Кондиціонована композиція крові і спосіб її одержання

1. Спосіб одержання кондиціонованої композиції крові з крові, який включає стадії: (a) відбору крові з тіла людини або тварини; (b) інкубації взятої крові в модифікованій посудині з внутрішньою поверхнею при температурі від 10 до 40 °С для кондиціонування крові, при цьому індукуються фактори, і при цьому модифікована посудина має внутрішню поверхню від 200 до 750 2 мм на 1 мл інкубованої крові; і (c) одержання в модифікованій посудині кондиціонованої композиції крові з індукованими факторами. 2. Спосіб за п. 1, де присутність частки інтерлейкіну-6 в композиції крові, що становить щонайменше 30 пг на 1 мл, вказує на успішну індукцію. 3. Спосіб за будь-яким з пп. 1, 2, причому інкубацію виконують протягом 2-36 годин. 4. Спосіб за будь-яким з пп. 1-3, причому парціальний тиск кисню (рО2) під час інкубації складає менше 5 кПа. 5. Спосіб за будь-яким з пп. 1-4, причому в додатковій стадії відділяють клітинні складові частини з кондиціонованої композиції крові і одержують кондиціоновану композицію сироватки крові. 6. Спосіб за будь-яким з пп. 1-5, причому модифікована посудина має внутрішні структури з великою поверхнею, які вибрані з кульок, волокон, борошна, грануляту, частинок і їх комбінацій. 7. Спосіб за п. 6, при цьому внутрішні структури складаються щонайменше з одного матеріалу, вибраного з металу, оксиду металу і пластмаси, скла, корунду, кварцу, полістиролу, полівінілхлориду, поліетилену, поліпропілену або їх комбінацій. 8. Спосіб за будь-яким з пп. 1-7, причому модифікована посудина має в своєму внутрішньому прос 2 (19) 1 3 90048 4 20. Композиція крові за будь-яким з пп. 16-19, при- захворювань сухожильного апарату, чому частка інтерлейкіну-4 (IL-4) складає від 2 до - алергій, 100 пг/мл. - непереносимості продуктів харчування, 21. Композиція крові за будь-яким з пп. 16-20, при- непереносимості лікувальних засобів, чому частка інтерлейкіну-13 (IL-13) складає від 2 - захворювань за участі імунної системи, до 100 пг/мл. - псоріазу, 22. Композиція крові за будь-яким з пп. 16-21, при- хронічних ран, таких як діабетичні виразки. чому частка інтерлейкіну-1 (IL-1) складає від 5 до 31. Застосування за п. 30, причому захворювання 1000 пг/мл. м'язів є пошкодженням м'язів, операцією м'язів, 23. Композиція крові за будь-яким з пп. 16-22, прирозривом волокон м'язів, дегенерацією м'язів, дечому частка інтерлейкіну-10 (IL-10) складає від 5 фектом м'язів, атрофією м'язів, розривом м'язів, до 1000 пг/мл. дистрофією м'язів, втомою м'язів або болем у м'я24. Композиція крові за будь-яким з пп. 16-23, призах. чому частка фактора некрозу пухлини (TNF) скла32. Застосування за будь-яким з пп. 30 або 31, дає від 5 до 1000 пг/мл. причому лікування м'язового захворювання вклю25. Композиція крові за будь-яким з пп. 16-24, причає регенерацію м'язової тканини. чому частка інсуліноподібного фактора росту (IGF) 33. Застосування композиції крові за будь-яким з складає від 100 до 15000 пг/мл. пп. 16-29 для лікування або профілактики захво26. Композиція крові за будь-яким з пп. 16-25, прирювання тіла людини або тварини, вибраного з: чому частка трансформуючого фактора росту - нейродерміту, (TGF) складає від 10 до 20000 пг/мл. - запалень або подразнень нервової системи, 27. Композиція крові за будь-яким з пп. 16-26, при- ендометріозу, чому частка тромбоцитарного фактора росту - хронічного запалення очей у коня. (PDGF) складає від 100 до 10000 пг/мл. 34. Застосування за будь-яким з пп. 30-33, причо28. Композиція крові за будь-яким з пп. 16-27, приму композиції крові за необхідності разом з фарчому частка фактора росту фібробластів (FGF) мацевтичними допоміжними засобами ін'єктують в складає від 50 до 10000 пг/мл. тіло або до порушеного органа. 29. Композиція крові за будь-яким з пп. 16-28, при35. Застосування композиції крові за будь-яким з чому частка гепатоцитного фактора росту (HGF) пп. 16-19 для одержання лікарського засобу для складає від 10 до 10000 пг/мл. лікування або профілактики одного з охарактери30. Застосування композиції крові за будь-яким з зованих в пп. 30-33 захворювань тіла людини або пп. 16-29 для лікування або профілактики захвотварини. рювання тіла людини або тварини, вибраного з: 36. Застосування композиції крові за будь-яким з - захворювань м'язів, пп. 16-29 як косметичного засобу. Даний винахід належить до способу одержання кондиціонованих композицій крові, які містять індуковані фактори або