Процес одержання засобу специфічної профілактики сибірки тварин з використанням штаму bacillus anthracis sterne 34f2

Реферат: Процес одержання засобу специфічної профілактики із безкапсульного штаму Bacillus anthracis Sterne 34F2 (Свідоцтво про депонування в Депозитарії Державного науково-контрольного інституту біотехнології і штамів мікроорганізмів № 504), згідно з корисною моделлю, застосовують модифіковану технологію виготовлення (використання для культивування бульйону та агару Хоттінгера, рН=7,0±0,2, амінний азот 120±10 мг%), з використанням фосфатно-буферного розчину рН=7,0±0,2 для суспендування урожаю біомаси. Біомасу вегетативних клітин виробничого штаму переводять у спори за 80 °C±1,5 °C протягом 108±12 3 годин, встановленням концентрації 12±4 млн. спор в 1 см , (для виготовлення препарату в рідкій формі суспензію спор консервують 30 % гліцерином, а з метою виготовлення сухої вакцини - суспензію спор ліофільно висушують), а контроль якості готового препарату проводять згідно з рекомендаціями Міжнародного Епізоотичного Бюро, Європейської фармакопеї та "Керівництва з виготовлення вакцин проти сибірки та емфізематозного карбункула" Продовольчої та сільськогосподарської організації Об'єднаних Націй (FAO). ІмД 50 одержаного засобу специфічної профілактики сибірки тварин із штаму Bacillus anthracis Sterne UA 99488 U 34F2 269±4 тис. спор, що зменшує навантаження на імунну систему організму тварин та забезпечує формування стійкого і напруженого протисибіркового імунітету на період не менше одного року. UA 99488 U 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Корисна модель належить до ветеринарної медицини, а саме до ветеринарної мікробіології та біотехнології, зокрема до способів виготовлення засобів специфічної профілактики захворювань тварин на сибірку і може бути використаний для імунопрофілактики цього захворювання. Існує "Спосіб виготовлення вакцини проти сибірки" (Деклараційний патент України на корисну модель 58093А, А61К39/07, C12N1/20, опубл. 15.07.2003, бюл. № 7), що включає підготовку посівного матеріалу штаму Bac.anthracis, його культивування в рідкому живильному середовищі, яке містить дріжджовий екстракт, додатково містить пептон ферментативний, калій фосфорнокислий двозаміщений, магній сірчанокислий, мідь сірчанокислу, залізо сірчанокисле, антиспінювач, амоній сірчанокислий, при цьому рН середовища підтримують 7,0-7,2, температуру 35±5 °C і аерують розчин протягом 20-24 годин при температурі 37 °C. Для виготовлення вакцини використовують сибірковий штам "СБ". Також існують: 1. "Вакцина абацилярна антракол проти сибірки тварин" (Деклараційний патент України на корисну модель 52796, А61К39/00, А61К39/02, А61К39/07, опубл. 15.01.2003. бюл. № 1), яка містить продукти культивування вакцинного штаму збудника сибірки Вас. anthracis K-79Z, титр сибіркового білка у продуктах культивування вакцинного штаму збудника сибірки складає 1:21:512, додатково вакцина містить продукти культивування вірулентного штаму Е.соlі. 2. "Способ изготовления вакцины против сибирской язвы животных" (Патент Російської Федерації RU 1566532 С, А61К39/02,опубл. 20.12.1995 р.), спосіб включає одностадійне культивування вакцинного штаму в рідкому поживному середовищі, що містить 77-82 % панкреатичного гідролізату казеїну та 18-23 % дріжджового екстракту. Культивування проводять протягом 41-48 год. при 30-33 °C, рН 8-9. Отриману бактеріальну масу з вмістом живих спор 9095 % ліофілізують. 3. "Способ изготовления вакцины против сибирской язвы животных" (Патент Російської Федерації RU 95111037 A1, C12N1/20, C12N3/00, A61K39/07, C12N1/20, C12R1:07, опубл. 20.06.1997 р.), для виготовлення вакцини використовують рідке споруляційно-ростове поживне середовище, що містить дріжджовий екстракт, пептон, калій фосфорнокислий двозаміщений, кальцій хлористий, магній сірчанокислий, цинк сірчанокислий, мідь сірчанокислу, залізо сірчанокисле, амоній сірчанокислий (рН 7,2±0,2). Культивування штаму 55-ВНИИВиМ здійснюють в реакторі протягом 23-25 годин. Прототипом корисної моделі, що реєструється, може бути "Сибіркова спорова вакцина із штаму Bacillus anthracis Sterne 34F2 в сапоніні", розроблена Максом Стерне в 1937 році, котра являє собою спорову завис в імуностимуляторі - сапоніні. Після виготовлення вакцину перевіряють на відсутність контамінації сторонньою бактеріальною та грибною мікрофлорою, наявність дисоціативних клітин, кількість спор та безпечність. Найбільш близьким до корисної моделі, що передбачається, є "Спосіб виготовлення засобу для профілактики сибірки тварин із штаму Bacillus anthracis Sterne 34F2" (Патент на корисну модель МПК (2011.01) № 60603, Заявл. 