Спосіб визначення дезінфікуючих властивостей деззасобів при знезараженні об’єктів з різним ступенем забрудненості

Реферат: UA 71005 U UA 71005 U 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 Корисна модель належить до галузі ветеринарної санітарії і може бути використана для визначення дезінфікуючих властивостей деззасобів, що застосовуються в тваринництві, при знезараженні об'єктів ветеринарного нагляду за різного ступеня їх забрудненості. Для апробації нових дезінфікуючих препаратів в ветеринарній медицині застосовують "Методические указания о порядке испытания новых дезинфицирующих средств" [Затв. Держагропромом СРСР у 1987 р.]. При проведенні дезінфекції об'єктів тваринництва на виробництві керуються інструкцією "Проведение ветеринарной дезинфекции объектов животноводства" [Затв. Держагропромом СРСР у 1989 р.]. Дані методичні підходи передбачають широкий спектр апробації дезінфікуючих препаратів, але в них відсутні положення щодо розрахунку витрат робочих розчинів дезінфектантів, в залежності від стійкості збудника інфекційного захворювання та об'єкту дезінфекції. Найбільш близьким за суттю є спосіб визначення норми витрати дезінфектантів при туберкульозі [Дек. пат. № 30045 Україна, від 11.02.2008., кл. A61L 2/16. "Спосіб визначення норми витрати дезінфектантів при знезараженні об'єктів контамінованих мікобактеріями"]. Це рішення може бути прототипом. Недоліком цього способу є визначення бактерицидних властивостей досліджуваного 3 2 дезінфікуючого препарату при витраті робочих розчинів з розрахунку від 200 до 1000 см /м при експозиції 5-24 години без урахування фактичного забруднення поверхонь, що робить дослідження віддаленими від виробничих умов та отримання результатів лише при дезінфекції ретельно очищених поверхонь, що дуже важко досягти на практиці в умовах виробництва. В основу корисної моделі поставлено задачу розробити спосіб визначення дезінфікуючих властивостей деззасобів при знезараженні об'єктів з різним ступенем забрудненості, що включає накопичення бактеріальної маси та виготовлення зависі тест-культур (Escherichia coli, Salmonella enteritidis, Staphylococcus aureus, Bacillus alvei, Mycobacterium fortuitum), підготовку стерильного біологічного забруднення, виготовлення суміші з мікроорганізмів та забруднення і контамінацію спеціальної плашки-трафарету шляхом нанесення і розподілення суміші з розрахунку 0,5, 1, 3, 5 мм та знезараження випробовуваним дезінфектантом з розрахунку 500, 3 2 1000, 1500, 2000, 2500 см /м , щоб забезпечити ефективність способу. Порівняльний аналіз із прототипом дозволяє зробити висновок, що спосіб, який заявляється, відрізняється від існуючого широким спектром досліджень щодо визначення необхідної кількості дезінфікуючого препарату для знезараження поверхонь в залежності від рівня наявного забруднення та біологічної природи контамінанту, що є максимально наближеним до виробничих умов, дозволяє отримати конкретні дані щодо потреби необхідної кількості деззасобу для санації об'єктів тваринництва при різній ефективності механічного очищення, що відповідає критерію "новизна". Спосіб виконується таким чином: Проводять культивування за температури 37 °C та накопичення на поживних середовищах бактеріальної маси тест-культур: Escherichia coli, Salmonella enteritidis, Staphylococcus aureus, Bacillus alvei, Mycobacterium fortuitum. Потім культури переносять бактеріологічною петлею в 3 попередньо зважені на аналітичних вагах стерильні флакони ємністю 200 см з бусами, та 3 готують зависі в концентрації 2 млрд. бактеріальних тіл в 1 см фізіологічного розчину. Для одержання однорідної зависі бактерій флакони струшують на шуттель-апараті протягом 30 хвилин. Готують забруднення шляхом змішування гною, сечі, ґрунту, корму по 50 г кожного. Отриманий матеріал стерилізують в автоклаві за температури 115-120 °C протягом 30 хвилин. Після цього в приготовану завись мікроорганізмів вносять забруднення з розрахунку 2:1 та ретельно перемішують. Отриману суміш наносять стерильним шпателем в чарунки спеціальної плашки-трафарету з розрахунку окремо 0,5, 1, 3, 5 мм товщини та залишають на 24 години для висихання. Через 24 години досліджуваний дезінфікуючий препарат вносять в чарунки плашки3 2 трафарету в кількості з розрахунку окремо 500, 1000, 1500, 2000, 2500 см /м . У контрольні чарунки плашки-трафарету замість дезінфектанту вносять стерильний ізотонічний розчин. Після закінчення експозиції дії дезінфікуючого препарату з кожного чарунку плашкитрафарету роблять змиви стерильним фізіологічним розчином у стерильні чашки Петрі, вміст яких потім центрифугують при 1500 об/хв протягом 15 хвилин. Осад, що утворився після центрифугування висівають на МПА, МПБ та поживне середовище для культивування мікобактерій. 