цитокіни, а також до кондиціонованих композицій крові і їх застосування для лікування або профілактики хвороби тіла людини або тварини. Відомо, що компоненти крові, передусім білки, фактори або цитокіни, такі як еритропоетин, інсулін або інтерферон, які містяться в крові, відповідно в сироватці крові, є ефективними терапевтично або профілактично. Відомі фактори, такі як антагоніст рецептора інтерлейкін-1 (IL-1Ra) гальмують дію процесів, які викликають запалення. Крім того, відомо, що такі компоненти крові частково створюються самою кров'яною тканиною, відповідно виділяються з клітин крові в плазмовій фазі крові. Створення або виділення визначених компонентів крові, таких як фактори або цитокіни, можна, наприклад, збільшувати за допомогою інкубації із взятої з тіла людини або тварини цільної крові. Потім після інкубації є часто більш висока концентрація визначених факторів в інкубованій крові. Потім ці компоненти крові можна за необхідності ізолювати. Крім того, кров, яка містить індуковані фактори, можна звільняти від клітинних складових частин і як так звану індуковану сироватку крові (повторно) вводити в тіло людини або тварини. Процес збільшення одержання або виділення компонентів крові, таких як фактори або цитокіни, називається «індукцією». Відомий спосіб індукції компонентів крові в цільній крові полягає по суті в тому, що одержують цільну кров з тіла людини або тварини, і потім її інкубують в модифікованому одноразовому шприці, в якому знаходяться спеціально оброблені хромовою сумішшю скляні кульки, протягом визначеного часу в культуральних умовах (Meijer et al. Inflamm. res. 52 (2003): 1-4). Потім відділяють клітинні складові частини, так що одержують кондиціоновану сироватку крові, в якій індуковані фактори або цитокіни. Таким чином, з венозної цільної крові людини одержують сироватку, в якій збільшена частка антагоніста рецептора інтерлейкіну-1 (IL-1Ra), інтерлейкіну-4 (IL-4) і інтерлейкіну-10 (IL-10) в порівнянні зі свіжовзятою цільною кров'ю. При цьому тривалість інкубації цільної крові становить 24 години, температура інкубації - близько 37°С. Одержані таким чином склади сироватки крові застосовують для лікування різних запальних захворювань і аутоімунних хвороб, наприклад, ревматоїдного артриту. Встановлено, що, наприклад, ревматоїдний артрит може бути пом'якшений або вилікуваний за допомогою локального і/або систематичного застосування таких кондиціонованих композицій сироватки крові. Однак ефективність терапії вимагає поліпшення. Крім того, є інші захворювання, наприклад, пошкодження м'язів, які щонайменше в тваринній 5 90048 6 моделі можна лікувати за допомогою локального, або гормональне лікування можуть допомагати відповідно систематичного, застосування одержапроти пов'язаних з цією хворобою скарг. Однак, них методом генної інженерії цитокінів, таких як регулярно трапляються повернення і рецидиви. IL-1Ra або аналогічних. Одержані відомим чином Пухлини можуть ставати настільки хронічними, що склади сироватки крові в цьому випадку не виявзростаються інші органи і виникають сильні хроніляють або виявляють лише недостатню дію. При чні болі. Симптоми можна часто робити переносицьому пошкодження м'язів якраз в сфері спортивмими лише за допомогою сильних анальгетиків. ної медицини є частими; вони мають частку аж до Приблизно 10% всіх жінок між статевою зрілістю і 30% хвороб або пошкоджень, що одержуються за менопаузою захворюють ендометріозом і розвирахунок спорту. Понад 90% цих пошкоджень м'язів вають більш або менш сильні симптоми. Екстревикликаються або ударом, або екстремальним мальний вияв цієї хвороби може приводити до навантаженням на розтягнення м'яза. Ці пошкобезплідності. дження регулярно приводять до сильних болів, а Тому, існує потреба в поліпшених, альтернапотім до неможливості продовження тренування, тивних і легко одержуваних композиціях біологічно відповідно до неможливості подальших занять активних речовин для ефективного лікування вкаспортом протягом короткочасного або тривалого заних вище захворювань, а також інших захворюперіоду часу. Тому рівень техніки потребує поліпвань, які можна лікувати за допомогою наявних в шення. крові факторів або цитокінів, і способах їх одерСерйозним захворюванням коня є хронічне жання. Встановлена в основу даного винаходу або періодичне запалення очей (кінський рецидитехнічна задача складається, передусім, в ствовний увеїт, ERU). Відповідно до сьогоднішнього ренні поліпшеного способу