Знезаражувальна композиція

Реферат: Винахід належить до композиції на основі н-октодецилдиметил(3-триметоксисиліл)пропіл амонію хлориду, бензалконію хлориду та ізопропілового спирту. Композиція призначена для застосування як засіб для дезінфекції, засіб для стерилізації, виявляє антивірусні, бактерицидні, спороцидні та фунгіцидні властивості. UA 104166 C2 (12) UA 104166 C2 UA 104166 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 Представлений винахід належить до якісного та кількісного складу синергетичної композиції на основі н-октодецилдиметил(3-триметоксисиліл)пропіл амонію хлориду, бензалконію хлориду та ізопропілового спирту, способу її одержання та застосування. З рівня техніки відоме окреме застосування кожного з компонентів пропонованої композиції. Так, бензалконію хлорид широко застосовується у цілях дезінфекції, для антисептики та у складі лікарських препаратів (див.http://ru.wikipedia.org/wiki//Бензалкония_хлорид). Він виявляє активність щодо стафілококів, стрептококів, грам-негативних бактерій, анаеробних бактерій, грибів, плісняви. Ізопропіловий спирт знайшов своє застосування у складі дезінфікуючих засобів, побутової хімії, косметиці (див. http://ru.wikipedia.org/wiki/Изопропиловый спирт). Відоме застосування н-октодецилдиметил(3-триметоксисиліл)пропіл амонію хлориду як складового компонента засобу для апретування тканинних та не тканинних текстильних матеріалів проти колонізації домашніми пиловими кліщами (див. ЕА 011471 В1). При аналізі відомих нам документів, не було знайдено джерел інформації, у котрих було б описано композицію, яка містить усі три зазначені вище активні інгредієнти та має синергетичний ефект. При розробці заявленого технічного рішення в основу була поставлена задача розробки раціонального складу такої нової композиції, на основі н-октодецилдиметил(3триметоксисиліл)пропіл амонію хлориду, бензалконію хлориду та ізопропілового спирту, з урахуванням властивостей окремих інгредієнтів, яка б мала явно виражений синергетичний ефект за рахунок певного як якісного, так і кількісного складу її компонентів. Поставлена задача вирішується за рахунок створення композиції, яка містить ноктодецилдиметил(3-триметоксисиліл)пропіл амонію хлорид, бензалклонію хлорид, ізопропіловий спирт та допоміжні речовини, причому вказані інгредієнти взяті у наступній кількості, мас. %: н-октодецилдиметил(3триметоксисиліл)пропіл амонію хлорид 0,01-4 бензалклонію хлорид 0,01-15 ізопропіловий спирт 1-35 решта до допоміжні речовини 100. Неочікувано було виявлено, що композиція вказаного якісного та кількісного складу має синергетичний ефект та виявляє мийні, дезінфекційні, антивірусні, антибактеріальні, спороцидні та фунгіцидні властивості. Неочікувано було виявлено, що композиція вказаного якісного та кількісного складу має широкий спектр біологічної активності відносно бактерій, грибів та вірусів. Проведені дослідження показали підсилення ефекту дії композиції від сукупності речовин, зокрема активність композиції щодо бактерій, грибів та вірусів, яка містить як активні інгредієнти н-октодецилдиметил(3-триметоксисиліл)пропіл амонію хлориду, бензалклонію хлориду та ізопропіловий спирт у кількостях, пропонованих даним винаходом, є набагато сильнішою, ніж активність кожного окремо взятого інгредієнта композиції. Пропоновану композицію одержують наступним чином. Ефективні кількості активних інгредієнтів н-октодецилдиметил(3-триметоксисиліл)пропіл амонію хлориду, бензалклонію хлориду та ізопропілового спирту змішують, додають допоміжні речовини та фасують у відповідну тару. Як допоміжні речовини можуть бути використані будь-як застосовані у даній галузі знань та відомі середньому спеціалісту речовини як то: носії, ліганди, дезінтегратори, мастила, наповнювачі, стабілізатори, розріджувачі, барвники, ароматизатори, змочувальні агенти та інші наповнювачі, відомі фахівцям. Нижче наведено приклади, які підтверджують можливість одержання пропонованої даним винаходом композиції. Приклад 1. Взяли н-октодецилдиметил(3-триметоксисиліл)пропіл амонію хлориду - 0,01 мас. %, бензалконію хлориду - 0,1 мас. %, ізопропілового спирту - 1 мас. %, суміш перемішали. Взяли ПАР 1 мас. %, воду - до 100 мас. %, додали до суміші активних інгредієнтів, ретельно перемішали. Приклад 2. Взяли н-октодецилдиметил(3-триметоксисиліл)пропіл амонію хлориду - 0,1 мас. %, бензалконію хлориду - 1 мас. %, ізопропілового спирту - 1,4 мас. %, суміш перемішали. Взяли воду - до 100 мас. %, додали до суміші активних інгредієнтів, ретельно перемішали. Приклад 3. Взяли н-октодецилдиметил(3-триметоксисиліл)пропіл амонію хлориду 1 UA 104166 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 - 1 мас. %, бензалконію хлориду - 11 мас. %, ізопропілового спирту - 15 мас. %, суміш перемішали. Взяли ПАР 5 мас. %, воду - до 100 мас. %, додали до суміші активних інгредієнтів, ретельно перемішали. Приклад 4. Взяли н-октодецилдиметил(3-триметоксисиліл)пропіл амонію хлориду - 2 мас. %, бензалконію хлориду - 10 мас. %, ізопропілового спирту - 12 мас. %, суміш перемішали. Взяли ПАР 9 мас. %, воду - до 100 мас. %, додали до суміші активних інгредієнтів, ретельно перемішали. Приклад 5. Взяли н-октодецилдиметил(3-триметоксисиліл)пропіл амонію хлориду - 4 мас. %, бензалконію хлориду - 15 мас. %, ізопропілового спирту - 35 мас. %, суміш перемішали. Взяли ПАР 9 мас. %, воду - до 100 мас. %, додали до суміші активних інгредієнтів, ретельно перемішали. Як ПАР було використано тетраніл, вітадет, н-пропіловий спирт, таед. Зрозуміло, що можна використовувати будь-які інші ПАР. Пропонована даним винаходом композиція має бактерицидні властивості щодо грамнегативних та грампозитивних бактерій (включаючи збудники туберкульозу), віруліцидні (включаючи віруси гепатитів, вірус СНІД/ВІЛ, поліомієліту, віруси грипу, аденовірус), фунгіцидні (включаючи кандидози, дерматофіти, дріжджі) та спороцидні властивості. Нижче наведено дослідження, проведені винахідниками, що підтверджують біологічну активність пропонованої даним винаходом композиції. Антивірусна активність композиції Ефективність віруліцидної активності композиції щодо поліовірусів Вивчення дезінфекційної активності композиції проводили на моделі вакцинного штаму поліовірусу типу 2 (Р 712, ch, 2 ав), який є високорезистентним до дії фізико-хімічних факторів 6 навколишнього середовища. Указаний вірус використовували в робочій концентрації 10 ТДЦ50/ мл та культивували на перещеплювальній культурі клітин НЕр-2. Для визначення віруліцидної активності пропонованої даним винаходом композиції із застосуванням батистових тест-об'єктів, за які використовували шматочки батисту розміром 1×0,5 см. Батистові тест-об'єкти поміщали у стерильну чашку Петрі і заливали рідиною, що 6 містить 10 ТЦД50/мл вакцинного штаму поліовірусу типу 2, з розрахунку 0,1 мл рідини на тестоб'єкт. Через 20 хвилин тест-об'єкти підсушували стерильним фільтрувальним папером у термостаті при 37 °C. Після цього тест-об'єкти використовували у досліді. Тест-об'єкти можуть бути використані у досліді протягом 3 діб, якщо вони зберігаються в холодильнику при -4 °C. Для приготування вірусовмісної рідини клітини культури тканини з повною цитопатичною дією, яка викликана поліовірусом типу 2, з культуральною рідиною переносили у стерильні пробірки, заморожували, а потім відтаювали. Далі центрифугували при 3000 об/хв. протягом 10 хвилин. Надосадову рідину відбирали та використовували у досліді. Перед використанням вірусу у досліді, за методом Ріду-Менча, визначали титр вірусовмісної рідини. При визначенні віруліцидних властивостей композиції готували 0,5 %, 1,0 %, 2,0 % та 4,0 % розчини на дистильованій воді з розрахунку 1,0 мл розчину на кожний тест-об'єкт. У робочі розчини занурювали інфіковані тест-об'єкти з розрахунку 5 штук на кожну експозицію. Через 30, 45, 60 та 90 хвилин діставали по 5 тест-об'єктів, поміщали у пробірку з 5 мл нейтралізатора, використовуючи 2 кратне промивання у стерильний дистильованій воді, потім тест-об'єкти стерильною петлею переносили у пробірку з бусами і розчином Хенкса. Струшували тест-об'єкти протягом 10 хвилин і цією рідиною заражали культуру клітин. Для росту клітини культури використовували середовище 199, середовище Ігла з подвійним набором амінокислот, з додаванням 10 % ембріональної бичачої сироватки і антибіотиків. Як підтримуюче середовище використовували середовище 199, середовище Ігла з подвійним набором амінокислот та з додаванням 2 % ембріональної бичачої сироватки На 4-7 добу відбувалось максимальне накопичення вірусу, яке супроводжувалось цитопатичною дією. При зараженні клітин тканин НЕр-2 вакцинним поліовірусом типу 2, з'являється рівномірна мілкозерниста деструкція клітин з наступним їх відшаруванням. При відсутності специфічних змін у клітинах культури вірус вважають інактивованим. З метою підвищення титру поліовірусу типу 2 здійснювали 3 пасажі на свіжу тканину. До кожного досліду ставили 4 контролі: 1. Контроль на зараженість тест-об'єктів поліовірусами. 