Спосіб визначення збудників гельмінтозів і протозоозів у пробах довкілля

Спосіб визначення збудників гельмінтозів і протозоозів в пробах довкілля шляхом відбору проб досліджуваного матеріалу, його механічного збагачення і тривалого зберігання до дослідження протягом 6 і більше місяців, який відрізняється тим, що для подовження терміну зберігання яєць гельмінтів і цист найпростіших і підвищення ефективності санітарно-паразитологічних досліджень проби довкілля обробляють складом, який містить наступні концентрації речовин, мас. %: Корисна модель належить до медицини і стосується діагностики збудників паразитарних хвороб в пробах довкілля: питній воді, воді відкритих водойм, стічний воді, ґрунті, змивах з об'єктів навколишнього середовища. Відомі імунологічні і мікробіологічні способи діагностики паразитарних хвороб [1, 2]. Імунологічні способи дозволяють визначати лише маркери збудників [2]. Більш достовірними для дослідження об'єктів довкілля є мікробіологічні способи, засновані на виявленні збудників у воді, ґрунті, донних відкладеннях, змивах [1]. Ці способи не дають можливості встановити життєздатність яєць гельмінтів і цист кишкових найпростіших [3]. Відомий спосіб [4] полягає в обробці біологічних субстратів складом консерванту, який пригнічує мікрофлору і гнилісні процеси, збудники паразитозів зберігають морфологічну структуру понад 2 місяці, але спосіб не завжди ефективний. В основу корисної моделі поставлене завдання підвищення ефективності дослідження зразків з об'єктів довкілля на збудників паразитарних хво роб та продовження терміну зберігання життєздатності збудників паразитозів. Поставлене завдання вирішують шляхом збільшення концентрації компонентів консерванту для збереження збудників паразитарних хвороб у зразках з об'єктів довкілля. Приклад 1 здійснення корисної моделі. Відбирають пробу води з річки в кількості 15 дм3. З проби води отримують осад методом механічного збагачення. До осаду з над осадовою рідиною у співвідношенні 1:2 додають консервант, який вміщує, мас. %: (13) 13457 (11) UA 40 %-вий формалін 2,4 96-градусний етанол 6,2 мертиолят 0,0020 хлорид натрію 0,85 дистильована вода решта В подальшому зі суміші готують мазки, забарвлюють вітальними барвниками і досліджують під світловим мікроскопом на наявність яєць гельмінтів і цист кишкових найпростіших. Результати досліджень представлені в таблиці 1. U 2,4-2,6 6,0-6,2 0,0020-0,0021 0,85 решта. (19) 40 %-вий формалін 96-градусний етанол мертиолят хлорид натрію дистильована вода 3 13457 4 Таблиця 1 Термін збереження у консерванті Вміст цист лямблій (%) живі 98 98 96 90 74 24 години 72 години 75 діб 6 місяців 10 місяців Вміст яєць аскариди (%) живі 96 96 96 96 95 дегенеровані 2 2 4 10 26 Дані таблиці свідчать про високу ефективність і надійність запропонованого способу визначення збудників протягом більше, ніж 6 місяців. Приклад 2 здійснення корисної моделі. Пробу ґрунту багаторазово промивають водою. З промивної води отримують осад методом механічного збагачення. До осаду з надосадовою рідиною у співвідношенні 1:2 додають консервант, який вміщує, мас. % 40 %-вий формалін 2,6 96-градусний етанол 6,0 мертиолят 0,0021 хлорид натрію 0,85 дистильована вода решта В подальшому зі суміші готують мазки, забарвлюють вітальними барвниками і досліджують під світловим мікроскопом. Отримані проби можуть зберігатися у побутовому холодильнику за температури +4...+6°С або кімнатній температурі +16...+24°С і бути придатними для дослідження протягом 6 і більше місяців. Незабарвлені яйця гельмінтів і цисти кишкових найпростіших є життєздатними, за їх вмістом визначають загальну кількість збудників паразитарних хвороб кожного виду у воді або ґрунті. Корисна модель дозволяє тривалий час зберігати життєздатними збудників паразитарних хво дегенеровані 4 4 4 4 5 роб за рахунок консерванту, який призводить до загибелі супутньої мікрофлори та інших клітинних елементів, про що свідчить їх інтенсивне забарвлення вітальними барвниками (еозином, толуїдиновим синім, метиленовим синім, метиленовим синім, акридиновим оранжевим та іншими). Водночас 90-96% цист кишкових найпростіших зберігає життєздатність протягом 6 місяців, а 95-96% яєць гельмінтів - протягом 10 місяців від забору проби. Це необхідно для оцінки епідеміологічної ролі окремих факторів передачі паразитарних хвороб з фекально-оральним механізмом передачі, ефективності якості дезінвазійних заходів в осередках таких хвороб, зберігання збудників паразитозів для постановки дослідів по вивченню ефективності овіцидних і цистоцидних засобів тощо. Застосування нового способу дозволяє підвищити ефективність дослідження об'єктів довкілля на наявність життєздатних збудників паразитарних хвороб. Приклад 3 здійснення корисної моделі. Визначення ефективності способу. Відомим і запропонованим способом здійснюють дослідження проб довкілля з вмістом цист лямблій і яєць аскарид протягом 6 місяців зберігання. Результати дослідження представлені у таблиці 2. Таблиця 2 Спосіб визначення Запропонований Відомий Кількість проб 100 100 Вміст цист лямблій (%) живі 98 73 Наведені дані підтверджують високу перевагу в ефективності запропонованого способу в порівнянні з відомим. ЛІТЕРАТУРА 1. Основные методы лабораторной диагностики паразитарных болезней. - Женева: ВОЗ, 1994.131 с. 2. Stetzenbach L.D., Arrowood M.J., Marshall M.M., Sterling C.K. Monoclonal antibody based immunofluorescent assay for Giardia and Cryptosporidium detection in water samples // Water Sci. and Technol. - 1988. - V. 20, N 11-12. - P. 193198. дегенеровані 2 27 Вміст яєць аскариди (%) живі 96 66 дегенеровані 4 34 3. Triaazinonverbindungen zur Behandlung von durch den befall mit parasitischen Protozoen bedingten Krankheiten: Заявка 19958388 Германия, МКИ7 А61К 31/54, А 61Р 33/02 GreifG., Bayer A.G. № 19958388.9; Заявл. 03.12.99; Опубл. 07.06.01. 4. А.с. № 1601546 СССР МКИ G01 N 1/28 Способ определения возбудителей гельминтозов и протозоозов / КНИИЭИБ. Заявл. 12.01.1988. Опубл. 22.06.1990. Падченко И.К., Локтева И.М., Таран В.В. Боллетень «Открытия, изобретения». 1990. - № 39. 5 Комп’ютерна верстка Д. Дорошенко 13457 6 Підписне Тираж 26 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601