Вакцина проти лептоспірозу тварин полівалентна (варіант suis)

Вакцина проти лептоспірозу тварин полівалентна (ВАРІАНТ SUIS), що містить суспензію клітин штамів Leptospira interrogans серогруп Icterohaemorrhagiae (штам ВГНКИ-2), Tarassovi (штам ВГНКИ-4), Pomona (штам ВГНКИ-6), Australis (штам Yez bratislava), інактиватор, сор 3 32966 - обробка бактеріальних клітин сильними хімічними реактивами (трихлорцтова концентрована кислота та аміак) відбивається на якості вакцини. Відома вакцина моновалентна проти лептоспірозу тварин [4]. Суттєвим недоліком даної вакцини є те, що в умовах України перебіг лептоспірозу в господарствах не рідко ускладнюється одночасним циркулюванням декількох серогруп лептоспір. В таких випадках виникає необхідність здійснювати дворазові та триразові (в залежності від кількості циркулюючих серогруп даного збудника) щеплення проти лептоспірозу, що призводить до збільшення часу та затрат на введення препарату. В основу корисної моделі поставлені наступні завдання: - створення інактивованої концентрованої полівалентної вакцини проти лептоспірозу свиней, яка б відповідала етіологічній структурі лептоспірозу (даного виду тварин) яка склалась в останній час; - підвищення антигенної і імуногенної активності вакцини та зменшення імуногенної дози даного імунобіологічного препарату за рахунок удосконалення технології його виготовлення. Технічний результат корисної моделі полягає в: підвищенні імуногенної активності та розширенні антигенного спектру полівалентної вакцини а також зменшенні імунізуючої дози вакцини за рахунок її концентрування. 1. Викладена мета досягається наступним шляхом: - беруть штами лептоспір, селекціоновані за ознаками максимальної імуногенної та антигенної активності, які відносяться до чотирьох серологічних гр уп: ВГНКИ-2, ВГНКИ-4, ВГНКИ-6, Yez bratislava. Дані штами були відібрані враховуючи зміни етіологічної структури, які відбулись в останній час; - вирощують штами на середовищі Кортгофа з додаванням 10-% овечої сироватки крові при 2728°С у темному приміщенні. Для виготовлення вакцин застосовують культури із накопиченням не менше 75 мільйонів лептоспір в одному см 3, тобто не менше 60 у полі зору мікроскопа; - кожен штам лептоспір культивують окремо, потім їх зливають в одну ємність та проводять інактивування; - інактивацію бактерій проводять розчином формаліну, його додають до культури у кількості 0,25% до об'єму вакцини. Консервовану культуру витримують при 27-28°С 12 год, після чого проводять мікроскопію культури в темному полі мікроскопа; - з метою концентрування вакцини, суміш культур лептоспір осаджують додаванням розчину полі етиленгліколю (ПЕГ) 10-12%, до об'єму препарату, попередньо приготувавши стерильний маточний розчин ПЕГ - 70%-ий. Після цього вакцину енергійно змішують мішалкою 10-15 хвилин; - отриману суміш витримують 7-10 діб при температурі 2-5°С, для випадання осаду, надосадову рідину де кантують в кількості 50% від загальної кількості суміші; 4 - потім суміш енергійно перемішують та проводять розфасовку препарату по флаконам при постійній роботі механічної мішалки. Вакцину виготовлену даним способом контролюють на стерильність, нешкідливість та імуногенну активність; - імуногенну активність отриманої вакцини проти лептоспірозу тварин в порівнянні з відомою вакциною прототипом перевіряють на лабораторних тваринах. З цією метою кролям массою 3-3,5кг одноразово внутрішньовенно вводять попередньо відтитровану кількість лептоспір (40-50 млн мікробних клітин). Через 25 днів у вакцинованих кролів відбирають кров і досліджують у РМА з гомологічними лептоспірами. Результати наведені в таблиці 1. 2. Вакцина проти лептоспірозу тварин полівалентна (варіант suis) включає корпускулярні антигени відселекціонованих, інактивованих штамів лептоспір: - Leptospira interrogans штам ВГНКИ-2, серовар icterohaemorrhagiae (серогрупа Icterohaemorrhagiae); - Leptospira interrogans штам ВГНКИ-4, серовар tarassovi (серогрупа Tarassovi); - Leptospira interrogans штам ВГНКИ-6, серовар monjakov (серогрупа Pomona); - Leptospira interrogans штам Yez bratislava, серовар bratislava (серогрупа Australis), які за депоновані в Депозитарії Державного науковоконтрольного інституту біотехнології і штамів мікроорганізмів 28.11.2005, реєстраційні номери надані депозитарієм 354, 359, 342, 334 відповідно. Інактивуюча речовина формалін, сорбент і ад'ювант поліетиленгліколь. В вакцині містяться антигени вказаних серотипів лептоспір в наступному співвідношенні: ВГНКИ-2 25% ВГНКИ-4 25% ВГНКИ-6 25% Ye z bratislava 25%. 