2. Контроль зберігання життєздатності поліовірусу. 3. Контроль повноти нейтралізації дезінфектанту. 4. Контроль за клітинами культури тканини. Кожний дослід повторювали не менше 3 разів. 60 2 UA 104166 C2 Таблиця 1 Віруліцидна активність композиції при знезараженні вакцинного поліовірусу типу 2 на батистових тест-об'єктах Повторність досліду 1 2 3 1 2 3 1 2 3 1 2 3 КЗТО КЖВ КПНД ККТ Пасаж 1 2 3 1 2 3 1 2 3 1 2 3 1 2 3 1 2 3 1 2 3 1 2 3 1 2 3 1 2 3 1 2 3 1 2 3 1 2 3 1 2 3 1 2 3 1 2 3 Концентрація (%) 0,5 0,5 0,5 1,0 1,0 1,0 2,0 2,0 2,0 4,0 4,0 4,0 Експозиція (хвилин) 30 #### #### #### #### #### #### #### #### #### #### #### #### #### #### #### #### #### #### #### #### #### #### #### #### #### ####          #### #### #### #### #### ####       45 #### #### #### #### #### #### #### #### #### #### #### #### #### #### #### #### #### #### #### #### #### #### #### #### #### ####          #### #### #### #### #### ####       60 #### #### #### #### #### #### #### #### #### #### #### #### #### #### #### #### ####                   #### #### #### #### #### ####       90 #### #### #### #### #### #### #### #### #### #### #### #### #### #### #### #### ####                   #### #### #### #### #### ####       Примітка: #### наявність цитопатогенної дії поліовірусу  відсутність цитопатогенної дії поліовірусу КЗТО - контроль зараженості тест-об'єктів поліовірусами КЖВ - контроль життєздатності поліовірусів КПНД - контроль повноти нейтралізації дезінфектанту ККТ - контроль культури клітин 5 Таким чином, 2,0 % концентрація за діючими речовинами композиції призводить до інактивації вірусу поліомієліту через 60 хвилин, а 4,0 % концентрація - через 30 хвилин. Ефективність віруліцидної активності композиції щодо вірусу грипу птиці 3 UA 104166 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Визначення віруліцидних властивостей композиції проводили у три етапи. Перший етап визначення віруліцидної активності композиції суспензійним методом. Другий етап - визначення віруліцидної активності композиції на тест-об'єктах. Третій етап - визначення віруліцидної активності композиції на тест-об'єктах з біологічним навантаженням. Як модель для визначення віруліцидних властивостей композиції було використано штам вірусу високопатогенного грипу птиці А/курка/Сиваш/02/05H5N1. Штам зареєстрований в депозитарії Державного науково-контрольного інституту біотехнології та штамів мікроорганізмів за номером 353. Як вірусовмісну рідину використовували екстраембріональну рідину курячих 7,5 3 ембріонів. Інфекційна активність складала 10 ЕІД/0,2см , гемаглютинуюча активність складала 1:256-1:512. Як біологічну систему для індикації вірусу грипу птиці використовували 9-11 - добові курячі ембріони, отримані від курей без антитіл до вірусу грипу птиці. Інкубацію курячих ембріонів після інфікування проводили при температурі +37,0±0,5 °C протягом 4 діб. Овоскопію здійснювали щоденно двічі на день. Облік проводили за загибеллю ембріонів та наявності гемаглютинінів у екстраембріональній рідині, що свідчило про репродукцію вірусу грипу у ембріонах. Загиблі ембріони, а також живі ембріони після 4 діб інкубації поміщали в холодильник при температурі 4-8 °C на 12-18 годин, після чого проводили розтин. Від кожного ембріона відбирали екстраембріональну рідину, яку перевіряли на наявність гемаглютинуючого вірусу в реакції гемаглютинації з 1 % суспензією еритроцитів півня. Постановку реакції гемаглютинації проводили у V-подібних планшетах за загальноприйнятою методикою. Як тест-об'єкти для визначення дезінфікуючих (антивірусних) властивостей пропонованої композиції було використано пластини з нефарбованої деревини, металеві пластини, кахель та бавовняну тканину (розміри 5 × 10 мм). У зв'язку з тим, що як біологічну систему для культивування вірусу грипу птиці були використані курячі ембріони, нами попередньо було вивчено вплив на них робочих розведень трьох зразків пропонованої композиції. Для цього готували робочі розведення композиції кінцевою концентрацією 0,1; 0,2; 0,5; 1; 2; 5 та 