всіх наступних аналізів розміру частинок. Виконали повторні вимірювання розміру частинок зразка, диспергованого в 0,1 % (мас./об.) Span™ 85 у гексані, з рециркуляцією протягом приблизно п'яти хвилин зі швидкістю насоса 1000 об./хв. Розмір частинок (d10, d50, d90) нанесли на графік залежності від часу рециркуляції. Значення для d10 і d50 потрапили у вузький діапазон протягом цього інтервалу. Зниження d90 перший раз виникло протягом перших 90 секунд із наступним поступовим зменшенням. Це зниження d90 дозволяє припустити, що агломерати диспергувалися протягом 90 секунд і що може відбуватися деяке стирання при більш тривалій рециркуляції, тому для подальших аналізів вибрали час рециркуляції, який дорівнює 90 секундам. Виконали повторні вимірювання розміру частинок зразка при часі рециркуляції 90 секунд і швидкості насоса, що збільшується, для вивчення впливу швидкості насоса на розмір частинок. Розходження між d10 і d50 були невеликими, а для d90 спостерігалося збільшення розміру частинок при швидкості насоса 1500 об./хв., але без подальшого збільшення при 2000 об./хв. Швидкість насоса 1500 об./хв. вибрали для оптимізації дисперсії агломератів і суспензії більших частинок і для мінімізації стирання пластин і голок. З дисперсійного осередку після вимірювання розміру частинок зі швидкістю насоса 1500 об./хв. виділили суспендований зразок і досліджували за допомогою мікроскопа. Первинні частинки були досить добре дисперговані, а мікрофотографії відповідали мікрофотографіям, отриманим до рециркуляції з такою самою кількістю та розміром пластин і голок, що дозволяє припустити, що стирання було мінімізовано. Відтворюваність зазначеного способу оцінили виконанням п'ятикратних вимірювань за допомогою остаточних умов способу. Відносні стандартні відхилення для d10, d50 і d90 становили 2,60 %, 3,42 % і 10,70 %, відповідно. Всі вони відповідають рекомендаціям Фармакопеї США, що становить < 30 %, < 10 % і < 15 % для d10, d50 і d90, відповідно. 5 UA 113324 C2 Виконали одне вимірювання розміру частинок для кожного зразка цитрату транс-кломіфену з використанням остаточних умов способу. Три партії мали однаковий бімодальний розподіл частинок за розміром, тоді як одна партія містила третю форму, що складається з набагато більших частинок. Остання партія була бімодальною, але відображала набагато більші розміри частинок, ніж розподіл попередніх трьох партій з бімодальними розподілами. Зробили мікрофотографії кожної партії цитрату транс-кломіфену в 0,1 % (мас./об.) Span™ 85 у гексані, потім виконали вимірювання частинок за розміром із використанням остаточних умов способу. Результати узгодилися з результатами розміру частинок. Три партії мали однаковий розподіл частинок за розміром, а також однакову морфологію, що складається, в основному, з пластин і голок довжиною 10-150 мкм і декількох ізометричних частинок < 10 мкм. Остаточні умови для визначення розміру частинок: Показник заломлення зразка Поглинання зразка Диспергатор Показник заломлення диспергатора Час вимірювання зразка Час вимірювання фону Швидкість насоса Час рециркуляції Модель Чутливість Форма частинок 1,62 0,01 0,1 % (мас./об.) Span 85 у гексані 1,39 10 секунд 20 секунд 1500 об./хв. 90 секунд Загальне призначення Нормальна Неправильна Визначення показника заломлення виконували за допомогою мікроскопа Leica DM LP. Для візуального дослідження зразків використовували один поляризатор у нижній частині мікроскопа. Зразки помістили на предметне скло, поверх зразка встановили покривне скло та додали краплю центрифугованого масла Cargill для вимірювання показника заломлення. Спостерігали рух лінії Бекке під час дефокусування зразка. Виконали мікроскопію у поляризованому світлі з використанням мікроскопа Leica DM LP, оснащеного камерою для кольорової зйомки Spot Insight. Використовували перехреснополяризоване світло з червоним компенсатором першого порядку. Для вивчення зразка використовували 10х, 20х або 40х об'єктив. Зображення одержали при кімнатній температурі за допомогою програми Spot Advanced (версія 4.5.9). Дані про розмір частинок одержали за допомогою приладу Malvern Instruments MS2000, оснащеного модулем диспергування Hydro 2000μP. Дані зібрали й аналізували за допомогою програми Mastersizer 