Лікарський засіб кардіопротекторної дії

Реферат: Лікарський засіб кардіопротекторної дії, що містить настойку лікарських рослин, причому як настойку лікарських рослин використовують настойку трави дивини звичайної на 40 % етиловому спирті при співвідношенні сировини і екстрагенту 1:10. UA 91775 U (12) UA 91775 U UA 91775 U 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Корисна модель належить до хіміко-фармацевтичної промисловості, зокрема до лікарських засобів на основі природних компонентів, що б забезпечувало комплексну лікувальну дію на організм хворого. Для лікування серцево-судинних захворювань широко використовують препарати рослинного та синтетичного походження. Серед численних кардіопротекторів найбільш ефективними є ті, які втручаються в процеси метаболічної активації окиснювальних процесів, модулюють ферментні системи, відновлюють проникність мембран кардіоцитів. Саме цим вимогам відповідають природні та синтетичні антиоксиданти. Є відомим протиішемічний засіб [пат РФ, №2022561, А61K5/78], що містить спиртову витяжку з коренів родіоли рожевої (50 %-й спиртовий екстракт промислового виробництва). Відома фармацевтична композиція, яка складається з компонентів рослинного походження, одним з компонентів якої є плоди лимоннику китайського, вміст яких у загальному об'ємі компонентів дорівнює 3-20 %, а сама композиція виконана у формі іонізованого настою (пат. UA, № 24498, А61K 36/00, 10.07.2007, бюл. № 10). Існує препарат для лікування серцево-судинних захворювань "Кардіофіт", який забезпечує кардіотонічну, коронаролітичну, гіпотензивну, антигіпоксичну, антитромбічну та седативну дію, виключає прояви побічних ефектів. Препарат містить настоянку 14-и лікарських рослин у 40 % етиловому спирті [пат. UA № 48986, А61P 9/00, 16.09.2002, бюл. № 9]. Однак вони мають вузько спрямовану дію, можуть викликати побічні ефекти при тривалому використанні. В основу корисної моделі поставлено задачу удосконалити лікарський засіб кардіопротекторної дії шляхом використання рослинної настойки щоб безпосередньо вплинути на стан міокарда та відкорегувати порушення окиснювальних процесів завдяки антиоксидантним властивостям даного засобу. Поставлена задача вирішується тим, що у відомому лікарському засобі, що містить настойку лікарських рослин, згідно з корисною моделлю, як настойку лікарських рослин використовують настойку трави дивини звичайної на 40 % спирті етиловому при співвідношенні сировини і екстрагенту 1:10. Лікарські засоби дивини звичайної виявляють відхаркувальну, протизапальну, антиоксидантну активність. Настойка містить фенольні сполуки, зокрема актеозид, флавоноїди, фенолкарбонові кислоти. Спосіб отримання настойки полягає в наступному. Сировину, у вигляді трави дивини звичайної, подрібнюють. Далі вичерпно екстрагують 40 % етанолом методом дрібної мацерації, у співвідношенні сировини і екстрагенту 1:10, протягом 3 діб. Приклад. Провели оцінку кардіопротекторної та антиоксидантної дії настойки з трави дивини на тваринах (щурах). Результати наведені в таблицях 1-4. Для проведення вивчення кардіопротекторної активності тварини (щури) були розділені на 4 групи: 1 - контрольні тварини (інтактний контроль); 2-а - тварини, уражені адреналіном (0,18 % розчин) в дозі 0,5 мг/кг маси тіла (одноразово), шлях введення - внутрішньом'язово; 3-я уражені тварини адреналіном та ліковані настойкою трави дивини в дозі 0,2 мл/кг маси тіла, шлях введення - інтрагастрально; 4-а - уражені тварини адреналіном та ліковані корвітином в дозі 42 мг/кг маси тіла, шлях введення - внутрішньовенно (у хвостову вену). При вивченні кардіопротекторної та антиоксидантної активностей досліджуваної субстанції як препарат порівняння використовували "Корвітин" (виробництва ЗАТ НВЦ "Борщагівський хіміко-фармацевтичний завод", м. Київ) - лікарський засіб з антиоксидантною активністю. Значення дози препарату порівняння вибирали, опираючись на інструкцію до застосування та використовуючи коефіцієнти видової чутливості Риболовлєва Ю.Р. і його метод перерахунку дози для людини на дозу для щура: Умовнотерапевтична доза для щура становить 42 мг/кг. Через 24 та 48 години від початку введення адреналіну тварин піддавали евтаназії під тіопенталовим наркозом. Показники метаболізму досліджували у сироватці крові та міокарді тварин. Дослідженнями, які проведені в останні два десятиліття, встановлено, що в патогенезі захворювань міокарда важливу роль відіграє активація процесів вільнорадикального окиснення, які призводять до ушкодження та загибелі кардіоцитів. Встановлено, що введення адреналіну в дозі 0,5 мг/кг маси тіла у гомогенатах міокарда та сироватці крові щурів призводило до активації процесів перекисного окислення ліпідів (ПОЛ). 