Застосування 3, 5, 7, 3′, 4′-пентаоксифлавону для підсилення біологічної дії свинцю

Застосування 3, 5, 7, 3', 4'-пентаоксифлавону як речовини, яка підсилює біологічну дію свинцю, у дозі 10 мг/кг маси тіла щура. (19) (21) u200607965 (22) 17.07.2006 (24) 15.12.2006 (46) 15.12.2006, Бюл. № 12, 2006 р. (72) Стежка Василь Ананійович, Леоненко Ольга Борніславівна, Покровська Тетяна Миколаївна, Діденко Марія Миколаївна, Білько Тамара Олександрівна, Зінченко Віктор Миколайович, Андрусіши 3 19632 4 антитоксичної функції печінки [10]. потребують застосування лікарських засобів з анДля реалізації корисної моделі досліджували тиоксидантним типом фармакологічної дії. Викоривплив ПОФ на токсикокінетику і токсикодинаміку стання ПОФ для детоксикації організму від надсвинцю у організмі щурів при моделюванні субхлишкового накопичення Pb2+ при СІ пов'язане з ронічної свинцевої інтоксикації (СІ). Три дослідні наявністю у нього здатності до хелатування важгрупи щурів - самців лінії "Вістар" масою 150-200г ких металів та антиоксидантним типом фармакона протязі 6-ти тижнів отримували: перша - внутлогічної дії. рішньошлунково ПОФ у дозі 10мг/кг; друга - внутЩоденне внутрішньошлункове введення ПОФ рішньоочеревинно водний розчин ацетату свинцю щурам, у яких моделювалася СІ, у дозі 10мг/кг (Рb2+) у дозі 1/100 LD50 (2.5мг/кг); третя - одночасмаси супроводжувалося впливом на токсикокінено Рb2+ та ПОФ у цих же дозах. Контрольні щурі не тику Рb2+ (таблиця 1). Найбільш значимі ефекти 2+ отримували Рb та ПОФ. Через 1, 2, 6 тижнів осспостерігалися через 1 та 2 тижні основної частиновної частини експерименту та через 6 тижнів ни експерименту. Застосування ПОФ призводило відновного періоду у біологічних субстратах щурів до зниженням накопичення Pb2+ у крові в обидва 2+ визначали вміст Рb У ці ж терміни проводили зазначені терміни експерименту при відсутності морфологічні, біохімічні та імунологічні дослівпливу на інтенсивність цього процесу у тканині дження. печінки, селезінки, мозку і збільшенні його накопиЩоденне внутрішньоочеревинне введення чення у нирках та кістковій тканині (1-й тиждень) та 1/100 LD50 ацетату свинцю щурам на протязі 6 до зниження накопичення в тканині печінки, мозку і тижнів супроводжувалося значним накопиченням нирках і до збільшення накопичення у кістковій Рb2+ у крові (приріст в динаміці експерименту четканині (2-й тиждень). рез 1 тиждень - у 4.1, через 2 тижні - у 9.1, через 6 У контрольних щурів, які отримували ПОФ у тижнів - у 6.7 разів), тканині печінки (відповідно, у аналогічній дозі, в динаміці основної частини екс4.9, 7.8, 8.3 разів), тканині селезінки (відповідно, у перименту (1-6 тижнів) та після відновного періоду 3.4, 5.6, 6.5 разів), тканині нирок (відповідно, у 3.9, (6 тижнів) він не впливав на процес депонування 15.6, 17.6 разів), кістковій тканині (відповідно, у Рb2+ який надходив до їхнього організму природнім 2+ 2.6, 4.1, 8.6 разів). У тканині мозку щурів Рb нашляхом з повітря, води і харчів, у кістковій тканині копичувався менш інтенсивно - його вміст через (таблиця 1). Через 1 тиждень його застосування у тиждень експерименту збільшувався на 80.0%, цій групі тварин, відмічалося