Спосіб копрологічної діагностики гельмінтозів і еймеріозів

1. Спосіб копрологічної діагностики гельмінтозів і еймеріозів, при якому проводять дослідження фекалій шляхом їх розчинення у рідині з наступними фільтрацією, центрифугуванням та мікроскопією крапель із поверхневої плівки, який відрізняється тим, що розчинення фекалій проводять в 3 дефекти методики значно знижують діагностичну достовірність способу. Прототипом до запропонованого способу є метод флотації в розчині цукру, що запропонований для прижиттєвої діагностики еймеріозів. Для виконання цього методу спочатку 3-5 г фекалій змішують з 15-20 мл води, потім отриману суспензію центрифугують впродовж 3-5 хв. за 2500 об/хв., надосадову рідину зливають, а до осаду додають розчин цукру (50 г сахарози розчиняють у 320 мл води та додають 6,5 г фенолу кристалічного). Осад ресуспензують скляною паличкою та повторно центрифугують впродовж 3-5 хв. за 1500-2000 об/хв. Металічною петлею знімають з поверхні рідини пробу, переносять її на предметне скло та мікроскопують (див. Ятусевич А.И. Паразитарные болезни кроликов: монография / А.И. Ятусевич, И.Н. Дубина. - Витебск: УОВГАМ, 2006. - С. 106.). Однак, питома вага описанного флотаційного розчину цукру є недостатньою (ρ=1,02), наслідком цього є високий відсоток недостовірності, а також непридатність цього методу для діагностики гельмінтозів. Також слід відмітити громіздкість способу - дворазове центрифугування проби створює додаткові складності під час проведення серійних досліджень. Використання фенолу кристалічного під час приготування флотаційної рідини невиправдане. Ця речовина не здатна підвищити результативність методу, але належить до токсичних сполук і здатна чинити негативний вплив на здоров'я дослідника. В основу створення корисної моделі поставлена задача створити спосіб копрологічної діагностики гельмінтозів і еймеріозів, що дозволить розширити спектр захворювань, які діагностуються, досягти диференціації ооцист найпростіших і яєць гельмінтів від рослинних та ін. сторонніх клітин з одночасним спрощенням схеми виконання способу. Поставлена задача вирішується за рахунок того, що при здійсненні способу копрологічної діагностики гельмінтозів і еймеріозів, при якому проводять дослідження фекалій шляхом їх розчинення у рідині з наступними фільтрацією, центрифугуванням та мікроскопією крапель із поверхневої плівки, відповідно до корисної моделі розчинення фекалій проводять в розчині сахарози та Люголя, а одержану суміш фільтрують через 13 шари марлі та центрифугують протягом 3-7 хв. при 1000-2000 об/хв., причому розчин сахарози та Люголя отримують при наступному співвідношенні компонентів, мас. %: сахароза 30-40 Люголь 10-15 вода решта. При цьому, в особому виконанні способу, суміш фільтрують та центрифугують протягом 5 хв. при 1500 об/хв., а розчин сахарози та Люголя отримують при наступному співвідношенні компонентів, мас. %: сахароза 35 Люголь 10 вода решта. 66145 4 Розчинення фекалій в розчині сахарози та Люголя, фільтрування одержаної суміші через 1-3 шари марлі та центрифугування протягом 3-7 хв. при 1000-2000 об/хв., причому отримання розчину сахарози та Люголя при наступному співвідношенні компонентів, мас. %: сахароза 30-40 Люголь 10-15 вода решта, дозволяє створити умови для спливу більш важких яєць гельмінтів з одночасним забезпеченням спливу яєць ооцист, а також забарвити рослинні клітини у рожевий та червоний кольори, що дозволяє розширити спектр діагностики захворювань, досягти диференціації ооцист найпростіших і яєць гельмінтів від рослинних та ін. сторонніх клітин з одночасним спрощенням схеми виконання способу. Застосування пропонованого способу копрологічної діагностики гельмінтозів і еймеріозів дозволяє забезпечити наступний технічний результат: - спрощується схема виконання способу; - з'являється можливість виявляти як збудників протозойних хвороб тварин, так і гельмінтозів, оскільки з підвищенням питомої ваги флотаційного розчину до щільності яєць гельмінтів, останні спливатимуть на його поверхню; - створюються умови досліднику для більш ефективної диференціації ооцист найпростіших та яєць гельмінтів від рослинних та ін. сторонніх клітин: паразитичні клітини залишаються безбарвними або природного кольору, а рослинні клітини розчин Люголя забарвлює у рожевий та червоний кольори. Крім того: - з'являється можливість більш достовірно оцінювати інтенсивність інвазії ооцист еймерій та яєць нематод за рахунок підвищення концентрації флотаційного розчину до 35 %, оскільки більший їх відсоток (порівняно з 15 %-м розчином у прототипі) спливає на поверхню; - скорочується термін проведення досліджень; - для здійснення способу не потрібні дефіцитні та дорогі прилади і матеріали. На фото 1 представлений зовнішній вигляд яйця стронгілят; фото 2 представлений зовнішній вигляд ооцисти еймерій та рослинних клітин. Графічні матеріали ілюструють зовнішній вигляд паразитарних клітин: 1 - яйце стронгілят, 2 ооциста еймерій, 3 - рослинні клітини. Спосіб здійснюють наступним чином. Пробу фекалій (1-3 г, залежно від виду тварини) кладуть у стаканчик, до неї доливають 10-30 мл (1:10) флотаційного розчину (35 %-й розчин цукру та Люголю 1:10) питомою вагою 1,15. Суспензію фекалій перемішують і фільтрують крізь два шари марлі або металеве ситечко у центрифужну пробірку. Отриманий розчин центрифугують 5 хв. при 1500 об/хв. З поверхні розчину мікропіпеткою або мікробіологічною петлею на предметне скло наносяться 3 краплі, які досліджуються на предмет виявлення ооцист еймерій чи яєць гельмінтів під мікроскопом. 5 Комп’ютерна верстка М. Мацело 66145 6 Підписне Тираж 23 прим. Державна служба інтелектуальної власності України, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601