Спосіб гормонального стимулювання самців дунайського лосося

Реферат: Спосіб гормональної стимуляції самців дунайського лосося передбачає ін'єктування риби гормональним препаратом. Як препарат застосовують сурфагон, який після анестезії самців ін'єктують під черевний плавець у дозі 5 мкг/кг маси тіла самців. UA 117879 U (54) СПОСІБ ГОРМОНАЛЬНОГО СТИМУЛЮВАННЯ САМЦІВ ДУНАЙСЬКОГО ЛОСОСЯ UA 117879 U UA 117879 U 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Корисна модель належить до галузі промислового рибництва, зокрема до способів відтворення зникаючих видів риб з метою поповнення природного ареалу та збільшення видового різноманіття на ринку аквакультури за рахунок введення нових об'єктів лососівництва (Salmonidae) і може бути використана для отримання якісних статевих продуктів за допомогою гормонального стимулювання самців дунайського лосося (Hucho hucho, Linnaeus, 1758). Антропогенний вплив на біогеоценози континентальних водойм упродовж останніх 50 років негативно вплинув на цінних гідробіонтів. Так, окремі представники іхтіофауни опинились під загрозою зникнення та були занесені до Червоної книги України. Виключної гостроти та особливої актуальності дана проблема набула щодо рідкісних і зникаючих представників лососевих риб, а саме дунайського лосося, який у зв'язку з особливою генетичною та господарською цінністю слід розцінювати як національне надбання України. Зокрема, вищезазначений вид заслуговує першочергової уваги з огляду необхідності збереження біорізноманіття аборигенної іхтіофауни та забезпечення гомеостазу водних екосистем. На теперішній час в Україні не відпрацьована система науково-обґрунтованих заходів та методичних прийомів щодо відтворення даного виду риб. Отже, основною метою цього завдання було розроблення цілісного механізму наукових засад і методичних рекомендацій щодо відтворення чисельності популяції цінного та зникаючого представника аборигенної іхтіофауни Дунайського басейну методом гормонального стимулювання дозрівання статевих продуктів плідників цієї риби для подальшого їх відбору, запліднення та проведення інкубації. В Україні наукові дослідження за цією проблемою не мали аналогів та проводились вперше, при цьому інформації щодо гормонального стимулювання дунайського лосося в доступній інформативній базі вітчизняних та зарубіжних джерел не знайдено. В основу корисної моделі покладено задачу розробити спосіб ефективного гормонального стимулювання самців дунайського лосося з метою удосконалення індустріальної технології відтворення, який би підходив для умов заводського відтворення та сприяв підвищенню ефективності ведення рибницького господарювання з метою збереження біорізноманіття у природних водоймах України. Згідно з запропонованим способом, стимулювання проводять за допомогою гормонального препарату сурфагон. Сурфагон - синтетичний нанапептид, аналог гонадотропін-рилізинг гормону ЛГ-РГшопиберину. Випускається у вигляді стерильного раегеора в 0,9 % розчині хлориду натрію. В 1 мл препарату міститься 5 мкг діючої речовини. Флакон - 10 мл. Фармакологічна дія сурфагону полягає у стимулюванні виділення гонадотропінів гіпофізу в кров'яне русло максимумом через 2-3 години після введення. Підвищений вміст гонадотропінів у крові зберігається упродовж 4-5 годин після введення. На відміну від природного люліберину, біологіна активність сурфагону в 50 раз вища, що дозволяє використовувати препарат в мікродозах та короткими курсами. Сурфагон повільніше, ніж природний люліберин руйнується під дією ферментів, що забезпечує більш сильну біологічну дію на гонадотропну функцію гипофізу. Упродовж 3 годин після введення пептид розкладається на амінокислоти та виводиться з організму Дослідження щодо штучного відтворення дунайського лосося в Україні проводяться упродовж останніх 10 років у господарствах "Ішхан", "Каскад", "Головатиця" та "Лопушне". [1-4]. Однак, у цих роботах гормональне стимулювання не проводили, що, у зв'язку з порційним нерестом досліджуваних риб, не дозволяло в повній мірі використовувати самиць. Спосіб здійснюється наступним чином. За досягнення температури води в гірських річках 5 °C риб розділяють за статтю. Як правило такі роботи проводять за 2-3 тижні до природного нересту. Самців, з метою уникнення травматизації, перед проведенням маніпуляцій занурюють в анестезуючий розчин гвоздичної олії в концентрації - 40-60 мг/л, тобто 1 мл на 20л води. Для гормонального стимулювання самців використовують гонадотропін-релізин гормон desGlylO- [D-Ala6] - Pro9-NH2-Et-LH-RH (комерційна назва сурфагон), який широко використовується в тваринництві та останнім часом в рибництві за відтворення цінних видів риб: осетрових, сигових, лососевих. Після анестезії самців зважують і відповідно до маси тіла визначають індивідуальну дозу гонадотропіну, з розрахунку - 5 мкг/ кг