Спосіб фармакокорекції закритої черепно-мозкової травми a-ліпоєвою кислотою

Спосіб фармакокорекції закритої черепномозкової травми, який полягає у внутрішньоочеревинному введенні α-ліпоєвої кислоти в дозі 100 мг/кг 1 раз на добу у вигляді 0,5 % водного розчину через 30 хвилин після нанесення дозованого удару вільнопадаючим вантажем на тім'яну ділянку щура. (19) (21) u200605948 (22) 29.05.2006 (24) 16.10.2006 (46) 16.10.2006, Бюл. № 10, 2006 р. (72) Лук'янчук Віктор Дмитрович, Шевчук Оксана Василівна (73) Лук'янчук Віктор Дмитрович, Шевчук Оксана Василівна 3 18120 контрольну (ЗЧМТ без лікування), референтну (ЗЧМТ+пірацетам) та дослідну (ЗЧМТ+-ліпоєва кислота). При дослідженні енергетичного гомеостазу в якості препарату порівняння (референтний препарат) був використаний ноотропний засіб пірацетам ("Фармак", Україна), який, за даними літератури [4, 6], володіє церебропротекторними властивостями та широко використовується в комплексній терапії ЗЧМТ. Кількісне визначення АТФ, АДФ та АМФ проводили методом тонкошарової хроматографії на пластинах фірми "Merk" (Германия) [3]. На підставі отриманих даних розраховували наступні показники енергетичного обміну: енергетичний заряд (ЕЗ), енергетичний потенціал (ЕП), коефіцієнт порівняння (Кпор), індекс фосфорилювання (ІФ), термодинамічний контроль дихання (ТКД) та ступінь фосфорилювання (СФ) за формулами наведенними в літературі [7]. Концентрацію фосфора неорганічного (Ф) визначали за допомогою наборів "Філісіт Діагностика" (Україна). Показники визначали в динаміці: через 1, 3, 6 діб після застосування лікарського засобу, що пропонується. При проведенні фармакокінетичного аналізу церебропротекторної дії препарату використовували 2 групи тварин: контрольну та дослідну. Фармакокінетичні параметри вивчали в динаміці: через 15, 30, 60 та 80 хвилин (в сироватці крові, головному мозку, печінці, нирках, сальнику, серці та м'язах) в контрольній групі після одноразового внутрішньоочеревинного введення 0,5% розчину -ліпоєвої кислоти в дозі 100мг/кг. Дослідна група тварин одержувала аналогічну дозу цього лікарського засобу через 30 хвилин після моделювання ЗЧМТ. Визначення концентрації препарату проводили за розробленим на нашій кафедрі способом [11]. На підставі отриманих даних розраховували відповідним чином фармакокінетичні параметри, що характеризують процеси: абсорбції - константу 4 швидкості абсорбції (К01), період напівабсорбції (t1/2, ), максимальну концентрацію (Сmax), час досягнення максимальної концентрації (tmax); розподілу - період напіврозподілу (t1/2, ), площу під фармакокінетичною кривою (AUC) та елімінації - константу швидкості елімінації (Кel), період напівелімінації (t1/2), середній час перебування препарату (MRT), загальний кліренс препарату (Сlt) [5]. Статистичну обробку результатів проводили з використанням t-критерію Ст'юдента за програмою "Statgraphics" [1]. Таким чином, критерієм ефективності застосування -ліпоєвої кислоти в умовах ЗЧМТ слугували стан енергетичного гомеостазу, який визначався за рівнем аденілових нуклеотидів в еритроцитах і їх співвідношенню, а також фармакокінетичних параметрів, що характеризують основні етапи проходження (абсорбція, розподіл та елімінація) потенційного церебропротектора в організмі експериментальних тварин. Встановлено (див. табл. 1), що вміст АТФ в умовах введення -ліпоєвої кислоти при патології, що моделюється вже на 1 добу спостереження на 42% вище ніж в контрольної серії, а через 3 та 6 діб експерименту спостерігається підвищення концентрації АТФ до значень, що