Склад для обробки проб досліджуваного матеріалу при проведенні досліджень біологічних матеріалів

Реферат: Склад для обробки проб матеріалу при проведенні досліджень біологічних матеріалів містить хлорид натрію, етанол. Додатково містить формалін 40 %, орто-етилртутьтіосаліцилат натрію (C9H9HgNaO2S), а хлорид натрію застосовують у вигляді 0,15 Μ розчину. UA 110724 U (12) UA 110724 U UA 110724 U 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 Корисна модель належить до засобів для проведення лабораторних способів досліджень біологічних матеріалів і може бути використана для діагностики глистової інвазії. У наш час збільшення поширення багатьох паразитарних хвороб пояснюється зростаючими масштабами туризму, торгівлі, завезенням і розведенням екзотичних тварин, змінами клімату (потеплінням). Відомо, що паразитарні хвороби домашніх і диких тварин, можуть викликати тяжкі захворювання людини, так звані зоонози, що іноді призводить до необхідності застосовувати складні методи при їх лікуванні, аж до хірургічного втручання. Тому діагностика паразитарних хвороб людини і тварин, що викликаються гельмінтами і патогенними найпростішими є актуальною проблемою і потребує подальшого спрощення обробки проб та підвищення достовірності досліджень. Відомим аналогом є склад для обробки проб досліджуваного матеріалу при проведенні досліджень (RU2557973, МПК G01N 1/28, G01N 33/483, дата публікації: 2015.07.27), що містить ізотонічний розчин (0,9 %) хлориду натрію. Недоліком аналога є трудомісткість відбору проб досліджуваного матеріалу, що вимагає чистого відбору яєць паразитарного збудника. Обмеженість сфери застосування складу обробкою проб досліджуваного матеріалу лише зі збудником Trichuris vulpis, необхідність експозиції пробірок з самицями Trichuris vulpis при t° = 37,5-39 °C впродовж 5 годин в умовах термостатування. Необхідність застосування зазначених у способі застосування спеціальних режимів тривалої термообробки ускладнює технологію обробки проб та технологію використання цього складу. Відомим аналогом є склад для обробки проб досліджуваного матеріалу при проведенні досліджень біологічних матеріалів та диференціальної діагностики Trichocephalus vulpis і Thominx (Capillaria) aerophilus (RU2482481, МПК G01N 33/48, дата публікації: 20.05.2013) що містить суміші 98,5 %-ного розчину гліцерину (щільністю 1,256) і 40 %-ної молочної кислоти, узятих в співвідношенні 1:1. Недоліком аналога є трудомісткість відбору проб досліджуваного матеріалу, що вимагає чистого відбору яєць паразитарного збудника, Обмеженість сфери застосування складу обробкою проб досліджуваного матеріалу лише зі збудниками Trichocephalus vulpis і Thominx (Capillaria) aerophilus. При цьому такий склад не забезпечує можливість тривалого зберігання паразитарних збудників, а лише покращує просвітлення границь паразитарних збудників у полі зору дослідника що дозволяє лише посилити ефект чіткості об'єкта. Відомим аналогом є склад для обробки проб досліджуваного матеріалу при проведенні досліджень біологічних матеріалів (RU2472154, МПК G01N 33/48, A61D 99/00, дата публікації: 10.01.2013), що містить наступні компоненти: перший у вигляді рідини - вода - 48 % і натрію хлорид - 25 %, другий - також у вигляді рідини, що містить: лаурилсульфат натрію - 16,3 %, насичений розчин солі, поліетиленгліколь - 10 %, бензоат натрію - 0,7 %, при цьому перший і другий компоненти змішані у в співвідношенні 1:1. Недоліком аналогом є те, що такий склад не забезпечує можливість тривалого зберігання паразитарних збудників, а лише покращує відокремлення паразитарних збудників. Відомим аналогом є склад для обробки проб досліджуваного матеріалу при проведенні досліджень (RU2473899, МПК G01N 33/48, дата публікації: 27.01.2013), що складається з насичених розчинів цинку хлориду (1,5 кг ZnCl2 на 1 л води), натрію хлориду (0,42 кг NaCl на 1 л води) і цукру (1,67 кг