8 %. Для розведення використовували стерильну воду. Робочі розведення препарату у композиції вводили в алантоїсну порожнину 9-11 добових курячих ембріонів в дозі 3 0,2 см . Після введення за ембріонами було встановлено спостереження. Як контроль курячим ембріонам вводили стерильну воду. Протягом усього терміну спостереження (4 доби) ембріотоксична дія композиції на курячі ембріони була виявлена в кінцевих концентраціях 1, 2, 5 та 8 %. В дослідних групах, яким вводили композицію у кінцевих концентраціях 0,1; 0,2 та 0,5 % відхилень ембріонів від норми не встановлено. Композиція ембріотоксичну дію проявила в кінцевих концентраціях 5 та 8 %, а в дослідних групах, яким вводили зразок композиції 0,1; 0,2; 0,5; 1 та 2 % відхилень від норми не встановлено. Композиція виявилася токсичною для курячих ембріонів в кінцевих концентраціях 1; 2; 5; та 8 %, в той час, як кінцеві концентрації композиції 0,1; 0,2 та 0,5 % не впливали на розвиток ембріонів. Це свідчить про те, що зразок композиції у кінцевих концентраціях 0,1; 0,2 та 0,5 % та зразок композиції в кінцевих концентраціях 0,1; 0,2; 0,5; 1 та 2 % не впливають на розвиток курячих ембріонів. Визначення віруліцидної активності суспензійним методом Визначення віруліцидної активності двох зразків пропонованої композиції суспензійним методом складалося з підготовки розведень дослідного препарату, перевірки титру інфекційної активності вірусу грипу, постановки основного досліду та контролів. Для досліджень було використано 3 дослідних зразки композиції з кінцевими концентраціями 0,05; 0,1; 0,2 та 0,5 %; та композиції з кінцевими концентраціями 0,05; 0,5; 1; 2 % та композиції з кінцевими концентраціями концентраціями 0,05; 0,1; 0,2 та 0,5 %. Приготування робочих розведень виконували на стерильній воді. Екстраембріональну рідину з 6 3 вірусом грипу використовували з інфекційною активністю 10 Іg ЕІД/0,2см . 3 Для досліду використовували стерильні пеніцилінові флакони об'ємом 10 см , в яких 6 змішували рівні об'єми екстраембріонільної рідини з вірусом грипу з інфекційною активністю 10 3 Іg ЕІД/0,2см та робочі розведення 2-х зразків композиції. Після змішування суміш витримували протягом 15, 30 та 45 хвилин при кімнатній температурі. Після завершення кожної експозиції з 3 суміші відбирали 1-2 см , які використовували для інфікування курячих ембріонів. Кожен дослід супроводжувався постановою контролів: позитивного - вірус грипу птиці в співвідношенні 1:1 зі стерильною водою, негативний контроль - стерильна вода. Інфікування ембріонів здійснювали згідно зі стандартною методикою, використовуючи для цього окремі одноразові шприці. Після інфікування за ембріонами було встановлено спостереження протягом 4 діб з 4 UA 104166 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 дворазовою щоденною овоскопією. Облік результатів досліду вели за загиблими ембріонами та наявністю в екстраембріональній рідині ембріонів гемаглютинінів. Після завершення вказаного терміну спостереження усі ембріони, що залишилися живими, охолоджували та проводили розтин. Наявність вірусу в екстраембріональній рідині визначали в реакції гемаглютинації (РГА) з 1 % суспензією еритроцитів півня, вільного від антитіл до вірусу грипу. При проведенні досліджень композиції суспензійним методом встановлено, що композиція у кінцевих концентраціях 0,1; 0,2 та 0,5 % інактивує високопатогенний вірус 31 штаму H5N1. Композиція у кінцевій концентрації 0,5; 1 та 2 % та композиція у кінцевій концентрації 0,1; 0,2 та 0,5 % також мають віруліцидну дію на високопатогенний вірус птиці. Визначення віруліцидної активності на тест-об'єктах З метою оцінки придатності пропонованої композиції для дезінфекції тваринницьких приміщень були проведені дослідження для визначення віруліцидної активності пропонованої композиції на поверхнях та тканині, що Контаміновані вірусом грипу птиці. Для цього були використані попередньо очищені, вимиті та простерилізовані тест-об'єкти: нефарбоване дерево, 2 метал, кахель площею приблизно по 100 см . Для досліджень використали концентрації препарату, які показали свою ефективність при суспензійному методі: 0,1; 0,2 та 0,5 %, та 0,5; 1 та 2 %. На чисті стерильні поверхні (дерево, метал, кахель) наносили необхідну кількість цільної вірусовмісної рідини та рівномірно розподіляли скляною паличкою по всій поверхні. Після