одержання кондиціонорівня техніки при цьому хронічному запаленні виваної композиції крові, яка містить певні індуковані ходять з того, що алергія на так звані лептоспіри, а чинники або цитокіни і може ефективно застосовутакож гостра або хронічна лептоспірна інфекція ватися для лікування і профілактики. мають значення для виникнення хронічного запаПоставлена в основу винаходу технічна задалення очей. У Німеччині ступінь зараження цими ча вирішена по суті за рахунок створення способу паразитними організмами складає до 80%. У часодержання кондиціонованої композиції крові з кротини інфікованих тварин виявляються різні картиві, при цьому спосіб включає щонайменше наступни хвороби, серед них також хронічне запалення ні стадії: очей. При цьому вирішальним для виникнення На стадії (а) відомим чином відбирають кров, хвороби здається наявність або відсутність перепереважно венозну цільну кров, з тіла людини або носимості імунної системи тварини лептоспір як тварини, переважно свіжу, за допомогою венепунпаразитних організмів. кції. У переважно безпосередньо наступній стадії У коней може виникати кульгавість внаслідок (b) взяту кров інкубують щонайменше в одній момасивного запалення, відповідно подразнення дифікованій посудині для індукції факторів або сухожильної піхви. Іншою причиною кульгавості цитокінів в складі крові, тобто для ініціювання можуть бути також дегенеративні зміни всередині створення і виділення таких факторів і цитокінів в сухожильної тканини, так звані «пошкодження тканині крові. Згідно з винаходом, температура при жил» (Core Lesions). Вони також приводять до маінкубації крові в модифікованій посудині складає сивних запальних реакцій. Симптоми запалень і від 10 до 40°С, переважно від 25 до 40°С, більш кульгавості лікують, як правило, глікокортикоїдами переважно близько 37°С. На стадії (с) одержують (Кортизон), клітинними мацератами (ACell®), конв модифікованій посудині кондиціоновану компоцентратами тромбоцитів (Osteokin®, Magellan® і т. зицію крові, яка багата визначеними індукованими д.) або ж клітинними препаратами з кісткового мофакторами або цитокінами. зку або жирової тканини («стовбуровими клітинаЗгідно з винаходом, при інкубації крові застоми»). совують щонайменше одну модифіковану посудиКартина хвороби нейродерміт викликається ну, яка характеризується тим, що вона має внутнадмірною реакцією імунної системи. Однак, часто рішню поверхню на 1 мл інкубованої крові 2 2 застосовувана сьогодні терапія із застосуванням щонайменше 100 мм /мл, зокрема 104 мм /мл або 2 2 мазей, що містять кортизон, супроводжується дебільше, 123 мм /мл або більше, 131 мм /мл або 2 2 якими побічними явищами. більше, 224 мм /мл або більше, або 283 мм /мл Крім того, у населення часто з'являються заабо більше. У одному переважному варіанті викопалення, відповідно подразнення, іритації нервонання посудина має внутрішню поверхню від при2 вої системи в більшості випадків невідомого похоблизно 200 до приблизно 750 мм /мл, особливо дження. При цьому часто виникаючим симптомом переважно від приблизно 250 до приблизно 650 2 є болі в спині. При цьому болі як причину запаленмм /мл. ня можна часто лікувати лише симптоматично за Посудина переважно має об'єм заповнення 5 допомогою введення анальгетиків, відповідно глімл або більше, 10 мл або більше, 50 мл або бількокортикоїдів (таких як триамцинолон). ше, 60 мл або більше, або 100 мл або більше. ЯкЕндометріоз є захворюванням, при якому кліщо, наприклад, передбачене взяття і інкубація тини, відповідно тканини, зі слизової оболонки приблизно 50 мл крові, то внутрішня поверхня моматки поселяються в черевній порожнині і там дифікованої посудини повинна складати, згідно з 2 приводять в більшості випадків до доброякісних винаходом, щонайменше приблизно 6600 мм (66 2 2 пухлин. Ця пухлина в більшості випадків є чутлисм ), переважно від приблизно 10000 мм до приб2 2 вою до гормонів і викликає, залежно від гормонализно 37500 мм (100-375 см ). Якщо, наприклад, льного стану, сильні болі. Оперативне втручання передбачене взяття і інкубація приблизно 10 мл 7 90048 8 крові, то внутрішня поверхня модифікованої посуможуть бути перев'язані мембранною поверхнею дини повинна складати, згідно з винаходом, щоімунних клітин. Під екзосомами розуміються субк2 2 найменше приблизно 2300 мм (23 см ), переважлітинні складові частини, які представляють вези2 2 но від приблизно 2500 мм до приблизно 7500 мм кулоподібні структури в нанометровому діапазоні