Метод забарвлення гістологічних препаратів

Метод забарвлення гістологічних препаратів, який включає імпрегнацію зрізів у розчині амонійного срібла, який відрізняється тим, що замість галунового карміну гістологічні зрізи забарвлюють спиртовим розчином метиленового синього. (19) (21) u201105868 (22) 10.05.2011 (24) 26.12.2011 (46) 26.12.2011, Бюл.№ 24, 2011 р. (72) КУЩ МИКОЛА МИКОЛАЙОВИЧ, БИРКА ОЛЕНА ВІКТОРІВНА 3 Приклад конкретного виконання. Метод забарвлення гістологічних препаратів здійснюється наступним чином [2, 4, 5]: 1. Відібраний матеріал фіксують у 10 % розчині нейтрального формаліну, промивають у проточній воді, заливають у парафін. 2. Отримують парафінові гістологічні зрізи. 3. Гістозрізи депарафінізують у ксилолі - 5 хв. 4. Гістозрізи проводять через 96° спирт - 5 хв. 5. Гістозрізи промивають дистильованою водою - 5 хв. 6. Гістозрізи занурюють у розчин Фонтана (амонійного срібла) - 2 год. (у добре закритому посуді, при температурі 60 °С, у темряві). 7. Гістозрізи прополіскують у дистильованій воді - 1 сек. 8. Гістозрізи занурюють у 1 % водний розчин тіосульфату натрію - 30 сек. 9. Гістозрізи промивають дистильованою водою - 30 сек. 10. Гістозрізи забарвлюють спиртовим розчином метиленового синього - 10 хв. 11. Гістозрізи прополіскують у 96° спирті - 1 сек. 12. Гістозрізи просвітлюють у ксилолі - 3 хв. 13. Гістозрізи заключають у бальзам. Результат реакції: на світло-блакитному тлі мікроскопічних структур гістологічного препарату чітко виявляються подвійно забарвлені тучні клітини від темно-синього до яскраво-синього кольору і аргентафінні ендокриноцити темно-брунатного кольору. Виготовлення спиртового розчину метиленового синього: Метиленовий синій - 0,1 г; Вода дистильована - 10,0 мл. Для виготовлення 10,0 мл 1 % розчину потрібно 0,1 г порошку метиленового синього розчинити у 10,0 мл дистильованої води. До 40 мл 96° спирту Комп’ютерна верстка М. Ломалова 66059 4 додаємо 7 крапель 1 % водного розчину метиленового синього. Таким чином, запропонований метод забарвлення гістологічних препаратів дозволяє: 1. Диференціювати тучні клітини від аргентафінних ендокриноцитів на гістологічному препараті. 2. Одночасно виявляти аргентафінні ендокриноцити і тучні клітини. Джерела інформації, прийняті до уваги при експертизі: 1. Быков В.Л. Развитие и гетерогенность тучных клеток / Быков В.Л. // Морфология. - 2000. - Т. 117, № 2. - С. 81-84. 2. Горальський Л.П. Основи гістологічної техніки і морфофункціональні методи досліджень у нормі і при патології. Навчальний посібник / Горальський Л.П., Хомич В.Т., Кононський О.І.. - Житомир : Полісся, 2005.-288 с. 3. Кветной И.М. Окрашивание ткани эндокринных желез и элементов АПУД-системы / Кветной И.М., Южаков В.В. // Микроскопическая техника: Руководство / под ред. Д.С. Саркисова и Ю.Л. Перова. – М.: Медицина, 1996. - С. 389-390. 4. Лилли Р. Патогистологическая техника и практическая гистохимия / Лилли Р. – М.: Мир, 1969. - С. 475-476. 5. Меркулов Г.А. Курс патологогистологической техники / Меркулов Г.А.. – Л.: Медицина, 1969. - 422 с. 6. Морфофункциональная характеристика эндокринных, тучных и бокаловидных клеток при токсикозах норок / Яглов В.В. [и др.] // Вопросы физико-химической биологии в ветеринарии. – М.: 2002. - С. 142-144. 7. Успенский В.М. К методике гистохимичсекой идентификации эндокринных клеток слизистой оболочки желудка и двенадцатиперстной кишки / Успенский В.М., Голофеевский В.Ю. // Архив патологии. - 1980. - № 1. - С. 81-84. Підписне Тираж 23 прим. Державна служба інтелектуальної власності України, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601