Спосіб профілактики захворювань у промислових прісноводних риб

Спосіб профілактики захворювань у промислових прісноводних риб, що включає операції згодовування рибам корму, що містить імуномодулюючий препарат, який відрізняється тим, що як імуномодулюючий препарат застосовують препарат "Ізатізон" і згодовують його рибам разом із кормом за схемою 0,3-0,5 мілілітра розчину препарату на 1 кілограм маси риби протягом 25-31 дня з інтервалом в 20-24 години при температурі не нижче 14 °С. (19) (21) u200710730 (22) 28.09.2007 (24) 11.02.2008 (72) ЗАЇКА ЛЕОНІД АНДРІЙОВИЧ, U A, ПОТОПАЛЬСЬКИЙ АН АТОЛІЙ ІВАНОВИЧ, U A, СИЧ ГАННА ОЛЕКСАНДРІВНА, UA, МАТВІЄНКО НАТАЛІЯ МИКОЛАЇВН А, UA, БУЧАЦЬКИЙ ЛЕОНІД ПЕТРОВИЧ, UA (73) ІНСТИТУТ МОЛЕКУЛЯРНОЇ БІОЛОГІЇ І ГЕНЕТИКИ НАЦІОНАЛЬНОЇ АКАДЕМІЇ Н АУК УКРАЇНИ, UA, ІНСТИТУТ РИБНОГО ГОСПОДАРСТВА УКРАЇНСЬКОЇ АКАДЕМІЇ АГРАРНИХ Н АУК, U A 3 30040 4 інтервалом в 20-24 години при температурі не відрізнялись від контрольних більшою вагою, нижче 14°С. підвищеним вмістом гемоглобіну, загального білку, Авторами експериментально було виявлено лейкоцитарною формулою, БАСК, фагоцитарною оптимальний за ціною та ефективністю активністю нейтрофілів, проліферативною імуномодулюючий препарат, а також схему його активністю лімфоцитів від контрольних риб (див застосування. Таким препаратом виявився рис. 1, 2, табл. № 1,2, 3). „Ізатізон". "Ізатізон" це комплексний, Аналіз даних продемонстрував, що по противірусний, антибактеріальний, антигрибковий і завершенні експерименту маса дослідних риб імуномодулюючий препарат, який має широкий була на 13% більша за контрольні, а вміст спектр дії, забезпечуючи високий лікувальногемоглобіну і загального білку у крові дослідних профілактичний, протизапальний і антигістамінний риб були вищими, приблизно, на 26% ніж у ефекти, підвищує резистентність організму тварин. контрольних (Фіг.1). При застосуванні препарат легко проникає через Характерною рисою білої крові риб є те, що біологічні бар'єри, блокує репродукцію вірусів, вона представлена переважно лімфоцитами. пригнічує розмноження патогенних Лімфоцити риб, як і у представників інших класів мікроорганізмів. Застосовується для лікування відіграють головну роль в роботі імунної системи. вірусних, бактеріальних і грибкових захворювань Важливе значення в реалізації імунологічних сільськогосподарських тварин, хутрови х звірів і функцій виконують і інші типи чи популяції бджіл. Препарат „Ізатізон" виготовляють у вигляді лейкоцитів: гранулоцити та моноцити. Вони водних розчинів [16]. приймають участь у фагоцитозі мікроорганізмів, Результат від згодовування рибам „Ізатізону" у синтезі цитокінів, медіаторів імунної відповіді, дозах менших ніж 0,3 мілілітра розчину препарату неспецифічних факторів імунітету: лізоциму, на 1 кілограм маси риби менше ніж 25 днів, інтерферону, гемолізину, хитинази та ін. [2]. практично, не дав позитивного результату. Низькій відсоток лейкоцитів в обох група х на Збільшення ж доз до 0,6 і вище мілілітрів розчину початку червня, був, вочевидь, наслідком препарату на 1 кілограм маси риби і його перехідних процесів. Аналіз лейкоцитарної вживання більше 32 днів економічно не формули засвідчив, що кількісні співвідношення обгрунтоване. Суть корисної моделі пояснюється клітин у всіх гр упах знаходились в межах норми графічними матеріалами: [6]. Під час та по закінченні експерименту вміст На Фіг.1 графічно показано вплив препарату лімфоцитів у дослідній групі в середньому був „Ізатізон" на масу риби. більшим на 10% ніж у контрольній, що На Фіг.2. графічно показано вплив препарату пояснюється стимулюючим впливом „Ізатізону" на „Ізатізон" на гемоглобін та загальний білок крові вроджену резистентність коропових риб (табл. 1). риби. Результати досліджень БАСК показали, що ця Назви таблиць: ознака, яка відображує реакцію риб на мінливі 1. Лейкоцитарна формула контрольних та умови середовища, зараженість їх паразитами, дослідних риб під впливом препарату „Ізатізону", життєстійкість риб, ступінь стійкості їх до %, М ± m інфекційних хвороб [10], в середньому на 31% 2. Вплив препарату „Ізатізон" на була вищою у риб, які приймали „Ізатізон" (табл. бактеріостатичну активність сироватки крові і 2). фагоцитарну активність нейтрофілів. Використання тетразолію нітросинього (НСТ) 3. Проліферативна активність лімфоцитів риб для аналізу фагоцитарних властивостей під дією препарату „Ізатізон" (за індексом нейтрофілів риб запропонував А.