і 2 (25-75 см ). виникають за рахунок впинання так званих «мульПід «внутрішньою поверхнею» мається на тивезикулярних тіл» і секреції імунними клітинами. увазі та поверхня всередині посудини, яка знахоПід «композицією крові» в цьому випадку мадиться при інкубації в контакті з композицією крові, ється на увазі композиція з крові, яка складається, що підлягає кондиціонуванню, тобто по суті змочупередусім, з плазми крові, сироватки і кров'яних ється нею. клітин, яка містить щонайменше один компонент, Таким чином, винахід передбачає, що кров, вибраний з протеїнів, таких як фактори і цитокіни. взяту з тіла людини або тварини, інкубують в спеУ цьому випадку під композицією крові мається на ціально модифікованій посудині з визначеним коувазі також композиція сироватки крові. Компози2 ефіцієнтом внутрішньої поверхні 200 мм /мл або ція сироватки крові відрізняється від композиції більше. Авторами винаходу було несподівано крові передусім тим, що композиція сироватки встановлено, що за допомогою способу, згідно з крові не містить (більше) клітинних складових часвинаходом, після порівняно короткого часу можна тин. Кондиціоновану композицію сироватки крові одержувати в модифікованій посудині кондиціоноодержують з одержаної, згідно з винаходом, конвану композицію крові, яка містить велику частку диціонованої композиції крові, наприклад, за рахувизначених індукованих факторів і в якій наявний з нок того, що з композиції крові відділяють клітинні високою концентрацією фактор IL-6. При цьому складові частини за допомогою центрифугування, спосіб, згідно з винаходом, несподіваним чином фільтрації і інших придатних заходів, так що одерприводить до одержання складу крові, який має жують розчин, що не містить клітини, з плазми велику профілактичну і терапевтичну дію. Так, крові і сироваткових складових частин, який міснаприклад, можна ефективно лікувати запальні тить щонайменше індуковані фактори і цитокіни. захворювання суглобів, запалення очей у коней, Відповідно до цього, в одному переважному пошкодження сухожиль, пошкодження нервів, енваріанті виконання в додатковій стадії повністю дометріоз, нейродерміт, а також пошкодження або по суті повністю відділяють клітинні складові м'язів, за допомогою введення одержаної кондицічастини з одержаної кондиціонованої композиції онованої композиції крові, згідно з винаходом, в крові, так що одержують кондиціоновану сироватку хворий організм або в, або на хворий орган. крові. Кондиціоновану сироватку крові можна заЗа допомогою способу, згідно з винаходом, стосовувати так само, як одержану, згідно з винаможна, наприклад, одержувати кондиціоновану ходом, композицію крові, і вона забезпечує, як композицію крові зі свіжовідібраної цільної крові правило, ті ж технічні переваги, згідно з винаходонорів, в якій наявна частка IL-6 більше 2000 дом. Фахівець залежно від сфери застосування і пг/мл. У порівнянні з цим в некондиціонованій цідоцільності буде застосовувати кондиціоновану льній крові частка IL-6 складає від приблизно 0,5 композицію сироватки крові або кондиціоновану до приблизно 0,15 пг/мл. Таким чином, за допомокомпозицію цільної крові. Переважно застосовувагою винаходу досягається, як правило, збільшення ти кондиціоновану композицію сироватки крові. від приблизно в 200 разів до приблизно в 4000 Інкубацію крові щонайменше в одній модифіразів вмісту IL-6. кованій посудині переважно проводять так довго, Нарівні з особливо важливим фактором IL-6 в поки не просунеться достатньо далеко індукція кондиціонованій композиції крові одержують висофакторів і цитокінів. Індуковані фактори або цитоку частку інших терапевтично і профілактично кіни виробляються і виділяються тканиною крові ефективних компонентів, таких як фактори і цитопо суті з моменту часу початку інкубації, так що кіни. До них належать нарівні з відомими фактоефективна кількість індукованих факторів або цирами IL-4, IL-10 і IL-1Ra несподіваним чином татокінів акумулюється в кондиціонованій композиції кож такі фактори, як інтерлейкін-13 (IL-13), крові. інтерлейкін-1 (IL-1), передусім (IL-Ιβ), фактор некВ одному варіанті виконання винаходу поява розу пухлини (TNF), інсуліноподібний фактор росту IL-6 в композиції крові вказує на успішну індукцію, (IGF), трансформуючий фактор росту (TGF), тромяка достатньо далеко просунулася. При цьому боцитарний фактор росту (PDGF), фактор росту частка IL-6 складає, зокрема, щонайменше 30 фібробластів (FGF), гепатоцитний фактор росту