Спосіб обробки насіння неонікотиноїдною сполукою (варіанти)

1. Спосіб обробки насіння, яке включає кодуючу чужорідну полінуклеотидну послідовність для виробництва інсектицидного білка або чужорідну полінуклеотидну послідовність, що забезпечує гербіцидну стійкість, або і те, і інше, для підвищення врожайності і/або потужності сільськогосподарської рослини, вирощеної з насіння, що включає: визначення рівня зараження комахами-шкідниками ділянки, де повинно бути висіяне насіння, за допомогою якого встановлюють, чи потрібна обробка вказаної ділянки інсектицидами, обробку насіння неонікотиноїдною сполукою або посів на такій визначеній ділянці насіння, обробленого неонікотиноїдною сполукою. 2. Спосіб обробки насіння сільськогосподарської рослини, яке включає кодуючу чужорідну полінуклеотидну послідовність для виробництва інсектицидного білка або чужорідну полінуклеотидну послідовність, що забезпечує гербіцидну стійкість, або і те, і інше, для підвищення врожайності і/або потужності сільськогосподарської рослини, вирощеної з насіння, що висівають на ділянці, яка має деякий рівень зараження комахами, що є шкідниками для даної сільськогосподарської рослини, і проти яких неонікотиноїдна сполука має інсектицидну активність, що включає: a. визначення того, чи рівень зараження комахами, що є шкідниками для даної сільськогосподарської 2 (19) 1 3 81115 4 7. Спосіб за п. 1, де неонікотиноїдна сполука 14. Спосіб за п. 12, де модифікований δвключає сполуку, що має формулу: ендотоксин є ендотоксином, що експресують послідовністю чужорідного гена В. thuringiensis, NO 2 N яка присутня в штамі, вибраному з гр упи, що складається з штамів, які мають номери R4 1 R депонування NRRL В-21744, NRRL В-21745, NRRL N N В-21746, NRRL В-21747, NRRL B-21748, NRRL ВR3 21749, NRRL В-21750, NRRL В-21751, NRRL ВR2 , 21752, NRRL B-21753, NRRL В-21754, NRRL Вде 21755, NRRL В-21756, NRRL В-21757, NRRL B1 R є воднем або С 1-С4 алкілом; 21758, NRRL В-21759, NRRL В-21760, NRRL В2 R є воднем, С1-С4 алкілом, С1-C4 алкенілом, С1-C4 21761, NRRL В-21762, NRRL B-21763, NRRL Валкінілом, гідроксилом, аміногрупою, арилом, 21764, NRRL В-21765, NRRL В-21766, NRRL Втіогрупою, алкіларилом, арилалкілом або С4-С6 21767, NRRL B-21768, NRRL В-21769, NRRL Вгетероциклом; 21770, NRRL В-21771, NRRL В-21772, NRRL B3 R є воднем, С1-С4 алкілом, С1-С4 алкенілом, С1-С4 21773, NRRL В-21774, NRRL В-21775, NRRL Валкінілом, гідроксилом, аміногрупою, арилом, 21776, NRRL В-21777, NRRL B-21778 і NRRL Bтіогрупою, алкіларилом, арилалкілом або 4-621779. членним гетероциклом; або є таким, що R2 та R3 15. Спосіб за п. 12, де модифікований δможуть з'єднуватися з утворенням 4-6-членного ендотоксин вибирають із групи, що складається з гетероциклу, що необов'язково може бути Cry3Bb.11230, Cry3Bb.11231, Cry3Bb.11232, заміщеним або незаміщеним; і Cry3Bb.11233, Cry3Bb.11234, Cry3Bb.11235, 4 R , якщо він присутній, є воднем, С1-С4 алкілом, Cry3Bb.11236, Cry3Bb.11237, Cry3Bb.11238, С1-С4 алкенілом, С1-С4 алкінілом, гідроксилом, Cry3Bb.11239, Cry3Bb.11241, Cry3Bb.11242, аміногрупою, арилом, тіогрупою, алкіларилом, Cry3Bb.11098, бінарного інсектицидного білка арилалкілом, С4-С6 гетероциклом, CryET33 і CryET34, бінарного інсектицидного білка галотіазоїлалкілом або фурилалкілом. CryЕТ80 і CryЕТ76, бінарного інсектицидного білка 8. Спосіб за п. 1, де неонікотиноїдна сполука tlC100 і tlC101, і бінарного інсектицидного білка включає сполуку, що має формулу: PS149B1. NO 2 16. Спосіб за п. 1, який має додатковий етап N оброблення ґрунту, в який висівають насіння, R4 R1 неонікотиноїдною сполукою. N N 17. Спосіб за п. 1, який має додатковий етап культивування насіння і рослини, яку вирощують із 3 2 R R , цього насіння, відповідно до практики без де: оброблення ґрунту. R1 є воднем або метилом; 18. Спосіб за п. 1, де визначення того, чи повинне R2 є воднем або метилом; насіння бути висіяне на ділянці, що має такий R3 є воднем, метилом або може з’єднуватися з R2 рівень зараження комахами-шкідниками, при з утворенням оксадіазинового кільця або 2,3якому було б показане оброблення інсектицидом, діазольного кільця; і включає визначення того, чи повинне насіння бути R4, якщо він присутній, є хлортіазоїлметилом або висіяне на ділянці, що має такий рівень зараження фурилметилом. комахами-шкідниками, при якому було б показане 9. Спосіб за п. 1, де неонікотиноїдну сполуку оброблення неонікотиноїдним інсектицидом. вибирають із групи, що складається з 19. Спосіб за п. 7, де насіння обробляють кількістю ацетаміприду, імідаклоприду, тіаметоксаму, неонікотиноїдної сполуки від приблизно 0,1 г/100 кг клотіанідину, динотефурану, нітенпіраму, насіння до приблизно 1000 г/100 кг насіння. флонікаміду, нітіазину і тіаклоприду. 20. Спосіб за п. 19, де насіння обробляють 10. Спосіб за п. 9, де неонікотиноїдну сполуку неонікотиноїдною сполукою у кількості від вибирають із групи, що складається з приблизно 5 г/100 кг насіння до приблизно 600 ацетаміприду, імідаклоприду, тіаметоксаму, г/100 кг насіння. клотіанідину, динотефурану і нітенпіраму. 21. Спосіб за п. 20, де насіння обробляють 11. Спосіб за п. 7, де насіння містить чужорідну неонікотиноїдною сполукою у кількості від полінуклеотидну послідовність, що кодує приблизно 10 г/100 кг насіння до приблизно 400 продукування інсектицидного білка. г/100 кг насіння. 12. Спосіб за п. 11, де насіння містить чужорідну 22. Спосіб за п. 21, де насіння обробляють полінуклеотидну послідовність, що кодує неонікотиноїдною сполукою у кількості від модифікований δ-ендотоксин В. thuringiensis. приблизно 20 г/100 кг насіння до приблизно 300 13. Спосіб за п. 12, де модифікований δг/100 кг насіння. ендотоксин є ендотоксином, що експресують 23. Спосіб за п. 7, де сільськогосподарську послідовністю чужорідного гена В. thuringiensis, рослину вибирають із групи, що включає зернові, яка присутня в штамі, вибраному з гр упи, що пшеницю, ячмінь, жито, овес, рис, сорго, буряк, складається з штамів, які мають номери фр укти, подібні до груші, кісточкові фр укти, депонування NRRL В-21579, NRRL В-21580, NRRL соковиті фрукти, яблуко, грушу, сливу, персик, В-21581, NRRL В-21635 і NRRL В-21636. японський абрикос, сливу домашню, мигдаль, вишню, полуницю, малину, ожину, бобові, 5 81115 6 квасолю, сочевицю, горох, сою, олійні рослини, аміди, фенілсечовини, інгібітори коріння і паростків ріпак, гірчицю, мак, оливу, соняшник, кокос, сіянців, хлорацетаміди, інгібітори синтезу рицину, боби какао, арахіс, гарбузові, гарбуз, ароматичних амінокислот, інгібітори синтезу огірок, диню, цитрусові, апельсин, лимон, амінокислот з розгалуженим ланцюгом, грейпфрут, мандарин, грейпфрут Уотсона, citrus сульфонілсечовини, імідазолінони, natsudaidai, овочі, салат, капусту, китайську триазолопіримідини, тиримідинілоксибензоати, капусту, китайську редьку, моркву, цибулю, томат, інгібітори біосинтезу ліпідів, картоплю, зелений перець, камфорні дерева, арилоксифеноксипропіонати, циклогександіони, авокадо, корицю, камфору, кукур удз у, тютюн, інгібітори біосинтезу клітинної стінки, нітрили, горіхи, каву, цукрову тростину, чай, виноградну бензаміди, речовини, що порушують клітинну лозу, хміль і банани. мембрану, розведену сірчану кислоту, 24. Спосіб за п. 7, де сільськогосподарську монокарбамід дигідросульфат, гербіцидні масла, рослину вибирають із групи, що включає рис, дипіридилії, дифенілові ефіри, оксидіазоли, Nпшеницю, ячмінь, жито, кукурудзу, картоплю, фенілгетероцикли та інгібітори глутамінсинтетази. моркву, солодку картоплю, цукровий буряк, боби, 32. Спосіб за п. 30, де гербіцид вибирають із групи, горох, цикорій, салат, капусту, цві тну капусту, що включає хлоримурон-етил, хлороцтову броколі, ріпу, редис, шпинат, спаржу, цибулю, кислоту, хлортолурон, хлорпропам, часник, баклажан, перець, селеру, цукрову хлорсуль фурон, хлортал-диметил, хлортіамід, тростину, гарбуз столовий, гарбуз, цукіні, огірок, цинметилін, циносульфурон, клетодим, яблуко, грушу, айву, диню, сливу, вишню, персик, клодинафоп-пропаргіл, кломазон, кломепроп, нектарин, абрикос, полуницю, виноград, ожину, клопіралід, клорансулам-метил, ціаназин, циклоат, ананас, авокадо, папайю, манго, сою, томат, сорго циклосульфамурон, циклоксидим, цигалофопі малину та банан. бутил, 2,4-D, даімурон, далапон, дазомет, 2,4-DB, 25. Спосіб за п. 7, де сільськогосподарську десмедифам, десметрин, дикамбу, дихлобеніл, рослину вибирають із групи, що включає бавовник, дихлорпроп, дихлорпроп-П, диклофоп-метил, льон, коноплю, джут, рамі, сизаль, сосну, дуб, дифензокват метилсульфат, ди флуфенікан, червоне дерево, тополю, евкаліпт, ясен, ялину, димефурон, димепіперат, диметахлор, березу, тсугу, модрину, махагонієве дерево, диметаметрин, диметенамід, диметипін, ебенове дерево, декоративні чагарники і диметиларсинову кислоту, динітрамін, динокап, декоративні дерева. динотерб, дифенамід, дикват дибромід, дитіопір, 26. Спосіб за п. 7, де сільськогосподарську діурон, DNOC, ЕРТС, еспрокарб, етальфлуралін, рослину вибирають із групи, що включає етаметсульфурон-метил, етофумезат, кукурудз у, зернові, ячмінь, жито, рис, овочі, етоксисульфурон, етобензанід, феноксапроп-пконюшини, бобові, боби, горох, люцерну, цукрову етил, фенурон, гептагідрат сульфату заліза (II), тростину, цукрові буряки, тютюн, бавовник, ріпак флампроп-М, флазасульфурон, флуазифоп-бутил, (канолу), соняшник, сафлор і сорго. флуазифоп-п-бутил, флухлоралін, флуметсулам, 27. Спосіб за п. 26, де сільськогосподарською флуміклорак-пентил, флуміоксазин, флуметурон, рослиною є кукурудза. флуроглікофен-етил, флупоксам, флупропанат, 28. Спосіб за п. 26, де сільськогосподарською флупірсульфурон-метил-натрій, флуренол, рослиною є соя. флуридон, флуро хлоридон, флуроксипір, 29. Спосіб за п. 7, де оброблення насіння рослини флуртамон, флутіацет-метил, фомезафен, додатково включає оброблення насіння фосамін, глуфосинат-амоній, гліфосат, фунгіцидом, вибраним із групи, що складається з галосульфурон-метил, галоксифоп, НС-252, флудіоксонілу, флухінконазолу, дифеноконазолу, гексазинон, імазаметабенз-метил, імазамокс, каптану, металаксилу, карбоксину, азоксистробіну, імазапір, імазахін, імазетапір, імазосулурон, іпконазолу мефеноксаму, оксадиксилу, імідазилінон, інданофан, іоксиніл, ізопротурон, тебуконазолу, тетреконазолу, симеконазолу і ізоурон, ізоксабен, ізоксафлутол, лактофен, тираму. ленацил, лінурон, МСРА, МСРА-тіоетил, МСРВ, 30. Спосіб за п. 7, де насіння має трансгенний мекопроп, мекопроп-П, мефенацет, метамітрон, елемент, який забезпечує стійкість рослини до метазахлор, метабензтіазурон, метиларсинову гербіциду, і оброблення включає нанесення кислоту, метилдимрон, метилізотіоціанат, гербіциду на листя. метобензурон, метобромурон, метолахлор, 31. Спосіб за п. 30, де гербіцид вибирають із групи, метосулам, метоксурон, метрибузин, що включає регулятори росту, феноксіоцтові метсульфурон-метил, молінат, монолінурон, кислоти, феноксипропіонові кислоти, напроанілід, напропамід, напталам, небурон, феноксимасляні кислоти, бензойні кислоти, нікосульфурон, нонілову кислоту, норфлуразон, піколінову кислоту та споріднені сполуки, інгібітори олеїнову кислоту (жирні кислоти), орбенкарб, транспорту ауксину, семікарбони, s-триазини, інші оризалін, оксадіаргіл, оксадіазон, оксасульфурон, триазини, заміщені сечовини, урацили, оксифлуорфен, паракват дихлорид, пебулат, бензотіадіазоли, бензонітроли, фенілкарбамати, пендиметалін, пентахлорфенол, пентанохлор, піридазинони, фенілпіридазини, інгібітори пентоксазон, мінеральні масла, фенмедифам, пігментів, піридазинони, ізоксазоли, інгібітори піклорам, піперофос, претилахлор, росту, речовини, що порушують мітоз, примісульфурон-метил, продіамін, прометон, динітроаніліни, оксисульфурони, піридини, аміди, прометрин, пропахлор, пропаніл, пропахізафоп, інгібітори паростків проростаючих сіянців, пропазин, профам, пропізохлор, пропізамід, карбамотіоати, інгібітори лише коріння сіянців, просульфокарб, просульфурон, пірафлуфен-етил, 7 81115 8 піразолінат, піразосульфурон-етил, піразоксифен, гербіцидну стійкість, або і те, і інше, для пірибутикарб, піридат, піримінобак-метил, підвищення врожайності і/або потужності піритіобак-натрій, квінклорак, квінмерак, сільськогосподарської рослини, вирощеної з квінокламін, хізалофоп, хізалофоп-П, насіння, що висівають на ділянці, яка має деякий римсульфурон, сетоксидим, сидурон, симазин, рівень зараження комахами, що є шкідниками для симетрин, натрію хлорат, STS-систему, сулкотріон, даної сільськогосподарської рослини, і проти яких сульфентразон, сульфометурон-метил, неонікотиноїдна сполука має інсектицидну сульфосульфурон, сірчану кислоту, дьогтьові активність, спосіб, який включає оброблення масла, 2,3,6-ТВА, ТС А-натрій, тебутам, тебуті урон, насіння неонікотиноїдною сполукою і висів тербацил, тербуметон, тербутилазин, тербутрин, обробленого насіння на ділянці, де оброблення тенілхлор, тіазопір, тифенсульфурон-метил, насіння або сільськогосподарської рослини тіобенкарб, тіокарбазил, тралкоксидим, триалат, інсектицидом не практикують. триасульфурон, триазифлам, трибенурон-метил, 43. Спосіб за п. 41, де висів обробленого насіння триклопір, триетазин, трифлуралін, на ділянці, де оброблення насіння або трифлусульфурон-метил, вернолат та їхні суміші. сільськогосподарської рослини інсектицидом не 33. Спосіб за п. 30, де гербіцид вибирають із групи, практикують, включає висів насіння в окрузі, що що включає глі фосат, глі фосинат, глуфосинат, подає відомості про сільськогосподарські імідазилінон і STS-систему. культури, в якому протягом попереднього року на 34. Спосіб за п. 33, де гербіцид включає гліфосат. сільськогосподарській культурі не 35. Спосіб за п. 33, де модифікований δвикористовували інсектициди. ендотоксин вибирають із Сrу3Вb. 11231 і Сrу3Вb. 44. Спосіб за п. 43, де висів обробленого насіння 11098. на ділянці, де оброблення насіння або 36. Спосіб за п. 7, де насіння обробляють сільськогосподарської рослини інсектицидом не неонікотиноїдною сполукою, яка є компонентом практикують, включає висів насіння в окрузі, що покриття з контрольованим вивільненням. подає відомості про сільськогосподарські 37. Спосіб обробки насіння, яке включає кодуючу культури, в якому протягом попереднього року на чужорідну полінуклеотидну послідовність для сільськогосподарській культурі не виробництва інсектицидного білка або чужорідну використовували неонікотиноїдний інсектицид. полінуклеотидну послідовність, що забезпечує 45. Спосіб за п. 41, де висів обробленого насіння гербіцидну стійкість, або і те, і інше, для на ділянці, де оброблення насіння або вирощування гібридної рослини з підвищеною сільськогосподарської рослини інсектицидом не врожайністю і/або потужністю з двох вихідних практикують, включає висів насіння в (батьківських) рослин, що включає: адміністративно-територіальному окрузі, в якому оброблення насіння однієї або обох вихідних протягом попереднього року на рослин неонікотиноїдною сполукою перед висівом сільськогосподарській культурі не насіння; використовували інсектициди. запилення жіночої вихідної (батьківської) рослини 46. Спосіб за п. 45, де висів обробленого насіння пилком чоловічої вихідної рослини, насіння яких на ділянці, де оброблення насіння або було оброблене неонікотиноїдною сполукою; і сільськогосподарської рослини інсектицидом не збирання насіння, виробленого жіночою вихідною практикують, включає висів насіння в рослиною. адміністративно-територіальному окрузі, в якому 38. Спосіб за п. 37, де пестицидний білок містить протягом попереднього року на інсектицидний токсин. сільськогосподарській культурі не 39. Спосіб за п. 38, де інсектицидний токсин є використовували неонікотиноїдний інсектицид. дельта-ендотоксином Bacillus thuringiensis. 