Спосіб кріоконсервації сперми американського веслоноса

Спосіб кріоконсервації сперми американського веслоноса, що передбачає введення у черевну порожнину самців американського веслоноса препарату для отримання сперми та розбавлення її класичним 74 мМ розчином Трис-НСl-буфера, який 3 50896 Нажаль, американського веслоноса в нашу країну завозили більш ніж тридцять років тому. За цей час у стадах цих риб завдяки близькоспорідненим схрещуванням впав рівень гетерозиготності. Це може призвести до так званої інбредної депресії, яка проявляється у зниженні життєстійкості і низки рибогосподарських показників. Тому для так званого освіження крові доцільно використовувати кріоконсервовану сперму, як найбільш практичний варіант для збереження і перевезення генетичного матеріалу. Використання існуючого способу щодо американського веслоноса дозволяє отримувати 55-70% розморожених рухливих сперматозоїдів з часом активного поступального руху до 3 хвилин [Методическое пособие по криоконсервации спермы карпа, лососевых и осетровых видов рыб. Государственный комитет Российской федерации по рыболовству и Всероссийский научноисследовательский институт прудового рыбного хозяйства, М., 1997. - 10с.]. Цей спосіб передбачає використання стимулюючих виділення сперми ін'єкцій водної суспензії ацетонованих гіпофізів заготовлених від коропа, ляща, сазана, карася. Для розбавлення сперми використовується розчин ДМСО і курячого жовтка приготований у Трис-НСІбуфері. Недоліком даного прототипу є недостатньо високий вихід життєздатних сперміїв і малий час їх руху. Зазначені недоліки усуваються запропонованим способом. В основу корисної моделі поставлено задачу розробити спосіб кріоконсервації сперми американського веслоноса, який би забезпечив більший вихід життєздатних сперміїв і час їхнього руху. Комп’ютерна верстка А. Рябко 4 Спосіб здійснюється наступним чином. Угорський препарат «Овопель» вводиться самцям американського веслоноса в черевну порожнину перед першим черевним плавцем з розрахунку 0,65гранули/кг. Через 48 годин отримується сперма високої якості. Рух майже 100% сперматозоїдів здійснюється протягом 10 хвилин. Для розбавлення сперми використовується класичний 74мМ розчин Трис-НСІ-буфера для виготовлення на його основі розробленого нами розчину з 18,2% (за об'ємом) курячого жовтка та 18,2% (за об'ємом) ДМСО (диметилсульфоксиду). Цим розчином розбавляється сперма. Заморожування проводиться у саморобних пакетах з алюмінієвої фольги ємністю 25мл кожен за класичною програмою: 1. В температурному діапазоні від +20°С до 15°С швидкість охолодження складала 2-3град/хв. 2. В температурному діапазоні від -15°С до 70°С швидкість охолодження складала 15рад/хв. 3. Перенесення ампул у рідкий азот. Розморожування сперми проводять у воді при температурі 40°С протягом 45с. Для активації розмороженої сперми використовується ставова вода. 80-90% розморожених активованих сперматозоїдів зберігають поступальний прямолінійний рух протягом 7хв. Наш доробок у даній розробці становить унікальну, теоретично і практично нову складову, яка, на відміну від зареєстрованих раніше різними авторами методик, полягає у використанні гонадотропного стимулятора «Овопель» у комбінації з розробленим нами кріозахисним розчином. Підписне Тираж 26 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601