Спосіб отримання препарату “метрофет” для корекції статевого циклу ссавців

1. Спосіб отримання препарату для корекції статевого циклу ссавців, при якому виготовляють біологічно активну речовину із тканин матки, узятих від ссавців, шляхом витримування їх протягом 2…8 діб при температурі 2…7 °С з наступним промиванням водою при температурі 30...50 °С, подрібненням та перемішуванням з поступовим додаванням 1...3 вагових частин стерильного розбавлювача на 1 частину тканин матки, вистоюванням протягом 1...4 годин при температурі 15…25 °С, витримуванням протягом 20...40 хвилин на водяному огрівнику при температурі 60...80 °С, видаленням твердої частини, фасуванням отриманої рідини в скляну тару, закриванням гумовими корками, герметизацією металевими ковпачками та піддаванням автоклавуванню при температурі 120...130 °С, який відрізняється тим, що біологічно активну речовину виготовляють із вмісту тканин і рідин фетальної частини плаценти, узятої від клінічно здорових ссавців з нормальним перебігом вагітності, безпосередньо протягом 24 годин після C2 2 (19) 1 3 Відомий препарат протизапальної дії, що містить активно діючу речовину і розбавлювач, причому в якості активно діючої речовини він містить денатуровану пуповину трупів людини, а в якості розбавлювача - стерильну дистильовану воду, в співвідношенні 1:0,8 - 1:1,2 (див. патент Російської Федерації за № 2025910, МПК А61К35/50, 1995). Препарат може використовуватися як для лікування людини, так і для лікування тварин. Однак препарат володіє недостатньою терапевтичною ефективністю. Основною причиною, що перешкоджає достатній терапевтичній ефективності цього препарату є те, що він виготовлений з окремої тканини - пуповини. Це суттєво обмежує його можливості позитивного впливу на організм корів та інших ссавців. Відомий спосіб отримання ветеринарного препарату для профілактики і лікування акушерських та гінекологічних патологій у корів, при якому виготовляють біологічно активну речовину із органів трупів ссавців, подрібнюють її, змішують із стерильним розбавлювачем з наступною стерилізацією отриманого препарату, причому біологічно активну речовину виготовляють із повного вмісту тканин матки, узятих від клінічно здорових корів 1...7 місяців тільності, одразу після забою, шляхом витримування їх протягом 2...8 діб при температурі 2...7°С з наступним промиванням водою с температурою 30...50°С, подрібненням та перемішуванням з стерильним розбавлювачем при наступному співвідношенні складових, у вагових частинах: - повний вміст тканин матки, дрібнодиспергований - 1; - стерильний розбавлювач - 1...3, крім того отриману суміш вистоюють протягом 1...4 годин при температурі 15...25°С, витримують протягом 20...40 хвилин на водяному огрівнику при температурі 60...80°С, видаляють тверду частину, фасують отриману рідину в скляну тару, герметизують та піддають автоклавуванню протягом 30...90 хвилин при температурі 120...130°С (див. патент України на винахід № 89579, МПК А61К35/48, А61Р15/00, 2009 рік). Однак, похідним матеріалом для виготовлення препарату є тканини з трупів здорових тварин, тобто похідного матеріалу для виготовлення препарату недостатньо для задоволення потреб тваринництва. Крім того, дефіцит похідного матеріалу від’ємно впливає на вартість препарату, збільшуючи її. В основу винаходу поставлено задачу розширення бази похідного матеріалу для виготовлення препарату і за рахунок цього зменшення собівартості препарату з забезпеченням підвищеної терапевтичної ефективності препарату. Поставлена задача вирішується за рахунок того, що при здійсненні способу отримання препарату для корекції статевого циклу ссавців, при якому виготовляють біологічно активну речовину із тканин матки, узятих від ссавців, шляхом витримування їх протягом 2...8 діб при температурі 2...7°С з наступним промиванням водою при температурі 30...50°С, подрібненням та перемішуванням з поступовим додаванням 1...3 вагових частин стерильного розбавлювача на 1 частину тканин матки, 93839 4 вистоюванням протягом 1...4 годин при температурі 15...25°С, витримуванням протягом 20...40 хвилин на водяному огрівнику при температурі 60...80°С, видаленням твердої частини, фасуванням отриманої рідини в скляну тару, закриванням