цього залишали у горизонтальному положенні для підсихання на 1-2 години за кімнатної температури. Після цього зрошували 3 аерозольно приблизно по 20 см робочого розчину препарату таким чином, щоб уся поверхня тест-об'єкта була оброблена дезінфектантом. Експозиція після нанесення склала 15 та 45 хвилин. Після завершення кожної з експозиції з поверхонь робили змиви стерильними ватними 3 тампонами, потім їх поміщали до флакону з 1 см стерильної води на 10 хвилин та інтенсивно струшували, після чого його використовували для інфікування курячих ембріонів за методиками, описаними вище. Як позитивний контроль використовували змиви, отримані з контамінованих поверхонь, оброблених стерильною водою. Як негативний контроль використовували стерильну воду. Тест-об'єкт - бавовняну тканину готували наступним чином. Стерильні чисті кусочки тканини просочували вірусовмісною рідиною та залишали прикімнатній температурі для підсихання на 1-2 години. Після цього тканину повністю занурювали у робочі розведення композиції зазначених концентрацій та витримували 15 та 45 хвилин. Після завершення експозицій тканину переносили в стерильну воду на 10 хвилин, інтенсивно струшували, а потім його використовували для інфікування курячих ембріонів за методиками, описаними вище. Як позитивний контроль використовували тканину, просочену вірусом, яку занурювали у стерильну воду. Як негативний контроль використовували стерильну воду. Після інфікування за ембріонами було встановлено спостереження протягом 4 діб із щоденною овоскопією. Облік результатів досліду вели за загиблими ембріонами та наявністю в екстраембріональній рідині ембріонів гемаглютинінів. Загибель протягом першої доби при відсутності гемаглютинінів вважали неспецифічною. Після завершення вказаного терміну спостереження усі ембріони, що залишилися живими, охолоджували та проводили розтин. Наявність вірусу в екстраембріональній рідині визначали в реакції гемаглютинації (РГА) з 1 % суспензією еритроцитів півня, вільного від антитіл до вірусу грипу. По результатах дослідження композиції: у кінцевій концентрації 0,1 % на тканині з експозицією 15 та 45 хвилин вона була не ефективною. Через зазначені проміжки часу вірус залишався інфекційноактивним та здатним до репродукції в КЕ. В той же час використання композиції з тою ж кінцевою концентрацією на інших тест-об'єктах, а також з кінцевою концентрацією 6,5 та 1 % на усіх тест-об'єктах мали виражений віруліцидний ефект. Композиція в кінцевій концентрації 0,5 та 1 % при обробці тканини не проявляла віруліцидного ефекту при експозиції протягом 15 хвилин, але при експозиції 45 хвилин розмноження вірусу в курячих ембріонах зафіксовано не було. Також при обробці металевої пластини та дерев'яної основи композицією з кінцевою концентрацією 0,5 % не спостерігали віруліцидного ефекту, а інша концентрація та довший час контакту композиції з вірусом мали виражений віруліцидний ефект. На наступному етапі з'ясовували віруліцидну активність пропонованої композиції відносно до високопатогенного грипу птиці з біологічним навантаженням. Як біологічне навантаження використовували сироватку крові великої рогатої худоби нативну без консервантів. Для цього 6 вірусовмісну суспензію з інфекційною активністю 10 змішували з сироваткою крові у співвідношенні 1:1, а потім цю суміш додавали до розчинів композиції у кінцевих концентраціях 0,1; 0,2 та 0,5 % та композиції у кінцевих концентраціях 0,5; 1 та 2 %. В подальшому нанесення 5 UA 104166 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 отриманої суміші на різні тест-об'єкти проводили так, як зазначено у досліді з вивчення віруліцидної активності препарату на різних тест-об'єктах. В результаті встановлено параметри знезараження поверхонь з різних матеріалів, заражених вірусом птиці. Бактерицидна та спороцидна, та фунгіцидна активність композиції При вивченні мінімальної бактерицидної концентрації пропонованої композиції відносно до мікроорганізмів встановлено, що цей показник для різних груп мікроорганізмів різний. Так, високоефективною є бактерицидна концентрація препарату відносно Е.соlі - щоб повністю затримати ріст тест-культури при експозиції 10 хв. потрібна була концентрація композиції 0,1 % і при експозиції 30 хв.-0,036 %. Менш ефективним виявився препарат відносно St.aureus (за 10 і 30 хв.