Спосіб прогнозування повноти видалення поліхлорованих біфенілів з поверхні шкіри людини в досліді in vitro при обґрунтуванні рецептур засобів зовнішньої детоксикації

Реферат: Винахід належить до способу прогнозування повноти видалення поліхлорованих біфенілів з поверхні шкіри людини в досліді in vitro при обґрунтуванні рецептур засобів зовнішньої детоксикації, який передбачає застосування фізико-хімічних методів аналізу виявлення даної групи речовин в біоматеріалі. Дослідження виконують на дев'яти або дванадцяти свіжих ізольованих незнежирених смужках із шкіри свині, шість або вісім із яких навантажують розчином поліхлорованих біфенілів певної концентрації, контрольні смужки залишаються необробленими, після цього три або чотири забруднені смужки обробляють розчином засобу для зовнішньої детоксикації, інші три або чотири - розчином рідкого мила, а три або чотири контрольні смужки - дистильованою водою, після чого залишки мийних засобів змивають UA 111546 C2 (12) UA 111546 C2 дистильованою водою, всі смужки обробляють гексаном, екстракти збирають у колби для визначення в екстрактах залишків поліхлорованих біфенілів з попереднім очищенням сірчаною кислотою, що дозволяє зробити висновок про ефективність засобу зовнішньої детоксикації певної рецептури. UA 111546 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 Винахід належить до способів оцінки якості і безпеки косметичної продукції та косметичної сировини і може бути впроваджений в установах державної санітарно-епідеміологічної служби та випробувальних лабораторіях, що виконують їх державну санітарно-епідеміологічну експертизу і сертифікаційні випробування з метою прогнозування повноти видалення екотоксикантів з поверхні шкіри людини in vitro при обґрунтуванні ефективності певних рецептур засобів зовнішньої детоксикації (засобів косметичних дерматологічних захисних). Відомий спосіб прогнозування впливу поверхнево-активних речовин (ПАР) на шкіру людини при обґрунтуванні рецептур мийних засобів шляхом визначення ступеню набряку ізольованого епідермісу свині (Zeidler U. "Physico-chemical in vitro methods for determination of the skin compatibility of surfactants". J SCC 1986; 20 (1): 17-26). За вказаним способом смужку ізольованого епідермісу свині обробляють 2 % розчином ПАР або чистою водою в якості контролю (умови обробки: температура 40 °C, тривалість 30 хв., рН 6,5). Після видалення надлишку води смужку зважують, висушують у присутності хлориду кальцію, повторно зважують та обраховують різницю, яку порівнюють з контролем. Ступінь набряку ізольованої смужки шкіри свині оцінюють за величиною Q, яка дозволяє опосередковано прогнозувати вплив ПАР на шкіру людини. Цей спосіб має такі недоліки: недостатня інформативність і відтворюваність результатів у прогнозуванні впливу речовин різного походження на шкіру людини, оскільки в експерименті використано знежирені смужки ізольованого епідермісу свині, тобто виключено фактор наближення хімічного складу людської шкіри до шкіри свині. низька об'єктивність оцінки в зв'язку з невідповідністю температури проведення експерименту, яка не відповідає температурі шкіри людини (35,0-36,9 °C); недостатня статистична достовірність, оскільки передбачає виконання досліджень лише на одній смужці ізольованого епідермісу шкіри свині. Як прототип винаходу був прийнятий спосіб визначення хлорорганічних пестицидів (ХОП) і поліхлорованих біфенілів при їх сумісній присутності в об'єктах зовнішнього середовища (воді, грунті) та біоматеріалі (рибі) (МУ № 1792 от 18.11.1977 г. Методические указания по определению хлорорганических пестицидов и полихлорированных бифенилов при их совместном присутствии в объектах внешней среды и биоматериале). Спосіб включає наступні операції. Наважку риби (10 г) гомогенізують в