пг/мл. У модифікованій посудині інкубацію прово(HGF). Таким чином, в одержаній, згідно з винаходять так довго, поки не буде досягнута частка IL-6, дом, кондиціонованій композиції крові переважно яка дорівнює щонайменше 30 пг/мл в композиції наявна суміш («коктейль») різних ефективно індукрові. У інших переважних варіантах виконання кованих факторів або цитокінів. Не вдаючись в інкубацію продовжують так довго, поки частка в теорію, саме суміш факторів і цитокінів, одержувакомпозиції крові не досягне щонайменше 200 на згідно з винаходом, представляє терапевтично і пг/мл, переважно 500 пг/мл, особливо переважно профілактично високоефективну композицію біо1000 пг/мл. логічно активних речовин. У іншому варіанті виконання інкубацію викоПри цьому зазначені вище біологічно активні нують протягом 36 годин або менше. У іншому речовини можуть знаходитися в композиції крові варіанті виконання інкубацію виконують протягом також у вигляді везикул, мікровезикул або екзосом. 9 годин або менше. У іншому варіанті виконання Під везикулами і мікровезикулами розуміються інкубацію виконують протягом від 2 годин або бісубклітинні складові частини, які, серед іншого, 9 90048 10 льше до 36 годин або менше, переважно до 9 говнутрішніх структур, так що одержують модифікодин або менше. вану посудину із збільшеною внутрішньою поверхУ іншому варіанті виконання інкубація крові вінею. Відповідно до цього, винахід передбачає задбувається при зниженому парціальному тиску стосування для одержання кондиціонованої кисню (рО2). Зокрема, парціальний тиск кисню під композиції крові щонайменше однієї модифіковачас інкубації складає менше 5 кПа, переважно ної посудини з великою внутрішньою поверхнею з менше 3 кПа. У одному переважному варіанті викоефіцієнтом поверхні, згідно з винаходом, який конання інкубація крові в модифікованій посудині має внутрішні структури, вибрані з кульок, воловідбувається без доступу кисню. кон, борошна, гранулята, частинок або їх комбінаУ переважному варіанті виконання модифікоцій. вана посудина в своєму внутрішньому просторі Фахівець може, природно, вживати інші або має особливі структури з великою поверхнею, так додаткові заходи для одержання модифікованої що внутрішня структура, що виходить із (зовнішпосудини із збільшеною внутрішньою поверхнею, ньої) геометрії посудини, збільшується за допомояку можна використовувати згідно з винаходом. У гою особливих структур. Збільшення поверхні за іншому переважному варіанті виконання передбадопомогою особливих структур складає переважчена посудина, внутрішні стінки якої мають впино від 10% до приблизно 200%, в одному варіанті нання, порожнини і/або виступи, так що досягаєтьвиконання від 10% до 100%. До цих структур песя відношення поверхні до об'єму (коефіцієнт реважно належать структури з великим відношенповерхні) згідно з винаходом. ням поверхні до об'єму, такі як кульки або волокна, У одному переважному варіанті виконання моа також інші частинки, такі як борошно і гранулят, дифікована посудина має еластичні стінки, які заабо комбінації таких структур. Поверхня цих струкбезпечують взяття крові переважно без потраптур є переважно гладкою. Як альтернативне ріляння повітря з тіла людини або тварини, коли шення, в деяких випадках можна використовувати модифікована судина, яка по суті ще не містить структури з шершавою поверхнею. повітря, розширюється лише при вході потоку кроФахівець може вибирати кількість і форму внуві, так що в посудині не може виникати небажаний трішніх структур залежно від сфери застосування і повітряний простір. Зрозуміло, що кількість і поведоцільності. Зрозуміло, що при цьому форму і кірхня передбачених для збільшення її внутрішньої лькість внутрішніх структур, що додаються, вибиповерхні внутрішніх структур не орієнтовані на рають так, що сума поверхонь доданих внутрішніх максимальну місткість еластичної посудини, а на структур і внутрішня поверхня модифікованої пооб'єм композиції крові, що підлягає інкубації. судини так узгоджені одна з одною, що зберігаєтьТаку еластичну посудину переважно вибирася передбачене, згідно з винаходом, відношення ють з передбачених в медицині для переливання поверхні до об'єму (коефіцієнт поверхні). крові пакетів для крові, які переважно є одинарниМодифікована посудина переважно має не піми, подвійними, потрійними або множинними парогенну внутрішню поверхню. Модифікована покетними системами. У той час як одинарна пакетсудина переважно виконана з матеріалу, який