47. Спосіб обробки насіння, яке включає кодуючу 40. Спосіб за п. 38, де інсектицидний токсин є чужорідну полінуклеотидну послідовність для модифікованим дельта-ендотоксином Bacillus виробництва інсектицидного білка або чужорідну thuringiensis типу, який був описаний у п. 15. полінуклеотидну послідовність, що забезпечує 41. Спосіб обробки насіння, яке включає кодуючу гербіцидну стійкість, або і те, і інше, для чужорідну полінуклеотидну послідовність для підвищення врожайності і/або потужності виробництва інсектицидного білка або чужорідну сільськогосподарської рослини, вирощеної з полінуклеотидну послідовність, що забезпечує насіння, що висівають на ділянці, яка має деякий гербіцидну стійкість, або і те, і інше, для рівень зараження комахами, що є шкідниками для підвищення врожайності і/або потужності даної сільськогосподарської рослини, і проти яких сільськогосподарської рослини, вирощеної з має інсектицидну активність неонікотиноїдний насіння, що висівають на ділянці, де оброблення інсектицид, спосіб, що включає: насіння або сільськогосподарської рослини a. оброблення насіння неонікотиноїдним інсектицидом не показане, спосіб, який включає інсектицидом; і оброблення насіння неонікотиноїдною сполукою і b. висів обробленого насіння на ділянці, яка має висів обробленого насіння на ділянці, де рівень зараження комахами-шкідниками, нижчий оброблення насіння або сільськогосподарської за той, при якому показане таке інсектицидне рослини інсектицидом не практикують. оброблення. 42. Спосіб обробки насіння, яке включає кодуючу 48. Насіння, яке обробляють способом за п. 7. чужорідну полінуклеотидну послідовність для 49. Спосіб обробки насіння, яке включає кодуючу виробництва інсектицидного білка або чужорідну чужорідну полінуклеотидну послідовність для полінуклеотидну послідовність, що забезпечує виробництва інсектицидного білка або чужорідну 9 81115 10 полінуклеотидну послідовність, що забезпечує b. виконання дії, яку вибирають із групи, що гербіцидну стійкість, або і те, і інше, для складається з: підвищення врожайності і/або потужності і. оброблення насіння неонікотиноїдною сполукою, сільськогосподарської рослини, вирощеної з і насіння, що включає: іі. висіву на ділянці насіння, яке було оброблене a. вибір ділянки, на якій має бути висіяне насіння, неонікотиноїдною сполукою. де рівень зараження комахами-шкідниками нижчий 50. Насіння, оброблене способом за п. 10. за той, при якому показане оброблення 51. Насіння, оброблене способом за п. 11. інсектицидом; і Даний винахід стосується поліпшення урожайності і/або потужності сільськогосподарських рослин, і, конкретніше, способу поліпшення урожайності і/або потужності сільськогосподарських рослин шляхом оброблення насіння рослини неонікотиноїдною сполукою, коли інсектицидний захист не показаний. Рослини є необхідним джерелом їжі, корму для тварин, волокон, пиломатеріалів, конструкційних матеріалів і корисних хімічних речовин та ліків. Збільшення потреб у цих рослинних продуктах стимулювало спроби, що тривають у всьому світі, підви щити продуктивність орних земель. Ці спроби призвели до значного підвищення продуктивності земель і урожайності. Більша частина цього підвищення може бути пояснена удосконаленням видового складу рослин і збільшенням використання пестицидів, новими типами пестицидів з вищою активністю, новими типами гербіцидів і збільшенням використання гербіцидів та постійним використанням добрив. Однак на противагу перевагам, які забезпечуються цими факторами, кожен із них має недоліки. Наприклад, сорти сільськогосподарських культур із вищою урожайністю можуть бути менш стійкими і можуть бути об'єктом катастрофічних втрат від шкідників або впливів навколишнього середовища, до яких вони не пристосовані; токсична дія пестицидів і гербіцидів часто не обмежується шкідниками і може бути шкідливою для нецільових видів, включаючи людину; а добрива можуть бути втрачені шляхом вилуго вування і стоку в поверхневі води і спричинити серйозне порушення флори і фауни природного водостоку та якості води. Були відкриті нові типи пестицидів, які є дуже ефективними проти цільових шкідників. Зокрема, була виявлена одна група інсектицидів, яка є вельми перспективною для захисту насіння і рослин важливих сільськогосподарських культур від ушкодження комахами. Ця група, неонікотиноїди, включають такі речовини, як тіаметоксам (комерційно доступний як HELIX® і CRUISER®), імідаклоприд (комерційно доступний як GAUCHO®), а також декілька інших споріднених сполук. Повідомлялося про використання тіаметоксаму як пестициду для протруювання насіння, принаймні на бавовнику, сорго, кукурудзі, цукровій кукурудзі і цукровому буряку, для контролю дротяників, бавовникового трипса, томатного трипса, бавовникової попелиці, чорної польової щипавки та інших комах. Повідомлялося про оброблення насіння імідаклопридом, принаймні, для озимих зернових, кукур удзи, пшениці, ячменю, цукрового буряка, сорго, картоплі, бавовнику і каноли, для контролю попелиць, земляних блішок, дрібних листоїдів, трав'яних клопів, личинок прихованохоботника насіннєвого, блішки довговусої, клопа білокрилого, дротяників та інших комах-шкідників. Вважають, що використання цих інсектицидів як протруйників насіння, а не препаратів для застосування в польових умовах, зменшує експозицію і запах пестициду, і зменшує кількість оброблень та внесень після висіву. Для подальшої інформації дивіться, [наприклад, патент США №6 331 531 В1 і WO 99/35913]. Ще однією галуззю боротьби із сільськогосподарськими шкідниками, в якій був досягнутий значний прогрес, є, разом із генною інженерією рослин, експресія білків, що мають інсектицидну токсичність, зокрема, дельтаендотоксинів Bacillus thuringiensis (Bt). Повний перелік таких ендотоксинів Bt можна знайти, наприклад, за адресою [http://epunix.biols.susx.ac.uk/Home/Neil_Crickmore/ Bt/index.html]; станом на 27.04.2002. Декілька повідомлень обговорювали поєднання оброблення трансгенних рослин, що продукують інсектицидні токсини, пестицидними сполуками з метою боротьби з комахамишкідниками. [Наприклад, Lee, В. et al., у WO 99/35913] описує спосіб боротьби із шкідниками шляхом оброблення рослин, які експресують один або більшу кількість природних інсектицидних токсинів Bt, неонікотиноїдною сполукою. У WO 99/35910 описаний спосіб боротьби із шкідниками, який включає застосування піметрозину, профенофосу, похідного бензоїлсечовини або похідного карбамату до шкідників, їхнього оточення, або до трансгенної рослини, яка може містити один або більшу кількість генів природних дельта-ендотоксинів Bt. У [патенті США №6 331 531] Kern описує оброблення трансгенних культур певними сполуками, включаючи імідаклоприд, для того щоб одержати синергічний контроль над шкідливими комахами. Monsanto Company, St. Louis, МО запропонувала, у промисловому масштабі, кукурудзу, оброблену препаратом GAUCHO®, яка є Roundup Ready® (тобто підготованою до дії гербіциду Roundup) (гібриди RX738RR і RX740RR), кукурудзу, яка має YieldGuard® кукурудзяного метелика (DK626BtY), і кукурудз у, яка має трансгенні елементи як Roundup Ready®, так і YieldGuard® кукурудзяного 11 81115 12 метелика (гібриди DK440RR/YG, DK520RR/YG, промислового одержання у В. thuringiensis. Ця DK551RR/YG і RX601RR/YG). Мету застосування робота описує способи конструювання гібридних інсектициду до насіння описують як захист на дельта-ендотоксинів В. thuringiensis, що містять стадії перших справжніх листків проти таких амінокислотні послідовності з природних шкідників як дротяники, личинки паросткової мухи, кристалічних білків Cry1Ас і Cry1F. Ці гібридні мурахи Ріхтера, земляні блішки, дрібні листоїди. білки, в яких весь або частину домену 2 Cry1Ас, При постійному розвитку методів весь або частину домену 3 Cry1 Ac, і весь або молекулярного клонування були виділені різні гени частину сегмента протоксину Cry1Ac замінюють дельта-ендотоксину і визначені послідовності їхніх відповідними ділянками Cry1F, мають не лише ДНК. Ці гени були використані для створення інсектицидні характеристики вихідних дельтапевних генно-інженерних Bt-продуктів, які були ендотоксинів, але також мають несподівані і дозволені для комерційного використання. В дивовижні властивості розширеного діапазону останніх розробках можна побачити винайдені нові специфічності, який не був компетентно системи доставки дельта-ендотоксину, включаючи продемонстрований жодним із природних дельтарослини, які містять і експресують генно-інженерні ендотоксинів, з яких були сконструйовані химерні гени дельта-ендотоксину. білки. Клонування і секвенування деякої кількості Одним із способів використання генів, які генів дельта-ендотоксину з різноманітних штамів кодують інсектицидні токсини, є введення гена у Bt було описане і підсумоване [Hofte and Whiteley, рослину, яка потребує захисту. Методики для Microbiol R., 53: 242-255 (1989)]. Плазмідні проведення цього перетворення є відомими у човникові вектори, призначені для клонування та даній галузі і можуть бути знайдені, [наприклад, у експресії генів дельта-ендотоксину в [Е. соlі або В. патентах США №№6 023 013 і 6 284 949], серед thuringiensis, описані Gawron-Burke and Baum, інших. У промисловій практиці є Genet. Engineer, 13: 237-263 (1991). Патент США загальноприйнятим переносити бажані гени №5 441 884] розкриває сайт-специфічну систему інсектицидних токсинів до генофонду рекомбінації для створення рекомбінантних сільськогосподарської рослини, яка є стійкою і штамів В. thuringiensis, які містять гени дельтасильною, але не належить до сортів із високою ендотоксину, вільні від ДНК, не властивої В. урожайністю. Як тільки трансгенний елемент thuringiensis. стабілізується у вибраному реципієнті, Останніми роками дослідники зосередили використовують процес звичайної гібридної зусилля на створенні гібридних дельтаселекції і відбору для схрещування трансгенних ендотоксинів, з надією на продукування білків зі рослин із сортами з вищою урожайністю, для того, збільшеною активністю або поліпшеними щоб одержати високоврожайні сорти, які властивостями. Досягнення у галузі молекулярної експресують бажаний трансгенний елемент. генетики за останнє десятиліття сприяли Нарешті, коли відбирають гібрид, що демонструє логічному та упорядкованому підходу до розробки відповідну урожайність і потужність, у той же час білків із поліпшеними властивостями. Методи експресуючи також трансгенний елемент, він може сайт-специфічного і випадкового мутагенезу, надходити у промислове використання. поява методологій полімеразної ланцюгової Недоліком цієї техніки, який, однак, реакції (PCR™) і розвиток рекомбінантних методів залишається, є те, що для гібридних сортів для формування злиття генів і конструювання рослини, і, зокрема, для трансгенних гібридів, не є химерних білків сприяли вибору методів для зміни незвичайною демонстрація нижчої потужності, амінокислотних послідовностей білків, інтеграції такої як, наприклад, менш інтенсивний ріст коріння частин двох або більшої кількості білків разом в і розвиток, у порівнянні з вихідним і не один рекомбінантний білок, і зміні генетичних трансгенним сортами. послідовностей, які кодують білки, що становлять Тому навіть із такими досягненнями, як комерційний інтерес. описано вище, зберігається потреба у підвищенні Незважаючи на це, у ранніх роботах із продуктивності придатних сільськогосподарських кристалічними білками ці техніки експлуатувалися земель, незалежно від того, чи це підвищення лише обмежено. Імовірність довільного створення зумовлене боротьбою із шкідниками, чи іншими химерного білка з удосконаленими властивостями факторами. Відповідно, високим пріоритетом із частин чисельних природних білків, які були залишається забезпечення способів підвищення ідентифіковані, була незначною, беручи до уваги урожайності і потужності сільськогосподарських складну природу білкової структури, фолдингу, рослин. Було б корисним, якби ці способи були олігомеризації, активації і правильного процесингу безпечними і зручними у використанні. Крім того, химерного протоксину до активного компонента. було б корисним, якби ці способи могли б Лише шляхом ретельного вибору специфічних допомогти зменшити кількість польових оброблень ділянок-мішеней в межах кожного білка і і застосування хімічних засобів до рослин подальшого конструювання білка можуть бути протягом їхнього росту. Також було б корисним, синтезовані токсини, які мають поліпшену якби ці способи могли б бути здійснені зі інсектицидну активність. зменшеним впливом токсичних пестицидів на Проте [у патенті США №6281016 English et al.] фермерів та прилеглу землю, воду, нецільові види розкрили надійні способи і композиції, що містять рослин і тварин. Також було б корисним, якби ці рекомбінантно сконструйовані кристалічні білки, способи могли б бути використані у вигідному які мають поліпшену інсектицидну активність, поєднанні з іншими технологіями, що з'являються, широку видоспецифічність, і які є придатними для наприклад, для підвищення потужності гібриду і, 13 81115 14 зокрема, трансгенних гібридних рослин, що має інсектицидну активність неонікотиноїдний експресують інсектицидні токсини. інсектицид, спосіб, що включає оброблення Отже, коротко, даний винахід спрямований на насіння неонікотиноїдною сполукою і висів новий спосіб підвищення урожайності і/або обробленого насіння на ділянці, де інсектицидне потужності сільськогосподарської рослини, яку оброблення насіння або сільськогосподарської вирощують із насіння, спосіб, що включає: рослини не застосовується. а. визначення того, чи повинне насіння бути Даний винахід також спрямований на новий висіяне на ділянці, що має такий рівень зараження спосіб підвищення урожайності і/або потужності комахами-шкідниками, при якому було б показане сільськогосподарської рослини, яку вирощують із оброблення інсектицидом; і, якщо таке насіння, що висівають на ділянці, яка має деякий оброблення не показане, рівень зараження комахами, що є шкідниками для b. виконання дії, яку вибирають із групи, що даної сільськогосподарської рослини, і проти яких складається з: має інсектицидну активність неонікотиноїдний і. оброблення насіння неонікотиноїдною інсектицид, спосіб, що включає: сполукою, a. оброблення насіння неонікотиноїдним іі. рекомендації купувати насіння, яке було інсектицидом; і оброблене неонікотиноїдною сполукою, для висіву b. висів обробленого насіння на ділянці, яка на ділянці; має рівень зараження комахами-шкідниками ііі. продажу насіння, яке було оброблене нижчий за той, при якому показане таке неонікотиноїдною сполукою, для висіву на ділянці, інсектицидне оброблення. і Даний винахід також спрямований на новий iv. висіву на ділянці насіння, яке було спосіб збуту насіння рослини, яке оброблене оброблене неонікотиноїдною сполукою. неонікотиноїдною сполукою для забезпечення Даний винахід також спрямований на новий підвищення урожайності і/або потужності спосіб підвищення урожайності і/або потужності сільськогосподарської рослини, яку вирощують з сільськогосподарської рослини, яку вирощують із цього насіння, спосіб, що включає: насіння, що висівають на ділянці, яка має деякий a. визначення