Спосіб післясмертної діагностики давності утворення механічних ушкоджень шкіри та м’язів протягом першої доби після травми при їх одночасному травмуванні

Реферат: UA 78300 U UA 78300 U 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 Корисна модель належить до медицини, а саме до судової медицини, і може бути використана для судово-медичної післясмертної діагностики давності утворення механічних ушкоджень шкіри та м'язів протягом першої доби після травми при їх одночасному травмуванні. Дослідження прижиттєвості або післясмертності та давності нанесення тілесних ушкоджень при тупій механічній травмі є актуальною задачею судової медицини. Останнє обумовлене кількістю факторів, які прямо опосередковано або іншим чином впливають на реактивність тканин та органів тіла людини і потребують спеціальних методів дослідження давності утворення механічних ушкоджень тіла людини, зокрема шкіри та м'язів, в тому числі при одночасному їх травмуванні, з метою виявлення нових судово-медичних критеріїв при їх діагностиці [Актуальные и наиболее перспективные научные направления судебной медицины / В.А. Клевно, С.С. Абрамов, Д.В. Богомолов и др. // Судебно-медицинская экспертиза. - 2007. Т. 50, № 1. - С. 3-8; Беженар І.Л. Сучасні аспекти встановлення зажиттєвості та давності спричинення тілесних ушкоджень у судово-медичній практиці / І.Л. Беженар // Буковинський медичний вісник. - 2006. - Т. 10, № 2. - С. 128-131; Герасименко O.I. Судова медицина. Навчальний посібник / О.І. Герасименко. - Донецьк: Норд-Прес, 2007.-418 с; Установление давности травмы мягких тканей морфологическими методами / М.И. Лаптева, Л.Н. Исхизова, М.Я. Баранова и др. // Судебно-медицинская экспертиза.-2005. - Т. 48, № 5. - С. 43-46]. Сьогодні все більшу актуальність отримують методи оцінки давності травми, які базуються на використанні лабораторних методів. Гістологічні та гістохімічні дослідження ранніх післясмертних змін тканин організму на макроскопічному чи мікроскопічному рівні, встановлення давності настання ушкоджень на тілі людини та визначення їх прижиттєвості або післясмертності є найбільш поширеним способом діагностики судової медицини [Диагностикум механизмов и морфологии повреждений мягких тканей при тупой травме. Т. 6: Механизмы и морфология повреждений мягких тканей / В.Н. Крюков, Б.А. Саркисян, В.Э. Янковский и др. - Новосибирск: Наука, 2001. - 142 с]. Даний спосіб встановлення критеріїв післясмертної діагностики давності утворення механічних ушкоджень шкіри та м'язів протягом першої доби після травми є найбільш близьким аналогом до того, що заявляється, за технічною суттю і результатом, який може бути досягнутим. В основу корисної моделі поставлено задачу удосконалення судово-медичної діагностики шляхом виявлення нових гістохімічних критеріїв післясмертної діагностики давності утворення механічних ушкоджень одночасно травмованих шкіри та м'язів. Поставлена задача вирішується тим, що у способі післясмертної діагностики давності утворення механічних ушкоджень шкіри та м'язів протягом першої доби після травми,що включає дослідження ранніх післясмертних змін тканин організму гістохімічними методами, згідно з корисною моделлю, при одночасному травмуванні шкіри та м'язів вилучають ділянку травмованої шкіри разом з травмованою м'язовою тканиною і симетричну ділянку шкіри разом з м'язовою тканиною без ушкоджень, матеріал фіксують в 10 % розчині формаліну протягом 24 годин, після чого його проводять за спиртами зростаючої концентрації та заливають парафіном, по закінченню проводки виготовляють серійні зрізи товщиною 5-6 мкм, зрізи з ушкодженою та неушкодженою шкірою піддають імуногістохімічному визначенню в дермі вмісту колагену 1-го типу з люмінесцентною візуалізацією, а зрізи з ушкодженою та неушкодженою м'язовою тканиною піддають гістохімічній ШІК-реакції з наступним цитофотометричним встановленням величин оптичної щільності саркоплазми поперечносмугастих м'язів та колагенових волокон шкіри, затим визначають відносні величини оптичної щільності ушкоджених біологічних тканин до оптичної щільності симетричних неушкоджених, які приймають за індекси, та які затим використовують для встановлення часу нанесення механічної травми шляхом співставлення визначеної величини індексу до відповідного часового проміжку. Технічний ефект корисної моделі, а саме розширення арсеналу способів судово-медичної післясмертної діагностики давності утворення механічних ушкоджень шкіри та м'язів протягом першої доби після травми при їх одночасному травмуванні, обумовлений необхідністю визначення досліджуваних показників в ушкодженій біологічній тканині паралельно з визначенням їх у неушкодженій, базується на розумінні того, що патологію біологічного об'єкту необхідно порівнювати з нормою того ж біологічного об'єкту. Крім того, вихідний вміст колагену 1-го типу в дермі може розрізнятися у людини в залежності від місця вилучення біологічного зразку, його стану тощо. За тими ж факторами також може розрізнятись морфофункціональний стан скелетних м'язів особи. У зв'язку з чим більш інформативним показником є відношення оптичної щільності дерми та м'язового волокна в ділянці ушкодження до оптичної щільності дерми та м'язового волокна в симетричній контрольній неушкодженій ділянці. 