Спосіб діагностики тяжкості аутоімунного ураження при системному червоному вовчаку та дерматоміозиті у жінок

Спосіб діагностики тяжкості аутоімунного ураження при системному червоному вовчаку та дерматоміозиті у жінок, який полягає у визначенні діагностичних маркерів тяжкості аутоімунного ураження в крові, який відрізняється тим, що в мононуклеарах периферійної крові жінок виявляють Y-хромосому методом полімеразної ланцюгової реакції в режимі реального часу. (19) (21) u201100233 (22) 06.01.2011 (24) 11.07.2011 (46) 11.07.2011, Бюл.№ 13, 2011 р. (72) ГРИНЬ ВЛАДИСЛАВ КОСТЯНТИНОВИЧ, ГНИЛОРИБОВ АНДРІЙ МИХАЙЛОВИЧ, ТРУБНІКОВА НАДІЯ МИКОЛАІВНА, ПОЛУЛЯХ ОЛЬГА ЄВГЕНІВНА, ІВАЩЕНКО ЄВГЕНІЯ СЕРГІІВНА, МЕЛЬОХІНА ВАЛЕРІЯ ОЛЕКСАНДРІВНА, РІДЖОК ВІКТОРІЯ ВОЛОДИМИРІВНА (73) ДЕРЖАВНА УСТАНОВА "ІНСТИТУТ НЕВІДКЛАДНОЇ І ВІДНОВНОЇ ХІРУРГІЇ ІМ. В.К.ГУСАКА 3 61256 ляє визначати полісистемність і виявляти АНАнегативні форми даних захворювань. Приклад. Пацієнтка Л., 33 роки, знаходилась на стаціонарному лікуванні з основним діагнозом: системний червоний вовчак, хронічний перебіг, активність II ступеня з ураженням суглобів (артралгії), м'язів (міалгії), полісерозитом в анамнезі (плеврит, перікардит), міокардіосклерозом Н І, ФК II, люпуснефритом ХПНо, імунологічними порушеннями. Надійшла зі скаргами на біль у великих суглобах, м'язах, хребті, задишку при ходьбі, періодичні колючі болі в області серця, виражену загальну слабкість, субфебрільну температуру, появу синців на шкірі ніг і тулуба, прискорене сечовипускання, переважно вночі. Лабораторні дослідження виявили наростання анемії (Ер-3,39х10/12; Нв-93), лейкопенію (Л-2,3х10/9), підвищений рівень креатиніну і сечовини (до 10,8 ммоль/л). Значення сіромукоїду та С-реактивного білку відповідали верхнім межам норми. В сечі пацієнтки виявили протеїн у кількості 0,40-1,44 г/л; в крові були присутні LE-клітини (1012 на 100 нейтрофілів); в сироватці крові визначалися антитіла до нативної ДНК. Пацієнтку Л. обстежили на мікрохімерізм. Для цього в вакутайнери з гепарином Venosafe (Terumo, Бельгия) з ліктьової вени набрали 10 мл периферійної крові, з якої виділили мононуклеари на градієнті щільності фікол-урографіну [р=1,077]. Концентрацію очищених мононуклеарів довели до 7 2,5x10 клітин/мл буфером PBS, а потім із 250 мкл отриманої суспензії виділили геномну ДНК на колонках NucleoSpin® Blood QuickPure (MACHEREY Комп’ютерна верстка Д. Шеверун 4 NAGEL GmbH & Co., Німеччина). Розчин чистої ДНК, виділеної зі зразка, використовували в двох повторах як матрицю для ампліфікації фрагмента Y-хромосоми, а саме гену SRY, з використанням набору Quantifier® Y Human Male DNA Quantification Kit (AppliedBiosystems, США). Полімеразну ланцюгову реакцію в режимі реального часу та наступну обробку отриманих даних проводили на приборі ROTOR GENE 6000 (Real-time PCR; «Corbett Research», Австралія). Аналіз виявив у мононуклеарах периферійної крові пацієнтки Л. присутність гену SRY в кількості 0,075 нг/мкл (що приблизно відповідає 22 клітинам, що містять Yхромосому). В подальшому у пацієнтки прогресувало полісистемне ураження органів і тканин, особливо нирок, серця, м'язів, розвився важкий вовчаковий психоз через ураження нервової системи, й у грудні цього ж року настала смерть пацієнтки внаслідок поліорганного полісистемного ураження. Джерела інформації: 1. С. В. Лапин, А. А. Тотолян. Иммунологическая лабораторная диагностика аутоиммунных заболеваний. - СПб.: Человек, 2010. - 272 с. 2. В. К. Гринь, A. M. Гнилорыбов, Н. Н. Трубникова, А. Г. Попандопуло, О. Е. Полулях, Т. В. Шатохина, М. В. Петрова, В. А. Мелехина. Клеточный микрохимеризм. Источники, генетический анализ и причины иммунологической толерантности при различных патологических состояниях // Вестник неотложной и восстановительной медицины. 2008. - том 9, № 4. - С. 477-483. Підписне Тираж 23 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601