С12Н22О11 на 1 л води), узятих в співвідношенні 1,75:1:1. Недоліком аналога є те, що такий склад не забезпечує можливість тривалого зберігання паразитарних збудників, а лише покращує просвітлення границь паразитарних збудників у полі зору дослідника. В основу корисної моделі поставлена задача створення складу для обробки проб досліджуваного матеріалу при проведенні досліджень біологічних матеріалів при здійсненні діагностики глистової інвазії, в якому за рахунок застосування нових інгредієнтів та нового їх співвідношення забезпечується подовження терміну зберігання яєць гельмінтів і цист найпростіших, розширення сфери можливих досліджуваних видів субстратів досліджуваного матеріалу та підвищення ефективності та достовірності досліджень проб біологічного матеріалу. Поставлена задача вирішується тим, що склад для обробки проб досліджуваного матеріалу при проведенні досліджень біологічних матеріалів включає хлорид натрію, та етанол, згідно з корисною моделлю, додатково містить формалін 40 %, орто-етилртутьтіосаліцилат натрію (C9H9HgNaO2S), а хлорид натрію застосовано у вигляді 0,15 Μ розчину, при наступному співвідношенні компонентів, мас: 60 1 UA 110724 U 5 10 15 20 25 30 35 40 45 етанол 96° 50,0-62,0 г формалін 40 % 18,0-26,0 г орто - етилртутьтіосаліцилат 18,0-21,0 г натрію (C9H9HgNaO2S) 0,15 M NaCl решта. Новий склад має низку нових технічних характеристик: За рахунок застосування нових інгредієнтів та їх співвідношення у такому складі для обробки проб відібраного матеріалу при проведенні лабораторних досліджень забезпечується подовження терміну зберігання яєць гельмінтів і цист найпростіших і підвищення ефективності та достовірності досліджень проб біологічного матеріалу та проб з зовнішнього середовища (довкілля). Застосування формаліну за новим призначенням, а саме як засіб збереження збудників у живому стані є нетрадиційним видом застосування формаліну оскільки у господарстві формалін отримав протилежне застосування, як дезінфікуючий засіб, а також для знезараження ґрунту, та для дезінфекції приміщень. При цьому такий склад є рідиною гомогенною, прозорою, яку зручно та просто використовувати при обробці проб досліджуваного матеріалу. Така рідина не потребує особливих умов зберігання і транспортування, при денному світлі не втрачає своїх властивостей, зберігає гомогенність протягом тривалого часу. При цьому розроблений склад має термін зберігання до 1 року, що суттєво більше терміну зберігання його окремих компонентів (наприклад термін зберігання формаліну складає три місяці з дня випуску речовини) (що підтверджує синергізм компонентів складу). Такий склад дозволяє використати його при підтвердженні діагнозів не лише на гельмінтози і протозоози, але і на саркоспороідози, демодекози і деякі ентомози, тобто забезпечує збільшення спектру визначуваних хвороб. На відміну від відомих рідин, створений склад для обробки досліджуваного матеріалу, що містить яйця гельмінтів різних класів, цисти/ооцисти найпростіших, кліщів, комах, і їх окремих стадій розвитку дозволяє обстежувати нові субстрати (наприклад, пил), що знаходяться в звірівницьких і тваринницьких приміщеннях. Розроблений склад для обробки проб досліджуваного матеріалу при проведенні досліджень біологічних матеріалів ілюструється прикладами його виконання та застосування наведеними у Таблиці 1 та у Таблиці 2. У наведених у Таблиці 1 прикладах склад готували наступним способом. Застосовували інгредієнти у кількостях зазначених у відповідних прикладах. Корисну модель виконують наступним чином. В мірний циліндр наливали відміряну кількість етанолу 96-градусного, в якому розчиняли наважку орто-етилртутьтіосаліцилатнатрію (C9H9HgNaO2S), яка була зважена на аналітичних вагах. В циліндр, градуйованою піпеткою, додавали формаліну 40 %-ного. Окремо в колбі готували розчин хлориду натрію: наважку NaCl (ДСТУ 3583-97, ДОСТ 13830-97 сорт 1), зважену