Спосіб моделювання відкритої проникаючої дозованої спинно-мозкової травми у експериментальних тварин

Реферат: Спосіб моделювання відкритої проникаючої дозованої спино-мозкової травми, при якому вводять у міждужковий простір тонку голку, проводять пункцію мозкової оболонки та деструкцію мозку, яка виконується шляхом дозованого введення гепаринізованої аутокрові у тканину спинного мозку на рівні сегментів Т 11-Т12 спинного мозку статевозрілих щурів-самців. Використовують загальне знеболювання сумішшю розчинів ксилазину (15 мг/кг) і кетаміну (70 мг/кг), формують доступ до вказаних сегментів спинного мозку шляхом перфорації міждужкової зв'язки голкою, через яку вводитиметься аутологічна гепаринізована кров, отримана з хвостової вени, занурення голки у тканину спинного мозку до формування рухових еквівалентів у обох задніх лапах і введення аутологічної крові у кількості 0,1 мл. Завершення хірургічного втручання і післяопераційний догляд за тваринами здійснюють звичним чином. UA 92561 U (54) СПОСІБ МОДЕЛЮВАННЯ ВІДКРИТОЇ ПРОНИКАЮЧОЇ ДОЗОВАНОЇ СПИННО-МОЗКОВОЇ ТРАВМИ У ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНИХ ТВАРИН UA 92561 U UA 92561 U 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Корисна модель належить до медицини, а саме до експериментальної нейрохірургії і може бути використаний для відтворення відкритої проникаючої дозованої спинномозкової травми (СМТ) у експериментальних тварин. Відомо багато методик моделювання дозованої СМТ. В першу чергу це належить до закритої СМТ. Класичною є модель A.R. Allen (1911) [1], модифікована Ю.І. Піголкіним та співавторами (1989) [2], вона є модифікацією способу Allen A.R. В основі цієї методики, лежить нанесення дозованого удару по грудному відділу хребта шляхом падіння вантажу визначеної ваги з різної висоти через циліндричну трубку. Сила удару залежить від ваги вантажу та ваги експериментальної тварини. Для нанесення подібної травми деякі автори використовували електромеханічний пристрій D.H. Noyes (1987) [3]. Недоліками цих моделей є те, що при нанесенні однакової сили удару у тварин виникає травма різної тяжкості, що проявляється різною морфологічною та клінічною картиною. Також, при даному виді травми страждають передусім задні структури спинного мозку. Іншим способом відтворення СМТ є локальна компресія спинного мозку за допомогою балона або манжетки (J.M. Tarlov та співавт., 1953; М. Kahel, R. Gabriel, 1983 [4, 5]). Однак цей метод технічно надто складний, ступінь компресії не може бути визначений і стандартизований, крім того, компресія є лише одним із багатьох уражаючих факторів спінальної травми. Відома модель статико-динамічної травми спинного мозку (T.J. Croft та співавт., 1972 [6]). При цьому використовують для інсталяції на оголену тверду мозкову оболонку травмуючий предмет різної ваги, накладення артеріальної кліпси (A.S. Rivlin та співавт., 1978 [7]). Суттєвим недоліком вказаних методів є необхідність формування широкого доступу до каналу хребта, що спричиняє його нестабільність на рівні моделювання травми. Гістологічні зміни у тварин практично не відрізняються від тих, що виявляють при використанні способу A.R. Аllen(1911) [1]. Модель Ю.I. Піголкіна та співавторів (1989) [2] є найбільш близькою до заявленої та прийнята нами за прототип. Особливості її виконання наступні. Наркотизованій тварині проводять ламінектомію на рівні T 12-L1, оголюють тверду мозкову оболонку і за допомогою падаючого вантажу (150 г/см) наносять дозовану травму спинному мозку. Недоліками цієї моделі є: 1. Складність дозування дії травмуючого чинника і значна різнорідність отриманої клінічної та патоморфологічної картини серед травмованих тварин. 2. При морфологічному дослідженні спинного мозку геморагічний компонент виражений слабко, локалізований, в основному, субпіально. 3. Різне поширення патологічного процесу вздовж довжини спинного мозку. 4. Травма наноситься у зону конуса спинного мозку та корінців кінського хвоста. Задачею корисної моделі є відтворення зони деструкції спинного мозку, отримання внутрішньо-спинномозкової гематоми, що відповідає відкритій проникаючій дозованій СМТ. Поставлена задача вирішується тим, що даний метод включає введення у міждужковий простір тонкої голки, пункцію мозкової оболонки та деструкцію мозку, при цьому деструкція мозку виконується шляхом дозованого введення гепаринізованої аутокрові у тканину спинного мозку на рівні сегментів Т 11-Т12 спинного мозку статевозрілих щурів-самців, відтворення моделі передбачає використання загального знеболення сумішшю розчинів ксилазину (15 мг/кг) і кетаміну (70 мг/кг), формування доступу до вказаних сегментів спинного мозку шляхом перфорації міждужкової зв'язки голкою, через яку вводитиметься аутологічна гепаринізована кров, отримана з хвостової вени, занурення голки у тканину спинного мозку до формування рухових еквівалентів у обох задніх лапах і введення аутологічної крові у кількості 0,1 мл, завершення хірургічного втручання і післяопераційний догляд за тваринами здійснюють звичним чином. А саме - спосіб моделювання відкритої проникаючої дозованої СМТ включає введення в міждужковий простір тонкої голки, пункцію