Спосіб визначення біоценозу шкіри у хворих на рожеві вугри

Спосіб визначення біоценозу шкіри у хворих на рожеві вугри, що включає попередню обробку шкірної поверхні хімічним реагентом з наступним 3 ризаційної флуоресценції як специфічного прийому для виявлення структур з рідкокристалічними властивостями. З огляду на притаманність останніх структурам одноклітинних паразитів, зокрема лямблій (L. intestinalis), що склало принципову сутність способу їх прижиттєвого виявлення [3-5], а також значну сферу паразитування на тілі людини, зокрема у шкірі, стає цілком очевидною методична і методологічна перевага одночасного виявлення кліщів та інших паразитів у структурних елементах шкіри людини. Беручи до уваги наведені міркування, поставлене завдання вирішують тим, що у відомому способі визначення біоценозу шкіри у хворих на рожеві вугрі, що включає попередню обробку шкірної поверхні хімічним реагентом з наступним мікроскопічним аналізом відбитку нашкірного вмісту на адгезивній оптично-прозорій плівці, відповідно до корисної моделі шкірну поверхню попередньо обробляють водним розчином пероксиду водню, на яку після підсихання здійснюють аплікацію адгезивної плівки, наступного дня знімають з шкірної поверхні, реаплікують клейкою поверхнею на предметне скло, а отриманий мікропрепарат досліджують у полі зору поляризаційного мікроскопу. Перелік фігур. Фіг. 1. Мікрофото. Поляризаційна флуоресценція кліща Demodex в мікропрепараті. ЛЮМАМ-8 М 3: обх10; окх20. Фіг. 2. Мікрофото. Поляризаційна флуоресценція кліща Demodex заповненого зсередини і адсорбованого ззовні лямбліями. ЛЮМАМ-8 М3: обх 8; окх15. Фіг. 3. Мікрофото. Заповнені тілами лямблій кліщі у периферійній частині адгезійної плівки в мікропрепараті. ЛЮМАМ-8 М3: обх 8; окх15. Фіг. 4. Кліщ в оточенні цистоподібних форм лямблій. ЛЮМАМ-8 М3: обх8; окх15. Спосіб здійснюють наступним чином. Вибрану для дослідження поверхню шкіри попередньо обробляють 3 % водним розчином водню пероксиду, а після підсихання на оброблену шкірну поверхню наклеюють клаптик оптично-прозорої плівки, наприклад скотчу. Наступного дня плівку обережно знімають із шкіри і накладають клейкою поверхнею на предметне скло. Виготовлений мікропрепарат досліджують за методикою поляризаційно флуоресцентної мікроскопії, звертаючи увагу на наявні в мікропрепараті паразити, зокрема, лямблії і/або кліщі. При цьому тіла лямблій (вегетативні і цистоподібні форми) світяться яскравим золотистожовтим світлом, іноді з червоною каймою. Тіла кліщів відповідно до типу вирізняються продовгуватою або овальною формою з потовщенням головного кінця і звуженням хвостової частини з характерним зернистим від жовтувато-зеленого до золотистого кольору світінням (фіг. 1). За наявності в мікропрепаратах одночасно кліщів Demodex folliculorum і лямблій звертають увагу на характер взаємо розташування паразитів, форму тіл і характер флуоресцентного світіння. Приклад 1. Хвора С, 42 років, з метою підтвердження діагнозу демодекозу, згідно з отриманою від лікаря інструкцією, в домашніх умовах само 40079 4 стійно обробила поверхню шкіри в ділянці лоба 3 % водним розчином водню пероксиду. Після підсихання на оброблену шкірну поверхню наклеїла клаптик плівки скотчу. Наступного дня плівку обережно зняла із шкіри і наклеїла клейкою поверхнею на предметне скло. Виготовлений у наведений спосіб мікропрепарат досліджували в лабораторії за методикою поляризаційно флуоресцентної мікроскопії. При цьому в мікропрепараті при освітленні його поляризованим світлом виявили овальної та округлої форми кліщі, світіння тіл яких вирізнялося дрібнозернистою структурою, компоненти якої висвічували від зелено-жовтого до золотисто-червоного кольору, походження яких вимагає подальшого вивчення, але за попередніми даними їх слід віднести до залишків перетравлених усередині кліща тіл лямблій. На поверхні кліщів (фіг. 2) рельєфно проступають адсорбовані тіла лямблій, які яскраво висвічують типовим золотисто-жовтим світлом. За наявності в мікропрепаратах одночасно кліщів Demodex folliculorum і лямблій звертали увагу на характер взаємо розташування паразитів, форму тіл і характер флуоресцентного світіння. Мікропрепарати фотодокументували, а при погребі здійснення довготривалого вивчення біоценозу шкіри шляхом аналізу матеріалу від хворих на основі поляризаційно флуоресцентної мікроскопії формували відповідну комп'ютерну базу даних. Приклад 2. При вивченні особливостей біоценозу шкіри за запропонованим способом звертали увагу на частоту виявлення у шкірі хворих людей кліщів обох типів, а саме Demodex folliculorum longus і Demodex folliculorum brevis, а також лямблій. Так, наприклад, одночасна присутність у матеріалі отриманому від хворих вказаних типів кліщів (фіг. 3) свідчить про невипадковий характер такого збігу, ставлячи на порядок денний вивчення особливостей та імовірну закономірність встановленого явища. Не менш важливою с практично постійна присутність одночасно лямблій (цист і вегетативних форм) і кліщів у матеріалі, отриманого від хворої людини з дерматологічними проявами демодекозу, виводячи до розряду першочергових, питання вивчення сутності встановленого феномену із загально біологічних позицій (фіг. 4). Таким чином, запропонований спосіб забезпечує точніше та інформативніше, ніж за способомпрототипом, дослідження біоценозу шкіри у хворих на рожеві вугрі, що сприятиме підвищенню точності та інформативності діагностичного дослідження паразитозів з переважним ураженням шкірного покриву людини, а отже – досягненню надійніших результатів лікування. Джерела інформації, які слід взяти до уваги: 1. Жаксылыкова Р.Д., Кененбаева М.К. К вопросу о диагностике демодекоза // Вестник АКазССр, 1990. - №4. - С.69-71. 2. Антонов В.Ф., Смирнова Е.Ю., Шевченко Е.В. Липидные мембраны при фазовых превращениях. М.: Наука, 1992. 3. Шкільна М.І., Дем'яненко В.В. Біофізичні засади клініко-лабораторної інформативності поляризаційної флуоресценції лямблій/Розвиток наукових досліджень 2007//Мат. Третьої міжнародної 5 40079 науково-практичної конференції. 28-28 листопада 2007 р. Г.5, -Полтава: ІнтерГрафіка, 2007.- С. 7778. 4. Дем'яненко В.В. Шкільна М.І. Лямбліоз: особливості діагностики лямбліозної інвазії. Екологія мікроорганізмів. Матеріали конференції. Тернопіль, «Укрмедкнига», 2007. - С. 54. Комп’ютерна верстка І.Скворцова 6 5. Пат.29303 U. Спосіб діагностичного визначення лямблій. Андрейчин М.А., Шкільна М.І, №U200709882; 03.09.2007; опубл. 10.01.2008; Бюл. № 1. 7. Карнаухов В.Н. Люминесцентный спектральный анализ клетки. - М: Наука, 1978.-209 с. Підписне Тираж 28 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601