Спосіб одержання вакцини проти сказу тварин рабівак “хтт”

Корисна модель відноситься до ветеринарної вірусології, зокрема до нової живої вакцини, що використовується проти сказу диких тварин. За найближчий аналог обраний спосіб виготовлення вакцини проти сказу, який включає виготовлення посівного матеріалу з штаму вірусу сказу "Щелково-51", інфікування посівним матеріалом культури прещеплюваних клітин ВНК-21, культивування вірусу сказу, збір вірусоутримуючої рідини, інактивацію вірусу з наступним виготовленням продукту у рідкій або ліофілізованої формі. Первісно репродукований вірус піддають термообробці. (Патент Росії №2 191 600. публ. 27.10.2002) Недоліком способу виготовлення і профілактики тварин проти сказу є те, що вакцину яка, виготовляється зі штаму "Щелково-51 " неможливо використовувати для диких тварин. Завданням цієї корисної моделі є розробка способу виготовлення високоімуногенної вакцини яка була б придатна для профілактики захворювань на сказ тварин, зокрема, диких при парентеральному введенні. Поставлене завдання досягається тим, що в способі одержання вакцини проти сказу тварин, включаючи приготування посівного матеріалу зі штаму вірусу, інфікування посівним матеріалом культури перещеплюваних клітин ВНК-21, культивування вірусу сказу, збір вірусуутримуючої рідини, згідно корисної моделі, посівний матеріал приготовляють зі штаму Rabdoviridae "НФ-2", а для інфікування посівним матеріалом також використовують культур у перевіваємих клітин ВНК-21/13 або НС (нирка сайги), або КФ (курині фібробласти), після збору вірусоутримуючої рідини доводять кількість вірусу в вакцині до 4,5 1g ЛД 50/см 3 методом титрування. Після цього, у вір усоутримуючу рідину додають яблучний пектин у кількості 2% та 0,015%% гентаміцину. Вибір цього виду штаму Rabdoviridae "HФ-2" обумовлено його високою імуногенною активністю, стабільними морфологічними та культуральними властивостями. Додавання до вірусоутримуючої сировини яблучного пектину дозволяє зберегти у шлунку тварин на протязі деякого часу вірус з усіма притаманними йому властивостями. Використання всіх істотних ознак, включаючи відмінні, дозволить отримати вакцину з імуногенними властивостями для профілактики сказу тварин, зокрема диких. Приклад. Вакцину готують наступним чином: Для приготування вакцини використовують культур у перещеплюваних клітин ВНК-21, або ВНК-21/13, або КФ, або НС, яку отримують ройлерним способом у вигляді кругового моношару у бутлях. У якості ростового середовища використовують середовище на основі середовища Ігла (45%), середовища 199 (45%) і гемогідролізат 10%. Через 2-3 доби культивування проводять заміну живильного середовища, а через 144 години заморожують при мінус 30-40°С на 24 години. Потім перевіряють на бактеріологічну і мікологічну забрудненість. Інфекційну активність виробничого вірусу визначають на білих мишах. Виробничим штамом "НФ-2" заражають у мозок овець, попередньо пропасажувавши його у культурах клітин ВНК-21, або ВНК-21/13, або КФ, або НС. Зараження овець проводять в об’ємі 0,5мг, титр 5,0 1g ЛД 50/0,03см 3. Титр 10% мозкової тканини повинен бути не нижче 5,1 ЛД 50/см 3. Зараження матраців, бутлів з добре сформованим моношаром проводять посівним вірусом (10% суспензії мозку адаптованої трьома пасажами до культури клітин ВНК-21, або ВНК-21/13, або КФ, або НС з перевіреним титром). Через 60-90 хвилин контакту вірусу з клітинами додають живильне середовище і культивують при температурі (37±0,5)°С в стаціонарному положенні або ройлерним способом при 10-15об/год. Через 2-3 доби проводять злив вірусу (заміну живильного середовища). Через 20 годин після заморожування відновляють заражену культуру клітин при кімнатній температурі і визначають титр на мишах. Титр повинен бути не нижче 4,5 1g ЛД 50/см 3. Після цього до вірусоутримуючої рідини додають яблучний пектин - 2% і 0,015% гентаміцину і фасують. Використання запропонованого способу отримання вакцини проти сказу дозволяє отримати вакцину яка надійно захищає диких тварин від цієї хвороби.