Спосіб адаптації видів роду trichogramma (hymenoptera, trichogrammatidae) за умов тривалої доместикації

Реферат: Спосіб адаптації видів роду Trichogramma (Hymenoptera, Trichogrammatidae) за умов тривалої доместикації включає розведення трихограми в яйцях амбарної зернової молі за умов суцільної темряви. Із природних незайманих трав'янисто-чагарникових екосистем відбирають стартову популяцію трихограми і формують у лабораторії колонію-засновницю. Проводять видову ідентифікацію трихограми, при цьому перші три пасажі її проводять через яйця капустяної (Mamestra brassicae L.) або бавовникової (Helicoverpa armigera Hb.), або озимої (Agrotis segetum Shiff.) совок. Імаго трихограми згодовують дієту у вигляді 10,0 %-ного водного розчину меду. Четвертий пасаж трихограми проводять через яйця амбарної зернової молі (Sitotroga cerealella Oliv.), при цьому використовують яйця молі, не старші однієї доби після їх відкладання самицями. Імаго трихограми за 1,5-2,0 години до контакту з яйцями молі, згодовують дієту у складі вуглеводневої компоненти - 15,0 %-ного водного розчину мальтози та білкової компоненти у складі гемолімфи гусениць старших віків капустяної або бавовникової совок. Перші дві доби контакт трихограми з яйцями молі відбувається за умов повної темряви. У подальшому увесь біоматеріал утримується за умов 18-годинного світла. У лабораторії підтримується температура повітря в межах 16-17 °C уночі та 22-25 °С вдень, відносна вологість повітря становить 75-82 %. UA 121587 U (54) СПОСІБ АДАПТАЦІЇ ВИДІВ РОДУ TRICHOGRAMMA (HYMENOPTERA, TRICHOGRAMMATIDAE) ЗА УМОВ ТРИВАЛОЇ ДОМЕСТИКАЦІЇ UA 121587 U UA 121587 U 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Корисна модель належить до сільського господарств, зокрема до галузі масового лабораторного розведення комах-ентомофагів для потреб біологічного захисту рослин від шкідників. Відомо, що складовою частиною сучасних інтегрованих технологій захисту агроценозів є використання промислових культур ентомофагів, зокрема видів роду трихограма - паразита яєць багатьох лускокрилих шкідників [Лапа О.М., Дрозда В.Ф., Пшець Н.В. Екологічно безпечні інтенсивні технології вирощування та захисту овочевих культур. Національний аграрний університет. Київ, "Колобіг"; 2006, 183 с.]. Проте, у більшості випадків, вирощені у біолабораторіях популяції трихограми характеризуються недостатнім рівнем життєздатності та конкурентоспроможності внаслідок режиму тривалої доместикації. Це є однією із визначальних причин нестабільної їх ефективності. Відомо, що для отримання та відбору високожиттєздатних популяцій трихограми для тривалого лабораторного розведення, використовуються різноманітні способи. Зокрема, імаго ентомофагам згодовують специфічну дієту у складі вуглеводневої та білкової компонент [Способ выращивания полезных насекомых. Дрозда В.Ф. та інші. АС СРСР 1505487, МПК А01K 67/00, Опубл.07.09.89, Бюл. № 33]. Реалізація способу дозволяє збільшити тривалість життя самиць трихограми, з одночасною стимуляцією репродуктивної функції. Відомий спосіб масового розведення трихограми, з відбором високожиттєздатних особин паразита, який є найбільш близьким технічним рішенням до способу, що пропонується і вибраний в якості найближчого аналога [Способ массового разведения трихограммы. Чернышев В.Б., Гринберг Ш.М., Афонина В.М., Гаврилица Л.Ф., Зотов В.А., Шляхтич В.А. АС СРСР, № 1655419. МПК А01K 67/00. Опубл. 