реєструються в інтактній групі тварин. Крім того, звертає на себе увагу той факт, що в групі тварин, яка отримувала досліджуваний лікарський засіб, рівні АТФ вірогідно перевищують (Р0,05). В той же час вміст АДФ на фоні прийому ліпоєвої кислоти в 1 добу спостереження вірогідно (Р0,05 0,001 0,01 2920,77 52,37 0,001 0,01 2625,50 80,75 0,001 3447,69 37,04 >0,05 0,001 0,001 3022,20 59,60 0,01 0,01 5 18120 6 Продовження таблиці 1 Вплив -ліпоєвої кислоти на рівень аденілових нуклеотидів (мкмоль/л) в еритроцитах щурів в нормі та при ЗЧМТ (n=7) Група щурів Інтактна Контрольна Дослідна Стат. показник М ±m М m Р1 М ±m Р1 Р2 3 Референтна (еталон) Інтактна Контрольна Дослідна Референтна (еталон) М ±m Р1 Р3 М ±m М ±m Р1 М ±m Р1 Р2 Р3 М ±m Р1 Р2 Термін спостереження (доби) 3 1 АДФ 1530,00 67,40 0,001 1640,36 25,81 0,001 >0,05 >0,05 1725,00 60,56 0,001 >0,05 АМФ 1686,30 66,03 0,001 1170,75 51,94 >0,05 0,001 >0,05 1365,49 72,23 0,05 0,05 6 2551,07 56,63 2268,21 32,44 0,01 2376,43 46,74 0,05 >0,05 >0,05 2209,64 55,90 0,01 >0,05 1815,00 62,30 0,001 2127,50 152,36 0,05 >0,05 >0,05 2092,07 74,56 0,01 0,05 1117,20 29,18 2209,20 41,23 0,001 1887,90 49,63 0,001 0,01 0,001 2221,80 22,09 0,001 >0,05 1710,10 49,33 0,001 1094,10 64,74 >0,05 0,001 0,05 1353,45 81,59 0,05 0,05 Примітка: P1 - в порівнянні з інтактною групою; P2 - в порівнянні з контрольною групою; P3 - в порівнянні з референтною групою. Протекторна дія -ліпоєвої кислоти ні в чому не поступається еталону - пірацетаму, про що свідчить відсутність вірогідної різниці (Р>0,05) в значеннях, зареєстрованих в обох групах щурів. Що ж стосується АМФ, то його вміст в дослідній групі тварин на 1 та 6 доби на 30 і 36%, відповідно, нижче аналогічного показника контролю, практично відповідає рівню інтактної серії та вірогідно (Р0,05 >0,05 1,40 1,32 0,06 0,03 0,05 >0,05 >0,05 0,01 Індекс фосфорилювання 0,92 0,03 0,55 0,58 0,03 0,01 0,001 0,001 0,90 0,77 0,04 0,02 >0,05 0,01 0,001 0,001 0,05 0,01 0,78 0,66 0,03 0,01 0,05 1,73 0,12 0,05 >0,05 >0,05 ,46 0,07 >0,05 >0,05 0,75 0,03 0,01 1,12 0,06 0,05 0,001 0,05 0,89 0,04 >0,05 0,05 2474,56 71,06 0,001 9 18120 10 Продовження таблиці 2 Вплив -ліпоєвої кислоти на показники енергетичного обміну (відн. од.) в еритроцитах щурів в нормі та при ЗЧМТ (n=7) Група щурів Терміни спостереження (доби) 1 3 1780,12 2634,47 67,93 129,21 0,05 0,001 >0,05 >0,05 >0,05 >0,05 2013,24 2941,50 98,99 71,17 0,01 0,001 >0,05 0,01 Термодинамічний контроль дихання 2,28 0,07 0,92 1,03 0,08 0,02 0,001 0,001 1,42 1,27 0,06 0,05 0,001 0,001 0,01 0,01 >0,05 0,001 1,29 0,99 0,07 0,002 0,001 0,001 0,05 >0,05 Ступінь фосфорилювання 0,51 0,02 0,60 0,56 0,04 0,02 >0,05 >0,05 0,57 0,49 0,02 0,01 >0,05 >0,05 >0,05 0,05 >0,05 >0,05 0,54 0,50 0,02 0,02 >0,05 >0,05 >0,05 >0,05 Стат. показник Дослідна Референтна (еталон) Інтактна Контрольна Дослідна Референтна (еталон) Інтактна Контрольна Дослідна Референтна (еталон) М ±m Р1 Р2 Р3 М ±m Р1 Р2 М ±m М ±m Р1 М ±m Р1 Р2 Р3 М ±m Р1 Р2 М ±m М ±m Р1 М ±m Р1 Р2 Р3 М ±m Р1 Р2 6 1881,99 152,64 0,05 0,05 >0,05 1955,73 98,74 0,01 0,01 1,06 0,03 0,001 1,90 0,15 >0,05 0,001 >0,05 1,57 0,09 0,001 0,01 0,66 0,03 0,01 0,52 0,03 >0,05 0,05 >0,05 0,48 0,03 >0,05 0,05 Примітка: див. табл. 1. При дослідженні такого необхідного компонента процесу окисного фосфорилювання як Фн (див. табл. 3) при патології головного мозку, встановлена здатність -ліпоєвої кислоти вірогідно (Р0,05 0,001 0,001 Р2 0,001 0,001 0,001 Р3 >0,05 0,05 М 2,60 2,68 3,05 ±m 0,05 0,04 0,08 Референтна (еталон) Р1 >0,05 >0,05