не на система характеризується тим, що має, як містить пірогенні речовини. правило, щонайменше один отвір для заповнення, Якщо застосовуються внутрішні структури, що відповідно випорожнення, подвійні, потрійні і мномають форму частинок, такі як кульки, волокна, жинні пакети представляють системи декількох борошно, гранулят або їх суміші, то вони переважзв'язаних один з одним пакетів, які знаходяться в но містять або складаються з матеріалів, вибраних контакті один з одним переважно за допомогою з металів, оксидів металів або пластмас і їх сумішлангового з'єднання. Переважно такі пакети прошей. Переважними прикладами для цього є скло, сто складаються з двох зварених одна поверх одкорунд, кварц, полістирол, полівінілхлорид, поліеної еластичних плівок. тилен і поліпропілен, а також їх суміші. Ці матеріаУ особливо переважному варіанті виконання ли переважно не є пірогенними. використовувана, згідно з винаходом, щонайменЩонайменше одна модифікована посудина ше одна модифікована посудина є пакетом для переважно містить в своєму внутрішньому простокрові або пакетною системою для крові, яка морі скляні кульки, особливо переважно з непірогендифікована за допомогою заповнення, згідно з ного боросилікатного скла, при цьому скляні кульвинаходом, вибраною кількістю частинок вибраноки мають (середній) діаметр від 0,5 до 5 мм, го виду, переважно скляними кульками. переважно 1,5 мм, 2,5 мм або 3,5 мм. Особливо Посудина переважно є пакетною системою, переважно в посудину, що підлягає модифікації, яку застосовують як двокамерну пакетну систему додають залежно від місткості посудини скляні для крові для центрифугування з метою розділенкульки в кількості від приблизно 10 до 500. Якщо, ня складових частин крові в свіжовзятій крові. Якнаприклад, передбачена посудина для розміщенщо посудина модифікована, згідно з винаходом, за ня приблизно 50 мл крові, то переважно додають допомогою заповнення скляними кульками, то в приблизно 30-300 кульок, зокрема приблизно 50ній можна здійснювати спосіб одержання кондиці250 кульок, які мають діаметр переважно 3,5 мм. онованої композиції крові. Потім з кондиціонованої У одному особливо переважному варіанті викрові в пакетній системі для крові відділяють комконання застосовують відому переважно з транспоненти крові, так що одержують кондиціоновану фузійної медицини посудину для взяття, відповідкомпозицію сироватки крові, яка не містить «тверно, зберігання крові, таку як шприц, пробірки для ді» складові частини крові. крові або пакети для крові, які модифікують за доПереважна двокамерна пакетна система для помогою додавання визначеної кількості таких крові містить щонайменше одну первинну посуди 11 90048 12 ну і щонайменше одну вторинну посудину, які У одному альтернативному варіанті виконання утворюють систему сполучених посудин. Первинкомпозиція крові є гетерологічною. Тобто, вона на посудина і вторинна посудина з'єднані одна з береться з чужого організму. Для цього не кондиодною щонайменше через один, зокрема, перехід, ціоновану композицію крові беруть з тваринного що закривається. У зв'язку з даним винаходом під організму, наприклад, у свині, у вигляді цільної «первинною посудиною» розуміється переважно крові, і після виконання способу, згідно з винахопосудина, тобто місткість, в яку вводиться комподом, вводять кондиціоновану композицію крові зиція крові, що підлягає кондиціонуванню і потім за індивіду, що підлягає лікуванню, який належить до необхідності розділенню на окремі компоненти, іншого виду, наприклад, коню, людині або спортінкубується і за необхідності піддається першому смену. фракціонуванню. Особливо переважно первинна Інший аспект винаходу належить до створення посудина, вторинна посудина і перехід зафіксовані кондиціонованої композиції крові, яку можна одерна одній загальній несучій пластині. Особливо пежати або яка переважно одержана за допомогою реважно перехід виконаний з можливістю закриспособу, згідно з винаходом. її можна застосовування за допомогою щонайменше одного переривати, згідно з винаходом, для лікування, полегвника, який може бути виконаний у вигляді шення, зцілення або профілактик хвороби тіла клапана, крана і/або пробки. Під «вторинною посулюдини або тварини. Згідно з винаходом, така диною» розуміється переважно посудина, тобто композиція крові містить індуковані при виконанні місткість, в яку вводиться повністю або частково способу, згідно з винаходом, фактори інтерлейкірозділена в первинній посудині