-0,52 і 0,19 % відповідно). Бактерицидне розведення композиції відносно тест-культури Е.соlі значно більше, порівняно з бактерицидним розведенням фенолу. Відповідно, досліджувана композиція в 12,62 рази активніший, ніж фенол. В присутності високомолекулярного білка активність досліджуваної композиції знижується в 1,65 разу. Було проведено випробування щодо дослідження дезінфікуючих властивостей композиції на тест-об'єктах з культурами Е.соїі та St.aureus. Одержані результати свідчать, що обеззаражуюча концентрація композиції 2,0 % - 4,0 % для санації та профілактичної дезінфекції приміщень для тварин є ефективною. Враховуючи, високу резистентність серед бактерій (крім туберкульозної) штаму Е. cоlі 1257, який використовували в досліді і який є еталонним, обеззаражуюча 2,0 % - 4,0 % концентрація відносно до збудників інших інфекцій (кишечних - сальмонельоз, крапельних та інших інфекцій стафілокок і т.д., крім туберкульозу) є оптимальною. Також було проведено дослідження щодо вивчення активності пропонованої композиції 9 щодо таких тест-об'єктів: (батистові), штучно контаміновані суспензією - 2-10 КУО/мл добової культури золотистого стафілокока (S.aureus 906), P.aeruginosa ATCC 9037, 5-добової культури мікобактерії туберкульозу В5. (M.tyberculosis В5), спорами B.cereus 96, A.niger 974. В якості модельних тест-об'єктів при вивченні дезінфекційних властивостей засобу використовували поверхні із різних матеріалів - кахлю, керамічної метлахської плитки, металу, скла, пластмаси, вінілової шкіри, штучно контаміновані тест-мікроорганізмами. З метою виключення бактеріостатичної дії проводили пересіви на рідкі поживні ередовища і пересіви з рідких на тверді поживні середовища. Визначили, що 10 % розчин композиції в умовах кімнатної температури, нанесений на тестповерхні з матеріалів - скло, пластмаса, метал, лінолеум - продовж від 1 до 21 дня зберігає антибактеріальні та спороцидні властивості відносно до золотистого стафілокока (S.aureus), мікобактерій туберкульозу В5. (M.tyberculosis В5) та спор (B.cereus). Визначили, що 5 % розчини композиції виявляють антибактеріальну дію при експозиції 15 хв. і вище відносно до золотистого стафілокока, синьо-гнійної палички, мікобактерії туберкульозу. Для спорової форми B.cereus - спороцидну активність проявляють зразки при експозиції 30 хвилин та 60 хвилин. Також було проведено дослідження фунгіцидної активності зразків композиції. Визначили, що фунгіцидна активність композиції відносно до штаму A.niger ярко виражена і проявляється при експозиції 15, 30 та 60 хвилин. Також додатково проводили визначення спороцидної активності композиції при знезараженні поверхні тест-об'єктів, контамінованих споровими мікроорганізмами роду Bacillus. Дослідження проводили на тест-об'єктах, контамінованими спорами Вас. anthracoides (штам 96), Вас. Subtilis з метою розроблення режиму їх знезараження в залежності від концентрації 2 композиції, експозиції, кратності обробки та витрати на 1 м . Для отримання спор, агарові культури вищевказаних культур висівали на МПБ і інкубували в термостаті при температурі + 37° С Добові і бульйонні культури висівали на скошений МПА в пробірки і витримували в термостаті при температурі + 37° С протягом 48 годин, а потім в темному місці при температурі + 10° С ~ +18° С протягом 5-7 днів. Наявність спор перевіряли під мікроскопом. Для цього готували мазки з агарових культур на предметному склі, які фарбували фуксином. При огляді мазків під мікроскопом в 10 полях зору нарахували 80 % спор. Спороцидну дію препарату визначали на тест-об'єктах, стерильні поверхні котрих контамінували 2-х мільярдними культурами anthracoides (штам 96), Вас. Subtilis розрахунку 1 мл культури і 0,5 мл інактивованої сироватки ВРХ (білкове навантаження) які рівномірно розподіляли по поверхні тест-об' єктів і залишали їх до повного висихання. Контаміновані тест 6 UA 104166 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 об'єкти обробляли композицією в горизонтальному і вертикальному положенні у наступних концентраціях: 2-8 % з розрахунку 3-5 мл на один тест-об'єкт при експозиції 3 години (аналогічно методиці визначення туберкулоцидної дії). Якісний облік спороцидної дії композиції проводили через 24 години та 7 діб. Встановлено, що бактерицидна концентрація композиції на спорові форми становила 8 %. Бактерицидна дія препарату на