15.06.91. Бюл. № 22]. Спосіб, викладений у найближчому аналогу полягає у тому, що попередньо проводять ізоляцію статевозрілих особин трихограми, з наступних їх спаровуванням. У подальшому трихограму переносять у скляний посуд з яйцями амбарної зернової молі. Період їх сумісного утримання складає 1-2 доби. Суттєвим при цьому є те, що весь цей термін сумісного утримання біоматеріалу відбувається у постійній темряві. Реалізація способу дозволила збільшити середню плодючість самиць на 27-30 % та кількість паразитованих яєць господаря на 15-21 %. Проте, найближчий аналог має такі недоліки: - як комаху-господаря трихограми в продовж усього терміну доместикації використовують яйця амбарної зернової молі, що стає основною причиною втрати адаптивних ознак властивих природним популяціям; - відсутній прийом у складі способу зі згодовуванням дієти самицям трихограми, основного фактору, що формує репродуктивний потенціал самиць; - у способі не вказані такі важливі показники як температура повітря та відносна вологість в період розведення трихограми. В основу корисної моделі поставлено задача експериментально обґрунтувати спосіб адаптації видів роду Trichogramma (Hymenoptera, Trichogrammatidae) за умов тривалої доместикації. Ставилась задача запропонувати спосіб, складові елементи якого забезпечували б успішну адаптацію природних популяцій трихограми - паразита яєць лускокрилих фітофагів. Поставлена задача вирішується шляхом послідовної реалізації суттєвих елементів у складі запропонованого способу. Зокрема, перший з них передбачає проведення збору із природних незайманих трав'янисто-чагарникових екосистем стартової популяції трихограми і у подальшому формують у лабораторії колонії-засновниці. Суттєвим є і те, що проводять видову ідентифікацію трихограми. Перші три пасажі трихограми проводять через яйця капустяної (Mamestra brassicae L.), або бавовникової (Helicoverpa armigera Hb.), або озимої (Agrotis segetum Shiff.) совок. Спосіб передбачає згодовування дієти у вигляді 10,0 %-ного водного розчину меду. Четвертий пасаж трихограми проводять через яйця амбарної зернової молі (Sitotroga cerealella Oliv.). Використовують яйця молі не старше однієї доби після їх відкладання самицями. Суттєвим є і те, що імаго трихограми за 1,5-2,0 годин до контакту з яйцями молі, згодовують дієту у складі вуглеводневої компоненти - 15,0 %-ного водного розчину мальтози та білкової компоненти у складі гемолімфи гусениць старших віків капустяної або бавовникової совок. Перші дві доби контакт трихограми з яйцями молі відбувається за умов повної темряви. У подальшому увесь біоматеріал утримується за умов 18-годинного світла. У лабораторії підтримується температура в межах 16-17 °C уночі та 22-25 °C вдень. Відносна вологість повітря становить 75-82 %. Суть запропонованого способу полягає у тому, що вирішується важлива господарська проблема у технологіях масового промислового розведення паразита яєць шкідливих 1 UA 121587 U 5 10 15 20 25 30 лускокрилих комах - трихограми. У природних умовах трихограма відшукує і паразитує яйця переважно листогризучих та підгризаючих совок, листокруток, шовкопрядів, біланів та молей. В умовах біолабораторій відомі способи її розведення в яйцях такого шкідника хлібних запасів, як амбарна зернова міль. За фізіологічними та біологічними характеристиками яйця молі не відповідають фізіологічним потребам організму трихограми. Проте, за відсутності альтернативного вибору, самиці трихограми заражають яйця зернової молі. Найбільш успішно відбувається зараження яєць молі фізіологічно повноцінною трихограмою з вираженими біологічними характеристиками. Запропонований спосіб забезпечує отримання високожиттєздатної культури трихограми, внаслідок реалізації усіх суттєвих елементів запропонованого способу. Особливо важливу роль у запропонованому способі відіграє склад дієти для імаго трихограми. Оптимізується овогенез самиць, що стає наслідком реалізації їх репродуктивного потенціалу. Приклад Типова біолабораторія з усім набором обладнання, іншим технологічним оснащенням. Технічний процес спрямований на вирощування трихограми для потреб біологічного захисту рослин. Для обґрунтування запропонованого способу формували дослідні варіанти, яких було три. У першому варіанті реалізовували суттєві елементи запропонованого способу. У другому елементи способу-найближчого аналога. У третьому - трихограму вирощували