того, чи повинне насіння бути рівень зараження комахами, що є шкідниками для висіяне на ділянці, що має такий рівень зараження даної сільськогосподарської рослини, і проти яких комахами-шкідниками, який вказує на необхідність неонікотиноїдна сполука має інсектицидну інсектицидного оброблення; і, якщо ні, активність, спосіб, що включає: b. виконання дії, яку вибирають із групи, що a. визначення того, чи рівень зараження складається з: комахами, що є шкідниками для даної і. рекомендації купувати і висівати таке сільськогосподарської рослини, вимагає оброблене насіння; оброблення інсектицидом; і, якщо оброблення не іі. рекламування такого обробленого насіння; показане, ііі. одержання такого обробленого насіння для b. оброблення насіння неонікотиноїдною перепродажу, і сполукою. iv. продажу такого обробленого насіння. Даний винахід також спрямований на новий Даний винахід також спрямований на новий спосіб селекції гібридної рослини, що має спосіб підвищення урожайності і/або потужності підвищену урожайність і/або потужність, із двох сільськогосподарської рослини, яку вирощують із батьківських (вихідних) рослин, спосіб, що насіння, спосіб, що включає: включає: а. вибір ділянки, на якій має бути висіяне оброблення насіння однієї або обох вихідних насіння, де рівень зараження комахамирослин неонікотиноїдною сполукою перед висівом шкідниками нижчий за той, при якому показане насіння; оброблення інсектицидом; і запилення жіночої вихідної рослини пилком b. виконання дії, яку вибирають із групи, що чоловічої вихідної рослини; і складається з: збирання насіння, виробленого жіночою і. оброблення насіння неонікотиноїдною вихідною рослиною. сполукою, Даний винахід також спрямований на новий іі. рекомендації купувати насіння, яке було спосіб підвищення урожайності і/або потужності оброблене неонікотиноїдною сполукою, для висіву сільськогосподарської рослини, яку вирощують із на ділянці; насіння, що висівають на ділянці, де оброблення ііі. продажу насіння, яке було оброблене насіння або сільськогосподарської рослини неонікотиноїдною сполукою, для висіву на ділянці, інсектицидом не показане, спосіб, що включає і iv. висіву на ділянці насіння, яке було оброблене оброблення насіння неонікотиноїдною сполукою і неонікотиноїдною сполукою. висів обробленого насіння на ділянці, де Даний винахід також спрямований на нове оброблення насіння або сільськогосподарської насіння, яке обробляють способом, вперше рослини інсектицидом не застосовується. описаним вище. Даний винахід також спрямований на новий Отже, серед декількох переваг, які, як спосіб підвищення урожайності і/або потужності виявлено, досягаються відповідно до даного сільськогосподарської рослини, яку вирощують із винаходу, можуть бути зазначені забезпечення насіння, що висівають на ділянці, яка має деякий способу підвищення урожайності і потужності рівень зараження комахами, що є шкідниками для сільськогосподарських рослин, а також даної сільськогосподарської рослини, і проти яких забезпечення таких способів, що є безпечними і 15 81115 16 зручними у використанні, і також забезпечення необхідною. Більше того, враховуючи увагу, яку таких способів, що можуть допомогти зменшити приділяють мінімізації використання ресурсів у кількість польових оброблень і застосування сучасній сільськогосподарській практиці, таке хімічних засобів до рослин протягом їхнього росту, застосування вважалося б марнотратством. Але і також забезпечення таких способів, що можуть несподівано винахідники виявили, що це не так. бути здійснені зі зменшеним впливом токсичних Винахідники виявили, що деякі неонікотиноїдні пестицидів на фермерів та прилеглу землю, воду, сполуки - зокрема, неонікотиноїдні інсектициди нецільові види рослин і тварин, і також можуть бути застосовані до насіння рослин з тим забезпечення способів, що можуть бути результатом, що рослини, які вирощують із цього використані у вигідному поєднанні з іншими насіння, демонструють підвищену урожайність технологіями, що з'являються, наприклад, для і/або потужність. підвищення потужності гібриду і, зокрема, Також вважають, що цей новий спосіб трансгенних гібридних рослин, що експресують демонструє особливо корисні і несподівані інсектицидні токсини. результати у ситуаціях, де оброблене насіння або Фіг.1 є картою, яка ілюструє рівні використання рослину піддають деякому стресу під час або після інсектициду на посівній площі (в акрах) під проростання. Наприклад, такий стрес міг бути кукурудзою у Сполучених Штата х у 2001p., згідно з спричинений впливом навколишнього округами, що подають відомості про середовища, таким як посуха, холод, сирість та сільськогосподарські культури; іншими подібними умовами. Вважають, фактично, Фіг.2 є гістограмою, що показує урожай що паралельні порівняння рослин, вирощених із кукурудзи (у бушеля х/акр) із насіння, що пройшло насіння, обробленого за допомогою переважних оброблення імідаклоридом (GAUCHO®), по втілень нового способу, і рослин, вирощених з відношенню до урожаю контрольної кукурудзи без необробленого насіння, підданих посушливим такого оброблення насіння, для дванадцяти різних умовам в якийсь момент після появи сходів, гібридів кукурудзи; і продемонструють кращу урожайність і/або Фіг.3 є гістограмою, що показує урожай потужність рослин, вирощених із обробленого кукурудзи (у бушеля х/акр) із насіння, що пройшло насіння. оброблення імідаклоридом (GAUCHO®), по Оскільки неонікотиноїдні сполуки, що є відношенню до урожаю контрольної кукурудзи без корисними у новому способі, можуть бути такого оброблення насіння, для двадцяти застосовані до насіння перед висівом, даний чотирьох різних ділянок. спосіб забезпечує легкий спосіб досягнення Відповідно до даного винаходу, було переваг поліпшеної урожайності і/або потужності виявлено, що потужність і/або урожайність рослин без додаткових зусиль і витрат на сільськогосподарської рослини можуть бути культивацію або польове застосування після підвищені шляхом оброблення насіння рослини проростання і появи сходів. ефективною кількістю неонікотиноїдної сполуки В іншому втіленні неонікотиноїдна сполука такого типу, який раніше був визначений в може бути застосована з хорошими результатами основному як інсектицид. Несподівано було до насіння рослин, що мають окремі трансгенні показано, що такі неонікотиноїдні сполуки мають елементи, незалежно від того, чи рівень здатність спричиняти поліпшення урожайності зараження комахами-шкідниками потребує і/або потужності рослини, знаходиться чи ні ця використання інсектициду. В одному прикладі рослина під тиском шкідників із патогенів комах. цього втілення неонікотиноїдну сполуку Фактично, можна показати, що підвищення застосовують до насіння, що містить один або урожайності і/або потужності має місце, навіть більшу кількість генів, здатних експресувати коли оброблене насіння і рослина взагалі не дельта-ендотоксин В. thuringeinsis будь-якого тину, знаходяться під тиском шкідників, наприклад, як у коли таке оброблення неонікотиноїдом не дослідах, де проростання, поява сходів і ріст показане внаслідок тиску комах-шкідників. В рослин відбуваються, в основному, за стерильних іншому прикладі цього втілення неонікотиноїдну умов. сполуку застосовують до насіння, що містить один Підвищення урожайності і/або потужності є або більшу кількість генів, здатних експресувати цілком несподіваним, оскільки воно здійснюється химерний або модифікований дельта-ендотоксин шляхом використання сполуки, яка раніше була Bt, який має амінокислотну послідовність, що визначена як інсектицид, але має місце навіть за відрізняється від послідовності будь-якого відсутності тиску шкідників через патогени комах, природного немодифікованого ендотоксину, такий проти яких ця сполука, як відомо, є активною. Як як ті, що [описані у WO 99/35910 and WO приклад, цей спосіб є корисним для підвищення 99/35913]. Несподіваною перевагою оброблення урожайності і/або потужності у географічних насіння трансгенної рослини є разюче збільшення районах, або з практикою оброблення землі, де потужності, яке даний спосіб забезпечує для конкретний інсектицид звичайно не трансгенної рослини. У переважних втіленнях використовують - і навіть за умов, де використання поєднання оброблення насіння неонікотиноїдною цього інсектициду явно не показане. сполукою та трансгенної рослини забезпечує Фактично, вважається, що було б алогічним синергічну перевагу. Це має особливе значення, для фахівця у галузі контролю патогенів комах на наприклад, у селекційних програмах для посівах застосовувати хімічну сполуку до насіння трансгенних рослин. або рослини - при значній витраті - у випадках, де Як згадано вище, застосування відома активність сполуки, як вважали, не була неонікотиноїдної сполуки має здатність 17 81115 18 підвищувати урожайність і/або потужність рослин Урожайність може бути виражена у показниках навіть за відсутності комах-шкідників, проти яких кількості, за масою або об'ємом, продукту рослини ця сполука має інсектицидну активність. Фактично, по відношенню до деякої основи. Основа може неонікотиноїдна сполука здатна підвищува ти бути виражена у показниках часу, площі урожайність і/або потужність рослини, навіть коли вирощування, маси продукованих рослин, кількості пророщують насіння, одержують сходи і використаної сировини і т.п. Як приклад, якщо вирощують рослину за стерильних умов. Ін шими необроблена соя дала урожай 35 бушелів/акр, і словами, взагалі за відсутності будь-яких шкідників якщо соя, що одержала дане оброблення, дала рослини. урожай 38 бушелів/акр за тих самих умов Коли кажуть, що пророщують насіння, вирощування, тоді б сказали, що урожай сої одержують сходи і вирощують рослину за збільшився на ((38-35)/35)´100=8,5%. Це стерильних умов, мають на увазі, що насіння, яке збільшення урожаю розглядалося б як таке, що було піддане нефітотоксичній процедурі знаходиться в межах визначення "підвищення стерилізації поверхні, такій як контакт з 0,1%урожайності" сої, оскільки тут використовуються ці 0,15% розчином гіпохлориту натрію, який містить терміни. 0,5% побутовий детергент, протягом 10 хвилин, Аналогічно, якщо конкретний бажаний супроводжуваній триразовим промиванням компонент сільськогосподарської рослини є стерильною дистильованою водою, або іншим більшим на вимірювану величину за урожай такого доцільним процедурам санітарного оброблення, ж компонента цієї рослини, одержаний за таких відомим у даній галузі, висівають у середовище самих умов, але без застосування даного способу, для вирощування, що було стерилізоване, або є тоді урожайність сільськогосподарської рослини є іншим чином в основному вільним від комахпідвищеною. Як приклад, якщо необроблена соя шкідників та інших організмів, які є патогенними (що важить 60 фунтів/бушель) дала урожай 35 для рослини. бушелів/акр бобів, що мають вміст олії 20% за Якщо не вказане інше, коли згадують "комахумасою, і якщо соя, що одержала дане оброблення, шкідника", або "комаху, що є шкідником для дала урожай 35 бушелів/акр бобів, що мають вміст сільськогосподарської рослини", мають на увазі олії 22% за масою, за тих самих умов види комах, відомі як важливі шкідники конкретної вирощування, тоді б сказали, що вихід соєвої олії сільськогосподарської рослини. Шкідник звичайно збільшився на ((0,22´60´35)розглядався б як важливий шкідник конкретної (0,2´60´35))/(0,2´60´35)´100=10%. Це збільшення рослини або сільськогосподарської культури, якщо виходу олії розглядалося б як таке, що б цей шкідник був здатним знижувати урожайність знаходиться в межах визначення "підвищення і/або потужність цієї рослини або урожайності" сільськогосподарської культури, сільськогосподарської культури до рівня, нижчого оскільки тут використовуються ці терміни. за той, який рослина або сільськогосподарська Коли даний спосіб описують тут як такий, що культура могла б забезпечити за відсутності цього "підвищує потужність" сільськогосподарської шкідника. рослини, мають на увазі, що характеристики Як вжито тут, терміни "сільськогосподарська потужності, або урожай на корені (кількість рослин рослина" і "агрономічно важлива рослина" на одиницю площі), або маса рослини, або висота означають одне й те ж, і обидва стосуються рослини, або рослинний покрив, або візуальний рослини, частину якої або її всю збирають чи зовнішній вигляд, або характеристики коріння, або збирали як урожай, або культивують чи будь-яке поєднання цих факторів є збільшеним культивували у промисловому масштабі, або або поліпшеним на вимірювану або помітну частина якої чи вона вся служить важливим величину у порівнянні з таким самим фактором джерелом корму, їжі, волокон, пиломатеріалів або рослини, вирощеної за таких самих умов, але без інших хімічних сполук. Приклади таких застосування даного способу. Краще, якщо такий сільськогосподарських рослин включають, без фактор (фактори) є збільшеним або поліпшеним обмеження, кукурудзу, зернові, включаючи на значну величину. пшеницю, ячмінь, жито і рис, овочі, конюшини, Коли кажуть, що даний спосіб здатний бобові, включаючи боби, горох і люцерну, цукрову "підвищити урожайність і/або потужність" тростину, цукрові буряки, тютюн, бавовник, ріпак сільськогосподарської рослини, мають на увазі, що (канолу), соняшник, сафлор і сорго. Інші цей спосіб має наслідком підвищення або сільськогосподарські рослини будуть описані урожайності, як описано вище, або потужності нижче. рослини, як описано вище, або як урожайності, так Коли даний спосіб описують тут як такий, що і потужності рослини. "підвищує урожайність" сільськогосподарської Як вжито тут, термін "ділянка" означає місце, рослини, мають на увазі, що урожай продукту цієї де висівають насіння, і коли насіння висівають у рослини є більшим на вимірювану величину за полі, саду або на городі, вона включає географічну урожай такого ж продукту цієї рослини, одержаний зону навколо поля, саду або городу, на якій за таких самих умов, але без застосування даного очікувався б такий самий рівень зараження способу. Краще, якщо урожай буде збільшений комахами-шкідниками, як і у місці, де висівають принаймні на приблизно 0,5%, ще краще, якщо насіння. Як приклад, звичайно очікувалося б, що збільшення буде становити принаймні приблизно суміжні поля і поля, розташовані в межах 1%, навіть ще краще, якщо воно становитиме прийнятної близькості до місця, де висівають приблизно 2%, і найкраще, якщо воно насіння, будуть мати такий самий рівень становитиме приблизно 4% або більше. зараження комахами-шкідниками. У деяких 19 81115 20 випадках очікувалося б, що цілий регіон Несподівано, даний спосіб вимагає робити вирощування, такий як округ або декілька округів, саме те, що існуючий стан знань у практиці або округ, що подає відомості про застосування пестицидів вчив би не робити сільськогосподарські культури, або навіть штат, обробляти насіння неонікотиноїдною сполукою, або більший регіон мав би однаковий рівень відомою до цього як інсектицид, коли зараження комахами-шкідниками. Вважають, що використання інсектициду не показане. окреслювання таких регіонів і способи визначення Визначення того, чи рівень зараження їхньої протяжності є загальновідомими в межах комахами, що є шкідниками для умінь звичайного професіонала в галузі боротьби сільськогосподарської рослини, потребує із сільськогосподарськими шкідниками. оброблення інсектицидом, може бути здійснене у Як вжито тут, термін "рівень зараження" будь-який із декількох способів, і є визначенням, означає здатність до пошкодження рослини що добре відоме фахівцеві у галузі боротьби із паразитичними організмами, виражену по шкідниками. Як приклад, одним із способів для відношенню до деякої основи. Основою може бути здійснення цього визначення є порівняння одиниця площі, одиниця часу, рослина і т.