Вакцина “клебсан” інактивована концентрована проти клебсієльозу тварин

Вакцина «Клебсан» інактивована концентрована проти клебсієльозу тварин. Корисна модель відноситься до галузі ветеринарної медицини, біотехнології, імунології, мікробіології і виробництва біологічних препаратів. Вакцина аналогів не має. В медичній літературі зазначається, що засоби специфічної профілактики при клебсієльозі не розроблені [1]. Відома близька до аналогу вакцина [2] асоційована інактивована проти колібактеріозу, сальмонельозу, клебсієльозу і протейної інфекції молодняка сільськогосподарських тварин і пушних звірів (вакцина ОКЗ), яка використовується для профілактики вище вказаних захворювань великої та дрібної рогатої худоби, свиней, пушних звірів (лисиці, песці). Вакцину застосовують для щеплення в пунктах, неблагополучних щодо гострих кишкових захворювань. Імунітет у вакцинованих тварин наступає через 2 неділі після другої вакцинації. Триває протягом 6 місяців. Вакцина містить мікробні культури 9 вакцинних штамів ентеробактерій, найбільш поширених збудників гострих кишкових захворювань, в тому числі і Klebsiella pnewnoniae. Мікробні культури отримані методом глибокого культивування в рідкому поживному середовищі, інактивовані формаліном або етанолом і депоновані на гідроксиді алюмінію. Літературні дані свідчать, що клебсієльоз часто ускладнюється стафілококовою інфекцією і в таких випадках дана вакцина буде малоефективною [3]. Відомі стафілококові анатоксин-вакцини [4, 5], для виготовлення яких використовується Staphylococcus aureus з вираженими плазмокоагулюючими властивостями. Вакцина пропонується в якості ефективного і економічно вигідного метода для лікування і профілактики маститів у корів. В умовах України перебіг клебсієльозу нерідко ускладнюється стафілококовою інфекцією, збудником якої являється Staphylococcus aureus. В таких випадках виникає необхідність здійснювати дворазові щеплення проти клебсієльозу, а через 2-3 неділі цих же тварин треба щепити двічі проти стафілококозу. При такій схемі щеплення тварин проводять протягом 2 місяців, що не відповідає вимогам здійснення термінових заходів, виходячи із складної епізоотичної ситуації. Крім того, при клебсієльозі тварин, ускладненого стафілококозом, вакцини 2, 4, 5 мало ефективні, а одночасне використання таких вакцин для щеплених тварин проти клебсієльозу і стафілококозу практично не можливе ізза відсутності наукового обґрунтування. В основу корисної моделі поставлені наступні завдання: - створення вакцини інактивованої концентрованої для одночасної профілактики клебсієльозу тварин та клебсієльозу ускладненого стафілококовою інфекцією; - підвищення специфічної активності вакцини шляхом зменшення її негативного впливу на щеплений організм і стимуляції синтезу антитіл за рахунок удосконалення технології її виготовлення. Технічний результат корисної моделі полягає в підвищенні імуногенної активності та розширенні антигенного спектру вакцини, а також зниженні її реактогенності. Викладена мета досягається наступним шляхом: - здійснення поглибленої інактивації культур виробничих штамів мікроорганізмів із зміною температурного режиму інактивації від 38±0,5°С до 24±2,0°С та додаванням розчину формаліну - 0,3%; - підтримування в анакультурах рН в межах 7,2±0,2 протягом всього періоду інактивації; - постійним перемішуванням анакультур протягом 5-7 діб інактивації та періодичним перемішуванням протягом наступних 5-7 діб інактивації з відбором проб для контролю повноти інактивації з використанням білих мишей або Tetrachymena piriformis; - в анакультурах виробничих штамів мікроорганізмів, де встановлено відсутність їх росту і токсичності, знижують рН до 5,8±0,2 відповідними розчинами хлористоводневої або аскорбінової кислоти та вносять 3%-вий стерильний розчин алюмінію гідроксиду з розрахунку 10-12% до загального об’єму анакультур. Сорбція антигенів триває 36-48 годин при температурі 24±2,0°С з послідуючою декантацією 10-20% надосадкової рідини; - в ємності з окремими анакультурами, що мають температуру 42,0±2,0°С вносять 1%-вий стерильний розчин агар-агару за температури 45,0±2,0°С з розрахунку 0,05% сухої речовини, імуномодулюючі і стабілізуючі засоби за спеціальним прописом [патент №65816 Україна, МПК А61К39/08, №2003055008; Заявлено 30.05.2003; Опубл. 