зниження вмісту Рb2+ через 2 та 6 тижнів, відповідно, у 3.3 та 3.0 рази у у тканині печінки та накопичення у мозкові і нирпорівнянні з контрольною групою тварин (табликах. Через 2 тижні експерименту під впливом ПОФ ця 1). спостерігалася тенденція до накопичення Рb2+ у 2+ Матеріальна кумуляція Рb у організмі щурів мозкові. А через 6 тижнів достовірне зниження під супроводжувалася порушеннями стану біохімічновпливом ПОФ вмісту Pb2+ у крові щурів цієї групи го, імунного гомеостазу і морфологічної структури призводило до збільшення його накопичення у тканини печінки, нирок, наднирникових залоз та печінці, селезінці та нирках. Тобто, зниження під лімфоїдних органів (тимус, селезінка, брижові лівпливом ПОФ вмісту Рb2+ у тканині печінки контмфатичні вузли), які характеризували особливості рольних щурів призводило до посилення його вийого токсикодинаміки з наростанням апоптозу кліведення через нирки та до депонування у мозкові, тин у печінці та селезінці (таблиці 3-8). Окрім цьотоді як зниження вмісту Рb2+ у крові супроводжуго, у щурів цієї групи через 2 тижні основної частивалося інтенсифікацією його накопичення у печінни експерименту спостерігалося збільшення ці, селезінці та нирках. відносної маси нирок та тимусу. Встановлена наявність динамічних відхилень у Після відновного періоду на протязі 6 тижнів, вмістові кальцію у біологічних субстратах щурів, під час якого щурі не отримували Pb2+, спостерігаякі зазнавали СІ: через 1 тиждень спостерігалося лося суттєве природне очищення організму від його накопичення у крові; через 2 та 6 тижнів - іннього. Рівень Рb2+ у крові знижувався у порівнянні тенсивне накопичення в мозкові та зниження вмісз 6-тим тижнем СІ до 2.8 разів, в тканинах печінки ту у кістковій тканині (таблиця 2). Накопичення до 3.1 разів, селезінки - до 2.3 разів, нирок - до 6.4 кальцію у крові і тканині мозку та зменшення його разів вище від контролю. Тоді як у тканині мозку вмісту у кістковій тканині зберігалося у щурів цієї (до 2.8 разів) і кістковій тканині (до 8.6 разів вище групи і після відновного періоду. Вплив ПОФ на від контролю) вміст свинцю зберігався відносно вміст кальцію у біологічних субстратах щурів в стабільним, що вказувало на його стійке депонудинаміці моделювання СІ проявлявся у: його знивання у цих біосубстратах. женні в крові до рівня контролю через 1 тиждень При цьому у плазмі (таблиця 4) і сироватці експерименту та накопиченні у тканині мозку; накрові (таблиця 6) та тканині печінки (таблиці 5, 6) копиченні у печінці, нирках і мозкові через 2 тижні; щурів зі СІ виявлено типовий вплив Рb2+ на активзниженні вмісту у крові, селезінці і нирках та тенність системи вільнорадикального перекисного денції до нормалізації у тканині мозку і накопиченокислення ліпідів (ВРПОЛ), який характеризувався ні у кістковій тканині через 6 тижнів основного експрооксидантною спрямованістю. Через 6 тижнів перименту; накопиченні у крові, мозкові та основної частини експерименту у щурів формувазниженні у кістковій тканині після відновного перілася антиоксидантна недостатність зі значною оду. Біологічний ефект ПОФ після внутрішньошлуактивацією системи ВРПОЛ після відновного перінкового