Штам bovinae herpesvirus-1 “молдавський” для виробництва вакцин та діагностикумів

Винахід відноситься до ветеринарної вірусології і може бути використаний при виготовленні вакцин та діагностикумів проти інфекційного ринотрахеїту великої рогатої худоби (ВРХ). Інфекційний ринотрахеїт - гостро протікаюча, контагіозна хвороба великої рогатої худоби, яка характеризується в основному катарально-некротичним враженням дихального тракту, лихоманкою, загальним пригніченням і кон'юнктивітом, а також розвитком пустульозного вульвовагініту при попаданні вірусу в генітальні органи тварин і абортами. Важливим засобом боротьби проти інфекційного ринотрахеїту, що завдає великі економічні збитки, є вакцинопрофілактика. Відомо, що вакцинний штам інфекційного ринотрахеїту (SCEIUS RUMINANTIUM 4016) входить до складу імунізуючого препарату "Инактивированная вакцина против инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота» (а.с. 980307, Росія А61К39/12 від 07.08.81). Використання цього штаму в біологічній промисловості України неможливе за його відсутністю. Для розробки засобів профілактики інфекційного ринотрахеїту необхідно мати вітчизняні високоімуногенні штами. В основу винаходу, що передбачається, поставлено задачу отримати штам герпес вірусу-1 ВРХ, який є продуцентом протективного та діагностичного антигену для виробництва вакцин та діагностикумів проти інфекційного ринотрахеїту великої рогатої худоби. Штам інфекційного ринотрахеїту великої рогатої худоби "Молдавський" виділено від хворих телят у неблагополучному господарстві. Штам інфекційного ринотрахеїту великої рогатої худоби "Молдавський" депонований та зберігається в Депозитарії Державного науково-контрольного інституту біотехнології і штамів мікроорганізмів, м. Київ, вул. Донецька 30, Україна, під номером 228: сімейство Herpes viridae, рід Alphaherpesviridae, вид Bovinae herpesvirus 1. Штам інфекційного ринотрахеїту великої рогатої худоби "Молдавський" характеризується наступними ознаками та властивостями. Культурально-морфологічні ознаки. Віріони округлої форми, діаметр їх 120-180ммк, усіяні протеїновими капсомерами, які знаходяться в мембрані навколо нуклеїнової кислоти. Нуклеїнова кислота - ДНК двохнитчата, мол. М. 92-102кД. Вірус культивується в первинних та перещеплюваних культурах клітин нирки теляти, нирки вівці, трахеї теляти, легенів ембріону корови, коронарних судин телят, титр вірусу становить 7,0-7,5 lg ТЦД50/мл, ЦПД виявляється через 24 години. Чутливий до жиро розчинників, хлороформу, ефіру, ацетону і спирту. Інактивується при 560С через 20хв., при 0 37 С через 4-10 діб, при 220С - 50 діб. Патогенні властивості. Широко розповсюджений у всіх географічних районах земної кулі, зараження відбувається аерогенним, аліментарним, контактним і половим шляхом. Біологічні властивості. Стабільні. Серологічні властивості. Вірус має гемаглютинуючі властивості, які обумовлені наявністю гемаглютинінів, глікопротеїну g97 на поверхні шипіків віріонів. Аглютинація вірусу проходить з еритроцитами мишей. Головні нейтралізуючі епітопи розташовані на ГА. Антигенні властивості. В організмі теляти утворює віруснейтралізуючі, комплементз'вязуючі, преципітуючі та гемаглютинуючі антитіла. Імуногенні властивості. Парентеральне введення вірусу стимулює вироблення віруснейтралізуючих антитіл, що забезпечує захист тварин при експериментальному зараженні. Біотехнологічні властивості. Стандартні для первинних та перещеплюваних клітинних культур. Основні умови зберігання. Заморожування при температурі нижче 200С, ліофілізація. Підтримання штаму проводять шляхом репродукції на чутливих культурах клітин. Штам проявляє характерні ознаки збудника інфекційного ринотрахеїту. Вірус нешкідливий в інактивованій вакцині. Стабільність властивостей штаму дозволила використовувати його при виробництві вакцин та діагностичних антигенів.