мікроподрібнювачі (гомогенізаторі) тканин протягом 5 хв. у суміші 20 мл ацетону і 10 мл гексану. Після чого посуд з гомогенізатом, центрифугують протягом 15 хв. (3000 об./хв.), рідку фазу зливають у ділильну воронку на 250 мл. Якщо є необхідність, рідку частину фільтрують через віскозний, або пористий фільтр під тиском азоту, фільтр промивають сумішшю 5 мл гексану і 1 мл етилового ефіру. До залишку біологічного матеріалу додають 20 мл гексану і 2 мл діетилового ефіру, гомогенізують протягом 5 хв., центрифугують, рідку частину приєднують до першої порції, залишок в посуді промивають сумішшю 10 мл гексану і 1 мл етилового спирту. До об'єднаних екстрактів у ділильну воронку додають 60 мл 0,9 %-ного розчину хлористого натрію, суміш струшують протягом 2-5 хв. Відділяють гексановий прошарок, водно-ацетоновий екстрагують ще двома порціями по 10 мл гексану. Після цього екстракти очищують сірчаною кислотою, відділяють ПХБ від ХОП на хроматографічній колонці, екстракт з ПХБ залишають для хроматографування, а екстракт ХОП піддають лужному дегідрохлоруванню з наступним окисленням хромовим ангідридом та хроматографуванням. Недоліками цього способу є енергозатрати на гомогенізування та центрифугування біоматеріалу (а саме - риби), використання достатньо великої кількості еконебезпечних реактивів, трудомісткий процес фільтрування під тиском азоту. В основу винаходу поставлена задача прогнозування повноти видалення поліхлорованих біфенілів з поверхні шкіри людини в досліді in vitro при обґрунтуванні рецептур засобів зовнішньої детоксикації, який включає фізико-хімічні методи аналізу даної групи речовин шляхом введення в відомий спосіб нових операцій для визначення поліхлорованих біфенілів; підвищення точності, відтворюваності та об'єктивності випробувань за рахунок моделювання експерименту на ізольованих незнежирених смужках із шкіри свині, оскільки її жировий склад найбільш приближений до складу жиру людини, а при контамінації шкіри поліхлорованими біфенілами основна частина цього екотоксиканту затримується на поверхні епідермісу, розчиняючись в виділеннях жирових залоз; виявлення оптимальних концентрацій компонентів рецептур, які надають цій продукції найвищої ефективності; можливість прогнозування ступеню видалення поліхлорованих біфенілів з поверхні шкіри in vitro при обґрунтуванні рецептур 1 UA 111546 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 засобів зовнішньої детоксикації; спрощення процесу пробопідготовки для кількісного визначення поліхлорованих біфенілів; економія реактивів при приготуванні проби для аналізу. Поставлене завдання вирішується тим, що в способі прогнозування повноти видалення поліхлорованих біфенілів з поверхні шкіри людини в досліді in vitro при обґрунтуванні рецептур засобів зовнішньої детоксикації, який передбачає застосування фізико-хімічних методів виявлення даної групи речовин в біоматеріалі і відрізняється тим, що дослідження виконують на дев'яти або дванадцяти свіжих ізольованих незнежирених смужках із шкіри свині, шість або вісім із яких навантажують розчином поліхлорованих біфенілів певної концентрації, контрольні смужки залишаються необробленими, після цього три або чотири забруднені смужки обробляють розчином засобу для зовнішньої детоксикації, інші три або чотири - розчином рідкого мила, а три або чотири контрольні смужки - дистильованою водою, після чого залишки мийних засобів змивають дистильованою водою, всі смужки обробляють гексаном, екстракти збирають у колби для визначення в екстрактах залишків поліхлорованих біфенілів з попереднім очищенням сірчаною кислотою, що дозволяє зробити висновок про ефективність засобу зовнішньої детоксикації певної рецептури. Причинно-наслідковий зв'язок між запропонованими ознаками і очікуваним технічним результатом полягає в