введення контрольним щурам відносно оду. зміни вмісту кальцію у тканині мозку, кістковій ткаВиявлені порушення активності системи нині і нирках був аналогічним такому, який спостеВРПОЛ у плазмі крові та тканині печінки щурів зі СІ рігався при його введенні тваринам на фоні свин 5 19632 6 цевої інтоксикації. В обох групах відбувалося інтего періоду (таблиця 7). Останнє також засвідчувансивне накопичення кальцію у тканині мозку, кістло наявність значного прооксидантного впливу на ках та зниження вмісту у нирках. організм та розгалуження процесу ВРПОЛ. Це буЗастосування ПОФ у групі тварин на фоні моло обумовлене наявністю прооксидантного впливу дельованої СІ, призводило до зниженням маси у ПОФ після внутрішньошлункового його введення тіла. Крім цього, його застосування у контрольних контрольним щурам у аналогічній дозі. Причому, щурів та тварин з модельованою СІ призводило до якщо активність ферментів СОД і ЦП зростала, то більш значних змін відносної маси таких органів як КТ пригнічувалася. Сам ПОФ не впливав на активпечінка, селезінка, нирки, тимус та наднирникові ність ферменту КТ. залози, ніж ізольоване введення тваринам Рb2+ Прооксидантний ефект ПОФ після його вве(таблиця 3). При цьому у групі тварин, у яких ПОФ дення контрольним щурам у певній частині може застосовувався в динаміці моделювання СІ, збібути пов'язаний з мобілізацією ендогенного Рb2+ з льшення відносної маси тимусу свідчило за актийого депо в організмі і реалізацією ним своєї біовацію імунної системи, тоді як збільшення віднослогічної дії. На користь цього свідчило зниження ної маси наднирників - за наявність значного гематокріту та зростання вмісту еритроцитарного стресорного впливу на організм. протопорфіріну, як специфічних ознак біологічної Результати дослідження впливу ПОФ на токдії Рb2+ (таблиця 7). Тоді як введення ПОФ щурам сикокінетику Рb2+ у контрольних щурів і у щурів зі зі СІ підсилювало токсичний вплив Рb2+, який надСІ та на вміст кальцію у біологічних субстратах ходив до організму щурів щоденно екзогенне у співставлені з його токсикодинамічними ефектами дозі 1/100 LD50. у цих групах тварин. Застосування ПОФ у контрольних щурів та у Внутрішньошлункове введення щурам ПОФ щурів зі СІ, також як і ізольоване введення щурам при моделюванні у них СІ викликало вогнищеві Pb2+, призводило до розвитку анемії, яка проявляморфологічні порушення в тканинах печінки та лася зниженням абсолютного вмісту еритроцитів нирок, які були відсутні, або менше виражені у та гемоглобіну у крові, лейкоцитозу та помірної тварин зі СІ. відносної еозинофілії. Введення ПОФ щурам зі СІ не зменшувало, а, Введення ПОФ контрольним та дослідним щунавпаки, підсилювало прооксидантний токсикодирам у ранні строки СІ (1 тиждень) викликало різке намічний вплив Рb2+ на систему ВРПОЛ у плазмі зниження відносного вмісту у крові активних фагокрові за показниками її Fe2+ - індукованої хемілюцитів, що було характернішим і для дії Рb2+ удозі мінесценції, що проявлялося через 6 тижнів осно1/100 LD50 (таблиця 8). В динаміці введення ПОФ вної частини експерименту більш суттєвим збільконтрольним щурам він до 6 тижнів володів аналошенням вмісту гідроперекисів