1 UA 91775 U 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Результати досліджень даних показників наведені в таблиці 1, а саме показано вміст ТБК-АП продуктів у сироватці крові (мкмоль/л) та міокарді (мкмоль/кг) щурів, уражених адреналіном, після введення настойки з трави дивини та корвітину (М±m; n=6). Через 24 години вміст ТБК-АП у сироватці крові уражених тварин збільшився у 1,7 разу, через 48 години - у 2 рази. У міокарді спостерігалась аналогічна тенденція до підвищення даного показника у 2,4 та 2,3 разу у відповідні терміни дослідження. Застосування настойки з трави дивини виявилось ефективним у обидва терміни дослідження як в сироватці крові, так і у міокарді тварин після ураження адреналіном. Вміст ТБК-АП після її введення в організм тварин зазнав значного зниження у досліджуваних тканинах. Отримані результати вказують на те, що у кардіоцитах і сироватці крові піддослідних тварин проходить активація вільнорадикальних процесів, яка супроводжується посиленням процесів ліпопероксидації та нагромадженням ендогенних токсичних продуктів ПОЛ. Використання настойки з трави дивини призвело до зниження активності процесів ліпопероксидації в уражених тварин, що дозволило підтвердити передбачувані антиоксидантні властивості даного фармакологічного засобу, зумовлені наявністю у траві рослини значної кількості біологічно активних речовин, що обумовлюють даний ефект. Ураження серця токсичною дозою адреналіну супроводжується інтенсифікацією вільнорадикальних реакцій у міокарді та сироватці крові, що неминуче призводить до розвитку ендогенної інтоксикації організму, деструкції та дестабілізації клітинних мембран, деградації їх ліпідних та білкових компонентів. Як наслідок можуть відбуватися зміни активності багатьох ферментів. Виявлені порушення призводять до порушень захисно-компенсаторних сил, особливо антиоксидантної системи. Застосування адреналіну призвело до значного підвищення в сироватці крові вмісту . церулоплазміну - ферменту, який нейтралізує супероксидні та гідроксильні радикали (О2 та . ОН ), тобто проявляє дію, аналогічну внутрішньоклітинній дисмутазі. Його вміст підвищився в 1,45 та 1,52 разу через 24 та 48 години відповідно. До кінця експерименту вміст його виявився найвищим і на 52 % перевищував рівень контрольних тварин. У таблиці 2 наведена активність СОД (мкмоль/л) та вміст ЦП (мг/л) у сироватці крові щурів, уражених адреналіном, після введення екстракту з трави дивини та корвітину (М±m; n=6). Використані нами коригуючі засоби викликали зниження вмісту церулоплазміну. Через 24 години з початку експерименту він становив 117 % при застосуванні досліджуваної настойки та 107 % після застосування корвітину, у останній термін дослідження (через 48 години) вміст церулоплазміну знизився на 14 % після надходження в організм настойки і на 38 % - корвітину порівняно з контрольною патологією. З таблиці 2 видно, що ураження серця адреналіном супроводжується зниженням у сироватці крові активності одного з наймогутніших ферментів антиоксидантного захисту супероксиддисмутази. Активність ензиму через 48 години від початку розвитку кардіопатії у крові щурів становила 75 % від рівня інтактного контролю. Після застосування досліджуваної настойки вона збільшилась на 20 %, корвітину - на 23 %, що вказує на однонапрямленість дії коригуючих чинників. Відомо, що токсичні метаболіти ПОЛ викликають деструкцію плазматичних та цитоплазматичних мембран, призводять до розвитку токсемії - виходу в кров з локального осередку токсинів, що викликають генералізацію патологічного процесу. Внутрішньом'язове уведення адреналіну (0,5 мг/кг маси тіла) спричиняло різної інтенсивності пошкодження міокарда, про що свідчило зростання активності АсАТ та АлАТ у сироватці крові тварин протягом 48 години після ураження. Результати активності амінотрансфераз у сироватці крові щурів після ураження адреналіном та застосування коригуючих чинників (M±m; n=6) наведені у таблиці 3. Через 24 год. після ураження адреналіном в сироватці крові щурів активність АсАТ зросла в 1,9 разу, активність АлАТ - в 1,4 разу. Аналогічне зростання відмічено через 48 год. з моменту застосування адреналіну - АсАТ - в 2,2 разу, АлАТ - в 1,5 разу. Отримані результати свідчать про цитоліз кардіоцитів, під дією токсичного чинника збільшується проникність їх мембран і внутрішньоклітинні компоненти потрапляють в кров, де ми реєструємо значне збільшення їх активності. Після застосування настойки з трави дивини активність АсАТ достовірно знижувалась через 24 години від початку експерименту. Дослідження активності даних ензимів у міокарді щурів після застосування адреналіну. Результати активності амінотрансфераз у міокарді щурів після ураження адреналіном та застосування коригуючих чинників (M±m; n=6) наведені в таблиці 4. 