Спосіб виготовлення вакцини проти стрептококових та/або стафілококових інфекцій у тварин

Спосіб виготовлення вакцини проти стрептококових та/або стафілококових інфекцій у тварин, що включає культивування токсигенних штамів стафілококів у рідкому живильному середовищі, виділення анатоксину та комплексу протективних антигенів та їх детоксикації формаліном, який відрізняється тим, що виділяють комплекс протективних антигенів екстрагуванням у дистильованій воді при 58-60°С протягом 2-х годин, додатково до складу вакцини вводять антигени токсигенних штамів стрептококів, об'єднують антигени, виділені із виробничих штамів стрептококів і стафілококів у співвідношенні 1 1 та вносять ад'ювант Передбачуваний винахід відноситься до ветеринарної мікробіологи і бютехнолопґ, зокрема до способів виготовлення засобів специфічної профілактики стрептококових та/або стафілококових інфекцій у тварин і може бути використаний для імунопрофілактики та імунотерапії захворювань, що зумовлені даними мікроорганізмами Існують способи одержання формолвакцини проти диплококової септицемії телят, ягнят і поросят (Ветеринарные препараты Справочник Под ред Д Ф Осидзе , М 1981) та анатоксин-вакцини проти стафілококоза птахів (Авторское свидетельство СССР №1706631, кл А61А39/085, 1989), які передбачають культивування вакцинних штамів в рідкому живильному середовищі з подальшою інактивацією культур формаліном В ветеринарній практиці широкого застосування набув вакцинний препарат "АСП" - анатоксин стафілококовий полівалентний( Ветеринария, 1995 - №5 - с 53-56) Найбільш близькими за технічним рішенням до об'єкту що заявляється, є спосіб одержання анатоксин-вакцини проти стафілококоза птахів Недоліком вказаних препаратів є те, що за їх допомогою можна індукувати розвиток імунітету до одного із вказаних мікроорганізмів В той же час відомо, що досить часто у тварин виникають захворювання, обумовлені патогенними стрептоко ками та стафілококами у вигляді як моноінфекцій так і мікстінфекцій Прототипом може бути вакцина, виготовлена згідно з А С №1706631 Але з м допомогою не можна забезпечити захист щеплених тварин проти інфекцій стрептококової етіології В основу винаходу, що передбачається, поставлено завдання одержання бівалентної вакцини проти стрептококових і стафілококових інфекцій у тварин Завдання вирішується завдяки тому, що до складу вакцини вводять екзотоксини виробничих штамів бактерій та комплекс протективних антигенів збудників, виділений з башаси виробни чих штамів за допомогою екстрагування в дистильованій воді при 58-60°С протягом 2 годин, інактивацію антигенів формаліном, об'єднання компонентів у співвідношенні 1 1, внесенням в одержану суміш адюванту До складу готової вакцини входять такі компоненти комплексний стрептококовий антиген, комплексний стафілококовий антиген, гідрооксид алюмінію, формалін Приклад 1 Виготовлення вакцини Для виготовлення вакцини використовують штами Streptococcus faecalis та Staphylococcus aureus з токсигенними та/або гемолітичними і адгезивними властивостями Штами вказаних мікроорганізмів висівають в пробірки з бульйоном Хоттінгера, який вміщує 1% глюкози і культивують при О (О ю 5 41546 нах (мишах, морських свинках) Приклад 3 Визначення імуногенності 20-30 мишам (18-20г) вакцину вводять підшкірно в дозі 0,3см дворазово з інтервалом між ІН'ЄКЦІЯМИ 14-21 день Через 2 тижні після останнього введення вакцини мишей заражають інтраперітонеально раніше відтитрованою летальною дозою тридобової бульйонної культури кожного з виробничих штамів Спостереження за зараженими тваринами ведуть протягом 7-10 діб Вакцина вважається імуногенною в тому разі, коли забезпечує захист від інфекції не менше 70% заражених тварин Вакцина може застосовуватися для профілактики захворювань стрептококової і стафілококової етіології в неблагополучних по даним інфекціям господарствах різної форми власності, які спеціалізуються на скотарстві, вівчарстві, свинарстві, коневодстві, КОЗІВНИЦТВІ, хутровому звіроводстві, а також в розплідниках службових порід собак, декоративних порід собак та кішок в віваріумахрозплідниках лабораторних тварин (мишей, щурів, Приклад 2 Визначення стерильності і морських свинок, кролів) В результаті викоринешкідливості стання цього способу можна досягти стійкого блаСтерильність вакцини визначають згідно ГОСгополуччя господарств по захворюванням стрепТу 28085-089 Нешкідливість визначають загальтококової та/або стафілококової етіології ноприйнятими методами на лабораторних твари 57°С протягом 72-74 годин Отриманою матричною культурою засівають ємкості, що вміщують бульйон Хоттінгера з 1% глюкози і культивують при 37°С 72-86 годин Бакмасу ВІДДІЛЯЮТЬ за допомогою центрифугування або сепарації В отриманні супернатанти бульйонних культур (токсинвміщуючий матеріал) вносять 0,3% формаліну і знезаражують при 37-38 °С протягом 10 діб Бакмасу суспензують в дистильованій воді (рН 6,59 6 8) до концентрації 80-100х10 мкр кл /мл і витримують на водяній бані при температурі 58-60"С протягом 2-х годин Після ЧОГО бакмасу ВІДДІЛЯЮТЬ за допомогою центрифугуванням або сепарації, в одержані супернатанти вносять 0,3% формаліну і знезаражують (37-38°С - 10 діб) Після закінчення інактивації всі компоненти перевіряють на стерильність та нешкідливість загальноприйнятими методами Після ЧОГО комплексні стрептококові та стафілококові антигени об'єднують у співвідношенні 1 1 , в суміш вносять 10% гідрооксиду алюмінію та 0,1% формаліну Комп ютерна верстка Т Чепелєва Підписне Тираж 38 прим Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності Львівська площа 8 м Київ МСП 04655 Україна ДП "Український інститут промислової власності", вул І Кудрі 29 м Киів-42, МСП 01601