вегетативні форми цієї мікрофлори була на рівні 4 % при температурі розчину + 15° - + 18° С Випробування пропонованої композиції щодо її дезінфекційних властивостей та її застосування для дезінфекції та стерилізації Було проведено дослідження щодо профілактичної дезінфекції приміщень для утримання ВРХ, птиці пропонованою композицією у концентрації 2,0 %, шляхом вологого зрошення 2 поверхні приміщення та витрат робочого розчину 0,1-0,3 л на м при експозиції 2 години. Було визначена якість дезінфекції. Дезінфекція приміщень проведена 2,0 % водним розчином пропонованої композиції - якісна. Для заправки дезбар'єрів, ванн для дезінфекції взуття необхідно приготувати 1,0 % розчин композиції. Заміну дезрозчину необхідно проводити по мірі забруднення, висихання. Неочікувано виявлені дезінфекційні властивості композиції можуть знайти застосування при проведенні поточної та заключної дезінфекції, а також для проведення генеральних прибирань в закладах охорони здоров'я, у вогнищах інфекції бактеріальної, вірусної та грибкової етіології; дезінфекції поверхонь в приміщеннях, жорстких меблів, санітарного транспорту, білизни, посуду, предметів догляду за хворими, виробів медичного призначення, іграшок, санітарнотехнічного обладнання, гумових килимків, прибирального інвентарю, перукарських і косметичних інструментів, в тому числі одноразового застосування; для профілактичної дезінфекції: у закладах охорони здоров'я (хірургічного, терапевтичного, акушерського, кардіологічного, неврологічного, фізіотерапевтичного, гінекологічного, онкологічного, патологоанатомічного, неонатологічного та інших профілів), клінічних, біохімічних, бактеріологічних, серологічних та інших профільних лабораторіях, станціях (підстанціях) швидкої та невідкладної медичної допомоги, донорських пунктах та пунктах переливання крові, медико-санітарних частинах, фельдшерсько-акушерських та медичних пунктах тощо; аптеках та аптечних закладах; оздоровчих закладах (санаторії, профілакторії, будинки відпочинку тощо); дитячих дошкільних закладах та учбових закладах; підприємствах парфумерно-косметичної, фармацевтичної, хімічної, біотехнологічної мікробіологічної, харчової та харчопереробної промисловості; підприємствах та об'єктах громадського харчування і торгівлі, підприємствах ресторанного господарства, базарах; для дезінфекції об'єктів підприємств та організацій держрезерву продовольчої групи; на рухомому складі та об'єктах забезпечення всіх видів транспорту (в тому числі санітарному транспорті, каретах швидкої медичної допомоги, громадському, залізничному, морському, річковому, автомобільному, повітряному транспорті), вокзалах, аеропортах, автостанціях, метрополітені тощо; спортивно-оздоровчих закладах (спорткомплекси, басейни тощо), а також місцях проведення тренувань, змагань, учбовотренувальних зборів та розважальних закладах; комунально-побутових об'єктах (готелі, кемпінги, перукарні, косметологічні клініки та салони, салони краси, SPA-центри, манікюрні та педікюрні салони, солярії, пральні, лазні та сауни, басейни, хімчистки, гуртожитки тощо); військових частинах; підрозділах міністерства внутрішніх справ: пенітенціарних закладах; закладах соціального захисту; для дезінфекції систем вентиляції, кондиціонування; підприємствах із збирання, транспортування, сортування та переробки сміття; для дезінфекції сміттєпроводів, сміттєзбиральних камер та контейнерів; для дезінфекції резервуарів вакуумних туалетів накопичувального типу (екологічно чистих туалетних комплексів), громадських туалетах згідно відповідних нормативно-методичних документів, технологічних регламентів та інструкцій; для дезінфекції на інших об'єктах, діяльність яких вимагає проведення дезінфекційних заходів відповідно до діючих санітарно-гігієнічних та протиепідемічних норм та правил, нормативно-методичних документів; санітарного та спеціального одягу персоналу; в побуті. Застосовують пропоновану композицію для дезінфекції і одночасного миття поверхонь приміщень, твердих меблів, поверхонь медичного обладнання та апаратури, санітарнотехнічного обладнання, гумових килимків, притирального інвентарю, предметів догляду хворих, виробів медичного призначення. Дезінфекцію здійснюють способами протирання, зрошення, занурення, замочування у відповідності з певними режимами. За результатами проведених досліджень стало