п. У урожайності або потужності сільськогосподарської даному випадку, рівень зараження може включати рослини, коли її вирощують на ділянці без будьнульове зараження. Загальноприйняті параметри якого інсектицидного оброблення (наприклад, як для рівня зараження комахами включають, необроблений контроль), з урожайністю або наприклад, концентрацію комах у показниках потужністю рослини, коли її вирощують на тій кількості на одиницю площі, і кількість комах, самій ділянці з стандартним обробленням ґрунту виявлених, спійманих, або іншим чином інсектицидом. Якщо оброблення ґрунту підрахованих, за одиницю часу на конкретній інсектицидом не призводить до поліпшення ділянці. урожайності або потужності рослини, це Коли кажуть, що комаха є такою, "проти якої розглядалося б як визначення того, що неонікотиноїдна сполука має інсектицидну оброблення інсектицидом було не показане. У активність", мають на увазі, що неонікотиноїдний здійсненні цього визначення краще, якщо інсектицид, такий як, наприклад, імідаклоприд, внесеним у ґрунт інсектицидом є неонікотиноїдний тіаметоксам або клотіанідин має токсичний вплив інсектицид. на комаху. Такий токсичний вплив може включати Ще одним способом визначення того, що пряму або опосередковану дію, таку як оброблення інсектицидом не показане, є огляд стимулювання смерті комахи, відлякування комахи історичних даних для конкретної ділянки, і, якщо від насіння, коренів, паростків і/або листя рослини, насіння сільськогосподарської рослини на цій інгібування живлення комахи або її личинкових ділянці історично не оброблялося інсектицидом стадій на, або відкладання її яєць на насінні, навіть коли таке оброблення насіння було корінні, паростках і/або листі рослини, та санкціоноване для використання і було комерційно інгібування або запобігання розмноженню комахи. доступним - тоді може бути визначено, що таке У втіленні даного способу урожайність і/або оброблення було не показане. потужність сільськогосподарської рослини, яку Приклад способу визначення того, що вирощують із насіння, можуть бути підвищені оброблення інсектицидом не показане, шляхом шляхом визначення того, чи повинне насіння бути огляду історичних даних для конкретної ділянки висіяне на ділянці, що має такий рівень зараження проілюстрований посиланням на доречні дані, що комахами-шкідниками, при якому було б показане показують реальні схеми інсектицидного оброблення інсектицидом; і, якщо таке оброблення для вибраної культури. Наприклад, у оброблення не показане, виконання дії, яку Сполучених Штата х були визначені певні округи, вибирають із групи, що складається з: (і) що подають відомості про сільськогосподарські оброблення насіння неонікотиноїдною сполукою, культури (crop reporting district, CRD), які (іі) рекомендації купувати насіння, яке було окреслюють географічні зони, в межах яких умови оброблене неонікотиноїдною сполукою, для висіву вирощування є однаковими або подібними. Для на ділянці, (ііі) продажу насіння, яке було кожного з цих округів, що подають відомості про оброблене неонікотиноїдною сполукою, для висіву сільськогосподарські культури, історично на ділянці, або (iv) висіву на ділянці насіння, яке накопичуються дані про типи і посівну площу (в було оброблене неонікотиноїдною сполукою. акрах) висіяних сільськогосподарських культур, а В альтернативному втіленні спосіб може бути також про використання інсектицидів. Таку здійснений шляхом вибору ділянки, на якій інформацію забезпечують торгові компанії, що повинне бути висіяне насіння, де рівень зараження обслуговують сільськогосподарський сектор, такі комахами-шкідниками є нижчим ніж той, при якому як Doane Market Research, Doane Agricultural показане оброблення інсектицидом; і виконання Services, Inc., St. Louis, MO. Як приклад, дані, що дії, яку вибирають із групи, що складається з: (і) показують засіяну посівну площу, посівну площу, оброблення насіння неонікотиноїдною сполукою, оброблену інсектицидами, посівну площу, (іі) рекомендації купувати насіння, яке було оброблену інсектицидами, що наносяться на оброблене неонікотиноїдною сполукою, для висіву листя, посівну площу, оброблену інсектицидами, на ділянці, (ііі) продажу насіння, яке було що вносяться у ґрун т, і посівну площу, не оброблене неонікотиноїдною сполукою, для висіву оброблену інсектицидами, можуть бути надані для на ділянці, або (iv) висіву на ділянці насіння, яке таких сільськогосподарських культур, як кукурудза, було оброблене неонікотиноїдною сполукою. бавовник і соя. Перевірка цієї інформації кваліфікованим фахівцем легко дозволила б 21 81115 22 визначити, чи було показане оброблення Research, Inc., St. Louis, Missouri]. Оскільки сільськогосподарської культури, що відноситься до інсектициди, дозволені для кукурудзи, і насіння справи, для конкретної ділянки. Зокрема, кукурудзи, оброблене інсектицидами, були оброблення було б не показане для округу, що дозволені для використання і були подає відомості про сільськогосподарську легкодоступними на ринку, вважають, що такі культур у, або для іншого регіону, що подає інсектициди та оброблене інсектицидами насіння відомості, в якому було відсутнє оброблення застосовувалися б на ділянках, де їхнє інсектицидами. Фактично, без знання того, що використання було б економічно виправданим. оброблення могло б забезпечити економічний Вважають, що їхнє невикористання на конкретній ефект урожайності і/або потужності іншим ділянці, таким чином, вказувало б на рівень способом, ніж при використанні як пестицид, вибір зараження комахами на цій ділянці, нижчий за той, застосувати інсектицид на ділянці, для якої не при якому показане оброблення інсектицидом. повідомлялося про використання інсектицидів, було б важко зрозуміти. Оскільки інформація по зараженню шкідниками і використанню інсектицидів є звичайно доступною для компаній, що займаються насінням, дистриб'юторів та продавців насіння і фермерів, слід припустити, що ця інформація є добре відомою для зацікавленої громадськості. Отже, оброблення насіння було б не показане для будь-якої ділянки, де оброблення не практикується. Як вжито тут, термін "оброблення не практикується", оскільки він модифікує ділянку або територію, де висівають сільськогосподарські культури, означає, що повідомлялося про оброблення менше ніж 1% загальної посівної площі в акрах, засіяної сільськогосподарською культурою. Переважний рівень визначення того, де не практикується оброблення, є таким, що обробляють 0,5% або менше від загальної посівної площі під сільськогосподарською культурою, навіть більш переважно, що обробляють менш ніж 0,1% від загальної посівної площі під сільськогосподарською культурою, і найбільш переважно, що посівну площу під сільськогосподарською культурою не обробляють взагалі. Можуть бути надані карти і таблиці, що показують місцеположення, де інсектицидне оброблення кукурудзи не практикується. Отже, вважають, що оброблення насіння кукурудзи неонікотиноїдною сполукою, як має інсектицидні властивості, для таких місцеположень було б не показане. Подібні дані можна побачити, серед інших сільськогосподарських культур, для бавовнику і сої, і ці дані так само можуть служити основою, яка вказує на те, що оброблення насіння цих сільськогосподарських культур неонікотиноїдною сполукою, яка має інсектицидні властивості, не показане. Як приклад, доступні дані, що показують загальну посівну площу в акрах у кожному окрузі США, що подає відомості про сільськогосподарські культури, засіяну окремою культурою, і те, скільки та які з цих площ посівів одержують інсектицидне оброблення. Наприклад, для кукурудзи у США таблиця 1 показує, що з приблизно 76 мільйонів акрів, які були засіяні кукурудзою, лише приблизно 21 мільйон акрів, або менш ніж 30% від загальної посівної площі, одержали інсектицидне оброблення. Це означає, що більш ніж 70% посівної площі під кукурудзою не одержали оброблення інсектицидом. Фіг.1 показує цю ж саму інформацію у графічному форматі. [Джерело Фіг.1: 2001 Doane AgroTrak Study - Doane Marketing 23 81115 24 25 81115 26 У деяких округах, що подають відомості про сільськогосподарські культури, на кукурудзі застосовують дуже незначну кількість інсектицидів. Це, як вважають, вказує на те, що у той час як інсектицид може бути застосований на Примітка: одній або небагатьох ділянках у межах CRD, на Джерело: 2001 Doane Agro-Trak Study - Doane Marketing Research, Inc.,в межах Missouri.інсектицид не інших ділянках St. Louis, CRD застосовують взагалі. Наприклад, може бути, що у той час як інсектициди застосовують на кукурудзі в Також доступні дані, щоб вказати ті округи, що одному адміністративно-територіальному окрузі в подають відомості про сільськогосподарські межах CRD, інші адміністративно-територіальні культури, в яких не повідомляли про застосування округи в межах того ж CRD могли б не застосовувати інсектициди на кукурудзі. інсектицидів на кукурудзі будь-де у цьому CRD. Наприклад, для 2001р. таблиця 2 показує, що Відповідно, вважають, що рівень зараження округи загальною площею більш ніж 3 мільйони комахами у цих адміністративного-територіальних акрів, які подають відомості про округах є нижчим ніж той, при якому показане сільськогосподарські культури, не повідомляли застосування інсектициду. Також доступні дані щодо застосування про застосування інсектицидів на кукурудзі. інсектицидів на сільськогосподарських культурах, відмінних від кукурудзи. Наприклад, таблиця З показує застосування інсектицидів на посівній площі під бавовником у 2001р. у США, за даними округів, що подають відомості про сільськогосподарські культури. Можна побачити, що більше половини з 16,1 мільйонів акрів, 27 81115 засіяних бавовником, не були оброблені інсектицидами. Отже, можна було б припустити, що ці ділянки мають рівні зараження комахами нижчі за ті, при яких було б показане оброблення інсектицидами. 28 Примітка: Джерело: 2001 Doane AgroTrak Study - Doane Marketing Research Ще один спосіб визначення того, чи рівень зараження комахами, що є шкідниками для сільськогосподарської рослини, потребує оброблення інсектицидом, включає порівняння рівня зараження комахами на даній ділянці з рівнем зараження комахами, при якому було б показане оброблення інсектицидом. Як приклад, це може бути здійснене шляхом визначення рівня зараження комахами на даній ділянці і визначення рівня зараження комахами, при якому було б показане оброблення інсектицидом. Коли ці два рівні зараження були визначені, їх порівнюють, щоб побачити, який з них вищий. Іншими словами, щоб визначити, обробляти чи ні насіння інсектицидом для того, щоб зменшити або попередити очікувані збитки від комах. Далі, якщо рівень зараження ділянки комахами нижчий ніж рівень зараження, при якому показане оброблення, обробляють насіння неонікотиноїдним інсектицидом. У даному способі етап "визначення рівня зараження комахами на даній ділянці" розуміють як такий, що включає набуття знань про рівень зараження у будь-який спосіб і з будь-якого джерела, включаючи, без обмежень, прямі випробування, письмові або усні повідомлення, бесіди з співробітниками служби поширення сільськогосподарських знань і досвіду, представниками округу, радіоповідомлення, сільськогосподарські зведення, епізодичні дані, одержані з бесід із сусідніми фермерами або іншими особами, добре обізнаними з рівнем зараження даного місцеположення комахамишкідниками, такими як постачальники сільськогосподарського обладнання і матеріалів, виробники, оптові торговці, роздрібні торговці, консультанти, а також з історичних даних, рекомендацій виробників і постачальників насіння або пестицидів, і т.п. 29 81115 30 У переважних втіленнях рівень зараження було б показане оброблення інсектицидом, спосіб комахами-шкідниками на даній ділянці визначають включає етап рекомендації купувати насіння, яке шляхом вимірювання рівня зараження комахами, було оброблене неонікотиноїдною сполукою, для проти яких неонікотиноїдні інсектициди мають висіву на ділянці. У значення терміну інсектицидну активність, і які є шкідниками для "рекомендації купувати" включена дія сільськогосподарських рослин, що сподіваються рекламування насіння, яке було оброблене вирощувати, де вимірювання проводять на неоцікотиноїдною сполукою, або рекламування ділянці, де збираються вирощува ти рослини, або бажаності оброблення насіння неонікотиноїдною поблизу неї. Приклади того, як такі вимірювання сполукою для висіву на ділянці. Рекомендація можуть бути зроблені, включають візуальне може бути здійснена усно або в письмовій формі. обстеження рослин, розміщення неспецифічних Вона може бути надрукована або ненадрукована. принад і пасток, і розміщення принад і пасток, Рекомендація може складатися лише з зазначення специфічних для роду і виду комах. Такі методики того, що оброблення насіння неонікотиноїдною випробувань і вимірювання є добре відомими у сполукою для висіву на ділянці може призвести до галузі захисту рослин від комах-шкідників. сприятливих результатів. Рівень зараження комахами, при якому було б У ще одному втіленні, якщо рівень зараження показане оброблення інсектицидом, може бути на даній ділянці є нижчим ніж рівень, при якому визначений на будь-якій основі, що становить було б показане оброблення інсектицидом, спосіб інтерес для фахівця. Як приклад, однією із включає етап продажу насіння, яке було загальноприйнятих основ є економічне визначення оброблене неонікотиноїдною сполукою, для висіву - наприклад, витрати проти вартості. Можна на ділянці. Термін "продаж" включає комерційні та порівняти вартість застосування неонікотиноїдного некомерційні продажі насіння, яке було оброблене інсектициду з очікуваною величиною додаткового неонікотиноїдною сполукою, доти, поки насіння не урожаю внаслідок зменшення пошкодження висівають, або не призначають для висіву, на шкідниками. Якщо витрати є меншими ніж ділянці, що має рівень зараження комахами очікувана додаткова величина, тоді оброблення нижчий ніж той, при якому показане оброблення інсектицидом було б показане. З іншого боку, якщо інсектицидом. Термін "продаж" також включає витрати є більшими, ніж очікувана додаткова обміни, бартери та інші форми торгівлі. величина урожаю внаслідок зменшення У ще одному втіленні, якщо рівень зараження пошкодження шкідниками, тоді оброблення на даній ділянці є нижчим ніж рівень, при якому інсектицидом було б не показане. Звичайно, якщо було б показане оброблення інсектицидом, спосіб рівень зараження комахами дорівнює нулю або включає висів на ділянці насіння, яке було близький до нуля, тоді оброблення інсектицидом оброблене неонікотиноїдною сполукою. Висів було б не показане у будь-якому випадку. включає висів насіння безпосередньо у ґрунт, а Прикладом ще однієї основи для цього також пересадження рослини, вирощеної з визначення є об'єктивний стандарт, такий як насіння. Висів може бути проведений ручним або очікуваний рівень пошкодження блішкою механізованим способом, бути комерційним або довговусою. Випробування на пошкодження некомерційним, без обмеження. блішкою довговусою може бути проведене за "Неонікотиноїдна сполука" за даним допомогою методу Айова (Iowa) для оцінки стану винаходом є будь-якою неонікотиноїдною коріння, який описаний нижче і є випробуванням, сполукою, що забезпечує властивості підвищення що оцінює пошкодження по 1-6-бальній шкалі (від урожайності і/або потужності, які є перевагами мінімального пошкодження до найгіршого даного винаходу, коли цю сполуку використовують пошкодження). Якщо історичні дані показують, що для оброблення насіння відповідно до способу, рівень пошкодження блішкою довговусою менший описаного тут. У переважних втіленнях ніж приблизно 3, тоді оброблення інсектицидом, неонікотиноїдна сполука є такою, що має активним проти блішки довговусої, було б не інсектицидні властивості. показане, тоді як рівень пошкодження блішкою Неонікотиноїдні сполуки, які є корисними у довговусою вищий ніж приблизно 3 вказував би на даному винаході, включають ті, що перераховані у необхідність інсектицидного оброблення. У The Pesticide Manual, 12 ed., а саме, ацетаміприд, переважних втіленнях рівень пошкодження імідаклоприд, тіаметоксам, клотіанідин (ТІ-435), блішкою довговусою нижчий ніж 2,6 вказував би, дінотефуран і нітенпірам. Корисні неонікотиноїдні що застосування інсектициду для захисту від сполуки можуть включати нікотиноїдні інсектициди блішки довговусої не потрібне, більш переважним тину нітрогуанідинових інсектицидів, було б, якби рівень пошкодження блішкою нітрометиленові інсектициди і піридилметиламінні довговусою був нижчим ніж 2,0. Після того, як інсектициди, як перераховано у Compendium of визначені рівень зараження комахами на ділянці і insecticide common names за адресою рівень зараження комахами, при якому було б [http://www.hclrss.demon.co.uk/crass_insecticides.ht показане оброблення інсектицидом, ці два рівні ml (02/19/2002)]. Корисні неонікотиноїдні сполуки порівнюють. В одному втіленні даного винаходу, можуть включати нітрогуанідинові сполуки, описані якщо рівень зараження на даній ділянці є нижчим за адресою [http://www.nigu.de/pdf/nqніж рівень, при якому було б показане оброблення chemistry21.pdf (07/08/02)]. Також включені такі інсектицидом, насіння обробляють неонікотиноїдні сполуки, як флонікамід, нітіазин і неонікотиноїдною сполукою. тіаклоприд. У ще одному втіленні, якщо рівень зараження Коли неонікотиноїдна сполука є нікотиноїдним на даній ділянці є нижчим ніж рівень, при якому інсектицидом нітрогуанідинового типу, сполуки, які 31 81115 32 є корисними за даним винаходом, включають трансгенний елемент у насінні або рослині сполуку, що має формулу: включає здатність експресувати білок. Коли кажуть, що "трансгенний елемент має активність проти шкідників", слід розуміти, що це - білок, який кодується цим геном, що дійсно має таку активність, коли білок експресується і вступає в контакт із шкідником. Приклади трансгенних елементів, що є корисними за даним винаходом, насіння і рослини, що містять такі елементи, а також приклади де: 1 способів їхнього використання, можуть бути R є воднем або С 1-C4алкілом; 2 знайдені [у патентах США №№6 329 504, 6 326 R є воднем, С1-C4алкілом, С1-C4алкенілом, 351, 6 326 169, 6 316 407, 6 313 378; 6 288 312; 6 С1-C4алкінілом, гідроксилом, аміногрупою, арилом, 284 949; 6 281 016; 6 255 560, 6 248 536, 6 242 241; тіогрупою, алкіларилом, арилалкілом або С46 221 649; 6 218 145; 6 215 048; 6 211 430; 6 197 С6гетероциклом; 3 747; 6 177 615; 6 174 724, 6 156 573; 6 153 814; 6 R є воднем, С1-C4алкілом, С1-C4алкенілом, 140 075; 6 121 436, 6 114 610; 6 110 464; 6 093 695; С1-C4алкінілом, гідроксилом, аміногрупою, арилом, 6 063 756; 6 063 597; 6 060 594, 6 023 013; 6 018 тіогрупою, алкіларилом, арилалкілом або 4-6100; 5 962 264; 5 959 091; 5 942 658, 5 880 275; 5 2 3 членним гетероциклом; і R та R можуть 877 012, 5 869 720; 5 859 347; 5 763 241; 5 759 538; з'єднуватися з утворенням 4-6-членного 5 679 343; 5 616 319; 5 495 071; 5 424 412; 5 378 гетероциклу, що необов'язково може бути 619; 5 349 124; 5 250 515 та 5 229 112, серед заміщеним або незаміщеним; і інших, і в WO 01/49834, WO 98/13498, WO R4 є воднем, С1-C4алкілом, С1-C4алкенілом, 00/66742 та WO 99/31248]. С1-C4алкінілом, гідроксилом, аміногрупою, арилом, [WO 99/31248 і патенти США №№6 326 351, 6 тіогрупою, алкіларилом, арилалкілом, С4281 016, 6 063 597, 6 060 594 і 6 023 013] описують С6гетероциклом, галотіазоїлалкілом або способи геннії інженерії генів δ-ендотоксину В. фурилалкілом. thuringiensis, для того щоб могли експресуватися Коли неонікотиноїдна сполука є нікотиноїдним модифіковані δ-ендотоксини. Модифіковані δінсектицидом нітрогуанідинового типу, сполуки, які ендотоксини відрізняються від білків дикого тину є переважними для використання за даним наявністю специфічних амінокислотних замін, винаходом, включають сполуку, що має формулу: вставок або делецій у порівнянні з білками, продукованими організмом дикого типу. Такі модифіковані δ-ендотоксини позначені тут за допомогою зірочки (*) або за допомогою посилання на специфічний білок за його ідентифікаційним номером. Переважні типи генетично модифікованих інсектицидних токсинів Cry* [описані у патенті де: США №6 326 169] і включають білки, кодовані R1 є воднем або метилом; полінуклеотидними послідовностями, що містяться R2 є воднем або метилом; у штамах В. thuringiensis, депонованих як NRRL ВR3 є воднем або метилом, або формою, що 21579, NRRL В-21580, NRRL В-21581, NRRL Вможе з'єднуватися з R2 з утворенням 21635 і NRRLB-21636. оксадіазинового кільця або 2,3-діазольного кільця; Переважні типи генетично модифікованих і інсектицидних токсинів Cry* описані у патенті США R4, якщо він присутній, є хлортіазоїлметилом № 6 281 016 і включають ті, що продукуються або фурилметилом. штамами В. thuringiensis EG11060, EG 11062, Вважають, що даний спосіб підвищення EG11063, EG11065, EG11067, EG11071, EG11073, урожайності і/або потужності може бути EG11074, EG11087, EG11088, EG11090, EG11091, застосований із насінням нетрансгенних рослин EG11092, EG11735, EG11751iEG11768. або з насінням рослин, що мають принаймні один Переважні типи генетично модифікованих трансгенний елемент. інсектицидних токсинів Cry* [описані у патенті У втіленні даного способу урожайність і/або США №6 023 013] і включають білки, кодовані потужність трансгенної сільськогосподарської полінуклеотидними послідовностями, що містяться рослини можуть бути підвищені шляхом у штамах В. thuringiensis, депонованих як NRRL Bоброблення насіння трансгенної 21744, NRRL B-21745, NRRL B-21746, NRRL Bсільськогосподарської рослини неонікотиноїдною 21747, NRRL B-21748, NRRL B-21749, NRRL Bсполукою, як описано вище, де насіння містить 21750, NRRL B-21751, NRRL B-21752, NRRL Bчужорідну полінуклеотидну послідовність, здатну 21753, NRRL B-21754, NRRL B-21755, NRRL Bкодувати та експресувати інсектицидний білок на 21756, NRRL B-21757, NRRL B-21758, NRRL Bінсектицидно ефективних рівнях. Ця чужорідна 21759, NRRL B-21760, NRRL B-21761, NRRL Bполінуклеотидна послідовність, разом з усіма 21762, NRRL B-21763, NRRL B-21764, NRRL Bіншими генами, необхідними для експресії 21765, NRRL B-21766, NRRL В-21767, NRRL Bактивного білка на ефективних рівнях, може бути 21768, NRRL B-21769, NRRL B-21770, NRRL Bзгадана тут як "трансгенний елемент". Отже, 21771, NRRL B-21772, NRRL B-21773, NRRL B 33 81115 34 21774, NRRL B-21775, NRRL B-21776, NRRL Bекспресувати принаймні один інший інсектицидний 21777, NRRL B-21778 і NRRL B-21779. білок, що відрізняється від білка Cry3. Переважні типи генетично модифікованих Даний винахід також включає оброблення інсектицидних токсинів Cry* [описані у патенті насіння, що має один або більшу кількість США №6 063 597] і включають, без обмеження: трансгенних елементів, які кодують продукування Сrу3Вb. 11230, Сrу3Вb.11231, Сrу3Вb.11232, бінарних інсектицидних білків, включаючи, але не Сrу3Вb.11233, Сrу3Вb.11234, Сrу3Вb.11235, обмежуючись, CryЕТ33 і CryЕТ34, CryЕТ80 і Сrу3Вb.11236, Сrу3Вb. 11237, Сrу3Вb. 11238, CryЕТ76, tlC100 і tlC101, і PS149B1. Сrу3Вb. 11239, Сrу3Вb.11241, Cry3Bb.11242 і Даний винахід також включає оброблення Cry3Bb.11098. насіння, що має трансгенні елементи Herculex® І Було виявлено, що деякі з модифікованих δ(доступні від Dow Agrosciences, Mycogen Seeds i ендотоксинів, які були [описані у WO 99/31248 і в Pioneer Hi-Bred International). патенті США №6 063 597], мають підвищену У втіленні даного винаходу, де даний спосіб активність проти твердокрилих комах, і, зокрема, включає оброблення насіння і/або листя рослини проти Diabrotica spp., включаючи блішку гербіцидом або пестицидом, відмінним від довговусу. Як вжито тут, термін "підвищена неонікотиноїду, краще, якщо рослина буде активність" стосується підвищеної інсектицидної трансгенною рослиною, яка має трансгенний активності модифікованого токсину у порівнянні з елемент, що надає стійкості до конкретного активністю такого ж токсину без амінокислотних гербіциду або іншого пестициду, який модифікацій, коли обидва випробовують за застосовують. однакових умов. Зокрема, було виявлено, що δКоли до оброблення включений гербіцид, ендотоксини Сrу3* мали підвищену активність такий як гліфосат, краще, щоб трансгенна рослина проти блішки довговусої, і, отже, є переважними або матеріал для розмноження рослини були для використання за даним винаходом, коли такими, що мають трансгенний елемент, який обробляють насіння кукурудзи. Більш забезпечує стійкість до гліфосату. Деякі приклади переважними є δ-ендотоксини Сrу3Вb*, і ще більш таких переважних трансгенних рослин, які мають переважними є Сrу3Вb*. Навіть більш трансгенні елементи, що надають стійкості до переважними трансгенними елементами є ті, що гліфосату, [описані у патентах США №№6 248 876, включають здатність експресувати модифіковані 6 225 114, 6 107 549, 5 866 775, 5 804 425, 5 776 δ-ендотоксини, які перераховані нижче у таблиці 4. 760, 5 633 435, 5 627 061, 5 463 175, 5 312 910, 5 Також у таблиці показані штами трансгенної В. 310 667, 5 188 642, 5 145 783, 4 971 908 і 4 940 thuringiensis, що включають гени для експресії 835]. Коли трансгенна рослина є трансгенною відповідних нових ендотоксинів, і дата та рослиною сої, переважними є такі рослини, що інвентарний номер їхнього депонування у колекції мають властивості "Roundup-Ready" (підготованої культур Служби сільськогосподарських досліджень до дії гербіциду Раундап) трансгенної сої (NRRL), за адресою 1815 N. University Street, (доступна від Monsanto Company, St. Louis, МО). Peoria, IL 61604. Даний винахід також корисний для застосування до насіння рослин, які були поліпшені за допомогою програми селекційного розмноження, основаної на інформації про локуси кількісних ознак (QTL). Подальшу інформацію про використання таких селекційних програм можна знайти [у патенті США №5 476 524 і в Edwards, Μ.D. et al, Genetics, 116:113-125 (1987); Edwards, Μ.D. et al, Theor. Appl. Genet, 83: 765-714 (1992); Paterson, A.H. et al, Nature, 335: 721-726 (1988); і Lander, E.S. et al, Mapping Medelian Factors Underlying Quantitative Traits Using RFLP Linkage Maps, Genetics Society of America, pp.185-199 (1989)]. В одному втіленні даний спосіб є особливо корисним, коли його використовують як частину звичайної селекційної програми для підвищення урожаю сільськогосподарської культури. Він є особливо корисним, коли селекційна програма Даний винахід також включає оброблення призначена для трансгенної сільськогосподарської насіння, що має більш ніж один трансгенний культури. Як згадано вище, трансгенні елементи елемент. Такі комбінації називають спочатку переносять у лінії рослин, які є стійкими, "пакетованими" трансгенними елементами. Ці сильними і мають хорошу репутацію як батьківські пакетовані трансгенні елементи можуть бути (вихідні) рослини в гібридизаційних елементами, що спрямовані на того ж самого випробуваннях, але самі звичайно не є цільового шкідника, або вони можуть бути високоврожайними гібридами. Трансгенні лінії далі спрямовані на різних цільових шкідників. В одному схрещують з іншими вихідними рослинами у переважному способі насіння, що має здатність звичайних селекційних програмах, щоб одержати експресувати білок Cry3, також має здатність високоврожайні гібриди, які також містять бажаний трансгенний елемент(и). Як згадано вище, одним 35 81115 36 недоліком, що є загальною рисою комерційних огірок, яблуко, грушу, айву, диню, сливу, вишню, високоврожайних гібридів, і особливо трансгенних персик, нектарин, абрикос, полуницю, виноград, гібридів, є те, що вони не такими сильними, як ожину, ананас, авокадо, папайю, манго, сою, вихідні рослини. Наприклад, у деяких випадках томат, сорго і малину, банан та інші такі їстівні трансгенні гібридні рослини кукурудзи мають види. значно меншу кореневу систему, ніж їхні Даний винахід також може бути корисним для батьківські рослини. Це може спричиняти більш підвищення урожайності і/або потужності рослин, високу чутливість до шкідників, які пошкоджують що дають волокна, включаючи бавовник, льон, коріння, так само як до вилягання. коноплю, джут, рамі, сизаль; дерев, що дають В одному втіленні даний спосіб застосовують пиломатеріали, включаючи листяні і хвойні до насіння, що використовують у селекційній дерева, такі як сосна, дуб, червоне дерево, програмі. Зокрема, цей спосіб може бути тополя, евкаліпт, ясен, ялина, береза, тсуга, застосований до селекційної програми, в якій модрина, махагонієве дерево, ебенове дерево, і принаймні одна батьківська рослина є тому подібні, а також декоративні чагарники і трансгенною рослиною. Також даний спосіб є дерева. корисним, як пояснено вище, для оброблення У способі за даним винаходом неонікотиноїдну високоврожайного трансгенного насіння, що є сполуку застосовують до насіння. Хоча вважають, продуктом селекційних випробувань. що даний спосіб може бути застосований до У способі селекції гібридної рослини з двох насіння у будь-якому фізіологічному стані, краще, батьківських (вихідних) рослин, цей спосіб включає якщо насіння буде у досить міцному стані, що не оброблення насіння однієї або обох вихідних піддаватиметься пошкодженню протягом процесу рослин неонікотиноїдною сполукою перед висівом оброблення. Типово, насіння могло б бути насіння; запилення жіночої вихідної рослини насінням, яке було зібране як урожай з поля; зняте пилком чоловічої вихідної рослини; і збирання з рослини; і виділене з будь-якого плоду, насіння, виробленого жіночою вихідною рослиною. квітконіжки, стебла, зовнішньої оболонки і У переважному втіленні одна або обидві оточуючої м'якоті або інших не насіннєвих вихідні рослини містять чужорідний ген, що кодує матеріалів рослини. Насіння було б переважно продукування пестицидного білка. Крім того, також біологічно стійким до такої міри, що краще, якщо пестицидний білок містить оброблення не викликало б ніякого біологічного інсектицидний токсин. пошкодження насіння. Наприклад, в одному Рослини, які придатні для здійснення на втіленні оброблення може бути застосоване до практиці даного винаходу, включають будь-які насіння кукурудзи, яке було зібране, очищене і голонасінні та покритонасінні, включаючи висушене до абсолютної вологості нижче ніж дводольні і однодольні. Переважними рослинами приблизно 15% за масою. є ті, які є агрономічно важливими. Приклади В альтернативному втіленні насіння може бути агрономічно важливих рослин включають, таким, що було висушене, а потім залите водою наприклад, рослини, які є їстівними, частково або і/або іншим матеріалом і далі висушене знову до в цілому, для людини або тварини. їстівні рослини, або під час оброблення неонікотиноїдною що можуть бути корисними у даному винаході, не сполукою. В межах щойно описаних обмежень є особливо обмеженими і можуть бути вважають, що оброблення може бути застосоване голонасінними, покритонасінними, включаючи до насіння у будь-який час між збиранням урожаю однодольні і дводольні. Такі рослини включають насіння і висівом насіння. Як вжито тут, термін "не зернові (пшеницю, ячмінь, жито, овес, рис, сорго, висіяне насіння" розуміють як такий, що включає споріднені сільськогосподарські культури і т.