ліпідів гічним ефектом. Після відновного періоду у порів(46.0±3.9)імп/с), інтенсивності перебігу перекислонянні з контролем, навпаки, спостерігалося достого окислення ліпідів (74.0±6.0)імп/с), швидкості вірне збільшення відносної кількості активних фагоцитів у крові щурів всіх трьох груп. Введення окислення ліпідів (27.6 2.6)0), накопиченням переконтрольним щурам ПОФ пригнічувало поглиналькисних продуктів вільнорадикальних реакцій ну здатність фагоцитів через 2 тижні основної час(24920±2726)імп/хв) та зниженням резистентності тини експерименту і стимулювало її після відновліпідів до переокислення (22777±2847)імп/хв) внаного періоду, тоді як його введення щурам у слідок антиоксидантної недостатності (скорочення динаміці моделювання СІ викликало пригнічуючий t2 до 219.0±9.0с) (таблиця 4). Цей ефект зберігався ефект (як і Рb2+) раніше - уже через 1 тиждень. у плазмі крові щурів і після відновного періоду. За ПОФ активував окисно-відновні процеси у фагоцирезультатами хемілюмінесцентних досліджень тах крові через 1 тиждень експерименту і пригнічувиявлялося суттєве зростання мембранопошковав їх через 2 і 6 тижнів та після відновного періоджуючої дії Рb2+ на гепатоцити як у динаміці осноду (НСТ-тест, спонтанний і активований). вної частини експерименту, так і після відновного Введення препарату щурам у динаміці СІ супровоперіоду (таблиця 5). При цьому спостерігалося джувалося аналогічними ефектами через 6 тижнів розгалуженням процесу ВРПОЛ у тканині печінки основної частини експерименту та після відновнота еритроцитах (таблиця 6). Зокрема, через 2 і 6 го періоду. При цьому після введення ПОФ конттижнів експерименту у тканині печінки суттєво зророльним щурам і щурам зі СІ функціональностав вміст кінцевих продуктів процесу перекисного метаболічні резерви фагоцитів (різниця між НСТокислення ліпідів - ТБКАС, які утворювалися за тестом активованим і спонтанним) в динаміці осспонтанним шляхом (відповідно новної частини експерименту значно знижувалися. (109.0 7.6)нмоль/г год та (125.0±9.2)нмоль/г год). Введення ПОФ контрольним щурам і щурам зі СІ в В еритроцитах крові аналогічний ефект (підвищендинаміці основного експерименту та після відновня вмісту ТБКАС) реєструвався через 1 тиждень ного періоду супроводжувалося реалізацією одноексперименту та після відновного періоду (відповіспрямованого пригнічуючого впливу на активність дно (48.2±7.0)мкмоль/л і (59.9±1.6)мкмоль/л). Цей комплементу у сироватці крові. Це поєднувалося з ефект був характерним і для самого ПОФ після суттєвим накопиченням у сироватці крові щурів його введення контрольним щурам. цих груп високо- та низькомолекулярних циркулюАктивація системи ВРПОЛ після введення ючих імунних комплексів (ЦІК). ПОФ контрольним щурам і щурам у динаміці моОтже, результати проведених хіміко - аналітиделювання СІ супроводжувалося чіткими змінами чних, морфологічних, біохімічних, гематологічних і активності ферментів антирадикальної (СОД), анімунологічних досліджень у щурів з модельованою типерекисної (КТ) та антиоксидантної (ЦП) ланок СІ і контрольних щурів засвідчують наявність у захисту організму, які зберігалися і після відновно 7 19632 8 ПОФ при його внутрішньошлунковому введенні у кой профилактики свинцовой интоксикации (эксдозі 10мг/кг маси значного прооксидантного вплипериментальное исследование) // Мед. труда и ву з наростанням пошкоджуючого впливу ендогенпром. экология. - 2000. - №3. - С.40-43. не депонованого Рb2+ і Рb2+, який щоденно надхо4. Кушнева B.C., Колтунова И.