Застосування 2a,3a,17b-тригідроксі-5a-андростан-6-ону для регуляції розвитку рослин

1. Застосування 2α,3α,17β-тригідроксі-5αандростан-6-ону як активного інгредієнта для регуляції розвитку рослин шляхом зниження стресу рослин. 2. Застосування за п.1, яке відрізняється тим, що активний інгредієнт є розчиненим у придатному розчиннику. 3. Застосування за п.2, яке відрізняється тим, що придатним розчинником є спирт або інші інертні органічні розчинники. 4. Застосування за п.3, яке відрізняється тим, що спиртом є етанол або ізопропанол. 5. Застосування за п.3, яке відрізняється тим, що іншим інертним органічним розчинником є диметилсульфоксид. 6. Застосування за п.2, яке відрізняється тим, що до розчину активного інгредієнта у придатному розчиннику додано поверхнево-активну речовину. 7. Застосування за п.6, яке відрізняється тим, що поверхнево-активною речовиною є Tween 20. 8. Застосування за п.2, яке відрізняється тим, що придатним розчинником є вода. UA (21) 2004010711 (22) 02.07.2002 (24) 16.01.2006 (86) PCT/CZ02/00041, 02.07.2002 (31) PV 2001-2436 (32) 02.07.2001 (33) CZ (31) PV 2001-2869 (32) 08.08.2001 (33) CZ (46) 16.01.2006, Бюл. № 1, 2006 р. (72) Когоут Ладіслав , CZ, Касал Александер , CZ, Ходоунска Гана , CZ, Славікова Барбора , CZ, Гнілічкова Ярослава , CZ (73) УСТАВ ОРГАНІЦКЕ ХЕМІЕ А БІОХЕМІЕ АКАДЕМІЕ ВЄД ЧЕСКЕ РЕПУБЛІКІ, CZ (56) СZ 9703975, A, 16.06.1999 CS 252605, B, 17.09.1987 US 5071466, A, 10.12.1991 JP 02209801, A, 21.08.1990 GAUDINOVA A ET AL: "Different effects of two brassinosteroids in tobacco callus tissue" PLANT GROWTH REGULATION, vol.17, no.2, 1995, pages 121-126 C2 2 (19) 1 3 74670 4 клад, нестача води/зрошування, нестача поживних (22R,23R,24)-2,3,22,23-тетрагідрокси-24-метилречовин у середовищі росту рослин, вплив холоду, 7а-гомо-7-окса-5-холестан-6-он, що є структурзасоленість, пестициди, гербіциди і т.ін.). ним ізомером брассіноліду, який відрізняється від Далі винахід описаний більш детально за добрассіноліду лише конфігурацією метальної групи помогою наступних прикладів, що не повинні розгу положенні 24. Проте синтез цієї сполуки також лядатися як обмеження даного винаходу, а лише має певні труднощі, хоча були описані деякі вдосяк ілюстрації даного винаходу. Межі цього винахоконалення цього синтезу [див., наприклад, Kohout ду визначені лише у формулі винаходу. L.: Coll. Czech. Chem. Commun. 59, 457 (1994), Приклади Brosa С Et al.: Tetr. Lett. 32, 7057 (1992) та Khripach Приклад 1 V.A. et al.: Zh. Org. Khim. 30, 1650 (1994)]. Приготування розчину з 2,3,17Синтез і застосування деяких інших нових брассіностероїдів описані у літературі [наприклад, тригідрокси-5-андростан-6-оном для застосуванKhripach V.A. et al.: Vesti Akad. Nauk. Belarusi, Ser. ня у якості регулятора стадій росту рослин. Khim. Nauk (3), 64 (1995) та Mori K. Et al.: Liebigs 2мл ізопропанолу додають до 1мг 2,3,17Ann. Chem. 815 (1988)]. Проте ці сполуки мають тригідрокси-5-андростан-6-ону. Цей розчин рознизьку активність і/або їх синтез надто складний і бавляють водою до потрібної концентрації. Отридорогий. Найчастіше використовуваним брассіносманий розчин готовий до застосування. тероїдом на цей час є згаданий вище 24Приклад 2 епібрассінолід формули II. Недолік його викорисПриготування розчину з 2,3,17тання вказаний вище. Тому існує необхідність затригідрокси-5-андростан-6-оном для застосуванстосування у якості регулятора росту рослин споня у якості регулятора стадій росту рослин з повелуки, що була б дуже активною, з активністю на рхнево-активною речовиною. рівні 24-епібрассіноліду, але яка була б легкодо2мл етанолу додають до 1мг 2,3,17ступною. Даний винахід вирішує згадану проблетригідрокси-5-андростан-6-ону і додають 1мл му. Tween 20. Цей розчин розбавляють водою до Ми виявили, що 2,3,17-тригідрокси-5потрібної концентрації. Отриманий розчин готовий андростан-6-он (сполука І) є дуже зручним активдо застосування. ним інгредієнтом для застосування у якості регуПриклад 3 лятора росту рослин, тобто, для впливу на різні Приготування розчину з 2,3,17стадії росту рослин, зокрема, шляхом зняття ефетригідрокси-5-андростан-6-оном для застосуванкту стресу рослин. Композиції зі сполукою І вигоня у якості регулятора стадій росту рослин. товляють таким чином: сполуку І розчиняють до 0,2мг 2,3,17-тригідрокси-5-андростан-6концентрованого розчину у придатному розчинниону розчиняють у 10л води. Цей розчин готовий до ку, такому як спирт, наприклад, метанол, етанол, безпосереднього застосування. пропанол або ізопропанол і т.