маси тіла. Вводять гонадотропін шляхом внутрішньочеревної ін'єкції. Ін'єктування здійснюють під черевний плавець. Перед ін'єктуванням місце ін'єкції дезинфікують ватним тампоном змоченим у медичному спирті з метою уникнення запального процесу. Після ін'єкції риб витримують в проточній воді до повного "просинання", за тим випускають в звичне середовище. Через 5діб у риб відбирають статеві продукти. Перед відбором молок самців знову витримують у розчині вищезазначеного анестетику. ПРИКЛАД. Дослідження проводили упродовж 3 років в таких господарствах: "Шипот" (ПрАТ "Закарпатський рибокомбінат") та у фермерських господарствах "Каскад" й "Ішхан". Оскільки 1 UA 117879 U 5 10 15 20 25 30 35 40 45 метою даних досліджень було отримання молок від самців в повному обсязі, - дослід розпочинали за 2 тижні до настання природного нересту, тобто, за досягнення температури води в гірських річках +5 °C. Проводили бонітування риб та розділяли їх за статтю. Самиць та самців утримували окремо. Введення гонадотропіну відбувалось шляхом внутрішньочеревної ін'єкції. Ін'єктування здійснювали під черевний плавець. Були використані наступні варіанти дозувань для самців: І варіант - 1-ша попередня ін'єкція – 3 мкг/ кг маси тіла, через 24 години 2-га ін'єкція - 5 мкг/ кг та через 12 годин 3 вирішальна ін'єкція 5 мкг/ кг маси тіла самців. II варіант - 1-ша попередня ін'єкція - 5 мкг/ кг маси тіла, через 24 години 2-га ін'єкція - 10 мкг/ кг та через 12 годин 3-тя дозвільна ін'єкція 15 мкг/ кг маси тіла самиць. III варіант - 1-ша попередня ін'єкція - 5 мкг/ кг маси тіла самців. Гормональне стимулювання самців проводили під час введення вирішальної ін'єкції самицям, використовуючи дозування 5 мкг/ кг маси тіла. Оскільки дозрівання самців в природі відбувається раніше ніж у самиць. За цим гормональна стимуляція самців значно збільшує кількість еякуляту. У І варіанті - максимальну кількість молок отримали на 7-й день після введення дозвільної ін'єкції, у II варіанті - молоки отримали після введення дозвільної ін'єкції на 2-й день, однак було відмічено запальний процес у самців, що супроводжувався кров'яним вмістом в молоках під час зціджування. Відповідно, відсоток рухливих сперміїв та тривалість активного руху були низькими (40 та 20 % відповідно). У III варіанті молоки отримали на 5-й день після введення ін'єкції. Об'єм еякуляту складав в середньому 2,5мл, що перевищувало вдвічі даний показник, за звичайних умов. Відсоток запліднення становив 90 %. Вихід вільних ембріонів з інкубації ікри в І та II варіантах становив 50 та 30 % відповідно. УIII варіанті 81 %. Гормональне стимулювання завершального етапу дозрівання у дунайського лосося є необхідним елементом заводського способу відтворення, який дозволяє отримати якісні статеві продукти у повному обсязі з мінімізацією травматичних наслідків для плідників. Найбільш ефективним препаратом для гормонального стимулювання дозрівання статевих продуктів дунайського лосося виявився сурфагон, дозування якого складало 5 мкг/ кг маси тіла. Таке дозування дозволило найбільш повно використати репродуктивний потенціал плідників дунайського лосося [5]. Джерела інформації: 1. Mruk A. Artificial reproduction of the Danube salmon (Hucho hucho [L, 1758]) in Ukraine / A. Mruk, V. Ustych // Annals of animal science. - Krakow, 2007. - №1. - P. 157-161. 2. Мрук А. И. Выращивание сеголеток дунайского лосося (Hucho hucho [L.,1758]) в искусственных условиях / А. И. Мрук, Устич В. И. // Вопросы рыбного хозяйства Беларуси: сб. научн. тр. - Минск: РУП "Институт рыбного хозяйства", 2008. - С. 161-163. 3. Мрук А. И. Воспроизводство дунайского лосося (Hucho hucho [L.,1758]) в Украине / А. И. Мрук // Сборник научн. ст. "Аквакультура Центральной и Восточной Европы: настоящее и будущее" посвященный 11 съезду НАСЕЕ. - Кишинев, 17-19 октября, 2011. 4. Conservation of fish in inland waters of Ukraine by artificial stocking. / [Yakovleva Т., Kucheruk th A., Mruk A. Et al.] // 5 Aquatic biodiversity international conference, 2015. Sibiu/Transylvania/Romania/Evropean Union. 5. Mruk A. Use of Surfagon for artificial reproduction of Danube salmon (Hucho hucho L. 1758) / A. Mruk, A. Khandozhivska // FABA 2014: Iinternational Symposium on Fisheries and aquatic sciences. - September 25-27 2014. - C. 269. ФОРМУЛА КОРИСНОЇ МОДЕЛІ 50 Спосіб гормональної стимуляції самців дунайського лосося, що передбачає ін'єктування риби гормональним препаратом, який відрізняється тим, що як препарат застосовують сурфагон, який після анестезії самців ін'єктують під черевний плавець у дозі 5 мкг/кг маси тіла самців. Комп’ютерна верстка В. Мацело Міністерство економічного розвитку і торгівлі України, вул. М. Грушевського, 12/2, м. Київ, 01008, Україна ДП “Український інститут інтелектуальної власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 2