д.), насіння у будь-який період між збиранням урожаю буряк, фрукти, подібні до груші, кісточкові фрукти, насіння і висівом насіння у ґрунт з метою соковиті фрукти (яблуко, грушу, сливу, персик, проростання і вирощування рослини. японський абрикос, сливу домашню, мигдаль, У переважних втіленнях неонікотиноїдну вишню, полуницю, малину, ожину і т.д.), бобові сполуку застосовують безпосередньо до насіння, а (квасолю, сочевицю, горох, сою), олійні (ріпак, не до ґрунту, в який висівають або повинні гірчицю, мак, оливу, соняшник, кокос, рицину, боби висівати насіння. В інших втіленнях какао, арахіс і т.д.), гарбузові (гарбуз, огірок, диню неонікотиноїдна сполука може бути застосована і т.д.), цитр усові (апельсин, лимон, грейпфрут, до ґрунту, наприклад, шляхом внесення у смуги, Тмандарин, грейпфрут Уотсона (citrus natsudaidai) і подібні смуги, або в борозну, одночасно з висівом т.д.), овочі (салат, капусту, китайську капусту, насіння, а також безпосередньо до насіння. В китайську редьку, моркву, цибулю, томат, інших втіленнях неонікотиноїдна сполука може картоплю, зелений перець і т.д.), камфорні дерева бути застосована до насіння опосередковано, (авокадо, корицю, камфору і т.д.), к укурудз у, наприклад, шляхом внесення сполуки у ґрунт, в тютюн, горіхи, каву, цукрову тростину, чай, який висіяне насіння. виноградну лозу, хміль і банани. Неонікотиноїдна сполука може бути Їстівні рослини, які є особливо корисними, застосована "чистою", тобто без будь-якого включають рис, пшеницю, ячмінь, жито, кукурудзу, розведення або присутності додаткових картоплю, моркву, солодку картоплю, цукровий компонентів. Незважаючи на це, -4· сполуку типово буряк, боби, горох, цикорій, салат, капусту, цвітну застосовують до насіння y вигляді препаративної капусту, броколі, ріпу, редис, шпинат, спаржу, форми. Ця препаративна форма може містити цибулю, часник, баклажан, перець, селеру, один або більшу кількість інших бажаних цукрову тростину, гарбуз столовий, гарбуз, цукіні, компонентів, включаючи, але не обмежуючись 37 81115 38 ними, рідкі розріджувачі, зв'язувальні речовини, Коли насіння обробляють гербіцидом, він що служать основою для неонікотиноїдної може бути вибраний з наступних корисних сполуки, наповнювачі для захисту насіння під час гербіцидів: стресових умов, і пластифікатори для поліпшення регуляторів росту, включаючи еластичності, прилипання і/або здатності до феноксіоцтові кислоти, такі як 2,4-D і МСРА, розтікання покриття. Крім того, для маслянистих феноксипропіонові кислоти, такі як препаративних форм, що містять мало дихлорпроп і мекопроп, наповнювача або не містять його, бажаним може феноксимасляні кислоти, такі як 2,4-DB і бути додавання до препаративної форми МСРВ, осушувальних речовин, таких як кальцію карбонат, бензойні кислоти, такі як дикамба, каолін або бентонітова глина, перліт, кізельгур або піколінову кислоту та споріднені сполуки, такі будь-які інші адсорбуючі речовини. Використання як піклорам, триклопір, таких компонентів у обробленні насіння добре клопіралід і квінклорак; інгібіторів транспорту відоме в даній галузі. Дивіться, [наприклад, патент ауксину, включаючи США №5 876 739]. Кваліфікований фахівець легко напталам, може вибрати бажані компоненти для семікарбони, такі як дифлуфензопір-натрій, використання у препаративній формі s-триазини, такі як атразин, симазин, ціаназин, неонікотиноїдної сполуки, в залежності від типу прометон, аметрин і насіння, що має бути оброблене, і конкретної прометрин, неонікотиноїдної сполуки, яку вибирають. Крім інші триазини, такі як гексазинон і метрибузин, того, можуть бути використані легкодоступні заміщені сечовини, такі як діурон, флуметурон, промислові препаративні форми відомих лінурон і тебуті урон, інсектицидів та інших пестицидів, як показано у урацили, такі як бромацил і тербацил, прикладах нижче. бензотіадіазоли, такі як бентазон, Насіння може також бути оброблене одним бензонітроли, такі як бромоксиміл, або більшою кількістю наступних інгредієнтів: фенілкарбамати, такі як десмедифам і пестицидами, відмінними від неонікотиноїдних фенмедифам, сполук, включаючи сполуки, які діють лише у піридазинони, такі як піразон, ґрунті; фунгіцидами, такими як каптан, тирам, фенілпіридазини, такі як піридат, металаксил, мефеноксам (розділений ізомер та інші, такі як пропаніл; металаксилу), флудіоксоніл, оксадиксил, інгібіторів пігментів, включаючи азоксистробін, іпконазол та ізомери кожної з цих амітрол, кломазон і флуридон, речовин, і т.п.; гербіцидами, включаючи сполуки, піридазинони, такі як норфлуразон, вибрані з карбаматів, тіокарбаматів, ацетамідів, ізоксазоли, такі як ізоксафлутол; триазинів, динітроанілінів, ефірів гліцерину, інгібіторів росту, включаючи піридазинонів, урацилів, феноксисполук, сечовин і речовини, що порушують мітоз, типу бензойної кислоти; гербіцидними поглиначами, динітроанілінів, таких як бенефін, такими як бензоксазин, похідні бензгідрилу, Ν,Νетальфлуралін, оризалін, пендиметалін, діаліл дихлорацетамід, різні дигалоацильні, продіамін і трифлуралін, оксазолідинільні і тіазолідинільні сполуки, етанон, оксисульфуронів, таких як флутіамід, сполуки нафтойного ангідриду і похідні оксиму; піридинів, таких як дитіопір і тіазопір, добривами; і речовинами для біоконтролю, такими амідів, таких як пронамід, як природні або рекомбінантні бактерії і грибки з та інших, таких як DCPA; інгібіторів паростків родів Rhizobium, Bacillus, Pseudomonas, Serratia, проростаючих сіянців, типу Trichodenna, Glomus, Gliocladium і мікоризні карбамотіоатів, таких як ЕРТС, циклоат, грибки. Ці інгредієнти можуть бути додані як пебулат, триалат, бутилат, молінат, окремий шар на. насінні або, альтернативно, тіобенкарб і бернолат; можуть бути включені як частина суміші для інгібіторів лише коріння сіянців, типу оброблення. амідів, таких як напропамід, Коли насіння обробляють пестицидами, фенілсечовин, таких як сидурон, відмінними від неонікотиноїдних сполук, такі та інших, таких як бенсулід, бетазан і пестициди можуть включати фунгіциди і гербіциди; бенсумек; гербіцидні поглиначі, добрива і/або речовини для інгібіторів коріння і паростків сіянців, типу біоконтролю. Ці інгредієнти можуть бути додані як хлорацетамідів, таких як ацетохлор, окремий шар або, альтернативно, можуть бути диметенамід, пропахлор, алахлор і включені в шар пестицидного покриття. метолахлор; Коли насіння обробляють іншими інгібіторів синтезу амінокислот, включаючи пестицидами, такі пестициди можуть бути вибрані інгібітори синтезу ароматичних амінокислот, з акарицидів, бактерицидів, фунгіцидів, такі як гліфосат і сульфосат, нематоцидів і молюскоцидів. інгібітори синтезу амінокислот з розгалуженим Коли насіння обробляють фунгіцидом, його ланцюгом, типу переважно вибирають із групи, що складається з сульфонілсечовин, таких як бенсульфурон, тебуконазолу, те траконазолу, симеконазолу, хлорсуль фурон, галосульфурон, дифеноконазолу, флухінконазолу, флудіоксонілу, нікосульфурон, просульфурон, каптану, металаксилу, карбоксину, азоксистробіну, фімсульфурондіфенсульфурон, трибенурон, іпконазолу і тираму. 39 81115 40 хлоримурон, етаметсульфурон, імідазилінон, інданофан, іоксиніл, ізопротурон, метсульфурон, примісульфурон, ізоурон, ізоксабен, ізоксафлутол, лактофен, оксасульфурон, сульфометурон, ленацил, лінурон, МСРА, МСРА-тіоетил, МСРВ, триасульфурон і трифлусульфурон, мекопроп, мекопроп-П, мефенацет, метамітрон, імідазолінонів, таких як імазаметабенз, метазахлор, метабензтіазурон, метиларсинову імазамокс, імазапік, імазапір, кислоту, метилдимрон, метилізотіоціанат, імазахін та імазетапір, метобензурон, метобромурон, метолахлор, триазолопіримідинів, таких як хлорансулам і метосулам, метоксурон, метрибузин, флуметсулам, метсульфурон-метил, молінат, монолінурон, тирімідинілоксибензоатів, таких як піритіобак; напроанілід, напропамід, напталам, небурон, інгібіторів біосинтезу ліпідів, включаючи нікосульфурон, нонілову кислоту, норфлуразон, арилоксифеноксипропіонати, такі як олеїнову кислоту (жирні кислоти), орбенкарб, циклофоп-метил, феноксапроп-етил, оризалін, оксадіаргіл, оксадіазон, оксасульфурон, феноксапроп-п-етил, флуазифоп-п-бутил, оксифлуорфен, паракват дихлорид, пебулат, галоксифоп і хізалофоп-п-етил, пендиметалін, пентахлорфенол, пентанохлор, циклогександіони, такі як клетодим, пентоксазон, мінеральні масла, фенмедифам, сетоксидим і тралкоксидим; піклорам, піперофос, претилахлор, інгібіторів біосинтезу клітинної стінки, примісульфурон-метил, продіамін, прометон, включаючи прометрин, пропахлор, пропаніл, пропахізафоп, нітрили, такі як дихлобеніл, пропазин, профам, пропізохлор, пропізамід, бензаміди, такі як ізоксабен, просульфокарб, просульфурон, пірафлуфен-етил, та інші, такі як квінклорак; піразолінат, піразосульфурон-етил, піразоксифен, речовин, що порушують клітинну мембрану, пірибутикарб, піридат, піримінобак-метил, включаючи піритіобак-натрій, квінклорак, квінмерак, розведену сірчану кислоту, монокарбамід квінокламін, хізалофоп, хізалофоп-П, дигідросульфат і гербіцидні масла, римсульфурон, сетоксидим, сидурон, симазин, дипіридилії, такі як дикват і паракват, симетрин, натрію хлорат, STS-систему, сулкотріон, дифенілові ефіри, такі як ацифлуорфен, сульфентразон, сульфометурон-метил, фомезафен, лактофен і оксифлуорфен, сульфосульфурон, сірчану кислоту, дьогтьові оксидіазоли, такі як флутіацет і оксадіазон, масла, 2,3,6-ТВА, ТС А-натрій, тебутам, тебуті урон, N-фенілгетероцикли, такі як карфентразон, тербацил, тербуіметон, тербутилазин, тербутрин, флуміклорак і сульфентразон; тенілхлор, тіазопір, тіфенсульфурон-метил, інгібіторів глутамінсинтетази, таких як тіобенкарб, тіокарбазил, тралкоксидим, триалат, глуфосинат; триасульфурон, триазифлам, трибенурон-метил, та інших, таких як DSMA, MSMA, асулам, триклопір, триетазин, трифлуралін, ендотал, етофумезат, дифензокват і ТСА. трифлусульфурон-метил, вернолат. Переважні гербіциди включають хлоримуронПереважно, кількість неонікотиноїдної сполуки етил, хлороцтову кислоту, хлортолурон, або інших інгредієнтів, що застосовуються в хлорпропам, хлорсульфурон, хлортал-диметил, обробленні насіння, не повинна інгібувати хлортіамід, цинметилін, циносульфурон, клетодим, проростання насіння або викликати фітотоксичне клодинафоп-пропаргіл, кломазон, кломепроп, пошкодження насіння. клопіралід, клорансулам-метил, ціаназин, циклоат, Препаративна форма неонікотиноїдної циклосульфамурон, циклоксидим, цигалофопсполуки, що використовується для оброблення бутил, 2,4-D, даімурон, далапон, дазомет, 2,4-DB, насіння за даним винаходом, може бути у формі десмедифам, десметрин, дикамбу, дихлобеніл, суспензії; емульсії; гідросуміші частинок у водному дихлорпроп, дихлорпроп-П, диклофоп-метил, середовищі (наприклад, воді); змочувального дифензокват метилсульфат, ди флуфенікан, порошку; водорозчинних гранул (сухи х плинних); і димефурон, димепіперат, диметахлор, сухи х гранул. Якщо препаративна форма є диметаметрин, диметенамід, диметипін, суспензією або гідросумішшю, концентрація диметиларсинову кислоту, динітрамін, динокап, неонікотиноїдної сполуки у препаративній формі динотерб, дифенамід, дикват дибромід, дитіопір, становить переважно від приблизно 0,5% до діурон, DNOC, ЕРТС, еспрокарб, етальфлуралін, приблизно 99%, за масою, переважно, 5-40%. етаметсульфурон-метил, етофумезат, Як згадано вище, до складу препаративної етоксисульфурон, етобензанід, феноксапроп-пформи можуть бути включені інші традиційні етил, фен урон, гептагідрат сульфата заліза (II), неактивні або інертні інгредієнти. Такі інертні флампроп-М, флазасульфурон, флуазифоп-бутил, інгредієнти включають, але не обмежуються ними, флуазифоп-п-бутил, флухлоралін, флуметсулам, загальноприйняті речовини для прилипання, флуміклорак-пентил, флуміоксазин, флуметурон, диспергуючі речовини, такі як метилцелюлоза флуроглікофен-етил, флупоксам, флупропанат, (наприклад, Methocel A15LV або Methocel A15C флупірсульфурон-метил-натрій, флуренол, служать комбінованими диспергуючими флуридон, флуро хлоридон, флуроксипір, речовинами/речовинами для прилипання для флуртамон, флутіацет-метил, фомезафен, застосування в обробленні насіння), полівініловий фосамін, глуфосинат-амоній, гліфосат, спирт (наприклад, Elvanol 51-05), лецитин галосульфурон-метил, галоксифоп, НС-252, (наприклад, Yelkinol P), полімерні диспергуючі гексазинон, імазаметабенз-метил, імазамокс, речовини (наприклад, імазапір, імазахін, імазетапір, імазосулурон, полівінілпіролідон/вінілацетат PVP/VA S-630), 41 81115 42 загусники (наприклад, глинисті загусники, такі як співполімерів вініліденхлориду; лігносульфонатів Van Gel В, для поліпшення в'язкості і зменшення кальцію; акрилових співполімерів; осідання частинок суспензії), стабілізатори полівінілакрилатів; поліоксіетилену; полімерів і емульсії, поверхнево активні речовини, співполімерів акриламіду; антифризні сполуки (наприклад, сечовину), полігідроксіетилакрилату, мономерів барвники, пігменти і т.п. Крім того, інертні метилакриламіду; і поліхлорпропену. інгредієнти, корисні за даним винаходом, можуть Краще, якщо зв'язувальну речовину бути знайдені у McCutcheon's, vol.1, "Emulsifiers вибирають таким чином, що вона може служити and Detergents", MC Publishing Company, Glen основою для даної неонікотиноїдної сполуки. Тоді Rock, New Jersey, U.S.A., 1996. Додаткові інертні як усі зв'язувальні речовини, описані вище, можуть інгредієнти, корисні за даним винаходом, можуть бути придатними як основа, конкретна бути знайдені у McCutcheon's, vol.2, "Functional зв'язувальна речовина буде залежати від Materials", MC Publishing Company, Glen Rock, New властивостей неонікотиноїду. Як вжито тут, термін Jersey, U.S.A., 1996. "основа" означає безперервну тверду фазу з Неонікотиноїдні сполуки і препаративні форми однієї або більшої кількості зв'язувальних сполук, за даним винаходом можуть бути застосовані до по всьому об'єму якої у вигляді дисперсної фази насіння за допомогою будь-якої стандартної розподілена одна або більша кількість методики оброблення насіння, включаючи, але не неонікотиноїдних сполук. В основі також обмежуючись цим, перемішування у контейнері необов'язково можуть бути присутні наповнювач (наприклад, пляшці або пакеті), механічне і/або інші компоненти. Термін "основа" слід нанесення, оброблення в поворотному барабані, розуміти як такий, що включає те, що можна обприскування і занурення. Для контактування розглядати як матричну систему, резервуарну насіння з пестицидами за даним винаходом може систему або мікроінкапсульовану систему. Взагалі, бути використаний будь-який загальноприйнятий матрична система складається з неонікотиноїдної активний або інертний матеріал, такий як сполуки за даним винаходом і наповнювача, традиційні матеріали з плівковим покриттям, рівномірно диспергованих усередині полімеру, тоді включаючи, але не обмежуючись ними, матеріали як резервуарна система складається з окремої з плівковим покриттям на водній основі, такі як фази, що містить дані неонікотиноїдні сполуки, яка Sepiret (Sерріс, Snс., Fairfield, NJ) і Opacoat фізично диспергована всередині оточуючої (Berwind Pharm. Services, Westpoint, PA). полімерної фази, що лімітує швидкість. Неонікотиноїдні сполуки можуть бути Мікроінкапсуляція включає покриття дрібних застосовані до насіння як компонент покриття частинок або крапель рідини, але також для насіння. Способи нанесення покриття на насіння і диспергування у твердій основі. композиції, які відомі у даній галузі, є корисними, Кількість зв'язувальної речовини у покритті коли вони модифіковані шляхом додавання однієї може варіювати, але буде знаходитися у діапазоні з неонікотиноїдних сполук за даним винаходом. від приблизно 0,01% до приблизно 25% від маси Такі способи нанесення покриття і пристрої для насіння, краще від приблизно 0,05% до приблизно їхнього застосування розкриті, [наприклад, у 15%, і ще краще від приблизно 0,1% до приблизно патентах США №№5 918 413, 5 891246, 5 554 445, 10%. 