повністю або частну-6 в кількості щонайменше 30, переважно більково на свої окремі компоненти рідина або суспенше 200, 1000, 5000, 10000 пг/мл, переважно від 30 зія і піддається другому фракціонуванню. Кожна з до 20000 пг/мл. Зрозуміло, що одержана за допоцих посудин переважно оснащена щонайменше могою способу, згідно з винаходом, композиція одним, зокрема, відводом і/або підводом, що закрові поряд з інтерлейкіном-6 має як індуковані кривається, зокрема, для підведення, тобто ввефактори інші індуковані фактори. Несподіваним дення, відповідно, реаплікації компонентів крові чином було встановлено, що саме одержувана, і/або відведення, тобто витягання, компонентів згідно з винаходом, композиція індукованих факкрові. Додаткові внутрішні структури, згідно з винаторів виявляє в суміші переваги і дії, згідно з винаходом, такі як скляні кульки переважно передбаходом. чені, відповідно заповнені в первинну посудину. Переважною є кондиціонована композиція, яка У одному переважному варіанті виконання папоряд з інтерлейкіном-6 (IL-6) має щонайменше кет, відповідно пакетна система, для крові викориодин додатковий компонент, вибраний з: антагоністовується для відділення твердих складових часста рецептора інтерлейкіну-1 (IL-1Ra), інтерлейкітин крові від кондиціонованої композиції сироватки ну-4 (IL-4), інтерлейкіну-13 (IL-13), інтерлейкіну-1 крові за допомогою центрифугування у відцентро(IL-1), інтерлейкіну-10 (IL-10), фактора некрозу вому стакані. Він переважно виконаний так, що пухлини (TNF), інсуліноподібного фактора росту виконана переважно у вигляді еластичного пакета (IGF), трансформуючого фактора росту (TGF), посудина розширяється при центрифугуванні так, тромбоцитарного фактора росту (PDGF), фактора що стінки посудини частково і/або повністю впиросту фібробластів (FGF) і гепатоцитного фактора раються у внутрішню стінку відцентрового стакана. росту (HGF). Переважно застосовувати стерильний стакан. За У одному варіанті виконання кондиціонована рахунок цього особливо переважно зменшується композиція крові містить частку антагоніста рецепнавантаження на розтягнення стінок посудини і тора інтерлейкіну-1 (IL-1Ra) від 30 до 50000 пг/мл. одержуваних клітин під час центрифугування. ПеУ іншому варіанті виконання кондиціонована комреважне застосування відцентрового стакана допозиція крові містить частку інтерлейкіну-4 (IL-4) зволяє також використовувати механічно більш від 2 до 100 пг/мл. У іншому варіанті виконання легкий, більш тонкий і менш стабільний матеріал кондиціонована композиція крові містить частку стінок для переважно еластичного пакета. інтерлейкіну-13 (IL-13) від 2 до 100 пг/мл. У іншому У одному переважному варіанті виконання варіанті виконання кондиціонована композиція способу інкубована композиція крові є алогенною крові містить частку інтерлейкіну-1 (IL-1) від 5 до композицією крові, яку беруть у вигляді цільної 1000 пг/мл. У іншому варіанті виконання кондиціокрові у людського або тваринного донора і, після нована композиція крові містить частку інтерлейківиконання способу, згідно з винаходом, у вигляді ну-10 (IL-10) від 5 до 1000 пг/мл. У іншому варіанті кондиціонованої композиції крові, переважно у виконання кондиціонована композиція крові місвигляді кондиціонованої композиції сироватки кротить частку фактора некрозу пухлини (TNF) від 5 ві можна вводити людському донору. У одному до 1000 пг/мл. У іншому варіанті виконання кондиваріанті виконання композиція крові є аутологічціонована композиція крові містить частку інсуліною, тобто організм донора і організм реципієнта є ноподібного фактора росту (IGF) від 100 до 15000 ідентичними. У цьому особливо переважному вапг/мл. У іншому варіанті виконання кондиціонована ріанті виконання можуть виявлятися всі переваги композиція крові містить частку трансформуючого аутологічного донорства. Фахівець може вибирати фактора росту (TGF) від 10 до 20000 пг/мл. У інвид і ідентичність донора залежно від застосуваншому варіанті виконання кондиціонована композиня і доцільності. При цьому можна враховувати ція крові містить частку тромбоцитарного фактора звичайно відомі критерії і переваги, які належать росту (PDGF) від 100 до 10000 пг/мл. У іншому до аутологічного донорства. варіанті виконання кондиціонована композиція крові містить частку фактора росту фібробластів 13 90048 14 (FGF) від 50 до 10000 пг/мл. У іншому варіанті виТому, згідно з іншим аспектом винаходу, конконання кондиціонована композиція крові