Штам rotavirus bovis “238” для виробництва вакцин та діагностикумів

Винахід відноситься до ветеринарної вірусології і може бути використаний для виробництва вакцин та діагностикумів проти ротавірусної інфекції. Ротавірусна інфекція викликає кишкові розлади - ротавірусний ентерит. Характеризується запаленням слизової оболонки кишкового тракту, у новонароджених телят загальною інтоксикацією і дегідратацією. Результатом може стати гостра виснажлива діарея та обезвожування організму. Збудник - РНК-утримуючий вірус із сімейства Reoviridae роду Rotavirus. Назву одержав від латинського rota колесо, тому що вірусні частини під електронним мікроскопом виглядають як маленькі коліщата із широкою ”маточиною”, 20 короткими ”спицями” і круговим ободком. Містить гемаглютиніни За допомогою РСК ротавіруси розділяються на два антигенних варіанти, а за допомогою реакції нейтралізації - на 4 (а можливо, і більше). Ротавіруси стійкі при кислих значеннях рН до жиророзчинників; на різних об'єктах навколишнього середовища зберігають життєздатність від 10-15 днів до 1 місяця. Важливим засобом боротьби проти ротавірусної інфекції, що завдає великі економічні збитки, є вакцинопрофілактика. Відомо, що штам ротавірусу входить до складу імунізуючого препарату ”Ассоциированная вакцина против рота-, корона-, герпесвирусной и эшерихиозной диареи новорожденных телят” (№2145236, Росія, кл. C12N7/00, А61К39/255 від 1999.04.30). Використання цього штаму в біологічній промисловості України неможливе за його відсутністю. Для розробки засобів профілактики ротавірусної інфекції необхідно мати вітчизняні високоімуногенні штами. В основу винаходу, що передбачається, поставлено задачу отримати штам ротавірусу ВРХ, який є продуцентом протективного та діагностичного антигену для виробництва вакцин та діагностикумів проти ротавірусу великої рогатої худоби IEKFM. Штам ротавірусу великої рогатої худоби ”238” виділено від хворих телят у неблагополучному господарстві. Штам ротавірусу великої рогатої худоби ”238” депонований та зберігається в Депозитарії Державного науково-контрольного інституту біотехнології і штамів мікроорганізмів, м.Київ, вул. Донецька 30, Україна, під номером 231: сімейство Bovine rotavirus, рід Rotavirus, вид Rotavirus bovis. Штам ротавірусу великої рогатої худоби ”238” характеризується наступними ознаками та властивостями. Культурально-морфологічні ознаки. Діаметр віріону становить 60-65нм (ядро - 38 нм в діаметрі), внутрішній шар капсомеру має радіальні відростки, до яких кріпиться зовнішній шар капсомерів. Вірус культивується в первинних та перещеплюваних культурах клітин нирки теляти, нирки вівці, трахеї теляти, легенів ембріону корови, коронарних судин телят в присутності трипсину, ти тр вірусу становить 5,0-5,5lg ТЦП 50/мл) ЦПД виявляється через 3-5 діб. Стійкий до хлороформу, ефіру, фреону та коливань рН від 3 до 10. Зберігається в фекаліях до 9-ти місяців; інактивується формаліном, хлором, двоокисом хлору та монохлораміном. Патогенні властивості. Широко розповсюджений у всі х географічни х районах земної кулі, висока контагіозність, зараження відбувається аліментарним шляхом. Біологічні властивості. Стабільні. Серологічні властивості. Вірус має гемаглютинуючі властивості, які обумовлені наявністю гемаглютинінів на поверхні інтактним віріонів. Гемаглютинація не проходить з віріонами, у яких відсутній зовнішній капсидний шар. Аглютинація вірусу проходить з еритроцитами морської свинки та з еритроцитами 0 групи людини. Антигенні властивості. В організмі теляти утворює віруснейтралізуючі, комплементз'вязуючі і гемаглютинуючі антитіла. Імуногенні властивості. Парентеральне введення вірусу стимулює вироблення віруснейтралізуючих антитіл, що забезпечує захист тварин при експериментальному зараженні. Біотехнологічні властивості. Стандартні для первинних та перещеплюваних клітинних культур. Основні умови зберігання. Заморожування при температурі нижче 20°С, ліофілізація. Підтримання штаму проводять шляхом репродукції на чутливих культурах клітин. Штам проявляє характерні ознаки збудника ротавірусної інфекції. Вірус нешкідливий в інактивованій вакцині. Стабільність властивостей штаму дозволила використовувати його при виробництві вакцин та діагностичних антигенів.