5 389 399, 5 107 787, 5 080 925, 4 759 945 і 4 465 Як згадано вище, основа необов'язково може 017]. Композиції для покриття насіння розкриті, включати наповнювач. Наповнювач може бути [наприклад, у патентах США №№ 5 939 356, 5 882 абсорбентом або інертним наповнювачем, таким, 713, 5 876 739, 5 849 320, 5 834 447, 5 791 084, 5 як відомі у даній галузі, і може включати деревне 661 103, 5 622 003, 5 580 544, 5 328 942, 5 300 127, борошно, глини, активоване вугілля, цукри, 4 735 015, 4 634 587, 4 383 391, 4 372 080, 4 339 кізельгур, зернове борошно, дрібнозернисті тверді 456, 4 272 417 і 4 245 432], серед інших. неорганічні речовини, карбонат кальцію і т.п. Придатні покриття насіння містять одну або Глини та тверді неорганічні речовини, які можуть більшу кількість зв'язувальних речовин, і бути використані, включають бентоніт кальцію, принаймні одну з даних неонікотиноїдних сполук. каолін, тальк, перліт, слюду, вермикуліт, Зв'язувальні речовини, що є корисними за кремнеземи, кварцовий порошок, монтморилоніт даним винаходом, переважно містять адгезивний та їхні суміші. Цукри, які можуть бути корисними, полімер, який може бути природним або включають декстрин і мальтодекстрин. Зернове синтетичним і який не має фітотоксичного впливу борошно включає пшеничне борошно, вівсяне на насіння, яке потрібно покривати. Зв'язувальна борошно та ячмінне борошно. речовина може бути вибрана з полівінілацетатів, Наповнювач вибирають таким чином, щоб він співполімерів полівінілацетату; співполімерів забезпечував потрібний мікроклімат для насіння, етиленвіпілацетату (ЕВА); полівінілових спиртів; наприклад, наповнювач використовують для співполімерів полівінілового спирту; целюлоз, підвищення ступеня навантаження активними включаючи етилцелюлози, метилцелюлози, інгредієнтами і для регулювання контрольованого гідроксиметилцелюлози, гідрокси пропіл целюлози вивільнення активних інгредієнтів. Наповнювач і карбоксиметилцелюлозу; полівінілпіролідонів; може допомогти у виробництві або процесі полісахаридів, включаючи крохмаль, нанесення покриття на насіння. Кількість модифікований крохмаль, декстрини, наповнювача може варіювати, але звичайно маса мальтодекстрпни, альгінат і хітозани; жирів; масел, компонентів наповнювача буде знаходитися у олій; білків, включаючи желатин і зеїни; діапазоні від приблизно 0,05% до приблизно 75% аравійської камеді; шелаку; вініліденхлориду і від маси насіння, краще від приблизно 0,1% до 43 81115 44 приблизно 50%, і ще краще від приблизно 0,5% до приблизно 0,5% до приблизно 10% від маси приблизно 15%. насіння. Кількість неонікотиноїдної сполуки, яку У переважному втіленні покриття насіння, що використовують для оброблення насіння, буде містить неонікотиноїдну сполуку, є покриттям із варіювати в залежності від типу насіння і типу контрольованим вивільненням. Коли тут вживають неонікотиноїдної сполуки, але оброблення буде термін "контрольоване вивільнення" для опису включати контактування насіння з такою кількістю покриття насіння, мають на увазі, що покриття неонікотиноїдної сполуки, або комбінації двох чи насіння діє як резервуар неонікотиноїдної сполуки більшої кількості неонікотиноїдних сполук, що є і є здатним вивільняти неонікотиноїдну сполуку зі ефективною для підвищення урожайності і/або швидкістю, меншою ніж та, з якою неонікотиноїдна потужності сільськогосподарської рослини, яку сполука могла б вивільнятися, якби вона була вирощують із обробленого насіння. присутня на поверхні насіння, не будучи Загалом, кількість неонікотиноїдної сполуки, компонентом покриття. Загальноприйняті яку застосовують до насіння при обробленні, буде методики для забезпечення покриттів із знаходитися у діапазоні від приблизно 0,1г до контрольованим вивільненням описані, приблизно 1000г сполуки на 100кг маси насіння. [наприклад, у Controlled-Release Deliveiy Systems Краще, якщо кількість неонікотиноїдної сполуки for Pesticides, H.B.Scher, Ed., Marcel Dekker, Inc., буде знаходитися у діапазоні від приблизно 5г до NY (1999)], і включають, без обмеження, матричні приблизно 600г активного інгредієнта на 100кг покриття, матричні мікрочастинки, вкраплення з насіння, ще краще, у діапазоні від приблизно 10г покриттям, частинки з покриттям, мікрокапсули і до приблизно 400г активного інгредієнта на 100кг т.п. Деякі покриття, утворені неонікотиноїдною насіння, і навіть ще краще, у діапазоні від сполукою, здатні здійснювати вивільнення сполуки приблизно 20г до приблизно 300г неонікотиноїдної з низькою швидкістю шляхом дифузії або руху сполуки на 100кг маси насіння. Альтернативно, крізь основу до навколишнього середовища. було виявлено, що краще, якщо кількість Оброблене насіння маже також обволікатися неонікотиноїдної сполуки буде більшою ніж надпокриттям з полімерної плівки з тим, щоб приблизно 20г сполуки на 100кг насіння, і ще захищати покриття і/або служити перешкодою для краще, більшою ніж приблизно 40г на 100кг дифузії неонікотиноїдної сполуки. Такі надпокриття насіння. Коли неонікотиноїдна сполука є є відомими у даній галузі і можуть бути нанесені з імідаклопридом, переважний діапазон використанням загальноприйнятих методик використання включає від приблизно 40г/100кг псевдозрідженого шару і барабанного покриття насіння до приблизно 100г/100кг насіння. плівкою. У препаративній формі для нанесення Препаративна форма неонікоіипоїдної сполуки покриття необов'язково може бути використаний може бути застосована до насіння з пластифікатор. Пластифікатори типово використанням загальноприйнятих методик і використовують для того, щоб зробити плівку, яка машин для нанесення покриття, таких як метод утворюється покривним шаром, більш гнучкою, псевдозрідженого шару, метод з вальцьовим поліпшити прилипання і здатність до розтікання, і млином, ротостатичні машини для оброблення підвищити швидкість оброблення. Поліпшення насіння і барабанні пристрої для нанесення гнучкості плівки є важливим для мінімізації покриття. Також можуть бути корисними інші сколювання, розламування або відшаровування способи, такі як фонтануючий шар. Насіння може під час процесів зберігання, транспортування або бути попередньо відсортоване за розміром перед висівання. Можуть бути використані багато нанесенням покриття. Після нанесення покриття пластифікаторів, однак корисні пластифікатори насіння звичайно сушать і потім переносять до включають пол іетиленглі коль, гліцерин, шліхтувальної машини для шліхтування. Такі бутилбензилфталат, глікольбензоати і споріднені методики є відомими у даній галузі. сполуки. У покривному шарі пластифікатор буде В іншому втіленні даного винаходу знаходитися у діапазоні від приблизно 0,1% до неонікотиноїдна сполука може бути нанесена на приблизно 20% за масою. або введена у насіння шляхом застосування Коли неонікотипоїдна сполука, ґрунтування твердої основи. Наприклад, певна використовувана у покритті, є препаративною кількість пеонікотиноїдної сполуки може бути формою маслянистого типу, і наповнювач змішана з твердим матеріалом основи, і потім відсутній або присутній у незначній кількості, може насіння може бути поміщене у контакт з твердим бути корисним прискорити процес висушування матеріалом основи на такий період, щоб шляхом висушування препаративної форми. Цей дозволити неонікотиноїдній сполуці проникнути у необов'язковий етап може бути здійснений насіння. Далі насіння необов'язково може бути засобами, добре відомими у даній галузі, і може відділене від твердого матеріалу основи і включати додавання карбонату кальцію, каоліну зберігатися або використовуватися, або суміш або бентонітової глини, перліту, кізельгуру або твердого матеріалу основи плюс насіння може будь-якого абсорбуючого матеріалу, який додають зберігатися або безпосередньо висіватися. Тверді переважно одночасно з пестицидним покривним матеріали основи, які є корисними у даному шаром, щоб увібрати масло або надлишок вологи. винаході, включають поліакриламід, крохмаль, Кількість карбонату кальцію або споріднених глину, кремнезем, глинозем, ґрунт, пісок, сполук, необхідна для ефективного забезпечення полісечовину, поліакрилат або будь-який інший сухого покриття, буде знаходитися у діапазоні від матеріал, здатний абсорбувати або який абсорбує неонікотиноїдну сполуку протягом певного часу і 45 81115 46 вивільняє цю сполуку в або на насіння. Корисно усі відсотки наведені за масою, якщо не вказано упевнитися, що неонікотиноїдна сполука і твердий інше. матеріал основи с сумісними один з одним. Приклад 1 Наприклад, твердий матеріал основи може бути Цей приклад ілюструє оброблення насіння вибраний таким чином, що він може вивільняти трансгенної кукурудзи імідаклопридом. сполуку з прийнятною швидкістю, наприклад, Насіння кукурудзи було підготовлене, щоб протягом періоду хвилин, годин або днів. експресувати ендотоксин Bacillus thuringiensis Даний винахід далі втілює імбібіцію як ще один Сrу3Вb.11231 або Сrу3Вb. 11098, за допомогою спосіб оброблення насіння неонікотиноїдною способів, описаних для цих відповідних елементів сполукою. Наприклад, насіння рослини може бути [у WO 99/31248]. змішане протягом певного періоду часу з Насіння кукурудзи одного й того ж гібридного розчином, що містить від приблизно 1% за масою сорту, з і без відповідного трансгенного елемента, до приблизно 75% за масою неонікотиноїдної було оброблене імідаклопридом (доступний як сполуки у розчиннику, такому як вода. GAUCHO® від Gustafson LLC, Piano, TX), як Переважною є концентрація розчину від викладено нижче. Препаративна форма для приблизно 5% за масою до приблизно 50% за оброблення насіння, що містить імідаклоприд, масою, більш переважною - від приблизно 10% за була приготована шляхом змішування відміряної масою до приблизно 25% за масою. Протягом кількості матеріалу, що містить імідаклоприд, з періоду, коли насіння змішане з розчином, воно водою як носієм. До суміші також додавали інші поглинає (всмоктує) частину неонікотиноїдної інгредієнти, відмінні від неонікотиноїдів, такі як сполуки. Суміш насіння рослини і розчину барвники, речовини для прилипання, поверхнево необов'язково може бути перемішана, наприклад, активні речовини, мастильні речовини та інші шляхом струшування, обертання, качання, матеріали, які є загальновідомими у даній галузі перекидання або іншими способами. Після імбібіції для використання у препаративних формах для насіння може бути відділене від розчину і оброблення насіння. Препаративну форму далі необов'язково висушене, наприклад, шляхом застосовували при кімнатній температурі до постукування або висушування на повітрі. виміряної маси насіння кукурудзи у ротостатичній У ще одному втіленні порошкоподібна машині для оброблення насіння. Розраховували неонікотиноїдна сполука може бути змішана відповідну масу препарату імідаклоприду і насіння безпосередньо з насінням. Необов'язково може кукурудзи, щоб забезпечити бажаний ступінь бути використана речовина для прилипання, щоб оброблення насіння імідаклопридом. Імідаклоприд приклеїти порошок до поверхні насіння. змішували з достатньою кількістю води, щоб Наприклад, певна кількість насіння може бути дозволити ефективний розподіл препарату по змішана з речовиною для прилипання і всьому насінні в партії, у той же мінімізуючи втрати необов'язково перемішана, щоб сприяти препаративної форми для оброблення через однорідному покриттю насіння речовиною для недостатнє поглинання препарату насінням. прилипання. Насіння, вкрите речовиною для Обробленому насінню давали змогу знаходитися прилипання, далі може бути змішане з відкритим принаймні протягом чотирьох годин порошкоподібною неонікотиноїдною сполукою. перед висівом. Суміш може бути перемішана, наприклад, шляхом Коли насіння обробляли імідаклопридом, перекидання, щоб сприяти контакту речовини для достатню кількість препарату Gaucho® 600 FS (що прилипання з порошкоподібною неонікотиноїдною містить 48,7% за масою імідаклоприду) ретельно сполукою, таким чином, спричиняючи прилипання розмішували у воді, щоб утворити препаративну порошкоподібної сполуки до насіння. форму для оброблення насіння, і цю препаративну Оброблене насіння за даним винаходом може форму наносили на певну масу насіння кукурудзи бути використане для розмноження рослин у той за допомогою ротостатичної машини для самий спосіб, що і насіння, оброблене оброблення насіння, щоб забезпечити рівень традиційним способом. Оброблене насіння можна оброблення 0,165мг імідаклоприду па зернину зберігати, транспортувати, висівати і вирощувати у (якщо припустити, що приблизно 1650 зернин той самий спосіб, що і насіння, оброблене будькукурудзи мають вагу один фунт, тоді ця норма є яким іншим пестицидом. Слід вжити відповідних еквівалентною 60г імідаклоприду па 100кг насіння) заходів безпеки, щоб обмежити контакт або 1.34мг імідаклоприду па зернину (приблизно обробленого зерна з людьми, харчовими 487г імідаклопрпду па 100кг насіння). продуктами або кормами, водою, птахами і дикими Приклад 2 або домашніми тваринами. Цей приклад ілюструє ефект оброблення Наступний приклад описує переважні втілення насіння .кукурудзи імідаклопридом у випробуванні винаходу. Інші втілення в межах обсягу п унктів продуктивності гібридного насіння. формули винаходу в цьому документі будуть Дванадцять комерційних гібридів кукурудзи очевидними для фахівця в даній галузі з аналізу були оброблені імідаклопридом з нормою витрат цього детального опису або способу винаходу, як 0,165мг/зернину (GAUCHO® 600). Всі норми розкрито тут. Мають на увазі, що цей детальний витрати наведені як маса активного інгредієнта опис, разом із прикладами, буде розглядатися (імідаклоприду) на зернину насіння. Спосіб лише як ілюстративний, зі сферою застосування і оброблення насіння був таким же, як описаний у суттю винаходу, які вказані пунктами формули прикладі 1. винаходу, що супроводжує приклади. У прикладах Насіння висівали па двадцяти чотирьох дослідних ділянках паралельно центральному 47 81115 48 кукурудзяному поясу США, використовуючи a. Код гібридів кукурудзи означає А=DK440, В=DKC46-26 стандартне обладнання для висіву. Кожна F=LH244XL1I295, G=DK567, Η=HC33XLH277, I=DKC57-38, J=DK5 дослідна ділянка складалася із шести гібридів, зі b. Гібриди A-F вирощували на 10 ділянках; гібриди G-L вирощува встановленими експериментальним с Стовпець, позначений "Характеристика", показує кількість кін обробляннями, де кожен гібрид одержував або (рослин/акр) і урожайність на ділянці (бушелів/акр) при повній сти оброблення лише фунгіцидом (MAXIM® XL з d. Все насіння одержало стандартне оброблення фунгіцидами. нормою витрати 0,165 унцій активного інгредієнта (а.