твердої мозкової оболонки і введення у паренхіму мозку гепаринізованої аутологічної крові. При цьому дозування травми визначається об'ємом введеної у паренхіму мозку гепаринізованої аутологічної крові. При макроскопічному дослідженні спинного мозку експериментальних тварин визначають травматичний канал у задній його частині, оточений вінцем субпіального крововиливу. В центральних відділах спинного мозку виявляють гематому з елементами мозкового детриту, яка поширюється на прилеглі сегменти спинного мозку. Спосіб дозволяє поєднувати два уражуючі чинники відкритої проникаючої СМТ: деструкцію мозкової тканини та крововилив. Спосіб виконується наступним чином. Після загального знеболення статевозрілих щурів-самців шляхом внутрішньо очеревинного введення суміші розчинів ксилазину (Sedazin, Biowet, Польща, 15 мг/кг) і кетаміну (Calypsol, 1 UA 92561 U 5 10 15 20 25 30 35 40 Гедеон Ріхтер А.О., Угорщина, 70 мг/кг), тварину фіксують на операційному столику черевцем до низу і, дотримуючись правил асептики, проводять розріз шкіри по лінії, що з'єднує остисті відростки T9-L2 хребців. Скелетують остисті відростки та дужки Т 10-L1 Ростральні скелетовані хребці трохи піднімають. Попередньо, з дотриманням правил асептики із хвостової вени відбирають невеликий об'єм крові, змішують з гепарином у співвідношенні 2:1. Тонку голку вводять у міждужковий простір, розширений шляхом підняття ростральних скелетованих хребців, дещо латеральніше серединної лінії у напрямку уявної осі каналу хребта, на глибину 2 мм до виникнення повторюваних при легких рухах голки рухових еквівалентів у обох задніх лапах, що підтверджує проникнення та перебування її у тканині спинного мозку. Через голку вводять гепаринізовану аутологічну кров у кількості 0,1 мл. Оперативне втручання закінчують звичним чином. З метою профілактики інфекційних ускладнень внутрішньоочеревинно або в товщу передньої стінки черевця вводять розчин біциліну-3 або біциліну-5 (ОАО "Киевмедпрепарат") у дозі 1 млн ОД на 1 кг маси (300 тис ОД на одну тварину), а також розчин дексаметазону (KRKA, Словенія) у дозі 6 мг/кг маси. Після проведення вказаних маніпуляцій тварини протягом 2-4 год. утримують в приміщенні з підвищеною температурою повітря (30-33 °C), що є необхідною вимогою в контексті застосування ксилазину. Спосіб впроваджений на базі лабораторії експериментальної нейрохірургії ДУ "Інститут нейрохірургії ім. А.П. Ромоданова НАМН України", є досить ефективним. Запропонований спосіб має ряд переваг: 1) простота відтворення; 2) можливість дозування СМТ шляхом зміни об'єму аутологічної крові; 3) однорідність морфологічної картини травми поміж експериментальними тваринами; 4) інтрамедулярне розташування вогнища з деструкцією насамперед сірої рідини, можливість відтворення трубчатої гематомієлії. Джерела інформації: 1. Allen H.K. Surgery of lesion of spinal cord equivalent to crush injury of fracture dislocation of spinal colum // JAMA.-1911. - Vol. 57. - P. 878-880. 2. Пиголкин Ю.И., Володин С.Ф., Шерстюк Б.В. Морфофункцыональная характеристика микроциркуляторного русла спинного мозга при его экспериментальной травме //Вопросы Нейрохирургии. - 1989. - №4. - С. 30-34. 3. Noyes D.H. Elektromechanical impactor for producing experimental spinal cord injuring animals // Med. Biol. Eng. Comput. - 1987. - Vol. 25. - P. 335-340. 4. Tarlov J.M., Klinger H., Vitaie S. Spinal cord compression studies: pression in dogs. - Arch. Neurol. Psychiatry. - 1953. - Vol. 70. - P. 831-819. 5. Kahel M., Gabriel R. Acute spinal cord injury in the rat: comparison of three experimental technijues // Can. J. Neurosci. - 1983. - Vol. 10. - P. 161-165. 6. Croft T.J., Brodkey J.S., Nulsen F.E. Reversible spinal cord trauma: model for electrical monitoring of spinal cord function // J. Neurosurg. - 1972. - Vol. 36. -P. 402-406. 7. Rivlin A.S., Tator C.H. Effect of duration of acute spinal cord compression in a new acute cord injury model in the rat // Surg. Neurol. - 1978. - Vol. 9. - P. 39-43. ФОРМУЛА КОРИСНОЇ МОДЕЛІ 45 50 55 Спосіб моделювання відкритої проникаючої дозованої спино-мозкової травми, є способом наукового моделювання, який відрізняється тим, що включає введення у міждужковий простір тонкої голки, пункцію мозкової оболонки та деструкцію мозку, при цьому деструкція мозку виконується шляхом дозованого введення гепаринізованої аутокрові у тканину спинного мозку на рівні сегментів Т11-Т12 спинного мозку статевозрілих щурів-самців, відтворення моделі передбачає використання загального знеболення сумішшю розчинів ксилазину (15 мг/кг) і кетаміну (70 мг/кг), формування доступу до вказаних сегментів спинного мозку шляхом перфорації міждужкової зв'язки голкою, через яку вводитиметься аутологічна гепаринізована кров, отримана з хвостової вени, занурення голки у тканину спинного мозку до формування рухових еквівалентів у обох задніх лапах і введення аутологічної крові у кількості 0,1 мл, завершення хірургічного втручання і післяопераційний догляд за тваринами здійснюють звичним чином. 2 UA 92561 U Комп’ютерна верстка М. Ломалова Державна служба інтелектуальної власності України, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 3