23.11.2010; Опубл. 25.06.2011; Бюл. № 12.). В основу корисної моделі поставлена задача розробити процес виготовлення засобу специфічної профілактики сибірки із штаму Bacillus anthracis Sterne 34F2 для тварин ізбезкапсульного штаму Bacillus anthracis Sterne 34F2 (Свідоцтво про депонування в Депозитарії Державного науково-контрольного інституту біотехнології і штамів мікроорганізмів № 504), що відрізняється модифікованою технологією виготовлення (використання для культивування бульйону та агару Хоттінгера, рН=7,0±0,2, амінний азот 120±10 мг%), використанням фосфатнобуферного розчину рН=7,0±0,2, для суспендування урожаю біомаси виробничого штаму, причому біомасу вегетативних клітин виробничого штаму переводили у спори при 80 °C±1,5 °C 3 протягом 108±12 годин, встановленням концентрації 12±4 млн. спор в 1 см , а контроль якості готового препарату проводять згідно з рекомендаціями Міжнародного Епізоотичного Бюро, Європейської фармакопеї та "Керівництва з виготовлення вакцин проти сибірки та емфізематозного карбункула" Продовольчої та сільськогосподарської організації Об'єднаних Націй (FAO), ІмД50 такого засобу дорівнює 269±4 тис. спор, що зменшує навантаження на імунну систему організму тварин та забезпечує формування стійкого і напруженого протисибіркового імунітету на період не менше одного року. Приклад 1. Для виготовлення засобу специфічної профілактики сибірки із штаму Bacillus anthracis Sterne 34F2 для тварин використовують матричну культуру штаму Bacillus anthracis Sterne 34F2, якою засівають агару Хоттінгера, рН=7,0±0,2, амінний азот 120±10 мг%, біомасу суспендують у фосфатно-буферному розчині рН=7,0±0,2, прогрівають за 80 °C±1,5 °C протягом 3 108±12 годин, встановлюють концентрацію 12±4 млн. спор в 1 см та консервують 30 % гліцерином. 1 UA 99488 U 5 10 15 20 25 30 Приклад 2. Для виготовлення засобу специфічної профілактики сибірки із штаму Bacillus anthracis Sterne 34F2 для тварин використовують матричну культуру штаму Bacillus anthracis Sterne 34F2, агару Хоттінгера, рН=7,0±0,2, амінний азот 120±10 мг%, біомасу суспендують у фосфатно-буферному розчині рН=7,0±0,2, прогрівають при 80 °C±1,5 °C протягом 108±12 годин, 3 встановлюють концентрацію 12±4 млн. спор в 1 см та ліофільно висушують. Приклад 3. Контроль якості готового препарату проводять згідно з рекомендаціями Міжнародного Епізоотичного Бюро, Європейської фармакопеї та "Керівництва з виготовлення вакцин проти сибірки та емфізематозного карбункула" Продовольчої та сільськогосподарської організації Об'єднаних Націй (FAO), при цьому ІмД50 препарату складає 269±4 тис. спор. Засіб специфічної профілактики сибірки тварин із штаму Bacillus anthracis Sterne 34F2 знайде застосування в тваринницьких господарствах приватного і громадського сектора власності, неблагополучних щодо даного захворювання для проведення профілактичних та оздоровчих заходів. ФОРМУЛА КОРИСНОЇ МОДЕЛІ Процес одержання засобу специфічної профілактики із безкапсульного штаму Bacillus anthracis Sterne 34F2 (Свідоцтво про депонування в Депозитарії Державного науково-контрольного інституту біотехнології і штамів мікроорганізмів № 504), який відрізняється тим, що застосовують модифіковану технологію виготовлення (використання для культивування бульйону та агару Хоттінгера, рН=7,0±0,2, амінний азот 120±10 мг%), з використанням фосфатно-буферного розчину рН=7,0±0,2 для суспендування урожаю біомаси, причому біомасу вегетативних клітин виробничого штаму переводять у спори за 80 °C±1,5 °C протягом 108±12 3 годин, встановленням концентрації 12±4 млн. спор в 1 см , (для виготовлення препарату в рідкій формі суспензію спор консервують 30 % гліцерином, а з метою виготовлення сухої вакцини - суспензію спор ліофільно висушують), а контроль якості готового препарату проводять згідно з рекомендаціями Міжнародного Епізоотичного Бюро, Європейської фармакопеї та "Керівництва з виготовлення вакцин проти сибірки та емфізематозного карбункула" Продовольчої та сільськогосподарської організації Об'єднаних Націй (FAO), ІмД 50 одержаного засобу специфічної профілактики сибірки тварин із штаму Bacillus anthracis Sterne 34F2 269±4 тис. спор, що зменшує навантаження на імунну систему організму тварин та забезпечує формування стійкого і напруженого протисибіркового імунітету на період не менше одного року. Комп’ютерна верстка В. Мацело Державна служба інтелектуальної власності України, вул. Василя Липківського, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут інтелектуальної власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 2