і.)/центнер насіння), або оброблення фунгіцидом плюс оброблення насіння Дані щодо урожаю, одержаного у цій серії неонікотиноїдною сполукою. польових випробувань, також представлені у Випробування були встановлені як формі гістограм, що показують збільшення або дрібноділянкові (2-4 рядка довжиною 15-40 футів) зменшення (у бушелях/акр) урожайності кукурудзи паралельні експерименти (чотири повторності) з для насіння, обробленого імідаклопридом, у планом повного блоку рандомізоваиих порівнянні з урожайністю для необробленого розщеплених ділянок. У плані експерименту насіння, як функція від типу гібриду кукур удзи, що гібриди були визначені як головні ділянки і був використаний (див. Фіг.2). На Фіг.3 гістограма оброблення насіння було визначене як підпоказує збільшення або зменшення (у ділянки. У кожному випробуванні проводили бушелях/акр) урожайності кукурудзи для насіння, стандартні оброблення гербіцидами для боротьби обробленого імідаклопридом, для двадцяти з бур'янами та інші стандартні процедури чотирьох різних ділянок, на яких було висіяне підтримання сільськогосподарських культур, за насіння. Обидві ці гістограми показують винятком того, що у жодному з випробувань не послідовне і комерційно важливе підвищення проводили ніякого додаткового оброблення урожайності кукурудзи, коли насіння обробляють інсектицидом протягом сезону вирощування. імідаклопридом незалежно від рівня зараження Ефект експериментального оброблення комахами. оцінювали, оцінюючи кінцевий урожай на корені Результати експериментів, описаних вище, рослин (на стадіях росту V4/V5) і урожайність на остаточно показують ефект імідаклоприду у ділянці при повній стиглості урожаю. Урожай з поліпшенні стійкості рослин і підвищенні ділянок був стандартизований при 15% вологості. урожайності сільськогосподарської культури. Дані випробувань наведені у таблиці 5. Однак слід зазначити, що підвищення урожайності, забезпечене обробленням неонікотиноїдною сполукою, було несподівано високим по відношені ίο до відповідного збільшення урожаю на корені. Згідно з публікаціями Purdue University [див., наприклад, Nielsen, R.L, Estimating Yield and Dollar Returns From Corn Replanting, AY-264-W (Rev. Jul-02), Purdue Cooperative Extension Service, West Lafayette, IN (July 2002), доступна за адресою http://www.ngry.purdue cdu/ext/pubs/AY-264-W.pdf; 29/4/03], різниця у 1000 рослин на акр для кукурудзи, висіяної при оптимальних розподіленнях, забезпечить очікувану різницю в урожайности приблизно 1%. [Див. також Shaw, Corn Production, pp.659-662, у Corn and Corn Improvement, Number 18 in the series, Agronomy, Sprague, G.F., et al. Eds., Am. Soc. of Agronomy, Inc., Madison, WI (1988)]. Стовпець у таблиці 5, позначений "Фактичний урожай вищий ніж очікуваний", показує, що 9 з 12 комбінацій гібрид/оброблення насіння продемонстрували підвищення урожаю, яке було більші·μ ніж підвищення, що могло б очікуватися на основі поліпшення одного лише урожаю на корені, у порівнянні з контролем, обробленим фунгіцидом. Фактично, більше половини комбінацій гібрид/оброблення насіння (7 із 12) показали підвищення урожаю більш ніж у два рази над тим, яке було б прогнозоване на основі поліпшення урожаю на корені ("Фактичний урожай у 2 рази вищий ніж очікуваний"). Це підвищення було несподіваним і незвичайно високим. Воно показало, що урожайність кукурудзи була збільшена за допомогою оброблення імідаклопридом, і що підвищення урожайності Примітки: було більшим, ніж підвищення урожайності, яке 49 81115 50 можна було б пояснити підвищеною кількістю експерименти проводили як смугові випробування, урожаю на корені. при різноманітних режимах оброблення ґрунту, і у Приклад 3 всіх випробуваннях проводили стандартні Цей приклад показує, що оброблення насіння оброблення гербіцидами і застосовували практики кукурудзи імідаклопридом призводило до культивування, загальноприйняті для підвищення урожайності кукурудзи навіть при комерційного одержання кукурудзи. Урожай з низькому тиску комах-шкідників. ділянки збирали, використовуючи стандартне Три різні гібриди кукурудзи (СХР050, ЕХР056 і механічне обладнання для збирання урожаю. ЕХР062А) обробляли за допомогою способу, Інсектициди, які вносять у ґрунт, описаного у прикладі 1, препаратом GAUCHO® 600 застосовували у спосіб, описаний у прикладі 2. FS з нормою витрати 0,165мг Значне підвищення урожайності кукурудзи імідаклоприду/зернину і висівали на різних спостерігали також, коли насіння кукурудзи, ділянках. Було показано, що ця норма витрати оброблене імідаклопридом, висівали у ґрунт, імідаклоприду несуттєво зменшує пошкодження оброблений інсектицидом, що вноситься у ґрунт. коріння у місцеположеннях з рівнями блішки Підвищення урожайності спостерігали при всіх довговусої, що завдають економічних збитків, але умовах оброблення ґрунту і для всіх є ефективною для захисту паростків кукурудзи досліджуваних гібридів. Таблиця 7 порівнює проти другорядних комах-шкідників кукурудзи, що урожай, одержаний: з необробленого насіння зменшують урожай на корені і обмежують ріст. кукурудзи і насіння кукурудзи, обробленого Урожай кукурудзи з необробленого контрольного імідаклопридом. висіяного у ґрунт, оброблений зразка, з кукурудзи, вирощеної із застосуванням інсектицидом, що вносять у ґрунт. Насіння, традиційних інсектицидів, що вносять у ґр унт, і оброблене імідаклопридом, давало значно вищий кукурудзи, насіння якої було оброблене урожай, ніж насіння, що не одержало оброблення імідаклопридом, був виміряний при збиранні імідаклопридом. Інсектициди, які вносять у ґрунт, урожаю, і ці дані наведені у таблиці 6. (Традиційне відомі як ефективний спосіб контролю оброблення із внесенням інсектициду в ґрунт другорядних комах-шкідників, так що підвищення включало застосування FORCE 3G з нормою урожайності кукурудзи було несподіваним. витрати 4-5 унцій/1000 футів борозни (проміжок між борознами 30 дюймів), LORSBAN 15G з нормою виграти 8 унцій/1000 футів борозни, і застосування COUNTER 20G з нормою витрати 6 уццін/1000 футів борозни. Тиск другорядних шкідників на всіх ділянках був несуттєвим або неіснуючим. Низький тиск шкідників був також очевидним з того факту, що інсектициди, які вносять у ґрунт, не впливали позитивно на урожайність. Незважаючи на це, оброблення імідаклопридом підвищувало урожайність приблизно на 4 бушелі/акр (приблизно 2,9%). Ці результати показали, що оброблення насіння імідаклопридом підвищувало урожайність кукурудзи навіть тоді, коли рівень тиску комах-шкідників був нижчим за топ, при якому була б показана необхідність інсектицидного оброблення. Приклад 4 Цей приклад показує, що імідаклоприд підвищує урожайність кукурудзи у польових дослідженнях з гібридами кукурудзи при різних режимах оброблення ґрунту. Насіння трьох гібридів кукурудзи обробляли імідаклопридом у спосіб, описаний у прикладі 3. У польових експериментах насіння висівали, використовуючи стандартне обладнання для висіву, паралельно кукурудзяному поясу США. Всі Примітки: а. Способи, описані як без оброблення ґрунту, мінімальне об традиційне оброблення ґрунту, відрізняються один від одного, го ґрунту перед висівом. За визначенням, практика "охорона ґр вкритими залишками сільськогосподарських культур. 51 81115 52 Система "без оброблення" стосується ситуацій, де до ґрунту перед висівом або під час Урожайність кукурудзи у польових випробуваннях нетран висіву не застосовують ніяких способів без оброблення і з обробленням насіння імідаклопридом на діл оброблення. Системи "охорона ґрунту/мінімальне Урожайність (буш оброблення ґрунту" стосуються практики Ділянка Гібрид Необроблений контроль та (оцінка Внесення у зменшеного оброблення ґрунту, яка дозволяє пошкодження коріння)а Lorsba залишати принаймні 30% поверхні ґрунту 1 RX670 76,8 (ОПК=2,3) вкритими залишками сільськогосподарських 2 RX601 105,1 (ОПК=1,9) культур. 3 RX601 199,3 (ОПК=2,5) "Традиційне оброблення ґрунту" стосується 4 RX601 119,8 (ОПК=2,6) практик оброблення ґрунту, де менше ніж 30% поверхні ґрунту вкриті залишками попередніх Примітки: сільськогосподарських культур. a. Оцінку пошкодження коріння (ОПК) дають відповідно до сис Такі практики можуть включати оброблення Rating system, Hill and Peters, 1971, ibid.) і виражають за шкалою поличковим плугом, дискування або багаторазові ніж 3 вказує на рівень пошкодження, який, як вважали б, показува проходи полем при оранці, перед або під час непотрібне. висіву сільськогосподарської культури. Хоча b. Оброблення насіння препаратами Force 3G, Lorsban 15G і Cou смугове і гребеневе оброблення ґрунту звичайно і при нормах витрат, описаних у прикладі 3. відносять до охорони ґрунту через сприятливий вплив на ґрунт і утримування води, тут вони віднесені до традиційного оброблення, оскільки Дані, наведені у таблиці 8, показують, що зони обробленого ґрунту, в яких висівають урожайність для ізолінії кукурудзи підвищувалась у сільськогосподарську культур у, створюють половині досліджуваних випадків за допомогою навколишнє середовище, більш подібне до оброблення імідаклопридом. Однак це підвищення істинного традиційного оброблення ґрунту. не було значним. Дані також показали, що Дані, одержані у цьому випробуванні, також пошкодження коріння, зумовлене блішкою показали, що урожайність кукурудзи, вирощеної з довговусою, під час випробувань було несуттєвим. використанням системи "без оброблення", була Однак, на відміну від цього, коли імідаклоприд підвищена на більший відсоток (6,3%), ніж у даному випробуванні застосовували до урожайність кукурудзи, що одержувала традиційне трансгенного насіння, підвищення урожаю оброблення ґрунту (підвищення на 1,7%) або за кукурудзи у порівнянні з урожаєм, одержаним із системою "охорона ґрунту/мінімальне оброблення необробленого трансгенного насіння, було ґрунту" (підвищення на 1,6%). значним. Таблиця 9 показує, що у всіх Приклад 5 випробуваннях трансгенне насіння, оброблене Цей приклад показує вплив на урожайність імідаклопридом, давало вищий урожай, ніж урожай оброблення ізолінії і насіння трансгенної кукурудзи ізоліній, а також вищий, ніж для необроблених імідаклопридом. трансгенних ліній. При відносній відсутності тиску Гібриди кукурудзи з трансгенними комах-шкідників, цей результат був несподіваним. елементами,, і без них, що експресують інсектицидні білки, оцінювали на ефективність у польових умовах. Гібридами, які оцінювали, були RX670 і RX601, кожен як ізолінія (без трансгенного Урожайність кукурудзи у польових випро елемента) і кожен як такий, що має трансгенний що мають низький тиск шкідників, для насіння к елемент, який експресує білок Сrу3Bb з активністю трансгенні елементи, що надають захист від блішки довгову проти Diabrotica spp. (блішки довговусої) позначений як MON853, або трансгенний елемент, Урожайність (бушелів/акр) який експресує білок Сrу3Bb з активністю проти Необроблений блішки довговусої - позначений як MON863, або Ділянка і Гібрид Гібрид Гібрид Гібрид контроль(оцінка комбінацію MON853 і трансгенного елемента, який 853+ 863+ гібрид пошкодження 853 863 Gaucho Gaucho експресує білок Cry1A з активністю проти коріння) кукурудзяного метелика - позначений як MON810, 1 (RX670) 76,8(ОПК=2,3) 52,5 78 70,7 85,8 або комбінацію MON863 і MON810. Таким чином, 2 (RX601) 105,1(ОПК=1,9) для кожного гібриду були випробувані ізолінія і 3 (RX601) 199,3(ОПК=2,5) 187,1 208,9 чотири трансгенні форми. Кожен тип насіння 4 (RX601) 117,1(ОПК=2,6) досліджували без оброблення і з обробленням імідаклопридом, 60г/100кг насіння, застосовуючи Приклад 6 пристрій для оброблення насіння Нікласа. Насіння Цей приклад пояснює, як таблиці округу США, ізолінії також досліджували без використання і з що подає відомості про сільськогосподарські використанням традиційних інсектицидів, що культури, щодо використання інсектицидів на вносять у ґрунт, які застосовували, як описано у кукурудзі, можуть бути використані для визначення прикладі 3. того, чи тиск шкідників на конкретній ділянці Урожай кукурудзи для випробувань показаний показує необхідність оброблення інсектицидом. у таблицях 8 і 9. Звертаючись до таблиці 1, особа вибирає місце для висіву кукурудзи в межах округу США, Таблиця 8 53 81115 54 що подає відомості про сільськогосподарські відходу від обсягу винаходу, мають на увазі, що культури (CRD) №01050. З даних таблиці 1 можна весь матеріал, який міститься у ви щенаведеному побачити, що у 2001р. не повідомлялося про описі і показаний на супровідних малюнках, оброблення кукурудзи інсектицидами на посівній потрібно інтерпретувати як ілюстративний, а не площі під кукурудзою у цьому CRD. Відповідно обмежуючий. можна визначити, що рівень тиску комах-шкідників у цьому місці є нижчим за той, при якому було б показане оброблення насіння кукурудзи інсектицидом. Консультуючись із таблицею 1, можна зробити подібні висновки для округів, що подають відомості про сільськогосподарські культури, №№ 01010, 01020, 01030, 01060, 04020, 04050, 05050, 05070, 06060, 13020, 16090, 20050, 22010, 22040, 22060, 22070, 23010, 23020, 26010, 26020, 26030, 27020, 27030, 28020, 28040, 28070, 28090, 29080, 30030, 30080, 30090, 32010, 33010, 34080, 37040, 38010, 38020, 38030, 38040, 38050, 38070, 38080, 40020, 40030, 40040, 40050, 40060, 40070, 40080, 40090, 44010, 45010, 45040, 46020, 46040, 46050, 46070, 46080, 48021, 49060, 53010, 53020, 53090, 55020 і 55030. Приклад 7 Цей приклад ілюструє, як відомості щодо використання інсектицидів на кукурудзі, подані адміністративно-територіальним округом, можуть бути використані для визначення того, чи тиск шкідників на конкретній ділянці показує необхідність оброблення інсектицидом. Якщо особа вибирає місце для висіву кукурудзи в адміністративно-територіальному окрузі у межах округу США, що подає відомості про сільськогосподарські культури (CRD), де у CRD показаний деякий рівень використання інсектицидів - наприклад, у CRD №01040, але відомо, що у тому адміністративнотериторіальному окрузі, який особа вибирає для висіву к укур удзи, інсектициди на кукурудзі не застосовують, тоді можна визначити, що рівень тиску комах-шкідників у такому адміністративнотериторіальному окрузі є нижчим за той, при якому було б показане оброблення насіння кукурудзи інсектицидом. Подібний висновок можна зробити для кожного адміністративно-територіального округу, для якого можна визначити рівень застосування інсектицидів на кукурудзі. Усі посилання, наведені у цьому патентному описі, включаючи без обмеження всі документи, наукові роботи, публікації, патенти, заявки на патенти, презентації, тексти, звіти, р укописи, брошури, книги, розсилання в мережі Інтернет, журнальні статті, періодичні видання та їм подібні, включені у цей патентний опис за допомогою посилання у своїй повноті. Обговорення тут посилань має на меті просто підсумувати твердження, зроблені їх авторами, і не зроблено жодного визнання того, що будь-яке посилання складає прототип. Заявники залишають за собою право заперечувати вірність і релевантність наведених посилань. Беручи до уваги вищевикладене, буде очевидно, що досягнуті декілька переваг даного винаходу і одержані інші корисні результати. Оскільки у вищезазначених способах і композиціях могли бути зроблені різні зміни без