п., або в інертному Приклад 4 розчиннику, такому як диметилсульфоксид, Ν,ΝПриготування розчину з 2,3,17диметилформамід, Ν,Ν-диметилацетамід і т.п., тригідрокси-5-андростан-6-оном для застосуванабо їх суміші. Тоді цей концентрований розчин ня у якості регулятора стадій росту рослин. розбавляють водою до потрібної концентрації, 0,5мл етанолу і 0,5мл диметилсульфоксиду наприклад, до 10-6Μ, і цей розчин наносять на рододають до 1мг 2,3,17-тригідрокси-5аслини. Звичайно, також існує сприятлива можлиандростан-6-ону. Цей розчин розбавляють водою вість безпосередньо розчиняти активний інгредідо потрібної концентрації. Отриманий розчин готоєнт у необхідній кількості води і наносити вий до застосування. безпосередньо цей розчин. Нанесення може здійПриклад 5 снюватися будь-яким зручним способом, наприПідвищення зеленої та сухої маси бобів клад, ручним розпилювачем, наспинним розпилюРозчин А готують шляхом додання 0,01мл ровачем або будь-яким розпилювальним пристроєм, зчину за прикладом 1 у 500мл води. Рослини бобів що випускається промисловістю. Ніяких обмежень на початку стадії їх другого міжвузля (довжина у виборі розпилювача немає, оскільки концентраміжвузля 2мм) розподіляють на 4 однакові групи. ція активного інгредієнта дуже низька. Для покраПершу і другу групи обприскують водою, а третю і щення зволоження можна додавати поверхневочетверту групи обприскують розчином для нанеактивну речовину, таку як Tween, наприклад, сення А. Через чотири дні реєструють зелену масу Tween 20. Розчин, отриманий у такий спосіб, припершої і третьої груп і залишають їх висихати. Чедатний для застосування з метою регуляції стадій рез наступні чотири дні рослини другої та четверросту рослин. тої груп обприскують розчином для нанесення А. Вираз "регуляція росту рослин" або "регуляція Через наступні 14 днів реєструють зелену масу стадій росту рослин" тут означає таке застосувандругої та четвертої груп і залишають їх висихати. ня, яке змінює ріст рослин бажаним чином (наприПісля сушки визначають суху масу всіх чотирьох клад, підвищує зелену або суху рослинну масу, груп. Результати наведені у таблицях 1 і 2. підвищує кількість квіток, підвищує кількість і масу фруктів, підвищує масу коріння і т.п.), включаючи усунення стресових впливів на рослини (напри 5 74670 6 Таблиця 1 Підвищення зеленої та сухої маси бобів (у % відносно контрольного досліду, тобто, першої групи, що складає 100%) через 4 дні Група 1 Група 3 Застосування Вода Розчин для нанесення А Таблиця 1 показує, що обробка розчином для нанесення А підвищує зелену і суху масу порівня Зелена маса 100 124 Суха маса 100 128 но з контрольним дослідом. Таблиця 2 Підвищення зеленої та сухої маси бобів (у % відносно контрольного досліду, тобто, другої групи, що складає 100%) через 18 днів Група 2 Група 4 Застосування Вода x 2 Розчин для нанесення А x 2 Таблиця 2 показує, що обробка розчином для нанесення А підвищує зелену і суху масу порівняно з контрольним дослідом. Приклад 6 Підвищення зеленої та сухої маси бобів Розчин А готують шляхом додання 0,01мл розчину за прикладом 1 у 500мл води. Рослини бобів, висаджені в теплиці, на початку стадії їх другого міжвузля (довжина міжвузля 2мм) розподіляють на 6 однакових груп. Першу і другу групи обприскують водою, що містить 1% розчин хлориду натрію, третю і четверту групи вирощують у теплиці при 15°С, а п'яту і шосту групи вирощують у теплиці у стандартних умовах. Другу, четверту і шосту групи обприскують розчином для нанесення А. Через 4 дні реєструють зелену масу всіх рослин, залишають їх висихати і потім знову реєструють масу. Таблиця 3 Зелена та суха маса рослин бобів (у % відносно контрольного досліду, тобто, п'ятої групи, що складає 100%) через 4 дні Група 1 Група 2 Група 3 Група 4 Група 5 Група 6 Застосування Зелена маса Суха маса NaCl 82 83 NaCl+розчин А 114 118 15°С 75 76 15°С+розчин А 120 123 0 100 100 0+розчин А 124 128 Таблиця 3 показує, що обробка розчином для нанесення