наступному. Крім проблеми прогнозування ризику шкідливої дії продукції або її окремих компонентів на здоров'я споживача розробка рецептур засобів детоксикації шкіри пов'язана ще з необхідністю вирішення трьох завдань: моделювання процесу забруднення шкіри in vitro, виявлення граничних концентрацій компонентів рецептур, які надають даній продукції найвищої ефективності, та спрощення методу її визначення. Моделювання процесу забруднення шкіри людини поліхлорованими біфенілами in vitro ускладнюється вибором моделі, оскільки існуючі моделі для визначення ризику шкідливої дії косметичної продукції на здоров'я споживача це лабораторні тварини (морські свинки, кролики) - моделі in vivo, або моделі ліофілізованого ксенотрансплантанту із шкіри свині (знежирена, спеціально оброблена висушена шкіра). Оскільки при контамінації шкіри людини поліхлорованими біфенілами основна частина цього екотоксиканту затримується на поверхні епідермісу, розчиняючись в виділеннях жирових залоз, а жировий склад шкіри свині найбільш приближений до складу жиру людини, тому для визначення поліхлорованих біфенілів з метою прогнозування повноти їх видалення з поверхні шкіри in vitro при обґрунтуванні рецептур засобів зовнішньої детоксикації, встановленні гранично-допустимих концентрацій рецептур, підвищення точності, відтворюваності, об'єктивності випробувань, та спрощення пробопідготовки експеримент було змодельовано на ізольованих знежирених смужках із шкіри свині, яка є одним з відходів переробки тваринної сировини. Перед проведенням експерименту дев'ять свіжих ізольованих незнежирених смужок шкіри свині термостатують за температури 35,0-36,9 °C протягом 40 хв. Температура нижче 35,0 °C або вище 36,9 °C не відповідає температурі шкіри здорової людини і може привести до отримання некоректних результатів. Час термостатування менше, ніж 40 хв. за температури 35,0-36,9 °C призводить до нерівномірного прогріву шкіри. При термостатуванні свіжих ізольованих незнежирених смужок шкіри свині за температури 35,0-36,9 °C протягом 40 хв. досягається її максимальний прогрів, про що свідчить вихід жиру на поверхню, тому термостатувати шкіру більше 40 хв. за температури 35,0-36,9 °C недоцільно. Крім того, при контролі ваги в процесі термостатування смужок виявилось, що при витримці більше ніж 70 хв. відбувається втрата ними трансепідермальної вологи, адже при навантаженні шкіри будь-якою жиророзчинною, або водорозчинною речовиною відбувається дезорганізація її ліпідного шару і речовина-забруднювач може нерівномірно дифундувати вглиб, що може негативно вплинути на результат експерименту, тому час витримки-термостатування смужок після навантаження розчином ПХБ певної концентрації повинен становити не більше 30 хв. Зменшення часу витримки-термостатування призводить до некоректних результатів, про що свідчить збільшення довірчого інтервалу при кількісному визначенні ПХБ і як слідство до похибки при виявленні оптимальних концентрацій компонентів рецептур засобів зовнішньої детоксикації. Дослідження виконують на дев'яти або дванадцяти свіжих ізольованих незнежирених смужках шкіри свині. Виконання випробувань на 9 або 12 свіжих ізольованих незнежирених смужках дозволяє підвищити достовірність оцінки ефективності засобу. Зменшення їх кількості виключає таку можливість. Виконання випробувань на більшій, ніж 12 кількості незнежирених смужок недоцільно, оскільки потребує збільшення загального часу дослідження. Використання в способі в якості моделі шкіри іншого походження, або знежиреної ліофізованої шкіри свині не дозволяє отримати достовірні результати, оскільки лише жировий склад незнежиреної шкіри свині найбільш приближений до складу жиру шкіри людини. 