2000 версії 5.60 з використанням вимірювань об'єму. Придатні для контролю відповідно до NIST (Національний інститут стандартів і технологій) скляні кульки використовували як еталонний стандарт. Розмір частинок цитрату транс-кломіфену з використанням остаточних умов способу представлений нижче: a b c № партії d10 (мкм) d50 (мкм) d90 (мкм) 31249 4,850 13,455 76,891 16204 8,058 106,743 318,464 24712 4,038 13,902 218,573 32305 3,373 9,664 44,995 24867 4,794 13,418 70,289 a. 10 % від загального об'єму частинок має розмір менше, ніж зазначений розмір частинок b. 50 % від загального об'єму частинок має розмір менше, ніж зазначений розмір частинок с. 90 % від загального об'єму частинок має розмір менше, ніж зазначений розмір частинок Нижче представлений розподіл частинок за розміром транс-кломіфену партії № 32305: 6 UA 113324 C2 Розмір (мкм) 0,010 0,011 0,013 0,015 0,017 0,020 0,023 0,026 0,030 0,035 0,040 0,046 0,052 0,060 0,069 0,079 0,091 % меншого об'єму 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 Розмір (мкм) 0,105 0,120 0,138 0,158 0,182 0,209 0,240 0,275 0,316 0,363 0,417 0,479 0,550 0,631 0,724 0,832 0,965 % меншого об'єму 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,02 Розмір (мкм) 1,096 1,259 1,445 1,660 1,905 2,188 2,512 2,884 3,311 3,802 4,385 5,012 5,754 6,607 7,586 8,710 10,00 % меншого об'єму 0,10 0,28 0,60 1,12 1,93 3,10 4,72 6,86 9,59 12,94 16,94 21,58 26,82 32,58 38,74 45,14 51,59 Розмір (мкм) 11,482 13,183 15,136 17,378 19,953 22,909 26,303 30,200 34,674 39,811 45,709 52,481 60,256 69,183 79,433 91,201 104,713 % меншого об'єму 57,87 63,80 69,20 73,95 77,98 81,29 83,92 85,99 87,62 88,95 90,13 91,28 92,50 93,84 95,28 96,72 98,02 Розмір (мкм) 120,226 138,038 158,489 181,970 208,930 239,883 275,423 316,228 363,078 416,869 478,630 549,541 630,957 724,438 831,764 954,993 1096,478 % меншого об'єму 99,04 99,72 99,97 100,00 100,00 100,00 100,00 100,00 100,00 100,00 100,00 100,00 100,00 100,00 100,00 100,00 100,00 Транс-кломіфен із розподілом частинок за розміром відповідно до даного винаходу приблизно забезпечує стійкий і поліпшений профіль поглинання/біодоступності in vivo, порівняно з транс-кломіфеном, що має розподіл частинок за розміром за межами зазначеного діапазону. Крім забезпечення стійкої доставки транс-кломіфену в шлунково-кишковий тракт й абсорбції з нього, зазначений розподіл частинок за розміром забезпечує більш точний контроль під час виробничого процесу. Регулювання частинок за розміром також мінімізує коливання кількості води, необхідної для досягнення заданої грануляції. Транс-кломіфен із розподілом частинок за розміром відповідно до даного винаходу, самостійно або в комбінації з іншим активним агентом, зазвичай вводять у формі звичайного складу. Наступні склади є лише ілюстративними, і вони не призначені для обмеження об'єму даного винаходу. ПРИКЛАД 3 Склади Желатинові капсули, що містять транс-кломіфен, одержують з використанням наступних компонентів: Компонент Кількість (мг на капсулу) Цитрат транс-кломіфену 5,0-100 Мікрокристалічна целюлоза 0-343,2 Стеарат магнію 0-8 Транс-кломіфен у кристалічній формі змішують з 1/3 від загальної кількості мікрокристалічної целюлози та пропускають через сито для забезпечення гарного розподілу матеріалів. Потім через сито пропускають інші 2/3 кількості мікрокристалічної целюлози та змішують з порошкоподібною сумішшю. Потім отриману суміш подрібнюють пропущенням через придатний подрібнювач (наприклад, млин Comil®). Додають стеарат магнію, попередньо пропущений через сито, і змішують з отриманими гранулами. Після аналізу однорідності отриману суміш інкапсулюють у желатинові капсули. Нижче представлений склад переважної желатинової капсули (3 розмір): Компонент Цитрат транс-кломіфену Мікрокристалічна целюлоза Стеарат магнію УСЬОГО Кількість (мг на капсулу) 12,5 85,5 2,0 100,0 7 UA 113324 C2 Відповідно до представлених вище способів можуть бути приготовлені комбіновані капсули, які містять транс-кломіфен і додатковий активний агент (наприклад, інгібітор ароматази або пероральний тестостерон): Компонент Цитрат транс-кломіфену Анастразол Мікрокристалічна целюлоза Стеарат магнію УСЬОГО Кількість (мг на капсулу) 12,5 1,0-50,0 85,5 2,0 100,0 Компонент Цитрат транс-кломіфену