Спосіб цілорічного вирощування садивного матеріалу рослин

1. Спосіб цілорічного вирощування садивного матеріалу рослин, що включає вирощування мікроклонів в умовах in vitro, мікрочубукування, пере 3 лення рослин in vitro та in vivo. При поступовому розкритті кришок культиваційних стаканів на протязі 8-10 днів вологість зменшується до 60-65%. При цьому відбувається утворення кутикули, інтенсифікується робота устячкового апарату, що сприяє звиканню рослин до більш суворих умов. Рослини поступово звикають до умов зниженої вологості, що сприяє більш швидкому звивиканню до умов in vivo, і скорочує, в цілому, період адаптації на 7-8 днів. Висадка мікрочубуків на субстрат об'ємом 4550 см куб. забезпечує розвиток кореневої системи з оптимальним співвідношенням довжини і маси коренів. При діаметрі ємкості 5,0-5,5 см рослини формують надземну частину з потовщеним пагоном і більш розвинутим листовим апаратом. Спосіб здійснюється таким чином. Восени заготовляють лозу з кущів, які пройшли тестування на відсутність вірусної і бактеріальної інфекції. Лозу стерилізують, нарізають на 2-х вічкові чубуки, зі сплячих вічок яких вигоняють зелені пагони. Ініціальні експланти вводять в культуру in vitro на живильні агарові середовища. Мікроклони вирощують в культуральних боксах при температурі 24-25°С, освітленні 3,0-3,5 тис.лк. і розмножують шляхом мікрочубукування на іонітному субстраті "Біона" в культиваційних "глинських" склянках. Для проведення адаптації мікрочубуки висаджують безпосередньо в спеціальні ємкості діаметром 5,0-5,5 см з об'ємом субстрату 45-50 см3, закриті фольговими кришками і культивують в культуральних боксах при температурі 20-22°С і освітленні 2,5-3,0 тис.лк. За досягнення рослинами висоти 2,5-3см починають адаптацію шляхом розкривання кришок спочатку на 1/3 поверхні, поступово збільшуючи поверхню розкриття на протязі 810 днів. В подальшому мікроклони переносять в тепличне приміщення з температурою 18-20° С, освітленням 2,2-2,5 тис. лк, витримують 3-4 дні і висаджують на постійне місце в живильний субстрат, 19053 4 виготовлений на основі цеоліту та зволожений водопровідною водою. Полив проводять 2 рази на день на протязі тижня, а в подальшому - один раз на день. За досягнення висоти пагонів 34-36 см рослини чеканять і пасинкують, залишаючи на пагоні 6 вічок. З адаптованих мікроклонів до осені вирощують вегетуючі стандартні і стандартні базові саджанці для висадки в польові умови. Приклад 3. Восени заготовлену лозу з кущів клону 441 Каберне Совіньйон ввели в культуру in vitro. Ініціальні експланти в кількості 20 штук висадили в стерильних умовах на живильне агарове середовище. Культивування експлантів проводили в культуральному боксі в умовах при температурі 24°С і освітленні 3,0 тис.лк. Після розмноження кількість мікроклонів склала 100 рослин. Для проведення адаптації вони були мікрочубуковані на одновічкові мікрочубуки, кількість яких склала 500 шт. Мікрочубуки висаджували в ємкості діаметром 5,2 см на живильний субстрат, який представляв суміш "Біони" і цеоліту в співвідношенні 3:1. Об'єм субстрату склав 48см3. Ємкості закривали фольговими кришками. Культивування проводили в культуральних боксах при температурі 21°С і освітленні 2,5 тис. лк. За досягнення рослинами 2,5 см починали адаптувати до умов "in vivo" шляхом поступового розкриття кришок на протязі 9 днів. В подальшому мікроклони перенесли в тепличне приміщення з температурою +19°С, освітленням 2,2 тис. лк. і висадили на постійне місце в живильний субстрат, виготовлений на основі цеоліту та зволожений водопровідною водою. Полив проводили 2 рази в день на протязі тижня, а в подальшому - один раз на день. За досягнення висоти пагонів 34-36 см рослини чеканили і пасинкували, залишаючи на пагоні 6 вічок. З адаптованих мікроклонів до осені виростили 370 вегетуючих стандартних саджанці для висадки в польові умови (див. Табл.1). Таблиця 1 Показники виходу саджанців винограду при запропонованому способі. Сорт винограду Висаджено на адаптацію мікроклонів, шт. прототип Запропонований спосіб Каберне Совіньйон 500 500 Кількість отриманих вегетуючих стандартних саджанців при запропонованому способі збільшується на 28%. Кількість отриманих саджанців.шт. Прототип Запропонований спосіб 286 370 За даним способом наведено ряд прикладів і занесено в таблицю 2. 5 19053 6 Таблиця 2 Приклади Операції Співвідношення іонітного субстрату з цеолітом Адаптація мікроклонів, днів Об"єм живильного субстрату, см 3 Діаметр ємкості, см3 Висновок Пр.1 Пр.2 Пр.З Пр.4 Пр.5 3:2 3:1 3: 1 3:1 1:1 6 8 9 10 11 40 45 48 50 55 4,0 5,0 5,2 5,5 Приживлюваність мікроклонів на етапі адаптації складає 90%. Загальний виПриживлюваність хід саджанців складає 82%. Значно мікроклонів склазміцнилась коренева система. Діаметр дає 43%,а вихід основних коренів збільшився в 1,5 расаджанців - 24% зи. Період адаптації скоротився на 7-8 днів. Дослідження проведено в лабораторнотепличному комплексі Центру клонової селекції ННЦ "Інституту виноградарства і виноробства ім. В.Є.Таїрова" на сортах винограду Каберне Совіньйон, Шардоне, Марсельський чорний ранній. Одеський чорний та Мускат жемчужний. За допомогою цього способу вирощування садивного матеріалу рослин можна розмножувати на Комп’ютерна верстка Д. Шеверун 6,5 Приживлюваність мікроклонів складає 65%, а вихід саджанців -57 %. протязі року в умовах in vitro троянди, горобину, калину та інші декоративні рослини. Використання запропонованого способу дозволяє протягом цілого року вирощувати базовий садивний матеріал рослин для забезпечення базових розсадників України саджанцями в необхідній кількості. Підписне Тираж 26 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601