Сивіцький зі стимуляції та відсотковою різницею РБТЛ). співавторами у 1986 році. Принцип тесту Приклад. Дослідження проводили на відновлення НСТ (НСТ-тест) полягає в тому, що однолітках ідволітках коропових риб. при активації фагоцитуючи х клітин радикали Використовували кілька окремих гр уп риб. Для кисню, що містяться у нейтрофілах, відновлюють кожної групи задавали свою схему згодовування розчинний тетразолій нітросиній до диформазану, „Ізатізону", а саме, для 1-ї групи з розрахунку якій розподіляється в цитоплазмі. Цей тест 0,2мл/кг маси риби, для 2-ї - 0,3мл/кг маси риби, відображує ступінь активації кисневозалежних для 3-ї - 0,4мл/кг маси риби, для 4-ї - 0,5мл/кг маси механізмів бактерицидної активності риби, для 6-ї - 0,6мл/кг маси риби, для 7-ї фагоцитуючи х клітин. Тест можливо виконати 0,7мл/кг маси риби. Одна - 8-а група риб була двома методами: цитохімічним та контрольною - не отримувала препарат "Ізатізон". спектрофотометричним [7]. Перевага Препарат "Ізатізон" риби отримували разом з цитохімічного методу, застосованого нами, комбікормом протягом 30 днів з інтервалом в 1 полягає в тому, що він нескладний та дозволяє у добу при температурі води 16-20°С. польових умовах дослідити велику кількість риби Проведені дослідження риб дозволили [22]. отримати дані про характер і направлення змін у Стимулюючу дію „Ізатізону" на фагоцитарну організмі однорічок коропових риб під впливом активність нейтрофілів: вона була на 60% вищою у імуномодулюючого препарату „Ізатізон", і дослідних риб порівняно з контролем. Дані НСТвстановити межі коливань та характер сезонної тесту свідча ть про стабільний позитивний ефект мінливості досліджуваних показників. З матеріалів навіть після закінчення застосування „Ізатізону" дослідів випливає, що дослідні риби, які приймали (табл. 2). вищезгаданий препарат за схемою 0,3-0,5мл/кг Реакція бласттрансформації лімфоцитів маси риби протягом місяця з інтервалом в 1 добу (РБТЛ) характеризує здатність Т-лімфоцитів і 5 30040 6 допоміжних клітин до кооперації та активації, до 3. Божик В.Й., Пірус Р.І., Шемчук В.Р., продукції цитокінів допоміжними клітинами з Струбіцький І.В. Про деякі властивості біологічного подальшою експресією рецепторів на Тпрепарату ДОН-IR // Науковий вісник. Том 2, лімфоцитах, і синтезом ними цитокінів, до частина 4. Львів: Львівська державна академії трансформації Т-лімфоцитів у бласти. Ця реакція ветеринарної медицини ім. Гжицького С.3., 2000. являє собою послідовність подій, протягом яких 4. Головіна Н.А., Стрелков Ю.А., Воронин В.Н., малі лімфоїдні клітини Т-ряду, що перебувають у Головин П.П., Евдокимова Е.Б., Юхименко Л.Н. стані спокою, у відповідь на регуляторний сигнал Под ред. Головиной Н.А., Ба уера О.Н. зазнають морфологічних та метаболічних змін, Ихтиопатология . - Москва: Мир, 2007. - 448с. наслідком яких є клітинна проліферація та 5. Дегтярьов П.А., Шерман І.М., Пилипенко диференціювання, синтез ДНК та ділення. Згадані Ю.В., Яржомбек О.О., Вовченко С.Г. Фізіологія імунологічні події лежать в основі початкової фази риб. Практикум // Київ: Вища школа, 2001. - С 24будь-якої імунологічної відповіді, тому реакція 44. 4. РБТЛ розглядається як інтегральний тест на 6. Иванова Н.Т. Атлас клеток крови рыб.// імунологічну реактивність [22]. Москва. Лёгкая и пищевая промышленность// Для оцінки результатів РБТЛ використовували Москва: Лёгкая и пищевая промышленность, 1982. здатність живих клітин відновлювати розчинну - 184 с. жовту тетразолієву сіль (МТТ) до нерозчинного 7. Івченко В.А., Сидорчук П.І., Павленко М.С., темно-синього формазану, інтенсивність цього Горбатюк О.