Спосіб визначення мембранопротекторної активності тканинних компонентів вушка серця

Спосіб визначення мембранопротекторної активності тканинних компонентів вушка серця, що включає проведення діагностичної цитолітичної проби in vitro в присутності екстрагованих компонентів тканинного субстрату, який відрізняється 3 53118 На предметне скло вміщують 20 мкл суспензію нативних лейкоцитів в аутологічній плазмі і витримують при 37 °С в умовах вологої камери впродовж 45 хв., після чого до інкубату додають аналогічний об'єм стандартизованого водного екстракту тканинного субстрату вушка серця, суміш додаткововитримують при 18-20 °С впродовж 30 хв. і досліджують під мікроскопом методом поляризованої флуоресценції. Висновок про мембранопротекторний ефект екстракту тканини вушка в мікропрепараті роблять за ступенем гальмування реакції лейкоцитолізу. Приклад 1. На предметне скло внесли 20 мкл суспензії лейкоцитів білої миші в аутологічній плазмі і витримали при 37 °С в умовах вологої камери, зокрема в чашці Петрі в термостаті, впродовж 45 хв., після чого до інкубату внесли 20 мкл стандартизованого за вмістом білку водного екстракту тканинного субстрату вушка серця, обережно перемішали і додатково витримали при 20 °С впродовж 30 хв. у затемненому місці, після чого отриманий мікропрепарат досліджували під мікроскопом методом поляризованої флуоресценції. Звертали увагу на характер лейкоцитолізу і характеристику спектрального складу флуоресценції клітинних ядер, а висновок про мембранопротекторний ефект екстракту тканини вушка формулювали за ступенем гальмування реакції лейкоцитолізу. Так, якщо в контролі цитоліз лейкоцитів після інкубації в аутологічній плазмі характеризувався вираженим набряком клітин, розмиванням структури їх зовнішньої мембрани і виходом ядрової субстанції назовні, то в результаті дії чинників екстракту тканинного суб 4 страту вушка серця ізольовані лейкоцити зберігали притаманну їм структуру і характер поляризованої флуоресценції. Приклад 2. Мембранопротекторну дію правого і лівого вушок серця лабораторних тварин досліджували запропонованим способом, а результати порівнювали з аналогічними, отриманими за відомим способом, тобто з використанням тесту на резистентність мембран еритроцитів до гемолітичного чинника в реакції кислотного гемолізу. В результаті дослідження, виконаного на вушках серця 5 білих щурів, встановлено, що мембранопротекторна дія тканинних компонентів правого і лівого вушка не співпадають за інтенсивністю (табл.). Так, водний екстракт тканини правого вушка суттєво перевищував протекторний ефект тканини лівого вушка серця: рівень лейкоцитолізу при інкубації клітин з екстрактом правого вушка був значно меншим, порівняно з впливом екстракту з лівого вушка. З наведених у таблиці даних видно, що порівняно із вираженим цитолізом нативних лейкоцитів в аутологічній плазмі, чому відповідає максимальне значення індексу (1,0), екстракти правого і лівого вушка суттєво гальмують цитолітичний процес: на 55 % правого та на 40 % - лівого вушків (Р>0,05 ). При цьому ефект гальмівної дії компонентів екстракту правого вушка на 15 % переважає аналогічну дію лівого, може слугувати доказом існування регуляторної за функціональною направленістю генетично детермінованої системи захисту клітинних мембран клітин крові і судинної стінки від дії цитолітичних чинників. Таблиця Мембранопротекторний ефект екстракту тканини вушків серця в експерименті на лабораторних тваринах (Х±m) Показник Індекс лейкоцитолізу Індекс резистентності мембран еритроцитів 1,0 Екстракт правого вушка (d) 0,45±0,02 Екстракт лівого вушка (s) 0,6±0,02 >0,05 23,4±2,6 44.6±7,3 32,8±6,6 >0,05 n Контроль 5 5 Аналогічний результат отримано при дослідженні мембранопротекторної дії екстрактів тканини вушків серця за відомим способом: екстракт правого вушка обмежує активність гемолітичного процесу на 90,6 %, а лівого – на 40,2 % порівняно з контролем (Р>0,05). Отже, з урахуванням доказів вищої, ніж за відомим способом, методичної доступності запропонованого способу, останній знайде використання в медичній практиці, зокрема, в реаніматології, інтенсивній терапії тощо для експрес-діагностики Комп’ютерна верстка Г. Паяльніков Pd/s ризику емболії, перш за все тромбоемболії, судин малого кола кровообігу, а також в експериментальній медицині. Джерела інформації, які слід взяти до уваги: 1. Тураш І.Б. Мембранотропний ефект компонентів тканин серця за впливом на резистентність еритроцитів у тестовій пробі in vitro // X міжнародний медичний конгрес студентів і молодих учених. Матеріали конгресу. -Тернопіль, 2006. - С. 125. Підписне Тираж 26 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601