2 UA 111546 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 Поєднання запропонованих ознак дозволяє забезпечити очікуваний технічний результат: підвищення точності, відтворюваності та об'єктивності випробувань за рахунок моделювання експерименту на ізольованих незнежирених смужках шкіри свині, оскільки її жировий склад найбільш приближений до складу жиру людини, а при контамінації шкіри людини поліхлорованими біфенілами основна частина цього екотоксиканту затримується на поверхні епідермісу, розчиняючись у виділеннях жирових залоз; виявлення оптимальних концентрацій компонентів рецептур, які надають цій продукції найвищої ефективності; можливість прогнозування ефективності видалення поліхлорованих біфенілів з поверхні шкіри in vitro при обґрунтуванні рецептур засобів зовнішньої детоксикації; спрощення процесу пробопідготовки для кількісного визначення поліхлорованих біфенілів; економія реактивів при приготуванні проби для аналізу. Спосіб здійснюється таким чином. Для прогнозування повноти видалення поліхлорованих біфенілів з поверхні шкіри людини в досліді in vitro при обґрунтуванні рецептур засобів зовнішньої детоксикації дослідження виконують на дев'яти або дванадцяти свіжих ізольованих не знежирених смужках шкіри свині. Перед проведенням експерименту дев'ять свіжих ізольованих незнежирених смужок шкіри свині термостатують за температури 35,0-36,9 °C протягом 40 хв. Потім шість або вісім смужок навантажують розчином поліхлорованих біфенілів певної концентрації, контрольні смужки залишаються необробленими. Час витримки-термостатування смужок після навантаження розчином ПХБ становить 30 хв. Після цього три або чотири забруднені смужки обробляють розчином засобу для зовнішньої детоксикації, інші три або чотири - розчином рідкого мила, а три або чотири контрольні смужки - дистильованою водою, після чого залишки мийних засобів 3 змивають дистильованою водою, всі смужки тричі обробляють гексаном (по 5 см ), екстракти збирають у колби для визначення в екстрактах залишків поліхлорованих біфенілів з попереднім очищенням сірчаною кислотою, після чого робиться висновок про ефективність засобу зовнішньої детоксикації певної рецептури. Приклад здійснення способу Приклад 1. Перед проведенням експерименту дев'ять свіжих ізольованих незнежирених смужок шкіри свині термостатують за температури 36,6 °C протягом 40 хв. Потім шість смужок навантажують стандартним розчином поліхлорованих біфенілів*, контрольні смужки залишаються необробленими. Час витримки-термостатування смужок після навантаження розчином ПХБ становить 30 хв. Після цього три забруднені смужки обробляють розчином засобу для зовнішньої детоксикації за рецептурою № 1 (див. таблиця 3), інші три - розчином рідкого мила, а три контрольні смужки - дистильованою водою, після чого залишки мийних 3 засобів змивають дистильованою водою, всі смужки тричі обробляють гексаном (по 5 см ), екстракти збирають у колби для визначення залишків ПХБ хроматографічним методом з попереднім очищенням сірчаною кислотою. Серед ПХБ, що були нанесені на шкіру, визначались лише зазначені у таблиці 18, тобто речовини з різними молекулярними масами. Отримані дані свідчать про те, що найвищу ефективність даний засіб має відносно ПХБ з малою та середньою молекулярною масою (РСВ-18 - РСВ-54). Ефективність видалення речовин з високою молекулярною масою типу 2, 2', 3, 3', 4, 4', 5-Heptachlorobiphenyl (РСВ-170) та 2, 2', 3, 3', 4, 4', 5, 5' - Octachlorobiphenyl (PCB-194) дещо падає, проте у порівнянні з контролем вона досить висока. Отже можна зробити висновок про збалансованість рецептури за вмістом інгредієнтів, які забезпечують високу ефективність засобу. 