15.04.2004, Бюл. №4]; - приготовлені анакультури клебсієл та стафілококів змішують у відповідних пропорціях, вирівнюють рН до 7,2-7,4, вносять 1%-вий спиртовий розчин бриліантової зелені з розрахунку 0,02-0,04%, перемішують і відбирають проби для технологічного контролю готового продукту. Вакцина «Клебсан» концентрована інактивована проти клебсієльозу тварин містить розчинні і корпускулярні антигени відселекціонованих, інактивованих епізоотичних штамів мікроорганізмів: Klebsiella pneumoniae, штам ВБ-05, Staphylococcus aureus «Ш-1/157» [Патент України 65810 А7А61К 39/085, 30.05.2003. Бюл. №4], інактивуючі речовини формальдегід і брильянтовий зелений, сорбент і ад’ювант алюмінію гідроксид, імуномодулюючий і стабілізуючий антитоксичний засіб на основі екстрактів лікарських рослин та компонентів природного походження. В 1 см3 вакцини міститься, (в %): Антигени Klebsiella pneumoniae 60,0-70,0 Антигени Staphylococcus aureus 20,0-30,0 Ад’ювант (алюмінію гідроксид) 10,0-12,0 Формальдегід залишковий 0,025-0,03 Брильянтовий зелений 0,01-0,02 Імуномодулюючий і стабілізуючий антитоксичний засіб за спеціальним прописом 10,0-12,0 Вакцина «Клебсан» призначена для профілактичного щеплення великої рогатої худоби і свиней. Щепленню підлягає поголів’я, виходячи з епізоотичної ситуації. Дозволяється щеплення слабких і хворих на клебсієльоз тва рин. Перед використанням флакони з вакциною переглядають, струшують, підігрівають у теплій воді до температури 36,0-38,0°С. Вакцину вводять підшкірне або внутрішньом’язово в ділянці шиї або внутрішньої поверхні стегна. Вакцину застосовують у дозах відповідно до віку тварин та в залежності від епізоотичного стану господарства. Щеплюють тварин двічі з інтервалом 7-14 діб, а ревакцинацію здійснюють через 6 місяців одноразовим щепленням. При складній епізоотичній ситуації ревакцинувати тварин бажано через 3-4 місяці до поліпшення епізоотичного стану. Вакцину застосовують у наступних дозах: Дози,см3 Вид та вік тварин 1 Корови, нетелі за 60-50- і 40-30 днів до отелу Телята віком до 30 днів Телята старші 30 днів Свиноматки перед осіменінням і за 30-15 днів до опоросу Поросята віком до 30 днів Поросята віком 1-2 міс. Поросята віком 2-4 міс. Поросята старші 4 міс. вакцинація І II 2 3 10,0 10,0 2,0 3.0 3,0 3,0 ревакцинація 4 10,0 5,0 5,0 5,0 10,0 10,0 1,0 2,0 3,0 3,0 2,0 2,0 3,0 5,0 2,0 3,0 5,0 5,0 Напружений імунітет у щеплених тварин з’являється через 2 тижні після другого щеплення і триває протягом 6 місяців. Вираженість та тривалість імунітету залежать від фізіологічного стану щеплених тварин. В організмі щеплених тварин відбувається імунологічна перебудова, про що свідчать показники гуморального і клітинного імунітету. Так, титри аглютинінів на 7-му добу після другого щеплення зростають в 3-4 рази відносно вихідних даних, протективна і нейтралізуюча властивість сироваток крові щеплених тварин з’являється через 14 діб після першого щеплення, достовірно зростає фагоцитарна активність крові та завершеність фагоцитозу. При спалахах клебсієльозної інфекції одночасно з ешерихіозами та сальмонельозами вакцину «Клебсан» застосовують одночасно роздільно з вакциною «Сердосан» в дозах указаних в настанові. Вакцина «Клебсан» характеризується високою специфічною ефективністю і не має обмежень для застосування, забезпечує одночасне формування імунітету проти клебсієльозу ускладненого стафілококовою інфекцією. Вакцина має наступні переваги перед близькими до аналогів: - містить антигени штамів мікроорганізмів, які циркулюють на території України; - може використовуватись не тільки проти клебсієльозу, а й проти клебсієльозу ускладненого стафілококовою інфекцією; - містить засоби активації синтезу антитіл, в тому числі і інактивований стафілококовий антиген, які зменшують негативний вплив препарату на щеплений організм, завдяки чому вакцину дозволяється застосовувати навіть ослабленим і хворим тваринам з лікувальною метою. При застосуванні вакцини при септичному перебігу захворювання втрати тварин скорочуються в 3-6 разів; Серед тварин щепленних вакциною «Клебсан» зменшується захворюваність пневмоніями, гастроентероколітами, маститами, ендометритами, поліпшується відтворювальна функція самок та збереженість новонароджених телят і поросят. Протипоказання щодо застосування вакцини відсутні. Джерела інформації. 1. Поздеев O.K. Медицинская микробиология / Под ред. акад. РАМП В.И. Покровского. -М: ГЭОТАР-МЕД, 2001. - С.371-373. 2. Вакцина ассоциированная инактивированная против колибактериоза, сальмонеллёза, клебсиеллёза и протейной инфекции молодняка сельськохозяйственных животных и пушных зверей (вакцина ОКЗ) //РОАО Росагробиопром, Торговый дом Биопром. -М: 2004. - С.144. 3. Евглевская Е.А., Поздеев А.В. Особенности специфической профилактики и лечения стафилококкозов //Матер, итог. науч. сессии КГМУ-Курск, 1997. - С.55-56. 4. Евглевский А.А., Поздеев А.В. Способ получения стафилококковой вакцины //Патенты на изобретения №99100824/13 (001494) от 26.01.99. 5. Поздеев А.В. Совершенствование технологии получения стафилококковой анатоксин-вакцины и испытание её еффективности при мастите у коров //Автореферат на соиск.уч.степени канд.вет.наук, Курск. - 1999. - 18с.