А підвищує зелену і суху масу у всіх випадках порівняно з контрольним дослідом, і що у всіх випадках здійснюється виразне усунення впливу стресу на рослини. Приклад 7 Підвищення зеленої та сухої маси бобів Зелена маса 100 119 Суха маса 100 120 Умови цього досліду такі ж, як у прикладі 6 за виключенням того, що оцінку зеленої та сухої маси робили через 18 днів. Таблиця 4 Зелена та суха маса рослин бобів (у % відносно контрольного досліду, тобто, п'ятої групи, що складає 100%) через 18 днів Група 1 Група 2 Група 3 Група 4 Група 5 Група 6 Застосування Зелена маса Суха маса NaCl 79 80 NaCl+розчин А 110 111 15°С 65 67 15°С+розчин А 114 117 0 100 100 0+розчин А 119 120 Таблиця 4 показує, що обробка розчином для нанесення А підвищує зелену і суху масу у всіх випадках порівняно з контрольним дослідом, і що у всіх випадках здійснюється виразне усунення впливу стресу на рослини. Приклад 8 Боротьба із впливом засухи на ріст цукрового коренеплоду Цей дослід проводили у відкритому ґрунті у 2000 році, що був надзвичайно посушливим і завдав сільськогосподарському виробництву Чеської республіки збитків більше ніж на 150 мільйонів американських доларів. Поле (№1) площею 10м обприскали розчином за прикладом 3 (розчин С). Друге поле (№2) тієї ж площі обприскали розчином D, що приготували шляхом розчинення 0,2г 24епібрассіноліду у 10л води. Третє поле (№2) тієї ж площі обприскали відповідною кількістю питної води (обробка Е). Після збору врожаю зареєстрували вміст цукру і масу цукрових коренеплодів. Результати наведені у таблиці 5. 7 74670 Таблиця 5 Середній денний приріст (цукрового буряку Epos) (контрольний дослід = 100%) Параметр Маса листя (свіжого) Маса листя (сухого) Площина листя Маса коренеплодів Вміст хлорофілу Вміст цукру С 149 135 148 239 314 106 Обробка D 49 64 128 176 174 101 Ε 100 100 100 100 100 100 Таблиця 5 показує, що обробка розчином для нанесення С, що містить сполуку І, зумовлює таке підвищення всіх величин відносно контрольних рослин, що перевершує ефект розчину для нанесення D, який містить 24-епібрассінолід. Обидва розчини для нанесення зумовлюють зниження стресу, викликаного надзвичайно посушливим періодом 2000 року. Приклад 9 Підвищення маси коріння пшениці Розчин В готували з 0,06мл розчину, отриманого за прикладом 2, і 1000мл води. Рослини пшениці вирощували у чашках, кожна з яких містила 10 рослин. Ці чашки поділили на дві групи з однаковою кількістю рослин в кожній. Відразу після проростання першу групу обприскали водою, а другу - розчином для нанесення В. Цю процедуру повторили на 7-й день. Через наступні 14 днів рослини витягли з ґрунту, відокремили коріння і визначили масу коріння. Отримані результати наведені в таблиці 6. Таблиця 6 Застосування Маса коріння Група 1 Вода 100 Група 2 Розчин для нанесення В 289 Комп’ютерна верстка О. Гапоненко 8 Таблиця 6 показує, що обробка розчином для нанесення зумовлює підвищення росту коріння порівняно з контрольним дослідом. Приклад 10 Підвищення вмісту хлорофілу в рослинах 2 Пшеничне поле (№1) площею 10м обприскали розчином за прикладом 3 (розчин для нанесення С). Друге поле (№2) тієї ж площі обприскали розчином D, що приготували шляхом розчинення 0,2г 24-епібрассіноліду у 10л води. Третє поле (№2) тієї ж площі обприскали тільки водою (обробка Е). На 21-й день рослини пшениці витягай для визначення вмісту хлорофілу. Результати наведені у таблиці 7. Таблиця 7 Вміст хлорофілу Вміст хлорофілу (в % відносно Поле Обробка поля (в одиницях контрольного хлорофілу) досліду) розчин для 1 43,95 131 нанесення С розчин для 2 42,63 127 нанесення D контрольний 3 33,55 100 дослід (вода) Таблиця 7 показує, що обробка розчином для нанесення С зумовлює підвищення вмісту хлорофілу у рослинах пшениці не тільки порівняно з контрольними рослинами, але й порівняно з 24епібрассінолідом, що є найчастіше використовуваним брассіностероїдом на цей час (поле 2: розчин для нанесення D). Ці приклади наведені лише для ілюстрації винаходу і не повинні розглядатися як його обмеження, оскільки можливі різноманітні модифікації наведених вище варіантів здійснення, які входять в область винаходу, визначену наступною формулою винаходу. Підписне Тираж 26 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601