3 UA 111546 C2 Таблиця 1 Склад стандарту 2, 2', 5 - Trichlorobiphenyl (PCB-18) 2, 3, 3' - Trichlorobiphenyl (PCB-20) 2, 4, 4' - Trichlorobiphenyl (PCB-28) 2, 4', 5 - Trichlorobiphenyl (PCB-31) 2, 2', 3, 5' - Tetraichlorobiphenyl (PCB-44) 2, 2', 5, 5' - Tetrachlorobiphenyl (PCB-52) 2, 2', 4, 5, 5' - Pentachlorobiphenyl (РСВ-101) 2, 3, 3', 4,4' - Pentachlorobiphenyl (PCB-105) 2, 3', 4, 4', 5 - Pentachlorobiphenyl (PCB-118) 2, 2', 3, 4, 4', 5' - Hexachlorobiphenyl (PCB-138) 2, 2', 3, 4', 5', 6 - Hexachlorobiphenyl (PCB-149) 2, 2', 4, 4', 5, 5' - Hexachlorobiphenyl (PCB-153) 2, 2', 3, 3', 4, 4', 5 - Heptachlorobiphenyl (РСВ-170) 2, 2', 3, 4, 4', 5, 5' - Heptachlorobiphenyl (PCB-180) 2, 2', 3, 3', 4, 4', 5, 5' - Octachlorobiphenyl (PCB-194) Ступінь чистоти, Концентрація, мкг % 99,0 10 99,0 10 99,0 10 99,0 10 99,0 10 99,0 10 99,0 10 99,0 10 99,0 10 99,0 10 99,0 10 99,0 10 99,0 10 99,0 10 99,0 10 Таблиця 2 Загальна кінцева рецептура засобу зовнішньої детоксикації № 1 2 3 4 5 6 7 Назва сировини А* Б* В* Консервант Шаромікс МСІ або Димол-П або Консервант Запашник Барвники натуральні харчові Вода питна або Вода дистильована Позначення НД За чинною НД (імпорт) За чинною НД (імпорт) За чинною НД (імпорт) За чинною НД (імпорт) Масова частка 10,00-20,00 5,00-6,00 8,00-10,00 0,05-0,10 ТУ У 22902465.007 За чинною НД (імпорт) За чинною НД (імпорт) ДСТУ 3845 ГОСТ 2874 або ГОСТ 6709 0,20-0,50 0,01-0,30 0,0001-0,05 До 100,00 *А, Б, В інгредієнти, що визначають ефективність засобу Таблиця 3 Робоча рецептура № 1 засобу зовнішньої детоксикації № 1 2 3 4 5 6 Назва сировини А* Б* В* Консервант Шаромікс МСІ або Димол-П або Консервант Запашник Барвники натуральні харчові Позначення НД За чинною НД (імпорт) За чинною НД (імпорт) За чинною НД (імпорт) За чинною НД (імпорт) Масова частка, % 10,00 5,00 8,00 0,10 ТУ У 22902465.007 За чинною НД (імпорт) За чинною НД (імпорт) ДСТУ 3845 4 0,30 0,05 UA 111546 C2 продовження таблиці 3 7 Вода питна або Вода дистильована ГОСТ 2874 або ГОСТ 6709 До 100,00 *А, Б, В інгредієнти, що визначають ефективність засобу Таблиця 4 Робоча рецептура № 2 засобу зовнішньої детоксикації № 1 2 3 4 5 6 7 Назва сировини А* Б* В* Консервант Шаромікс МСІ або Димол-П або Консервант Запашник Барвники натуральні харчові Вода питна або Вода дистильована Позначення НД За чинною НД (імпорт) За чинною НД (імпорт) За чинною НД (імпорт) За чинною НД (імпорт) Масова частка, % 20,00 6,00 10,00 0,10 ТУ У 22902465.007 За чинною НД (імпорт) За чинною НД (імпорт) ДСТУ 3845 0,30 0,05 ГОСТ 2874 або ГОСТ 6709 До 100,00 *А, Б, В інгредієнти, що визначають ефективність засобу Таблиця 5 Робоча рецептура № 3 засобу зовнішньої детоксикації № 1 2 3 4 7 Позначення НД За чинною НД (імпорт) За чинною НД (імпорт) За чинною НД (імпорт) За чинною НД (імпорт) або або Вода дистильована 5 6 Назва сировини А* Б* В* Консервант Шаромікс МСІ або Димол-П або Консервант Запашник Барвники натуральні харчові Вода питна ГОСТ 6709 Масова частка, % 21,00 6,00 10,00 0,10 ТУ У 22902465.007 За чинною НД (імпорт) За чинною НД (імпорт) ДСТУ 3845 ГОСТ 2874 *А, Б, В інгредієнти, що визначають ефективність засобу 5 5 0,30 0,05 До 100,00 UA 111546 C2 Таблиця 6 Робоча рецептура № 4 засобу зовнішньої детоксикації № 1 2 3 4 5 6 7 Назва сировини А* Б* В* Консервант Шаромікс МСІ або Димол-П або Консервант Запашник Барвники натуральні харчові Вода питна або Вода дистильована Позначення НД За чинною НД (імпорт) За чинною НД (імпорт) За чинною НД (імпорт) За чинною НД (імпорт) Масова частка, % 20,00 7,00 10,00 0,10 ТУ У 22902465.007 За чинною НД (імпорт) За чинною НД (імпорт) ДСТУ 3845 ГОСТ 2874 або ГОСТ 6709 0,30 0,05 До 100,00 *А, Б, В інгредієнти, що визначають ефективність засобу Таблиця 7 Робоча рецептура № 5 засобу зовнішньої детоксикації № 1 2 3 4 5 6 7 Назва сировини А* Б* В* Консервант Шаромікс МСІ або Димол-П або Консервант Запашник Барвники натуральні харчові Вода питна або Вода дистильована Позначення НД За чинною НД (імпорт) За чинною НД (імпорт) За