2 UA 91775 U 5 10 15 20 25 Відмічено достовірне зниження (р < 0,05) активностей АсАТ та АлАТ в міокарді тварин протягом всього експерименту після застосування токсичних доз адреналіну. Після введення настойки з трави дивини активність АсАТ через 24 години та 48 години дещо підвищувалась, хоча зміни не було вірогідними порівняно з тваринами, які не отримували його. Активність АсАТ на 24 год. підвищилась на 8 % відносно контрольної патології і на 20 % була нижчою від рівня норми. В останній термін дослідження активність АсАТ після застосування настойки становила 83 % порівняно з інтактними тваринами. Аналогічно на цей показник вплинув корвітин, активність АсАТ у міокарді після його застосування підвищилась на 18 % уже через 24 години після ураження. При дослідженні активності АлАТ не спостерігали достовірних відмінностей між активностями даного ферменту у міокарді всіх дослідних груп тварин після застосування як настойки, так і препарату порівняння. При проведенні фармакологічних дослідження було встановлено, що настойка у дозі 0,2 мл/кг проявляє мембрано- та кардіопротекторні властивості, що виражається у нормалізації активності органоспецифічних ферментів міокарда, зокрема аспартатамінотрансферази як у сироватці крові, так і в серці за умов адреналінової міокардіодистрофії. Таким чином, запропонований лікарський засіб кардіопротекторної дії, а саме настойка трави дивини звичайної, проявляє виражений кардіопротекторний ефект, механізм якого реалізується через його антиоксидантні властивості. Це доведено на моделі адреналінового пошкодження міокарда. В порівнянні із відомими лікарськими формами-прототипами, він має ряд переваг, а саме достатню сировинну базу для його створення, яка не впливає на самовідтворення рослини. Отже, досліджуваний засіб може бути використаний для виготовлення у фармацевтичній промисловості з подальшим застосуванням при захворюваннях серцево-судинної системи та інших ураженнях, які супроводжуються розвитком оксидативного стресу, викликаного підвищеним вмістом катехоламінів в організмі. Таблиця 1 Сироватка крові Міокард Терміни дослідження, год. 24 48 24 48 2,50±0,17 0,75±0,03 4,30±0,15* 4,90±0,14* 1,80±0,12* 1,75±0,13* Групи тварин Інтактний контроль Уражені адреналіном Уражені + ліковані настойкою, 0,2 мл/кг Уражені + ліковані корвітином, 42 мг/кг 3,65±0,14** 4,15±0,13** 1,30±0,15** 1,25±0,09** 3,15±0,13** 3,95±0,15** 1,17±0,10** 0,95±0,07** Примітка: тут і в наступних таблицях * вірогідні зміни між контрольними та ураженими тваринами (р< 0,05); ** - вірогідні зміни між ураженими та лікованими тваринами (р< 0,05) Таблиця 2 Групи тварин Інтактний контроль Уражені адреналіном Уражені + ліковані настойкою, 0,2 мл/кг Уражені + ліковані корвітином, 42 мг/кг СОД Терміни дослідження, год. 24 48 40,2±1,3 32,5±1,2* 30,0±1,5* ЦП Терміни дослідження, год. 24 48 10,5±0,3 15,3±0,4* 16,0±0,7* 35,4±1,2** 38,2±1,4** 12,3±0,5** 14,5±0,5** 37,5±1,3** 39,5±1,6** 11,2±0,4** 12,0±0,4** 3 UA 91775 U Таблиця 3 Групи тварин АсАТ, мкмоль/л год. АлАТ, мкмоль/л год. Терміни дослідження, год. 24 48 24 48 0,25±0,02 0,28±0,02 0,48±0,03* 0,54±0,02* 0,40±0,02* 0,42±0,013* Інтактний контроль Уражені адреналіном Уражені + настойка, 0,2 мл 0,38±0,02** /кг Уражені + корвітин, 42 0,30±0,02** мг/кг 0,45±0,03 0,36±0,015 0,35±0,012** 0,32±0,02** 0,32±0,02** 0,32±0,016** Таблиця 4 Групи тварин АсАТ, мкмоль/кг год. АлАТ, мкмоль/кг год. Терміни дослідження, год. 24 48 24 48 0,72±0,03 0,56±0,02 0,52±0,02* 0,58±0,03* 0,44±0,015* 0,45±0,02* Інтактний контроль Уражені адреналіном Уражені + настойка, 0,2 0,58±0,03 мл/кг Уражені + корвітин, 42 0,65±0,02** мг/кг 0,60±0,04 0,48±0,02 0,50±0,015 0,68±0,03** 0,50±0,015 0,52±0,03 ФОРМУЛА КОРИСНОЇ МОДЕЛІ 5 Лікарський засіб кардіопротекторної дії, що містить настойку лікарських рослин, який відрізняється тим, що як настойку лікарських рослин використовують настойку трави дивини звичайної на 40 % етиловому спирті при співвідношенні сировини і екстрагенту 1:10. Комп’ютерна верстка Г. Паяльніков Державна служба інтелектуальної власності України, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 4