І. Дика О.В. Ім унологічні методи процесу є показником загального рівня досліджень у лабораторіях ветеринарної метаболізму клітин. Аналіз результатів РБТЛ медицини // Біла Церква: Білоцерків.держ. (табл. 3) доводить, що „Ізатізон" здатен індукувати аграр.ун-т, 1997. - 79с. диференціювання зрілих Т-лімфоцитів риб на 8. Казарникова А.В., Шестаковская Е.В. різних етапах дозрівання, оскільки він індукує Методы поддержания здоровья осетровых рыб відповідь Т-лімфоцитів на неспецифічні мітогени, а при заводском получении и товарном саме ФГА та КОН-А. Стимуляція клітин у культурі выращивании в современных условиях // залежала від концентрації мітогенів, які було Проблемы иммунологии, патологии и охраны підібрано експериментально. Ліпополісахарід здоровья рыб. Москва: Институт биологии (ЛПС) стимулював проліферацію В-лімфоцитів, внутренних вод РАН, 2004г., - С.486 - 494. фітогемагглютинин (ФГА) та конканавалін-А (Кон9. Канаєв О. Ветеринарна санітарія в А) індукували in vitro різні групи Т-лімфоцитів: Конрибництві. 2 вид., перепр. I доп. - М.: А впливав на Т- лімфоцити різних ступенів Агропроміздат, 1985.-280 ст. дозрівання, а ФГА стимулював проліферацію 10. Компанець Е.В., Мікрометод визначення диференційовано - визначених Т - клітин. Крім БАСК у риби та його використання в імунологічних того, „Ізатізон" збільшує функціональну активність дослідах // Рибне господарство: Київ. - 1991. зрілих лімфоцитів риб. №45. - С.71 - 73. Застосування прпарату „Ізатізон" при 11. Микряков В.Р, Попов А.В., Половкова С.Н. додаванні у комбікорм впродовж місяця з Структурно - функциональные изменения в інтервалом в 1 добу у кількості 0,3-0,5мл/кг ваги иммунной системе рыб озера Неро в связи с підвищує вміст гемоглобіну та загального білку в загрязнением воды пестицидами// Проблемы крові однорічок коропових риб, сприяє більш иммунологии, патологии и охраны здоровья рыб. швидкому росту та накопиченню маси риби. Москва: Институт биологии внутренних вод РАН, Під впливом імуномодулюючого препарату 2004г., - С. 1326 - 142. "Ізатізон" стабілізується картина білої крові риб, 12. Мусселі ус В.О., Ванятинський В.Ф., Ли хмар внаслідок чого збільшується кількість зрілих форм А.А. та інші. Лабораторний практикум по хворобах лейкоцитів. риб// Москва "Легка та харчова промисловість", Препарат „Ізатізон" стимулює функціональну 1983. - 296с. активність Т- та В- лімфоцитів, підвищує 13. Пастер Е.У., Овод В.К., Позур В.К., Вихоть фагоцитарну активність нейтрофілів та Н.Е. Иммунология (практикум). - Київ: Вища бактеріостатичну активність сироватки крові школа, 1989. - 304с. однорічок коропових риб. 14. Плохинский Н.А. Биометрия // Імуномодулюючий препарат „Ізатізон" може Новосибирск: Изд-во СОАН СССР, 1961г. - 364с. бути рекомендований для підвищення імунного 15. Потопальский А.И., Лозюк Л.В. статусу однорічок коропових риб. Противовирусный и противоопухолевый препарат Імуномодулюючий препарат „Ізатізон" може изатизон. Киев.- Наук, думка - 1995.-104. бути рекомендований для підвищення 16. Потопальський А.І., Лозюк Л.В., продуктивності коропових риб. Миролюбива А.Н., Бесарабов Б.Ф. Література „Противовирусный, протифопухолевый и 1. Алекин О.А, Семенов А.Д., Скопинцев Б.А. антилейкозный препарат изатизон". Киев.: Руководство по химическому анализу вод суши. Наук.Думка. - 1991. -192 с. Л.: Гидрометиздат, 1973. - 267 с. 17. Правдин И.Ф. Руководство по изучению 2. Балахнин И.А., Козиненко И.И. рыб. -М.: Пищ. Пром-ть, 1966. - 376 с. Интенсивность ответа на митоген неполовозрелых 18. Супрун СМ., Донченко Г.В., Пархоменко карпов в зависимости от возраста, длины, массы Ю.М., Кучмеровская Т.М., Исаева Н.М. Новый тела и наличия патогена //Докл. НАН Украины. витаминно-коферментный микопрепарат: 1996.-№12.-0.163-165. результаты испытаний и перспективы применения 7 30040 8 в рыбовордстве. // Рибне господарство: Київ. Вересень 57% 44% 2004. - №63. - С.217 - 220. Жовтень 43% 35% 19. Трифонова Е.С., Бычкова Л.И., Юхименко Л.Н., Болотов В.Д. Э ффективность применения *Примітка - р