чинною НД (імпорт) За чинною НД (імпорт) Масова частка, % 20,00 6,00 11,00 0,10 ТУ У 22902465.007 За чинною НД (імпорт) За чинною НД (імпорт) ДСТУ 3845 ГОСТ 2874 або ГОСТ 6709 0,30 0,05 До 100,00 *А, Б, В інгредієнти, що визначають ефективність засобу Таблиця 8 Робоча рецептура № 6 засобу зовнішньої детоксикації № 1 2 3 4 5 6 Назва сировини А* Б* В* Консервант Шаромікс МСІ або Димол-П або Консервант Запашник Барвники натуральні харчові Позначення НД За чинною НД (імпорт) За чинною НД (імпорт) За чинною НД (імпорт) За чинною НД (імпорт) Масова частка, % 9,00 5,00 8,00 0,10 ТУ У 22902465.007 За чинною НД (імпорт) За чинною НД (імпорт) ДСТУ 3845 6 0,30 0,05 UA 111546 C2 продовження таблиці 8 7 Вода питна або Вода дистильована ГОСТ 2874 або ГОСТ 6709 До 100,00 *А, Б, В інгредієнти, що визначають ефективність засобу Таблиця 9 Робоча рецептура № 7 засобу зовнішньої детоксикації № 1 2 3 4 5 6 7 Назва сировини А* Б* В* Консервант Шаромікс МСІ або Димол-П або Консервант Запашник Барвники натуральні харчові Вода питна або Вода дистильована Позначення НД За чинною НД (імпорт) За чинною НД (імпорт) За чинною НД (імпорт) За чинною НД (імпорт) Масова частка, % 10,00 4,00 8,00 0,10 ТУ У 22902465.007 За чинною НД (імпорт) За чинною НД (імпорт) ДСТУ3845 ГОСТ 2874 або ГОСТ 6709 0,30 0,05 До 100,00 *А, Б, В інгредієнти, що визначають ефективність засобу Таблиця 10 Робоча рецептура № 8 засобу зовнішньої детоксикації № 1 2 3 4 5 6 7 Назва сировини А* Б* В* Консервант Шаромікс МСІ або Димол-П або Консервант Запашник Барвники натуральні харчові Вода питна або Вода дистильована Позначення НД За чинною НД (імпорт) За чинною НД (імпорт) За чинною НД (імпорт) За чинною НД (імпорт) Масова частка, % 10,00 5,00 7,00 0,10 ТУ У 22902465.007 За чинною НД (імпорт) За чинною НД (імпорт) ДСТУ 3845 ГОСТ 2874 або ГОСТ 6709 *А, Б, В інгредієнти, що визначають ефективність засобу 5 7 0,30 0,05 До 100,00 UA 111546 C2 Таблиця 11 Робоча рецептура № 9 засобу зовнішньої детоксикації № 1 2 3 4 5 6 7 Назва сировини А* Б* В* Консервант Шаромікс МСІ або Димол-П або Консервант Запашник Барвники натуральні харчові Вода питна або Вода дистильована Позначення НД За чинною НД (імпорт) За чинною НД (імпорт) За чинною НД (імпорт) За чинною НД (імпорт) Масова частка, % 20,00 5,00 8,00 0,10 ТУ У 22902465.007 За чинною НД (імпорт) За чинною НД (імпорт) ДСТУ 3845 ГОСТ 2874 або ГОСТ 6709 0,30 0,05 До 100,00 *А, Б, В інгредієнти, що визначають ефективність засобу Таблиця 12 Робоча рецептура № 10 засобу зовнішньої детоксикації № 1 2 3 4 5 6 7 Назва сировини А* Б* В* Консервант Шаромікс МСІ або Димол-П або Консервант Запашник Барвники натуральні харчові Вода питна або Вода дистильована Позначення НД За чинною НД (імпорт) За чинною НД (імпорт) За чинною НД (імпорт) За чинною НД (імпорт) Масова частка, % 20,00 5,00 10,00 0,10 ТУ У 22902465.007 За чинною НД (імпорт) За чинною НД (імпорт) ДСТУ 3845 ГОСТ 2874 або ГОСТ 6709 0,30 0,05 До 100,00 *А, Б, В інгредієнти, що визначають ефективність засобу Таблиця 13 Робоча рецептура № 11 засобу зовнішньої детоксикації № 1 2 3 4 5 6 Назва сировини А* Б* Д* Консервант Шаромікс МСІ або Димол-П або Консервант Запашник Барвники натуральні харчові Позначення НД За чинною НД (імпорт) За чинною НД (імпорт) За чинною НД (імпорт) За чинною НД (імпорт) Масова частка, % 20,00 7,00 8,00 0,10 ТУ У 22902465.007 За чинною НД (імпорт) За чинною НД (імпорт) ДСТУ 3845 8 0,30 0,05 UA 111546 C2 продовження таблиці 13 7 Вода питна або Вода дистильована ГОСТ 2874 або ГОСТ 6709 До 100,00 *А, Б, В інгредієнти, що визначають ефективність засобу Таблиця 14 Робоча рецептура № 12 засобу зовнішньої детоксикації № 1 2 3 4 5 6 7 Назва сировини А* Б* В* Консервант Шаромікс МСІ або Димол-П або Консервант Запашник Барвники натуральні харчові