Спосіб отримання рослинного екстракту, стимулюючого утворення інтерферону

Спосіб отримання рослинного екстракту, стимулюючого утворення інтерферону, що включає використання рослинної сировини з її висушуванням, подрібненням та екстракцією, який відрізняється тим, що як сировину використовують листя бадану товстолистого, які 3-4 рази екстрагують гарячою водою у співвідношенні 1:15 - 1:20 з наступним просвітленням, фільтруванням та ліофільним висушуванням кінцевого продукту. (19) (21) 20040604691 (22) 15.06.2004 (24) 15.06.2006 (46) 15.06.2006, Бюл. № 6, 2006 р. (72) Козловський Михайло Михайлович, Бензель Леонід Васильович, Лозинський Ігор Миколайович, Федорук Володимир Іллїч, Друль Оксана Стефанівна, Білецька Галина Вацлавівна, Бензель Ігор Леонідович (73) ЛЬВІВСЬКИЙ НАУКОВО-ДОСЛІДНИЙ ІНСТИТУТ ЕПІДЕМІОЛОГІЇ ТА ГІГІЄНИ МІНІСТЕРСТВА ОХОРОНИ ЗДОРОВ'Я УКРАЇНИ, Козловський Михайло Михайлович, Бензель Леонід Васильович (56) Лікарські рослини: Енциклопедичний довідник./ Відп. ред. А.М. Гродзінський. - К.: Голов, ред. УРЕ, 1989. - С. 49-50 3 76000 4 Запропонований спосіб здійснюють таким чиОтримані витяги об'єднували, 15 год відстоювали, ном . потім фільтрували і ліофільно висушували. Вихід Сухе листя бадану товстолистого (Bergenia кінцевого продукту становив 36,4 %. crassifolia) подрібнюють на дрібний порошок Вивчення інтерфероніндукуючої дії екстрактів розміром 1-3 мм, екстрагують діючі речовини очиздійснювали в дослідах на мишах лінії СВА згідно щеною водою при температурі 90 - 95° С у з вимогами і методами, рекомендованими для співвідношенні 1 : 15 - l : 20 впродовж 30-60 хв і оцінки індукторів інтерферону [2]. проціджують. Екстракцію проводять 3-4 рази, після Отримані фітозасоби вводили тваринам мачого об'єднані екстракти просвітлюють впродовж сою 12-14 г одноразово внутрішньоочеревинно 10-15 год, фільтрують і висушують. (в/о ) в дозах 140 і 70 мг/кг, що відповідали 1/3-1/6 Одержаний екстракт являє собою комплекс ЛД50. Через 5, 24, 48 і 72 год у них проводили біологічно активних речовин у вигляді забір крові, використавши на кожну експерименгігроскопічного аморфного порошку світлотальну умову по 4 миші. В одержаних пробах сикоричневого кольору з легким специфічним запароваток крові визначали рівень інтерферону хом і з терпким смаком. Вихід кінцевого продукту мікрометодом в культурі клітин L-929 за затримкою становить 31,7 - 36,4 %. У ліофілізаті, умовно поцитопатичної дії (ЦПД) тест-вірусу значеному "АН", виявлені дубильні речовини, енцефаломіокардиту мишей. фенологлікозиди, полісахариди, фенолкарбонові Для порівняльної характеристики і оцінки кислоти та інші фенольні сполуки. Вміст активності досліджуваних екстрактів в якості прополіфенольних сполук у фітосубстанції становить тотипу за характером дії використовували відомий 67%, дубильних речовин - 31 %, арбутину-33%. комерційний препарат аналогічного призначення Спосіб ілюструється наступними прикладами: аміксин, який застосовували за оптимальною для Приклад 1. 50 г подрібнених в порошок сухих нього схемою введення: перорально (п/о) в дозі листків бадану товстолистого заливали 750 мл 200 мг/кг [3]. доведеної до кипіння очищеної води і настоювали Результати вивчення відібраних варіантів впродовж 30 хв на водяній лазні при температурі фітозасобу АН, що відображають суть запропоно90° С. Екстракцію в круглодонній колбі ємкістю 1,5 ваного способу, наведені нижче в таблиці. Із її л повторювали ще тричі, після чого екстракти даних видно, що отримані екстракти володіють об'єднували, відстоювали впродовж 10 год при вираженою інтерферон-індукуючою активністю, які температурі 8 - 10° С і фільтрували. Фільтрати не лише не поступаються за інтенсивністю дії вирозливали у флакони по 250 мл і висушували за щезгаданому прототипу, але в окремих випадках допомогою сублімаційного апарату КС-30. Вихід навіть і перевищують його активність. Так, встакінцевого продукту становив 31,7%. новлено, що ліофілізати АН-1 і АН-2 в дозі 140 Приклад 2. 50 r подрібненої лікарської мг/кг індукують у мишей інтерферон в титрах 640рослинної сировини бадану товстолистого екстра1280 од/мл з піком активності через 24 год після гували в круглодонній колбі ємкістю 2,0 л доведевведення, а взірець АН-3 забезпечував ною до кипіння очищеною водою у співвідношенні циркуляцію в крові 1280-2560 од/мл даного сировина - екстрагент 1:20 на водяному огрівнику цитокіну. В цих же умовах експерименту аміксин при 93° С впродовж 45 хв. Аналогічний спосіб викликав подібне за динамікою виділення біологічно активних речовин повторюінтерфероноутворе-ння в кількості – 640-1280 вали ще двічі, після чого об'єднані екстракти од/мл. Помітну стимуляцію інтерфероногенезу (40освітлювали при температурі 8-10°С, фільтрували 80 од/мл) реєстрували і при застосуванні вказаних і проводили ліофільне висушування. Вихід варіантів АН в дозі 70 мг/кг, що підтверждує їх виліофілізованого фітоекстракту становив 32,9 %. ражену здатність індукувати інтерферон. Приклад 3. 50 г висушеної і подрібненої Наведені результати вказують на високу рослинної сировини бадану товстолистого вносиінтерфероніндукуючу активність одержаних із ли в круглодонну колбу ємкістю 1500 мл, заливали листків бадану товстолистого екстрактів, які за доведеною до кипіння очищеною водою в об'ємі інтенсивністю стимуляції інтерферонової системи 850 мл, настоювали впродовж 60 хв при 95° С на здатні переважати активність відомого водяній лазні і після чого проціджували. Вказану комерційного індуктора інтерферону аміксину. екстракцію аналогічно проводили ще 3 рази. Таблиця Порівняльна оцінка інтерфероніндукуючої активності відібраних рослинних екстрактів АН і аміксину Препарати АН-1 АН-2 АН-3 Аміксин Доза в мг/кг 140, в/о 70, в/о 140, в/о 70, в/о 140, в/о 70, в/о 200, п/o Титри інтерферону в од/мл в крові мишей через: 5 год 24 год 48 год 72 год 20 1280 10-20