Штам м. fortuitum № 122 для визначення оптимального режиму у нових дезінфекційних засобах при туберкульозі

Реферат: Тест-культура М. fortuitum № 122 для визначення у дезінфектантів високих бактерицидних властивостей до мікобактерій туберкульозу бичачого виду. UA 85626 U (54) ШТАМ М. FORTUITUM № 122 ДЛЯ ВИЗНАЧЕННЯ ОПТИМАЛЬНОГО РЕЖИМУ У НОВИХ ДЕЗІНФЕКЦІЙНИХ ЗАСОБАХ ПРИ ТУБЕРКУЛЬОЗІ UA 85626 U UA 85626 U 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Корисна модель належить до мікробіології і може бути використаний у практичних лабораторіях ветеринарної медицини, а також у науково-дослідних інститутах для визначення бактерицидної дії у дезінфектантів щодо збудника туберкульозу. Відомий штам М. avium № 431-Р, що використовували як тест-культуру для визначення стійкості до фенолу. Культура добре росте при температурі +37 °C на яєчних середовищах. Ріст колоній спостерігається на 10-20 день після посіву у вигляді окремих вологих колоній сіро-білого кольору. Окремі колонії можуть зливатися і давати суцільний ріст. Колонії мікобактерій легко знімаються бактеріологічною петлею з поверхні середовища і добре суспендуються. В мазках пофарбованих за методом Циля-Нільсена під мікроскопом виглядають у вигляді дрібних, прямих або злегка зігнутих паличок з закругленими кінцями червоного кольору, в середньому довжиною від 1 до 3 мк, а шириною від 0,2 до 0,5 мк. Мікобактерії мають виражений поліморфізм. Штам патогенний для домашньої та дикої птиці, свиней, великої рогатої худоби і для людей /Архипова О.П. Дезинфекция туберкулёзной мокроты сухими препаратами. Труды ЦНИИДИ.-1948. - Вып.4.-стр. 19-21/. Добре відомий лабораторний штам М. bovis-8 - збудник туберкульозу бичачого виду. Він основний збудник туберкульозу у великої рогатої худоби. Але ці мікобактерії патогенні для інших видів тварин і для людей. Це кислото- та спиртостійкі бактерії. В мазках, пофарбованих за методом Циля-Нільсена, під мікроскопом виглядають у вигляді червоних прямих паличок з закругленими кінцями, в середньому товщиною 0,3-0,6 мк та довжиною 1,5-4 мк. Внутрі паличок виявляють зернистість. Оптимальна температура росту +37 °C. На середовищі Левенштейна-Ієнсена росте у вигляді дрібних, круглих, вологих колоній кольору слонової кістки. Ріст колоній виявляють на 30-60 день. Недоліком цього штаму є те, що він повільно росте на живильних середовищах і небезпечний для працюючих співробітників /Лысенко А.П., Высоцкий А.Е., Бирман Б.Л. Гутырчик М.П. Новые средства для дезинфекции при туберкулёзе. Ветеринарный консультант.-2004. - № 8 (79). - стр. 10-11/. Найбільш близьким технічним рішенням, вибраним як прототип для відбору дезінфікуючих засобів при туберкульозі, є тест-культура В-5. Ріст колоній на яєчних живильних середовищах з'являється на 3-5 день, як при температурі +37 °C так і при кімнатній температурі +20-22 °C. На щільних живильних і простих середовищах ростуть у вигляді гладеньких, блискучих, S колоній. При мікроскопії із культури пофарбованих за методом Ціля-Нільсена виявляють червоного кольору короткі, товсті палички, що мають овальну або веретеноподібну форму. Недоліком цього штаму є те, що він має низьку стійкість до препаратів із групи хлорамінів, ніж збудник туберкульозу /Путина Т.Г. Устойчивость микобактерий к хлор активным препаратам. Тр. 3 республиканской конференции в Гродно. Минск.