Вода питна або Вода дистильована Позначення НД За чинною НД (імпорт) За чинною НД (імпорт) За чинною НД (імпорт) За чинною НД (імпорт) Масова частка, % 10,00 5,00 10,00 0,10 ТУ У 22902465.007 За чинною НД (імпорт) За чинною НД (імпорт) ДСТУ 3845 ГОСТ 2874 або ГОСТ 6709 0,30 0,05 До 100,00 *А, Б, В інгредієнти, що визначають ефективність засобу Таблиця 15 Робоча рецептура № 13 засобу зовнішньої детоксикації № 1 2 3 4 5 6 7 Назва сировини А* Б* В* Консервант Шаромікс МСІ або Димол-П або Консервант Запашник Барвники натуральні харчові Вода питна або Вода дистильована Позначення НД За чинною НД (імпорт) За чинною НД (імпорт) За чинною НД (імпорт) За чинною НД (імпорт) Масова частка, % 10,00 6,00 8,00 0,10 ТУ У 22902465.007 За чинною НД (імпорт) За чинною НД (імпорт) ДСТУ 3845 ГОСТ 2874 або ГОСТ 6709 *А, Б, В інгредієнти, що визначають ефективність засобу 5 9 0,30 0,05 До 100,00 UA 111546 C2 Таблиця 16 Робоча рецептура № 14 засобу зовнішньої детоксикації № 1 2 3 4 5 6 7 Назва сировини А* Б* В* Консервант Шаромікс МСІ або Димол-П або Консервант Запашник Барвники натуральні харчові Вода питна або Вода дистильована Позначення НД За чинною НД (імпорт) За чинною НД (імпорт) За чинною НД (імпорт) За чинною НД (імпорт) Масова частка, % 10,00 6,00 10,00 0,10 ТУ У 22902465.007 За чинною НД (імпорт) За чинною НД (імпорт) ДСТУ 3845 ГОСТ 2874 або ГОСТ 6709 0,30 0,05 До 100,00 *А, Б, В інгредієнти, що визначають ефективність засобу Таблиця 17 Робоча рецептура № 15 засобу зовнішньої детоксикації № 1 2 3 4 5 6 7 Назва сировини А* Б* В* Консервант Шаромікс МСІ або Димол-П або Консервант Запашник Барвники натуральні харчові Вода питна або Вода дистильована Позначення НД За чинною НД (імпорт) За чинною НД (імпорт) За чинною НД (імпорт) За чинною НД (імпорт) Масова частка, % 20,00 6,00 8,00 0,10 ТУ У 22902465.007 За чинною НД (імпорт) За чинною НД (імпорт) ДСТУ 3845 ГОСТ 2874 або ГОСТ 6709 *А, Б, В інгредієнти, що визначають ефективність засобу 10 0,30 0,05 До 100,00 UA 111546 C2 Таблиця 18 Визначення ефективності видалення ПХБ в досліді in vitro при обґрунтуванні рецептур засобів зовнішньої детоксикації ВвеНайменування ПХБ дено, мкг 2, 2', 5Trichlorobiphenyl 0,1 (PCB-18) 2, 3, 3'Trichlorobiphenyl 0,1 (PCB-20) 2, 4, 4' Trichlorobiphenyl 0,1 (РСВ-28) 2, 4', 5Trichlorobiphenyl од (PCB-31) 2, 2', 3, 5'Tetraichlorobiphen 0,1 yl (PCB-44) 2, 2', 5, 5' Tetrachlorobiphenyl 0,1 (РСВ-52) 2, 2', 3, 3', 4, 4', 5Heptachlorobiphenyl 0,1 (РСВ-170) 2, 2', 3, 3', 4, 4', 5, 5'0,1 Octachlorobiphenyl (РСВ-194) 1* 2* 3* 4* 5* 6** Знайдено мкг Номер рецептури 7** 8** 9* 10* н/в н/в н/в н/в н/в н/в н/в н/в н/в н/в н/в н/в н/в н/в н/в н/в н/в н/в н/в н/в н/в н/в н/в н/в н/в н/в н/в н/в н/в н/в н/в н/в н/в н/в н/в 1,0· 10-2 н/в н/в н/в н/в н/в н/в н/в н/в н/в н/в н/в н/в н/в н/в 1,0· 10-2 н/в н/в н/в н/в н/в н/в н/в н/в н/в н/в н/в н/в н/в н/в 2,0· 10-2 1,0· 0,2·10-2 10-2 н/в н/в н/в н/в н/в н/в н/в н/в н/в н/в н/в н/в 4,1· 10-2 3,6· 1,0· 4,1·10-2 10-2 10-2 н/в н/в 1,0· 10-2 1,0· 10-2 1,0· 10-2 н/в 1,1 1,1 1,1 10-2 10-2 10-2 1,1 10-2 1,1 10-2 4,1 10-2 3,9· 1,1 4,110-2 10-2 10-2 1,1 10-2 1,1 10-2 1,1 10-2 1,1 10-2 1,1 10-2 1,1 10-2 1,4 1,4· 1,4 -2 10-2 10 10-2 1,4 10-2 1,4· 10-2 5,1· 10-2 4,0· 1,4 6,110-2 10-2 10-2 1,4· 10-2 1,4 10-2 1,4 10-2 1,4 10-2 1,4 10-2 1,4 10-2 * ефективний ** слабка ефективність за рахунок розбалансованості рецептури 11 11* 12* 13* 14* 15* UA 111546 C2 5 З даних таблиці видно, що засоби зовнішньої детоксикації за рецептурами № 6-8 менш ефективні по видаленню ПХБ у порівнянні з рецептурами № 1-5 і № 9-15, оскільки в рецептурі № 6 зменшено вміст компонента А до 9,0 %, в рецептурі № 7 масова частка компонента Б становить 4,0 %, а в рецептурі № 8 вміст компонента В становить 7,0 %, що недостатньо для змивання