3. Вакцина проти лептоспірозу тварин полівалентна (варіант suis) призначена для профілактичного щеплення тварин, з метою запобігання захворювання на лептоспіроз та абортів, що пов'язані з даним захворюванням. Вакцину застосовують переважно для свиней та тварин в яких діагностуються відповідні серогрупи лептоспір, що виявлені у тварин цього господарства або цієї місцевості. Даний імунобіологічний препарат застосовують у неблагополучних щодо лептоспірозу господарствах або загрозливій зоні. Вакцину вводять внутрішньом'язево з дотриманням правил асептики у дозах відповідно до віку тварин. Щеплюють тварин одноразово, а ревакцинацію здійснюють через 6 місяців одноразовим щепленням (Таблиця 2). Напружений імунітет у щеплених тварин з'являється через 2 тижні після введення препарату і триває протягом 6-ти місяців. Вираженість та тривалість імунітету залежить від фізіологічного стану щеплених тварин. В організмі щеплених тварин відбувається імунологічна перебудова про що свідчать показники гуморального імунітету. Так, титри специфічних протилептоспірозних аглютинінів достовірно зрос 5 32966 тають після щеплення і досягають максимальних показників на 14-21 добу після вакцинації (Таблиця 3, 4). Полівалентна вакцина проти лептоспірозу тварин варіант SUIS» характеризується високою імуногенною активністю, себто являється ефективним засобом профілактики лептоспірозу свиней. Даний препарат необхідний для проведення раціональної та успішної боротьби з лептоспірозною інфекцією, а також для забезпечення епізоотичного благополуччя щодо лептоспірозу серед свинопоголів'я на території України. Запропонована вакцина найбільш відповідає вимогам сьогоденності тому, що до її складу входять найбільш поширені серогрупи лептоспір, які реєструються в останній час серед свинопоголів'я на території України. Вакцина має наступні переваги перед аналогами: - містить антигени штамів лептоспір, які циркулюють на території України; - зменшена імуногенна доза вакцини за рахунок удосконалення технології її виго товлення, а саме концентрування препарату; - значно полегшені такі виробничі процеси як розфасовка, пакування, транспортування за рахунок зменшення об'єму вакцини. 6 Джерела інформації: 1. Патент №828459. СССР. Поливалентная вакцина ВГНКИ против лептоспироза животных и способ её получения и использования / Ю.А.Малахов, А.П.Самохвалов, А.Н.Шуплико, В.С.Соловьёва, Р.М.Алё хин, В.С.Панов, Г.Ф.Денисенко, А.М.Косиков, И.Г.Серёгин, И.А.Логинов, В.В.Шорохов, А.Н.Панин, Н.М.Иванова и Г.Л.Соболева // Заяв. 02.01.79; Опубл. 23.01.83, Бюл. №3. 2. Піотрович В.А., Кучерявенко О-р О, Кучерявенко О-й О та ін. L. interrogans серовар bratislava серологічний аналіз циркуляції збудника на території України // Ветеринарна медицина України. 2005. - №6. - С 19-21. 3. Нтахоншикіра Шарль Виявлення антитіл проти L. bratislava у сироватці крові свиней в Україні //Вісник Білоцерківського ДАУ. - 1999. - №8. С.177-181. 4. Вакцини проти лептоспірозу тварин моновалентні: ТУ У 24.4.05510830.665-2002.; чинна від 22.08.2002. термін дії до 22.08.2007. - Київ, 2002. 16 С 5. Инструкция по изготовлению и контролю поливалентной вакцины "ВГНКИ" против лептоспироза животных. Утв. Глав. упр. вет. МСХ СССР 6.03.84. Таблиця 1 Титри антитіл кролів у відповідь на застосування вакцини Вакцина із штамів лептоспір серогруп Icterohaemorrhagiae Tarassovi Pomona Australis Титри антитіл у сироватці крові кролів після введення вакцини вакцина проти лептоспірозу тварин полівалентна вакцина ВГНКИ проти леполівалентна (варіант suis) птоспірозу тварин (прототип) 1:400-1:800 1:200-1:800 1:400-1:800 1:400-1:800 1:800-1:1600 1:800-1:1600 1:800-1:3200 — - штами лептоспір даної серогрупи не входять до складу препарату який взятий в якості прототипу Таблиця 2 Вид та вік тварин 1 свиням з 2-3 місячного віку до року свиням старше 1 року й дорослим великій і малій рогатій худобі, верблюдам, коням, віслюкам, мулам з 2-3 місячного віку до року великій і малій рогатій худобі, верблюдам, коням, віслюкам, мулам старше 1 року й дорослим собакам, лисицям, песцям з 2-3 місячного віку до 6 місяців собакам, лисицям, песцям старше 6-ти місяців і дорослих норкам з 2-3 місячного віку і старше Дози, см 3 вакцинація ревакцинація 2 3 3,0 3,0 5,0 5,0 3,0 3,0 5,0 1,0 2,0 1,0 5,0 2,0 2,0 1,0 7 32966 8 Таблиця 3 Титри антитіл у РМАЛ щодо різних серогруп лептоспі у сироватці крові вакцинованих свиней віком 6 місяців (доза 3мл.) Серогрупа Icterohaemorrhagiae Pomona Tarassovi Australis Середній титр 14-ть діб після вакцинації 1:94±27,7 1:97,7±27,7 1:93,5±32,3 1:101,4±64,7 1:96,6±3,8 21-ша доба після вакцинації 1:113,5±18,5 1:122,8±64,7 1:112,1±32,3 1:124,6±64,7 1:118,2±6,1 Таблиця 4 Титри антитіл у РМАЛ щодо різних серогруп лептоспір у сироватці крові вакцинованих свиней віком 18 місяців (доза 5мл.) Серогрупа Icterohaemorrhagiae Pomona Tarassovi Australis Середній титр Комп’ютерна в ерстка Н. Лисенко 14-ть діб після вакцинації 1:101,7±27,7 1:105,6±32,3 1:109,6±69,3 1:103,5±64,7 1:105,1±3,8 Підписне 21-ша доба після вакцинації 1:125,2±55,4 1:132,2±64,7 1:133,5±69,3 1:138,3±64,7 1:132,3±6,4 Тираж 26 прим. Міністерство осв іт и і науки України Держав ний департамент інтелектуальної в ласності, вул. Урицького, 45, м. Київ , МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислов ої в ласності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601