-1989. - стр. 93/. Задача даної корисної моделі - знайти апатогенний, з високою резистентністю, швидкоростучий штам мікобактерій для відбору ефективних дезінфекційних засобів при туберкульозі. Зазначена задача вирішується тим, що попередньо використовується непатогенний, резистентний, швидкоростучий штам М. fortuitum № 122 для визначення бактерицидної активності у дезінфікуючих засобів та режиму застосування (концентрація та експозиція). Порівняльний аналіз з прототипом дозволяє зробити висновок, що запропонований штам М. fortuitum № 122 різниться від відомої тест-культури В-5, яка використовується для вивчення бактерицидної активності у дезінфікуючих засобів при туберкульозі, має нові властивості однакову стійкість із збудником туберкульозу бичачого виду до препаратів з різних хімічних груп, що відповідає критерію "Новизна". Штам М. fortuitum № 122 знаходиться у колекції культур мікобактерій і депонований в лабораторії вивчення туберкульозу Національного наукового центру "Інституту експериментальної і ветеринарної медицини" під номером 122. Лабораторний штам М. fortuitum віднесений до порядку Actinomycetalis, родини Mycobacteriaceae, роду Mycobacterium, виду fortuitum та характеризується наступними морфологічними, культуральними і біохімічними властивостями. Це кислото-спиртостійкі бактерії, в середньому довжиною від 1 до 3 мк. В мазках пофарбованих за методом Ціля-Нільсенавони виглядають у вигляді поліморфних, коковидних паличок, розташованих поодиноко або групами. Культура добре росте на яєчних живильних середовищах та на середовищі Павловського при температурі 37-38 °C. На щільних яєчних середовищах штам росте у вигляді окремих круглих, гладеньких або колоній, що злилися між собою. Ріст колоній спостерігається через 3-5 днів після посіву. На картопляному клині середовища Павловського штам росте у вигляді світло-сірого кольору колоній з гладкою, блискучою поверхнею, що злилися. На рідкій частині середовища Павловського штам утворює тонку світло-сірого кольору 1 UA 85626 U Таблиця 1 Запропонований Прототип Контроль М. Fortuitum № 122 В-5 Valle (M. bovis] № Режим Режим Режим Конзастосування застосування застосування Засоби п/ Резу- КонценРезу- КонценРезу- троль КонценЕкспози ЕкспоЕкспоп льтат льтат льтат трація трація трація ція зиція зиція препарат препарат препарату (год.) (год.) (год.) у (%) у (%) (%) 1 5 + 1 5 1 5 + + 24 + 24 24 + + 2 5 + 2 5 2 5 + + Гекса1 декон 24 + 24 24 + + 3 5 3 5 3 5 + 24 24 24 + 0,1 30 хв. 0,1 30 хв. 0,1 30 хв. + Жавель 2 -Клейд 1 1 1 + 10 5 + 10 5 10 5 + + Бриль3 янт 24 + 24 24 + + 5 1 + 5 1 5 1 + + Броваде 4 з плюс 24 + 24 24 + + Примітка: «-» - відсутній ріст мікобактерій «+» - наявний ріст мікобактерій хв. - хвилин 5 10 15 20 25 плівку, яка при струшуванні пробірки легко тоне та утворює рихлий осад. Штам росте як при температурі 37 °C, так і при температурі 25 °C. Росте також на середовищі ЛевенштейнаІєнсена з утримуванням 5 % хлористого натрію. Штам має виражену каталазну активність. Має позитивний тест акумуляції заліза, редукції нітратів, реакцію з телуритом та позитивну реакцію з гідролізом Твін-80. Культура непатогенна для лабораторних тварин. Для відбору засобів з високими бактерицидними властивостям щодо збудника туберкульозу попередньо вивчають резистентність суспензійним методом з використанням штаму М. fortuitum № 122. При встановленні у засобу бактерицидних властивостей до тест-культури, додатково підтверджують визначений режим бактерицидної дії щодо збудника туберкульозу бичачого виду. Результати досліджень наведені у таблиці 1. Порівняльний аналіз отриманих даних показав, що запропонований штам М. fortuitum № 122 має високу стійкість до засобів, ніж прототип. В контролі результати бактерицидної дії у засобів до збудника бичачого виду збігаються з режимом бактерицидної дії дезінфектантів до тест-культури М. fortuitum № 122. Таким чином, М. fortuitum № 122 за стійкістю прирівнюється до збудника туберкульозу бичачого виду. Використання штаму дозволить підвищити ефективність визначення режиму бактерицидної активності у нових дезінфектантів та прискорить відбір засобів для знищення збудника туберкульозу у зовнішньому середовищі. ФОРМУЛА КОРИСНОЇ МОДЕЛІ Тест-культура М. fortuitum № 122 для визначення у дезінфектантів високих бактерицидних властивостей до мікобактерій туберкульозу бичачого виду. 30 2 UA 85626 U Комп’ютерна верстка Л. Бурлак Державна служба інтелектуальної власності України, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 3