гумовими корками, герметизацією металевими ковпачками та піддаванням автоклавуванню при температурі 120...130 °С, згідно з винаходом біологічно активну речовину виготовляють із вмісту тканин і рідин фетальної частини плаценти, узятої від клінічно здорових ссавців з нормальним перебігом вагітності, безпосередньо протягом 24 годин після народження плода, а автоклавування проводять протягом 1...90 хвилин. При цьому, отримання препарату для корекції статевого циклу ссавців може бути здійснено із біологічно активної речовини із тканин матки, узятих від ссавців, шляхом витримування їх протягом 5 діб при температурі 5°С з наступним промиванням водою при температурі 40°С, подрібненням та перемішуванням з поступовим додаванням 2 вагових частин стерильного розбавлювача на 1 частину тканин матки, вистоюванням протягом 2 годин при температурі 20°С, витримуванням протягом 30 хвилин на водяному огрівнику при температурі 70°С, видаленням твердої частини, фасуванням отриманої рідини в скляну тару, закриванням гумовими корками, герметизацією металевими ковпачками та піддаванням автоклавуванню протягом 60 хвилин при температурі 120°С, при цьому біологічно активну речовину виготовляють із вмісту тканин і рідин фетальної частини плаценти, узятої від клінічно здорових ссавців з нормальним перебігом вагітності, безпосередньо протягом 1 години після народження плода. Крім того, біологічно активна речовина може бути виготовлена із вмісту тканин і рідин фетальної частини плаценти, узятої від клінічно здорових кобил, корів або овець. Виготовлення біологічно активної речовини із вмісту тканин і рідин фетальної частини плаценти, узятої від клінічно здорових ссавців з нормальним перебігом вагітності, безпосередньо протягом 24 годин після народження плода, дає можливість отримати похідний матеріал практично від кожної тільної тварини, що розширює базу похідного матеріалу, знижує собівартість препарату з одночасним підвищенням його терапевтичної ефективності. Проведення автоклавування протягом 1...90 хвилин дає можливість провести термічну обробку отриманого матеріалу, який розфасований у різну тару (від 2 мл до 400 мл), що дозволить використовувати препарат для різних видів ссавців, дозволяє більш ефективно використовувати препарат, знижує собівартість одної дози препарату з одночасним підвищенням його терапевтичної ефективності. Застосування пропонованого способу отримання ветеринарного препарату для корекції статевого циклу свійських тварин дозволяє забезпечити наступний технічний результат: - розширюється база похідного матеріалу для виробництва препарату; 5 - збільшується вміст мікро- і макроелементів в отриманому препараті; - при введенні препарату в організмі тварин краще активізуються і стимулюються обмінні процеси. Крім того: - зменшується собівартість виробництва препарату; - при відборі сировини для виробництва препарату враховуються біоетичні міркування У тварин також досягається: - корекція обміну речовин і біохімічного складу крові; - скорочення тривалості усіх стадій родів; - профілактика затримань фетальної частини плаценти; - стимуляція і прискорення інволюції матки та яєчників; - стабілізація і синхронізація статевих циклів; - повноцінний прояв першого статевого циклу після отелення протягом першого місяця; - відсутність абортагенної дії. Ветеринарний препарат для корекції статевого циклу свійських тварин отримують наступним чином. Відбирають вміст тканин і рідин фетальної частини плаценти, узятої від клінічне здорових ссавців з нормальним перебігом вагітності, безпосередньо протягом 24 годин після народження плода. Далі її витримують протягом 2...8 діб при температурі 2...7°С з наступним промиванням тканин охолодженою до 30...50°С кип'яченою водою, зважують, подрібнюють та додатково ретельно розтирають у гомогенізаторі при поступовому додаванні 1...3 вагових частин стерильного розбавлювача у вигляді 0,9 % розчину натрію хлориду на 1 частину вмісту тканин і рідин фетальної частини плаценти. Виготовлену таким чином масу залишають на 1...4 годин при температурі 15...25°С, потім протягом 20...40 хвилин витримують на водяному огрівнику при температурі 60-80°С. Далі масу фільтрують через 2-3 шари стерильної марлі, фільтрат