Г. Пектины раздив до організму у вигляді ацетату у дозі 1/100 личной степени этерификации и пектинсодержаLD50. Останнє є суттєвою перепоною для застосущий препарат «Медетопект» как факторы, способвання ПОФ у цій дозі для детоксикації організму ствующие элиминации свинца из организма від свинцю, оскільки являє загрозу для здоров'я. (экспериментальные исследования) // Мед. труда Джерела інформації: и пром. экология. - 1997. - №7. - С.27-31. 1. Meredith T.J. Haines J.A., Berget J.C. 5. Патент України №13943, публ. Бюл. №4, IPCS/CEC evaluation of clinical efficacy of chelating 2006р. agents used in the treatment of poisoning // 3-rd Int. 6. Патент Російської Федерації №2035460, Symp. "Chelat. Agents Pharmacol. Toxicol. and пуб.1995.05.20. Ther." Plzen. Lek. Sb. - 1990. Suppl. 62. - P.13-15. 7. Патент Російської Федерації №2107066, 2. Tandon S.K., Krashru D.N. Chelation in metal пуб.1998.03.20 intoxication. XXXVI. Effect of substituted piperasine 8. Патент Російської Федерації №2182906, ditiocarbamates in lead - exposed rats // Acta пуб.2002.05.27. Pharmacol. Sin. - 1991. - Vol.12. - №5. - P.391-394. 9. Патент Російської Федерації №2182907, 3. Дегтярева Т.Д., Кацнельсон Б.А., Привалова пуб.2002.05.27. Л.И., Вереснева О.Ю., Конышева Л.К., Демченко 10. Патент України №23303, Бюл. №4, 2002р П.И. Оценка эффективности средств биологичесТаблиця 1 Вміст катіонів свинцю у біологічних субстратах щурів в динаміці експерименту (М±m) Кров, Печінка, мг/л мкг/г 0,30±0,03 0,71±0,02 0,25±0,02 0,59±0,04* 1 тиждень 1,22±0,12*а 3,49 0,47* 0,84±0,07*а 3,42±0,39* 0,25±0,04 0,64±0,02 0,29±0,03 0,65±0,04 2 тижні 2,28±0,55*а 4,98±0,29* 1,43±0,28*а 4,22±0,34*а 0,34±0,02 0,60±0,03 0,26±0,03* 0,85±0,10* 6 тижнів 2,28±0,20* 4,99±0,43* 2,19±0,59* 5,99±0,43* 0,25±0,01 0,62±0,05 0,27±0,02 0,63±0,11 Відновл. період 0,71±0,02* 1,90±0,12* 0,69±0,03* 1,62±0,13* Група тварин Контроль ПОФ СІ СІ+ПОФ Контроль ПОФ СІ СІ+ПОФ Контроль ПОФ СІ СІ+ПОФ Контроль ПОФ СІ СІ+ПОФ Селезінка, мкг/г 1,51±0,13 1,37±0,12 5,19±1,29* 5,97±0,99* 1,0±0,19 0,81±0,19 5,57±0,24* 5,23±0,61* 1,28±0,09 1,63±0,10* 8,36±0,92* 9,94±1,37* 1,02±0,28 0,88±0,11 2,38±0,47З* 1,98±0,58* Мозок, мкг/г 1,30±0,19 2,08±0,33* 2,33±0,28* 2,85±0,32* 1,03±0,18 1,43±0,15 3,42±0,41* 2,27±0,21*а 0,97±0,09 1,02+0,08 2,89±0,20* 2,51±0,21* 0,60±0,09 0,67±0,03 1,69±0,25*а 1,30±0,11*а Нирки, мкг/г 2,78±0,26 4,24±0,78* 10,64±0,49* 13,48±1,65*а 1,43±0,21 1,36±0,22 22,33±3,58*а 8,47±0,21*a 2,08±0,31 1,21±0,20* 36,57±8,92*а 28,54±2,20*а 1,0±0,17 0,80±0,19 6,39±0,70* 8,18±1,01* Кістки, мкг/г 14,68±0,82 13,04±0,88 37,44±1,43* 41,26±1,46*а 13,95±0,65 13,98±0,42 57,24±4,44*а 70,22±4,40*а 17,62±0,48 19,30±1,13 151,34±6,03*а 201,40±3,05*а 20,42±0,76 18,90±0,31 176,55±3,24*а 152,20±4,14*а Примітка: у цій та інших таблицях позначено: * - статистично вірогідну різницю (р