згідно стандартної технології, котра загальноприйнята в усіх вітчизняних лабораторіях. Попередньо, із природних екосистем була відібрана і ідентифікована трихограма виду Trichogramma pintoi Voeg. Саме цей вид розводився і у двох інших варіантах. Для підсумкової оцінки величини можливого позитивного результату, використовували найбільш інформативні та об'єктивні тестові характеристики. Отриманий цифровий матеріал обробляли статистично. Результати досліджень наведено у таблиці. Встановлено, що завдання поставлене корисною моделлю виконано. Реалізація запропонованого способу забезпечила ефективність на рівні 92,6 %. У способі-найближчому аналогу цей показник становив 78,3 %. Різниця статистично доведена. Практично, за усіма тестовими характеристиками, визначальні параметри трихограми перевищували показники найближчого аналога. Це свідчить про те, що процес доместикації трихограми проходить у режимах, що наближаються до оптимальних. При цьому, значно послаблюється негативна дія різноманітних стресів, про що свідчать результати експериментів. Таким чином, запропонований спосіб досить успішно вирішує проблему адаптації природних ізолятів трихограми до комплексу негативних факторів, що супроводжують процес тривалого розведення трихограми у режимі доместикації культури. 35 2 UA 121587 U Таблиця Результати реалізації способу адаптації трихограми за умов тривалої доместикації Способи, що Плодюпорівнюючість ться самиць, яєць Спосіб, що пропонується 43,7 Спосіб – найближчий аналог 31,2 Стандартна технологія розведення трихограми 28,7 НІР05 2,3 Тестові характеристики трихограми ЕфективЗаражено Стате- Рухова ність Відродияєць, % Режим адаптації вий активність способів, лось самок, зерно- індекс, % імаго, % совок см/хв. вої молі ♀/♂ Тривала доместикація трихограми 89,4 7,8 2:1 63,5 92,4 92,6 проходить без різких, стресових змін Процес доместикації біоматеріалу супроводжуєть80,2 69,3 1,5:2,5 51,2 81,2 78,3 ся частковою втратою продуктивності технологій Спостерігається накопичення факторів стресового 76,4 61,4 1:1 48,0 77,4 74,8 характеру. Знижується життєздатність та продуктивність 3,6 4,8 3,4 4,5 5,2 ФОРМУЛА КОРИСНОЇ МОДЕЛІ 5 10 15 20 Спосіб адаптації видів роду Trichogramma (Hymenoptera, Trichogrammatidae) за умов тривалої доместикації, що включає розведення трихограми в яйцях амбарної зернової молі за умов суцільної темряви, який відрізняється тим, що із природних незайманих трав'янисточагарникових екосистем відбирають стартову популяцію трихограми і формують у лабораторії колонію-засновницю, крім того, проводять видову ідентифікацію трихограми, при цьому перші три пасажі її проводять через яйця капустяної (Mamestra brassicae L.) або бавовникової (Helicoverpa armigera Hb.), або озимої (Agrotis segetum Shiff.) совок, крім того, імаго трихограми згодовують дієту у вигляді 10,0 %-ного водного розчину меду, крім того, четвертий пасаж трихограми проводять через яйця амбарної зернової молі (Sitotroga cerealella Oliv.), при цьому використовують яйця молі, не старші однієї доби після їх відкладання самицями, крім того імаго трихограми за 1,5-2,0 години до контакту з яйцями молі згодовують дієту у складі вуглеводневої компоненти - 15,0 %-ного водного розчину мальтози та білкової компоненти у складі гемолімфи гусениць старших віків капустяної або бавовникової совок, крім того, перші дві доби контакт трихограми з яйцями молі відбувається за умов повної темряви, крім того, у подальшому увесь біоматеріал утримується за умов 18-годинного світла, при цьому у лабораторії підтримується температура повітря в межах 16-17 °C уночі та 22-25 °С вдень, відносна вологість повітря становить 75-82 %. Комп’ютерна верстка М. Мацело Міністерство економічного розвитку і торгівлі України, вул. М. Грушевського, 12/2, м. Київ, 01008, Україна ДП “Український інститут інтелектуальної власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 3