розливають у ампули по 5-20 мл або флакони по 50-400 мл. Ампули запаюють, а флакони герметично закривають гумовими корками, закатують металевими ковпачками та автоклавують протягом 1...90 хвилин при температурі 120...130°С. Спосіб здійснювали з використанням тканин і рідин фетальної частини плаценти корів, як найбільш поширених в господарствах тварин. Конкретні приклади застосування способу. Приклад 1 - Відібрали вміст тканин і рідин фетальної частини плаценти, узятої від клінічно здорових ссавців з нормальним перебігом вагітності, безпосередньо протягом 1 години після народження плода. Далі її витримують протягом 2 діб при температурі 2°С з наступним промиванням тканин охолодженою до 30°С кип'яченою водою, зважують, подріб 93839 6 нюють та додатково ретельно розтирають у гомогенізаторі при поступовому додаванні 1 вагової частини стерильного розбавлювача у вигляді 0,9 % розчину натрію хлориду на 1 частину вмісту тканин і рідин фетальної частини плаценти. Виготовлену таким чином масу залишили на 1 годину при температурі 15°С, потім протягом 20 хвилин витримали на водяному огрівнику при температурі 60°С. Далі масу профільтрували через 2-3 шари стерильної марлі, фільтрат розлили у флакони по 2 мл. Флакони герметично закрили гумовими корками, закатали металевими ковпачками та стерилізували автоклавуванням протягом 1 хвилини при температурі 120°С. Приклад 2 - Відібрали вміст тканин і рідин фетальної частини плаценти, узятої від клінічно здорових ссавців з нормальним перебігом вагітності, безпосередньо протягом 1 години після народження плода. Далі її витримують протягом 5 діб при температурі 5°С з наступним промиванням тканин охолодженою до 40°С кип'яченою водою, зважують, подрібнюють та додатково ретельно розтирають у гомогенізаторі при поступовому додаванні 2 вагових частин стерильного розбавлювача у вигляді 0,9% розчину натрію хлориду на 1 частину вмісту тканин і рідин фетальної частини плаценти. Виготовлену таким чином масу залишили на 2 години при температурі 20°С, потім протягом 30 хвилин витримали на водяному огрівнику при температурі 70°С. Далі масу профільтрували через 2-3 шари стерильної марлі, фільтрат розлили у флакони по 50 мл. Флакони герметично закрили гумовими корками, закатали металевими ковпачками та стерилізували автоклавуванням протягом 60 хвилин при температурі 125°С. Приклад 3 - Відібрали вміст тканин і рідин фетальної частини плаценти, узятої від клінічно здорових ссавців з нормальним перебігом вагітності, безпосередньо протягом 1 години після народження плода. Далі її витримують протягом 8 діб при температурі 7°С з наступним промиванням тканин охолодженою до 50°С кип'яченою водою, зважують, подрібнюють та додатково ретельно розтирають у гомогенізаторі при поступовому додаванні 3 вагових частин стерильного розбавлювача у вигляді 0,9% розчину натрію хлориду на 1 частину вмісту тканин і рідин фетальної частини плаценти. Виготовлену таким чином масу залишили на 4 години при температурі 25°С, потім протягом 30 хвилин витримали на водяному огрівнику при температурі 80°С. Далі масу профільтрували через 2-3 шари стерильної марлі, фільтрат розлили у флакони по 400 мл. Флакони герметично закрили гумовими корками, закатали металевими ковпачками та стерилізували автоклавуванням протягом 90 хвилин при температурі 130°С. Результати зведені в таблицю 1. 7 93839 8 Таблиця Найменування показників, відповідно до Од, ви- Прик- Пока Вплив, який здійснює показник на отримання кінцевотехнологічного циклу міру лад зник го продукту Термін витримування тканин матки в повГраничний термін, менше якого - низький вміст дію1 2 ному обсязі при температурі 2...7°С чих речовин Оптимальний вміст діючих речовин при найменших доба 2 5 витратах Граничний термін, більше якого - невиправдано низь3 8 кий вміст діючих речовин Температура витримування вмісту тканин і Гранична температура, менше якої - низький вміст 1 2 рідин фетальної частини плаценти або відсутність діючих речовин °С 2 5 Найбільш оптимальний вміст діючих речовин Гранична температура, більше якої - наявне мікробі3 7 ологічне псування матеріалу Температура промивки кип'яченою водою Гранична температура, менше якої не екстрагуються 1 30 вмісту тканин і рідин фетальної