6-{[6-карбокси-пентил-карбамоїл-піридин-2-карбоніл]-аміно}гексанова кислота, що має противірусну активність

6-{[6-карбокси-пентил-карбамоіл-піридин-2карбоніл]-амшо} гексанова кислота, яка має противірусну активність щодо вірусу герпесу звичайного Винахід відноситься до галузі медицини, а саме, до вірусологи, і стосується розробки речовин, що мають противовірусну активність Вірус герпесу є найбільш розповсюдженим вірусом людини, що може вражати практично всі органи людського організму За даними ВОЗ майже 95% населення планети інфіковано вірусом герпесу 3 кожним роком у зв'язку з погіршенням екологічної ситуації на планеті, компенсаторних можливостей організму та розвитком вторинних імунодефіцитів, спостерігається невпинний зріст КІЛЬКОСТІ інфікованих Тому розширення арсеналу протигерпетичних сполук та створення більш ефективних засобів, що мають протигерпетичну активність, є актуальним завданням Відома епсілон-амінокапронова кислота, яка має противірусну дію по відношенню до вірусу герпеса (Fedtchouk A S , Veventsa Р О , Lozitsky V Р , Yu I Girlya Medical cure of recidivmg herpes simplex virus infection by means of proteolysis inhibitors//Antiviral Reserch -1999 - Vol 41, N 2 P A67) Недоліком s-амшокапроновоі кислоти є той факт, що препарат застосовують у досить високих дозах (10-12г на добу) (Кислота аминокапроновая В кн Машковский М Д Лекарственные средства Минск, Беларусь, 1987, ч 2, С 64-65) В основу винаходу поставлено задачу - створити біологічно активну сполуку, яка виявляє більш високу активність щодо вірусу герпесу звичайного Поставлена задача вирішена синтезом 6-{[6карбокси-пентил-карбомаіл-піридин-2-карбоніл] аміно} гексанової кислоти формули (CHX—N-H \ соон H-N-(CH.,)5 / н о о с що виявляє противірусну активність щодо вірусу герпесу звичайного Більш висока противірусна активність досягається синтезованою речовиною, яка являє собою діамід 2,6-піридин дикарбонової кислоти, який містить залишки sамінокапронової кислоти, приєднані через амідні фрагменти до піридинієвого містка у положеннях 2 та 6 Свідомо передбачити певну біологічну активність синтезованої нової сполуки неможливо Приклад 1 Синтез нової сполуки 6-{[6-(5карбокси-пентил-карбамоіл-піридин-2-карбоніл]аміно} гексанової кислоти До розчину s-амшокапроновоі кислоти 1,31 г (0,01 М) в 50мл 50% водного 1,4-дюксану додали 1,6г (0.04М) NaOH в ЗОмл Н2О і перемішували протягом 1 години Потім поступово додавали 1,02г (0.005М) хлорангидриду ДИПІКОЛІНОВОІ кислоти та перемішували реакційну суміш протягом З годин Розчин підкислювали соляною кислотою до рН=5 і осад, що випав перекристалізовували з етанолу Вихід 1,43г (73%), t° розкладу >300° Знайдено, % С 58,11, Н 6,84, N 10,70, C19H27N3O6 Обраховано, % С 58,02, Н 6,87, N 10,69 (О 61292 M 393 Приклад 2 Протигерпетична дія 6-{[6-(5карбокси-пентил-карбамоіл-піридин-2-карбоніл]аміно} гексанової кислоти Протигерпетичну дію нового хіміотерапевтичного препарату вивчали, визначаючи його вплив на репродукцію вірусу звичайного герпесу першого типу штаму VS Для визначення противірусної дії нової сполуки, її в стерильних умовах розчиняли 4 на середовищі 199 до кінцевої концентрації 1х10 На цьому середовищі, що містило препарат (дослід) або не містило його (контроль) розводили вірус звичайного герпесу до інфекційного титру, що призводив до утворення 50-80% внутрішньо ядерних включень на культурі клітин Нер-2, яка культивувалася на покривних скельцях Концентрацію інфекційного віруса розраховували методом Weber (1972) в модифікації Л Н Носач і Н С Дяченко (Носач Л Н , Дяченко Н С Цитопатология аденовирусной инфекции - 1982 - К Наукова думка - 124с) Контрольні та ДОСЛІДНІ зразки шкубували 48 годин при 37°С, після чого клітини на скельцях фіксували 96% етиловим спиртом Далі їх фарбували акридиновим оранжевим та підраховували % клітин з внутрішньо ядерними включеннями під люмінесцентним мікроскопом зі збільшенням 40x8 % інгібування появ клітин з внутрішньо ядерними включеними розраховували за формулою К-0 АП = К : 100% де АП - % інгібування препаратом появ клітин з внутрішньо ядерних включеннями (ВЯВ), К - КІЛЬКІСТЬ клітин з ВЯВ у контрольних зраз Комп'ютерна верстка О Гапоненко ках, О - КІЛЬКІСТЬ клітин з ВЯВ в присутності препарату (дослід) Розрахована активність одержаної речовини склала 60,5% Як референс-препарат використовували s4 амінокапронову кислоту у концентрації 2x10 , тому що синтезована сполука вміщує два фрагменти s-амшокапроновоі кислоти Референс-препарат інгібував репродукцію вірусу звичайного герпесу в культурі клітин Нер-2 на 45% Таким чином, 6-{[6-(5-карбокси-пентилкарбамоіл-піридин-2-карбоніл]-аміно) гексанова кислота виявляла більш високу протигерпетичну активність Приклад 3 Вивчення токсичності 6-{[6-(5карбокси-пентил-карбамоіл-піридин-2-карбоніл]аміно} гексанової кислоти Для визначення токсичної дії нової сполуки, її в стерильних умовах розводили на середовищі 199 до кінцевої концентрації 1x10 4 і додавали до добової культури клітин Нер-2 (дослід), яку вирощували на покривних скельцях Після 24, 48 та 72 годин інкубації моношар цієї культури порівнювали з моношаром клітин, які культивували на 199 середовищі без додавання препарату (контроль) 6-{[6-(5-карбокси-пентилкарбамоіл-піридин-2-карбоніл]-аміно} гексанової кислоти в кінцевій концентрації 10 токсичної дії на культуру клітин Нер-2 не спричиняв Таким чином, одержана біологічно активна сполука у нетоксичній концентрації виявляла більш високу (на 15,5%) протигерпетичну активність, ніж прототип Підписне Тираж39 прим Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, Львівська площа, 8, м Київ, МСП, 04655, Україна ДП "Український інститут промислової власності", вул Сім'ї Хохлових, 15, м Київ, 04119