1 UA 78300 U 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 Спосіб виконують наступним чином: судово-медичну післясмертну діагностику давності утворення механічних ушкоджень шкіри та м'язів при їх одночасному травмуванні протягом першої доби після травми виконують шляхом дослідження ранніх післясмертних змін тканин організму. Для цього вилучають ділянку травмованої шкіри разом з травмованою м'язовою тканиною і симетричну ділянку шкіри разом з м'язовою тканиною без ушкоджень. Матеріал фіксують в 10 % розчині формаліну протягом 24 годин, після чого його проводять за спиртами зростаючої концентрації та заливають парафіном, по закінченню проводки виготовляють серійні зрізи товщиною 5-6 мкм. Зрізи з ушкодженою та неушкодженою шкірою піддають імуногістохімічному визначенню в дермі вмісту колагену 1-го типу з люмінесцентною візуалізацією. Зрізи з ушкодженою та неушкодженою м'язовою тканиною піддають гістохімічній ШІК-реакції. Встановлюють цитофотометричну величину оптичної щільності саркоплазми поперечносмугастих м'язів та колагенових волокон шкіри. Затим визначають відносні величини оптичної щільності ушкоджених ділянок біологічних тканин до оптичної щільності симетричних неушкоджених, які приймають за індекси. Індекси використовують для встановлення часу нанесення механічної травми шляхом співставлення визначеної величини індексу до відповідного часового проміжку. Ефективність способу доказана експериментально. Експериментальне дослідження було проведено на 55 статевозрілих білих щурах лінії Вістар обох статей з вихідною масою 200-260 г. До і після експерименту щури перебували у приміщенні віварію, при температурі повітря 2023 °C, вологості не більше 75 %, світловому режимі день/ніч, при штучному освітленні (300 люкс на відстані 1 метру від підлоги), у стандартних алюмінієвих клітках (не більше 5 особин у кожній), на стандартному раціоні. Доступ до води був вільним. Тварин травмували нанесенням удару по задній кінцівці. Сила удару була такою, щоб на задній кінцівці утворився тільки крововилив, без перелому стегнової кістки. Тварин підрозділяли на групи залежно від часу, який тварина жила від моменту травми до виведення її з експерименту. Тварин виводили з експерименту зразу після нанесення травми та через кожну годину після нанесення травми в перебігу 24 годин. Під час травми і декапітації тварини були під наркозом каліпсолу 12,5 мг/100 г маси щура. Безпосередньо після декапітації травмовану ділянку задньої кінцівки препарували і вилучали шкіру та м'язи в місці ушкодження, також з симетричної задньої кінцівки вилучали неушкоджені шкіру та м'язи. Для гістохімічного дослідження використовували як травмовані, так і не травмовані м'які тканини. Експериментальний матеріал фіксували в 10 % розчині формаліну протягом 24 годин. Після чого матеріал проводили за спиртами зростаючої концентрації та заливали парафіном. По закінченню проводки виготовляли серійні зрізи товщиною 5-6 мкм. Було виготовлено та проаналізовано в загальній кількості 696 мікропрепаратів. Методи гістохімічного дослідження були обрані за їх діагностичною інформативністю для біологічних тканин, які досліджувалися. Дослідження гістохімічних показників в ушкодженій біологічній тканині паралельно з визначенням їх у неушкодженій базувалося на розумінні того, що патологію необхідно порівнювати з нормою для одного й того ж біологічного об'єкту. Відношення визначеного цитофотометричного показника оптичної щільності в ділянці ушкодження до такого в аналогічній контрольній симетричній неушкодженій ділянці (індекс) є більш точним ніж показник окремих ділянок біологічної тканини, так як відомо, що вихідний вміст колагену 1-го типу в дермі розрізняється у людини в залежності від місця вилучення біологічного зразку, його стану тощо. За такими ж критеріями розрізняється морфофункціональний стан скелетних м'язів особи. Індекси вираховували для кожного часового інтервалу виведення тварин із експерименту. Результати експерименту були підтверджені судово-медичним дослідженням біоптатів м'яких тканин тіла травмованих людей (20 осіб). У всіх випадках був достовірно відомий час тривалості посттравматичного періоду, який був зафіксований відповідними документами. ФОРМУЛА КОРИСНОЇ МОДЕЛІ 55 60 Спосіб післясмертної діагностики давності утворення механічних ушкоджень шкіри та м'язів протягом першої доби після травми, який включає дослідження ранніх післясмертних змін тканин організму гістохімічними методами, який відрізняється тим, що при одночасному травмуванні шкіри та м'язів вилучають ділянку травмованої шкіри разом з травмованою м'язовою тканиною і симетричну ділянку шкіри разом з м'язовою тканиною без ушкоджень, матеріал фіксують в 10 % розчині формаліну протягом 24 годин, після чого його проводять за 2 UA 78300 U 5 10 спиртами зростаючої концентрації та заливають парафіном, по закінченню проводки виготовляють серійні зрізи товщиною 5-6 мкм, зрізи з ушкодженою та неушкодженою шкірою піддають імуногістохімічному визначенню в дермі вмісту колагену 1-го типу з люмінесцентною візуалізацією, а зрізи з ушкодженою та неушкодженою м'язовою тканиною піддають гістохімічній ШІК-реакції з наступним цитофотометричним встановленням величин оптичної щільності саркоплазми поперечносмугастих м'язів та колагенових волокон шкіри, затим визначають відносні величини оптичної щільності ушкоджених біологічних тканин до оптичної щільності симетричних неушкоджених, які приймають за індекси, та які затим використовують для встановлення часу нанесення механічної травми шляхом співставлення визначеної величини індексу до відповідного часового проміжку. Комп’ютерна верстка Д. Шеверун Державна служба інтелектуальної власності України, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 3