частини жири плаценти перед подрібненням Найбільш оптимальна температура, при якій в достатній мірі тканини відмиваються від механічних забру2 40 °С днень, жирів при збереження біологічно активних речовин у тканинах Гранична температура, більше якої розпочинається 3 50 надмірна екстракція біологічно активних речовин у промивній воді Співвідношення тканин і рідин фетальної Граничне співвідношення, менше якого неповна ексчастини плаценти дрібнодиспергованих і тракція діючих речовин із сировини та надмірна в'яз1 1:1 натрію хлориду 0,9% стерильного розчину кість отриманої рідини, що погіршує введення препарату через голку для ін'єкцій Вагові Найбільш оптимальне співвідношення, при якому частини 2 1:2 достатня екстракція, найкращий терапевтичний ефект, можливість проведення ін'єкції Граничне співвідношення, більше якого настає погір3 1:3 шення терапевтичного ефекту Термін попереднього витримування виготоГраничний термін, менше якого - недостатня екстрак1 1 вленої маси ція 2 2 Найбільш оптимальна екстракція годин Граничний термін, більше якого - невиправдані ви3 4 трати часу і збільшення контамінації мікроорганізмами Гранична температура, менше якої - недостатня екс1 15 тракція Температура попереднього витримування °С 2 20 Найбільш оптимальна температура екстракції виготовленої маси Гранична температура, більше якої невиправдані 3 25 витрати енергії і мікробіологічне псування Граничний термін, менше якого - недостатній час для 1 20 розчинення і екстракція діючих речовин Найбільш оптимальний час для розчинення і екстраТермін витримування виготовленої маси на 2 30 хвилин кція діючих речовин водяному огрівнику Граничний термін, більше якого - невиправдано дов3 40 гий час для розчинення і екстракція діючих речовин при надмірних витратах праці та енергії Гранична температура, менше якої недостатнє роз1 60 чинення і екстракція діючих речовин Найбільш оптимальна температура для розчинення і Температура витримування виготовленої 2 70 °С екстракції діючих речовин маси на водяному огрівнику Гранична температура, більше якої - високий ступінь 3 80 коагуляції білка, що перешкоджає екстракції діючих речовин при надмірній енерговитрати Граничний термін, менше якого недостатня стериль1 1 ність Термін автоклавування розфасованого фіНайбільш оптимальний термін для розчинення і екстхвилин 2 60 льтрата ракції діючих речовин Граничний термін, більше якого інактивація діючих 3 90 речовин при надмірних енерговитратах Гранична температура, менше якої недостатня сте1 120 рильність Температура автоклавування розфасоваНайбільш оптимальна температура для підтримання °С ного фільтрата 2 125 достатньої стерильності при оптимальних енерговитратах 3 130 Гранична температура, більше якої - надмірні енер 9 93839 10 говитрати 11 93839 У прикладі 1 отриманий препарат для корекції статевого циклу ссавців з допустимим вмістом діючих речовин. Випробування препарату показали позитивний його вплив на організм тварин, його задовільну терапевтичну ефективність для стимуляції і синхронізації статевого циклу, корекції перебігу вагітності, лікування акушерських і гінекологічних захворювань, профілактики неплідності. У прикладі 2 отриманий препарат для корекції статевого циклу ссавців з оптимальним вмістом діючих речовин. Випробування препарату показали його добру терапевтичну ефективність у тварин для стимуляції і синхронізації статевого циклу, корекції перебігу вагітності, лікування акушерських і гінекологічних захворювань, профілактики неплідності. Комп’ютерна верстка В. Мацело 12 У прикладі 3 отриманий препарат для корекції статевого циклу ссавців з достатнім вмістом діючих речовин. Випробування препарату показали його достатню терапевтичну ефективність у тварин для стимуляції і синхронізації статевого циклу, корекції перебігу вагітності, лікування акушерських і гінекологічних захворювань, профілактики неплідності. Однак економічна ефективність процесу його отримання менша, ніж в прикладу 2 за рахунок збільшення втрат біологічно активних речовин при промиванні сировини, погіршення терапевтичного ефекту за рахунок надмірного розбавлення, а також збільшення часу і витрат на його виробництво. Підписне Тираж 23 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601