Ундеканоат тестостерону Мікрокристалічна целюлоза Стеарат магнію Кількість (мг на капсулу) 12,5 80-200 мг 85,5 2,0 Альтернативно, можуть бути отримані таблетки, які містять від 5,0 до 100 мг транскломіфену, наступним чином: Компонент Цитрат транс-кломіфену Крохмаль Полівінілпіролідон Мікрокристалічна целюлоза Стеарат магнію Тальк Кількість (мг на таблетку) 5,0-100 30-60 0-8 25-45 0,1-2,0 0-3 Для складів у формі таблеток транс-кломіфен, крохмаль та целюлозу пропускають через сито (наприклад, № 45) і ретельно змішують. Розчин полівінілпіролідону змішують з отриманим порошком, який потім пропускають через сито (наприклад, № 14). Отримані гранули висушують при 50-60 °C і пропускають через сито (наприклад, № 18). Потім до гранул додають стеарат магнію та тальк, попередньо пропущені через сито (наприклад, №6), а після змішування їх пресують на таблетковій машині з отриманням таблеток. Альтернативно, отримують суспензії, які містять від 1,0 до 100 мг транс-кломіфену на 5 мл дозу, наступним чином: Компонент Цитрат транс-кломіфену Карбоксиметилцелюлоза натрію Сироп Розчин бензойної кислоти Ароматизатор Барвник Очищена вода до Кількість (мг/5 мл) 1,0-100 мг 50 мг 1,25 мг 0,10 мл за необхідністю за необхідністю 5 мл Для суспензій транс-кломіфен пропускають через сито (наприклад, № 45) і змішують з карбоксиметилцелюлозою натрію та сиропом з утворенням однорідної пасти. Розчин бензойної кислоти, ароматизатор і барвник розбавляють невеликою кількістю води та додають при перемішуванні. Потім додають достатню кількість води для отримання заданого об'єму. Альтернативно, наступним чином можуть бути приготовлені супозиторії: Компонент Цитрат транс-кломіфену Гліцериди насичених жирних кислот Кількість (мг на супозиторій) 100-500 1000-3000 Для супозиторіїв транс-кломіфен пропускають через сито (наприклад, № 60) і суспендують у гліцеридах насичених жирних кислот, попередньо розплавлених із використанням мінімально 8 UA 113324 C2 необхідного нагрівання. Потім суміш виливають у форму для супозиторіїв і залишають для охолодження. ФОРМУЛА ВИНАХОДУ 5 10 15 20 25 1. Фармацевтична композиція для перорального введення, яка включає або яка отримана із застосуванням (і) 12,5 мг або 25 мг цитрату транс-кломіфену, яка відрізняється тим, що цитрат транс-кломіфену знаходиться у вигляді частинок, при цьому зазначені частинки мають середній розмір частинок в інтервалі від 5 до 20 мікронів, причому щонайменше 90 % зазначених частинок мають розмір менше ніж 50 мікронів, і (іі) одного або більше фармацевтично прийнятних носіїв, розріджувачів або наповнювачів. 2. Фармацевтична композиція за п. 1, в якій цитрат транс-кломіфену знаходиться в несольватованій кристалічній формі. 3. Фармацевтична композиція за п. 1 або 2, яка відрізняється тим, що зазначена композиція являє собою капсулу. 4. Фармацевтична композиція за будь-яким із пп. 1-3, яка додатково містить мікрокристалічну целюлозу і/або стеарат магнію. 5. Фармацевтична композиція за п. 4, яка являє собою капсулу, яка містить приблизно 12,5 мг цитрату транс-кломіфену, приблизно 85,5 мг мікрокристалічної целюлози та приблизно 2,0 мг стеарату магнію. 6. Фармацевтична композиція за будь-яким із пп. 1-5 для застосування при лікуванні вторинного гіпогонадизму в чоловіків або для лікування розладу, пов'язаного з ним. 7. Фармацевтична композиція за п. 6, яка відрізняється тим, що зазначений розлад, пов'язаний з вторинним гіпогонадизмом, вибраний зі зниження м'язової маси, зниження щільності кісток, зниження лібідо, олігоспермії й азооспермії. 8. Фармацевтична композиція за будь-яким із пп. 1-5 для застосування в лікуванні безплідності в жінок, де композицію переважно вводять жінкам з ановуляцією у вигляді добової дози протягом періоду п'яти послідовних днів. 9. Фармацевтична композиція за будь-яким із пп. 1-5 для застосування в способі лікування і/або запобігання: і) діабету 2 типу в чоловіків, іі) раку молочної залози в жінок, ііі) раку ендометрія, матки або яєчників у жінок. 9 UA 113324 C2 Комп’ютерна верстка О. Гергіль Державна служба інтелектуальної власності України, вул. Василя Липківського, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут інтелектуальної власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 10