Спосіб визначення патогенної мікрофлори в невеликих кількостях ексудату з великих слинних залоз

Спосіб визначення патогенної мікрофлори в невеликих кількостях ексудату з великих слинних залоз, який включає взяття матеріалу з проток слинних залоз і висівання на живильне середовище, яке містить: 3 16829 4 креалізати казеїну і желатину, дріжджовий екствідсутності якого-небудь компоненту. ракт, глюкозу, хлористий натрій, L-аргінін, піруват 1. Найбільш близьким та обраним за прототип натрію, агар, гемін, вітамін К1 і дистильовану воду. є спосіб з використанням напіврідкого збагаченого Застосовують також середовище Клаузена, яке тіогліколевого агару (середовище НЗТА) [Лаборамістить триптон, дріжджовий екстракт, пептон, торна діагностика гніно-запальних захворювань, глюкозу, хлориди натрію, кальцію і магнію, дінатобумовлених аспорогенними анаеробними мікроорійфосфат, цитрат, дитіонат і біфосфат натрію, Lрганізмами (методичні рекомендації, Харків, 2000.цистін, L-аспарагін, лецитін, сульфати магнію, ко35с.]): бальту, заліза і цинка,твин-80, агар і дистильовану Сухе середовище для контролю воду). Проте ці середовища містять дорогі і рідкісні стерильності 33,0г інгредієнти. Пептон 15,0г Відомі багато інших поживних середовищ для Натрій тіогліколят 1,0г виділення анаеробів, яке можливо використовуваНатрій метабісульфіт (Na2S2O5) або ти для визначення патогенної мікрофлори в невенатрій гідросульфіт(Nа2S2O4) 0,1г ликих кількостях ексудату з великих слинних залоз Натрій фосфорнокислий двозамісний [Каталог фирмы Oxoid, Великобритания, 1991; (Na2HPO4) 1,0г Morello G.A., Graves M.H. Clinical Anaerobic BacteХлористий калій (КСl) 0,2г riology.-Laboratory Management, 1977], СередовиАгар-агар 2,0г ще Шадлера містить: Живильний бульйон з амінним азоПанкреалізат сої 10,0г том 120-150мг% 1,0л Пептон 5,0г Після стерилізації при 1,5 атм. 30хв. до Дріжджовий екстракт 5,0г регенерованої основи додають: Глюкоза 5,0г Менадіон 0,2мл 1% спирт, розчина Цистеїн 0,4г Гемін 1мл 1% розчина Гемін 0,01г Твін-80 1мл Агар 13,5г Спосіб має істотний недолік - необхідність доТрис-буфер 0,75г давання в середовище після стерилізації ex temДистильована вода до 1 літру. pore додаткових інгредієнтів, таких як менадіон, При її використовуванні в неї ex tempore стекров і ін. рильно вносять 10мкг/мл менадіона і 5об. крові. В основу корисної моделі поставлено задачу Недоліки застосування вказаного середовища удосконалення способу визначення патогенної пов'язані з необхідністю додавання в них після мікрофлори в невеликих кількостях ексудату з вестерилізації ex tempore додаткових інгредієнтів, ликих слинних залоз, в якому за рахунок зміни таких як менадіон, кров і ін. складу середовища, досягається можливість виВідомим є спосіб діагностики з застосуванням значити присутність і накопичити в мінімальних поживного середовища І.З. Курбанова для культикількостях досліджуваного матеріалу в одній провування анаеробів [Пат. №2086646, Россия]: бірці середовища патогенні мікроорганізми як аеГлюкоза 0,5-1,5г робні, так і анаеробні. Триптичний гідролізат казеїну Поставлена задача вирішується в способі ви(ТГК) 12-18г значення патогенної мікрофлори в невеликих Цистеїн 1-3г кількостях ексудату з великих слинних залоз, який Гемін 0,1-0,3г включає взяття матеріалу з проток слинних залоз і Менадіон 0,0005-0,0015г посів на живильне середовище, яке містить Агар 9-13г Сухе середовище для контролю Джерело вітамінів групи В на стерильності 33,0г основі дріжджів (ЕКД) 5-15г Пептон 15,0г Пептичний гідролізат казеїну Натрій тіогліколят 1,0г (ПГК) 5-11г Натрій метабісульфіт (Na2S2O5) або Амінопептід 2-4г натрію гідросульфіт (Nа2S2O4) 0,1г Дігідрофосфат калію 0,3-0,7г Натрій фосфорнокислий двозамісний Гідрофосфат калію 0,3-0,7г (Na2HPO4) 1,0г Сульфат амонію 0,3-0,7г Хлористий калій (КСl) 0,2г Сульфат магнію 0,1-0,3г Живильний бульйон з амінним азоХлорид натрію 0,5-0,11г том 120-150мг % 1,0л Піруват натрію 1-2г з подальшою ідентифікацією мікроорганізмів, Сукцинат натрію 1-1,4г згідно з корисною моделлю, до середовища додаКарбонат натрію 1,9-2,7г ють м'ясо-пептонний агар на дріжджовій основі Крохмал 0,5-1,5г 2,0г. Мальтоза 0,5-1,5г Заміни у складі середовища «агар-агару» на Арабіноза 0,5-1,0г «агар на дріжджовій основі» оптимізує зростання Фруктоза 0,5-1,0г мікроорганізмів, а виключення присутності інгредіПоліглюкин 4-6г єнтів ех tempore (менадіона, геміна і твін-80), Дистильована вода до 1 літру. створює оптимальні умови для засіву невеликої Недоліки способу пов'язані з необхідністю викількості досліджуваного матеріалу. користання великої кількості компонентів, що Спосіб, що заявляється, здійснюють таким чистворює певні труднощі при приготуванні у разі ном. 5 16829 6 Готують поживне середовище шляхом концентрації 1х105КОЕ/мл. Посіви інкубують в змішуваннясухих інгредієнтів з подальшим розчитермостаті при 37°С. Після 24 годин проводять ненням в м'ясо-пептонному бульйоні. висів з поверхні середовища на плоскі Сухе середовище для контролю диференціально-діагностичні середовища для стерильності 33,0г отримання чистих культур мікроорганізмів аеробів Пептон 15,0г через 48 годин - з глибини пробірки - посів на Натрій тіогліколят 1,0г диференціально-діагностичні середовища для Натрій метабісульфіт (Na2S2O5) або виділення анаеробних мікроорганізмів. натрію гідросульфіт(Nа2S2O4) 0,1г Даний спосіб посіву дозволяє визначити приНатрій фосфорнокислий двозамісний сутність і накопичити в мінімальних кількостях до(Na2HPO4) 1,0г сліджуваного матеріалу в одній пробірці середоХлористий калій (КСl) 0,2г вища патогенні мікроорганізми як аеробні, так і М'ясо-пептонний агар на дріжджовій анаеробні. основі (або агар 2,0г і 50мл Важливими перевагами цього середовища є дріжджового екстракту) 2,0г відсутність в її рецептурі дефіцитних компонентів, Живильний бульйон з амінним азокомпонентів ex tempore створення оптимальних том 120-150мг % 1,0л умов для зростання аеробів і аспорогенних анаеСередовище стерилізують автоклавуванням робних мікроорганізмів шляхом додавання м'ясопри 121° протягом 15хв. пептонного агару на дріжджовій основі і можлиВ поживне середовище, розлите по пробірках вість завчасного приготування поживного середов кількості 10мл, засівають по 0,1мл суміші культур вища. аеробів і анаеробних мікроорганізмів в Комп’ютерна верстка Л. Купенко Підписне Тираж 26 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601