на медичних вагах, розчиняли у дистильованої води, для отримання 0,15 Μ розчину NaCl. До отриманої суміші речовин: етанолу 96-градусного і формаліну 40 %-ного та розчинного в цій суміші орто-етилртутьтіосаліцилатнатріго (C9H9HgNaO2S), у флакон добавляли 0,15 Μ розчин хлориду натрію, яким доводили загальний об'єм до 1000 мл. В подальшому флакони з сумішшю залишали на світлі при кімнатній температурі (+16…+25 °C) протягом терміну зазначеного у Таблиці 1 для якісної оцінки отриманої суміші, тобто за гомогенністю та її прозорістю. Результати досліджень представлені в Таблиці 1. Дані проведених досліджень зразків складу свідчать, що отримана рідина стійка до світла, тобто не втрачає свої властивості при денному світлі і зберігає гомогенність та прозорість протягом тривалого часу (до одного року) і компоненти, які входять в склад рідини, не кристалізуються. 2 UA 110724 U Таблиця 1 Показники Гомогенність Прозорість Склад Досліди C9H9HgNaO2S Приклад 1 Приклад 2 Приклад 3 Приклад 4 Приклад 5 Приклад 6 Приклад 7 Приклад 8 5 етанол 96°, г 18 18 20 20 19 20 21 21 формалін 0,15 Μ 40 %, г NaCl, г 50 50 50 52 56 62 60 62 18 18 20 20 23 24 26 26 932 932 930 928 921 914 914 912 місяці 1 гомог гомог гомог гомог гомог гомог гомог гомог 6 гомог гомог гомог гомог гомог гомог гомог гомог місяці 12 гомог гомог гомог гомог гомог гомог гомог гомог 1 ГірО'5 проз проз проз проз проз проз проз 6 проз проз проз проз проз проз проз проз 12 проз проз проз проз проз проз проз проз Отримані різнобічні зразки: свіжі фекалії людини, об'єкти зовнішнього середовища (річна вода, ґрунт, пил - змиви з предметів). Кожний зразок розділяли на 2 частини до кожного із яких у співвідношенні 1:2 додавали зазначений у Таблиці 2 варіант прикладу виконання (зазначеного в Таблиці 1) розробленого складу. В кожну частину відповідного зразка, вносили по 1000 яєць аскариди свиней та по 200 цист лямблій та зберігали (при денному світлі) протягом зазначеного у Таблиці 2 терміну. Після зазначеного терміну зберігання, зразки досліджували під мікроскопом та по зміні у часі визначали термін зберігання життєздатності яєць аскариди і цист лямблій. 10 Таблиця 2 Зразки фекалії ґрунт вода пил 15 Вміст зразка яйця аскариди цисти лямблій яйця аскариди цисти лямблій яйця аскариди цисти лямблій яйця аскариди цисти лямблій Застосований приклад складу Приклад 1 Приклад 2 Приклад 3 Приклад 4 Зразу після Термін зберігання обробленого зразка обробки 2 неділі 1 місяць 2 місяці місяці % живих % живих % живих % живих % живих 99 99 99 99 99 98 98 98 96 95 99 99 99 99 99 98 98 98 96 95 99 99 99 99 99 98 98 98 96 95 99 99 99 99 99 98 98 98 96 95 Як показують проведені дослідження розроблений склад для обробки проб досліджуваного матеріалу при проведенні досліджень біологічних матеріалів забезпечує подовження терміну зберігання яєць гельмінтів і цист найпростіших (пропагативні форми паразитів) і підвищує ефективність та достовірність досліджень різнобічних проб біологічного матеріалу. Розроблений склад не потребує особливих умов зберігання і транспортування, при денному світлі не втрачає своїх властивостей, зберігає гомогенність протягом тривалого часу. ФОРМУЛА КОРИСНОЇ МОДЕЛІ 20 Склад для обробки проб матеріалу при проведенні досліджень біологічних матеріалів містить хлорид натрію, етанол, який відрізняється тим, що додатково містить формалін 40 %, ортоетилртутьтіосаліцилат натрію (C9H9HgNaO2S), а хлорид натрію застосовують у вигляді 0,15 Μ розчину, при наступному співвідношенні компонентів, мас.: етанол 96° 50,0-62,0 г формалін 40 % 18,0-26,0 г орто-етилртутьтіосаліцилат 18,0-21,0 г натрію (C9H9HgNaO2S) 0,15 M NaCl решта. 3 UA 110724 U Комп’ютерна верстка О. Рябко Державна служба інтелектуальної власності України, вул. Василя Липківського, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут інтелектуальної власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 6