1 UA 71005 U 5 10 15 2025 Пробірки з висівами культивують в термостаті за температури 37 °C протягом 30 діб і через кожні 3-5 днів проводять облік росту культур. Відсутність або наявність росту колоній мікроорганізмів у пробірках з дослідними висівами, при наявності росту колоній у пробірках з контрольними висівами, є ознакою відповідно прояву або відсутності дезінфікуючих властивостей препарату. Приклад За вищезазначеним способом визначали дезінфікуючі властивості кисневого препарату "Екоцид С". Результати проведених дослідів наведені в таблиці. З матеріалів, наведених в таблиці видно, що для знезараження тест-культур Escherichia coli, Salmonella enteritidis, Staphylococcus aureus, Bacillus alvei, Mycobacterium fortuitum, що знаходяться на оброблюваній поверхні без будь-якого забруднення достатньо застосувати 2 препарат за норми витрати лише 0,2 л/м . 2 При забрудненні поверхні в 0,5 мм необхідно зрошувати 1 м , контамінований кишковою паличкою, сальмонелами, стафілококом та бацилами з розрахунку 0,7 л, а при контамінації атиповими мікобактеріями - 1,0 л. Дезінфікуючий препарат згубно діє на дослідні тест-культури 2 2 при 1 мм забрудненості поверхні за норми витрати 1,2 л/м і 1,5 л/м при контамінації мікобактеріями. Знищення атипових мікобактерій М. fortuitum, що знаходяться під захистом забруднення у 3 мм досягається при застосуванні кисневого дезінфектанту за норми витрати 2 2 2 л/м , а девіталізація інших тест-культур настає після нанесення деззасобу у кількості 1,5 л/м . При забрудненні об'єкту у 5 мм знищення Е. coli, S. enteritidis, В. alvei досягається при нанесенні 2 2 2 препарату у кількості від 1,5 л/м , St. aureus - від 2 л/м , а мікобактеріями М. fortuitum-2,5 л/м . Результати проведених досліджень свідчать про те, що дезінфікуючий препарат "Екоцид С" може повністю знезаразити забруднені поверхні, але для цього необхідна санація відповідно 2 більшою кількістю дезінфікуючого препарату на одиницю площі (1 м ). Запропонований спосіб визначення дезінфікуючих властивостей деззасобів при знезараженні об'єктів з різним ступенем забрудненості має конкретну спрямованість, точність та зручність проведення дослідів, дозволяє швидко проводити дослідження і отримувати достовірні результати визначення дезінфікуючих властивостей препаратів. 30 Таблиця Спосіб визначення дезінфікуючих властивостей деззасобів при знезараженні об'єктів з різним ступенем забрудненості Товщина забруднення, мм Забруднення відсутнє 0,5 1 3 5 Норма витрати, 2 л/м 0,2 0,5 0,7 1,0 0,5 0,7 1,0 1,2 1,0 1,2 1,5 2,0 1,2 1,5 2,0 2,5 1,2 1,5 2,0 2,5 Тест-культура мікроорганізмів Е. coli S. enteritidis St. aureus Вас. alvei М fortuitum + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + Примітка: «-» - ріст мікроорганізмів відсутній; 2 UA 71005 U «+» - ріст мікроорганізмів наявний. ФОРМУЛА КОРИСНОЇ МОДЕЛІ 5 10 Спосіб визначення дезінфікуючих властивостей деззасобів при знезараженні об'єктів з різним ступенем забрудненості, що включає виготовлення двомільярдної зависі культур бактерій та стерильного біологічного забруднення, виготовлення суміші з бактерій та забруднення, дію на них розчинів дезінфікуючого препарату, який відрізняється тим, що проводять контамінацію спеціальної плашки-трафарету шляхом нанесення і розподілення забруднення, що вміщує Escherichia coli, Salmonella enteritidis, Staphylococcus aureus, Bacillus alvei, Mycobacterium fortuitum, з розрахунку 0,5, 1, 3, 5 мм товщини, та знезараження випробовуваним 3 2 дезінфектантом з розрахунку 500, 1000, 1500, 2000, 2500 см /м . Комп’ютерна верстка Г. Паяльніков Державна служба інтелектуальної власності України, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 3