відомо, що композиція має бактерицидні властивості щодо грам негативних та грам позитивних бактерій (включаючи збудників 7 UA 104166 C2 5 10 15 20 25 30 35 туберкульозу), віруліцидні (включаючи віруси гепатитів, вірус СНІД/ВІЛ, поліомієліту, віруси грипу, аденовірус), фунгіцидні (включаючи кандидози, дерматофіти, дріжджі) та спороцидні. Зокрема, було досліджено, що 10 % розчин композиції при зберіганні на поверхнях з різних матеріалів (зі скла, металу, пластмаси, лінолеуму) протягом 60 днів зберігає бактерицидні та туберкулоцидні властивості. Фунгіцидні властивості щодо A.niger зберігаються протягом 30 днів. Нанесений на скляні, металеві, пластмасові поверхні 4 % розчин композиції зберігає бактерицидні (щодо стафілокока, кишкової палички), фунгіцидні (кандиди, аспергіли), туберкулоцидні властивості впродовж 14 днів, спороцидні - 7 днів Отже, композиція призначена для застосування як засіб для дезінфекції, засіб для стерилізації, антивірусний, бактерицидний, спороцидний та фунгіцидний засіб. Засіб, зокрема, може бути призначений для медичних, фармацевтичних та ветеринарних цілей. Для застосування пропонованої композиції як засобу для дезінфекції, засобу для стерилізації, антивірусного, бактерицидного, фунгіцидного та спороцидного засобу.композицію за винаходом слід належно формувати разом з прийнятними носіями/наповнювачами. Для застосування у медицині, фармацевтиці та ветеринарії при створенні певних засобів для дезінфекції, засобів для стерилізації, антивірусних, бактерицидних, фунгіцидних та спороцидних засобів на основі пропонованої композиції переважнимиє форми, придатні для перорального застосування, як-то розчини, таблетки, капсули, гранули, порошки, розчини, суспензії, сиропи тощо. Ці форми можна отримувати звичайними способами, застосовуючи відомі інгредієнти, як то: ліганди, дезінтегратори, мастила, наповнювачі, стабілізатори, розріджувачі, барвники, ароматизатори, змочувальні агенти та інші наповнювачі, відомі фахівцям. Пероральні композиції також містять форми з уповільненим вивільненням, як-то покриті кишково-розчинним покриттям таблетки або гранули. Тверді пероральні композиції можна отримувати звичайними способами змішування, наповнення або пресування. Рідкі пероральні препарати можуть бути у формі, наприклад, водних або масляних суспензій або розчинів, емульсій, сиропів, або можуть бути сухим продуктом для відтворення водою або іншим придатним носієм перед застосуванням. Дозування може залежати від віку та загального стану пацієнта, природи та суворості хвороби або розладу та шляху і режиму застосування. Пропонована даним винаходом композиція може бути одержана на будь-якому підприємстві по виготовленню відповідних композицій. Композиція може бути виготовлена способом відповідно до будь-якої технології виготовлення відповідних композицій, відомої для спеціаліста у даній галузі, та за допомогою будь-якого стандартного устаткування з використанням відомих стандартних матеріалів, засобів та операцій для виготовлення відповідних композицій, відомих для спеціаліста у даній галузі, що підтверджує її промислову придатність. Слід розуміти, що описані вище приклади та варіанти втілення є лише ілюстративними і спеціалістам у даній галузі пропонуються різні модифікації та зміни, які охоплюються суттю цієї заявки та обсягом формули винаходу. Слід розуміти, що наведена вище інформація ніяким чином не обмежує обсяг прав за заявкою. ФОРМУЛА ВИНАХОДУ 40 45 1. Композиція, яка містить н-октодецилдиметил(3-триметоксисиліл)пропіл амонію хлорид, бензалконію хлорид, ізопропіловий спирт та допоміжні речовини, причому вказані інгредієнти взяті у наступній кількості, мас. %: н-октодецилдиметил(30,01-5 триметоксисиліл)пропіл амонію хлорид бензалклонію хлорид 0,01-15 ізопропіловий спирт 0,1-35 допоміжні речовини решта до 100. 2. Композиція за п. 1, яка містить н-октодецилдиметил(3-триметоксисиліл)пропіл амонію хлорид, бензалклонію хлорид, ізопропіловий спирт та додаткові речовини, причому вказані інгредієнти взяті у наступній кількості, мас. %: н-октодецилдиметил(31-4 триметоксисиліл)пропіл амонію хлорид бензалклонію хлорид ізопропіловий спирт допоміжні речовини 8-15 10-15 решта до 100. 8 UA 104166 C2 Комп’ютерна верстка Л. Бурлак Державна служба інтелектуальної власності України, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 9