забруднювачів з поверхні смужок шкіри свині. Проте у порівнянні з контролем вони теж є ефективними. Таблиця 19 Визначення залишків ПХБ на не знежирених смужках шкіри свині (контроль) після їх обробки рідким милом (1) та дистильованою водою (2) Найменування ПХБ 2, 2', 5 - Trichlorobiphenyl (PCB-18) 2, 3, 3' - Trichlorobiphenyl (PCB-20) 2, 4, 4' - Trichlorobiphenyl (PCB-28) 2, 4', 5 - Trichlorobiphenyl (PCB-31) 2, 2', 3, 5' - Tetraichlorobiphenyl (РСВ-44) 2, 2', 5, 5' - Tetrachlorobiphenyl (РСВ-52) 2, 2', 3, 3', 4, 4', 5 - Heptachlorobiphenyl (PCB-170) 2, 2', 3, 3', 4, 4', 5, 5' - Octachlorobiphenyl (PCB-194) 10 15 20 25 30 35 40 Введено, мкг 1 2 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 Визначено, мкг 1 2 -2 -2 8,9·10 9,9·10 -2 -2 8,1·10 9,0·10 -2 -1 8,9·10 1,1·10 -2 -1 9,0·10 1,2·10 -2 -1 9,1·10 9,8·10 -2 -1 9,7·10 9,9·10 -2 -1 9,9·10 1,0·10 -2 -1 9,9·10 1,1·10 При виборі найбільш ефективної і збалансованої рецептури необхідно також враховувати, зовнішній вигляд отриманого засобу. Так, наприклад, в рецептурі № 7 масова частка компонента Б становить 4,0 % і при ній не досягається достатнє емульгування деяких компонентів рецептури, тому не тільки дещо низька ефективність засобу, а й зовнішній вигляд системи вказує на її недосконалість за співвідношенням складових. В збільшенні масової частки цього компонента більше 6,0 % (рецептура № 7) немає сенсу, оскільки 6,0 % цього компонента достатньо для здійснення процесу емульгування та підтримання ефективності засобу, і тому збільшення концентрації компонента Б є не економічним. Не економічним також є збільшення масової частки компонента А до 21,0 % в рецептурі № 3 і компонента В в рецептурі № 5 до 11,0 %, оскільки висока ефективність засобів досягається при масовій частці компонента А на рівні 20,00 %, а компонента В - 10,00 %. Крім того, при концентрації компонента А>20,00 %, а компонента В>10,00 % збільшується втрата шкірою трансепідермальної вологи, що може привести до сухості, розтріскування шкіри та контамінації організму токсикантами органічного і неорганічного походження. Проаналізувавши отримані дані, можна встановити граничні концентрації інгредієнтів, при яких досягається синергізм їх дії, забезпечується ефективність та зовнішній вигляд розроблюваного засобу зовнішньої детоксикації. Загальна кінцева рецептура збалансованого за інгредієнтами та ефективністю засобу зовнішньої детоксикації представлена в таблиці 2. ФОРМУЛА ВИНАХОДУ Спосіб прогнозування повноти видалення поліхлорованих біфенілів з поверхні шкіри людини в досліді in vitro при обґрунтуванні рецептур засобів зовнішньої детоксикації, який передбачає застосування фізико-хімічних методів аналізу виявлення даної групи речовин в біоматеріалі, який відрізняється тим, що дослідження виконують на дев'яти або дванадцяти свіжих ізольованих незнежирених смужках із шкіри свині, шість або вісім із яких навантажують розчином поліхлорованих біфенілів певної концентрації, контрольні смужки залишаються необробленими, після цього три або чотири забруднені смужки обробляють розчином засобу для зовнішньої детоксикації, інші три або чотири - розчином рідкого мила, а три або чотири контрольні смужки - дистильованою водою, після чого залишки мийних засобів змивають дистильованою водою, всі смужки обробляють гексаном, екстракти збирають у колби для визначення в екстрактах залишків поліхлорованих біфенілів з попереднім очищенням сірчаною кислотою, що дозволяє зробити висновок про ефективність засобу зовнішньої детоксикації певної рецептури. 45 12 UA 111546 C2 Комп’ютерна верстка О. Гергіль Державна служба інтелектуальної власності України, вул. Василя Липківського, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут інтелектуальної власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 13