містить диціонована композиція крові застосовується для частку гепатоцитного фактора росту (HGF) від 50 одержання лікарського засобу для лікування або до 10000 пг/мл. профілактики хвороб тіла людини або тварини. Ці Несподіваним чином якраз наявна в одержухвороби зазначені вище. ваній кондиціонованій композиції крові суміш індуНарівні з цим передбачене застосування комкованих факторів і цитокінів діє особливо ефектипозиції крові, згідно з винаходом, також як нетеравно терапевтично і профілактично. Згідно з певтичного косметичного засобу, як так званого винаходом, кондиціонована композиція крові, відзасобу «проти старіння». Було встановлено, за повідно одержувана з неї кондиціонована компорахунок систематичного і/або місцевого застосузиція сироватки крові, застосовується особливо вання пом'якшуються або виліковуються тілесні ефективно при ряді хвороб, відповідно недуг тіла супутні віку явища, передусім вказані вище симплюдини або тварини, які вона лікує, виліковує або томи, або ж можна поліпшувати зовнішній вигляд: полегшує, відповідно забезпечує профілактику цих шкіру, волосся, нігті. Згідно з іншим аспектом вихвороб і недуг. находу, композиція крові, згідно з винаходом, заОдержувана, згідно з винаходом, кондиціоностосовується для одержання косметичних засобів. вана композиція крові, відповідно кондиціонована Нарешті, даний винахід належить також до композиція сироватки крові, застосовується при способу лікування або профілактики вказаного захворюваннях м'язів, при захворюваннях опорновище захворювання тіла людини або тварини, рухового апарату, а також запаленнях і подразякий включає щонайменше наступну стадію: ввененнях нервової системи, передусім захворювандення кондиціонованої композиції крові, згідно з нях сухожильного апарату, таких як пошкодження винаходом, в тіло людини або тварини в терапевсухожиль, запалення сухожильної піхви, пошкотично або профілактично ефективній дозі. Дозу і дження зв'язок і дегенерація зв'язок, а також для вид введення вибирає фахівець залежно від сфешвидкого зцілення, полегшення, відповідно профіри застосування і доцільності. лактики алергій, непереносимості продуктів живПриклади виконання лення або лікувальних засобів, захворювань за Винахід пояснюється нижче більш детально за участі імунної системи, передусім аутоімунних допомогою подальших прикладів і креслення, при захворювань, зокрема ревматоїдного форменого цьому приклади потрібно розуміти як такі, що не контуру, а також хвороб, зумовлених нейродермімають обмежувального характеру. Фахівець може том, і для лікування і виліковування хронічних ран, з прикладів зрозуміти основний принцип винаходу зокрема діабетичних виразок, лікування ендометі пов'язані з ним технічні переваги. Він може переріозу, а також лікування хронічного запалення нести основні принципи і технічні переваги на інші, очей, і регенерації, відповідно полегшення болів в явному вигляді не вказані сфери. від подразнення сухожиль у коня. До захворювань На кресленні схематично показаний переважм'язів належать м'язові захворювання, які виклиний варіант виконання пристрою, згідно з винахокаються пошкодженнями м'язів при операціях на дом, посудини, що складається з виконаного у м'язах, в зв'язку з розривом м'язових волокон при вигляді еластичного пакета 10 з переважно напівдегенерації м'язів, при дефектах м'язів, при атрокруглою нижньою ділянкою 14 і переважно звужуфії м'язів, при розриві м'язів, дистрофії м'язів, відваною верхньою ділянкою 15, щонайменше з одповідно, втомою м'язів або болем в м'язах. ним підводом і/або відводом 11, який входить у Тому даний винахід належить до застосування лійкоподібну верхню ділянку 15 посудини. На її композиції крові, згідно з винаходом, і одержуваної нижньому кінці, який входить в просвіт посудини з неї кондиціонованій композиції сироватки крові 10, переважно передбачений манжетний клапан для лікування або профілактики недуг тіла людини 13, тобто вібраційний клапан. або тварини. Недуги тіла людини або тварини, які Приклад 1: Набір для одержання кондиціономожна переважно лікувати, полегшувати або виліваної композиції крові з цільної крові ковувати, або ж попереджувати, вибираються з Складається стерилізований набір для однохвороб ревматоїдної групи, хвороб опорноразового використання, який містить наступне: рухового апарату, а також хвороб, які пов'язані з - пакетну систему для інкубації крові і для відімунною системою, а також хвороб, які викликають ділення твердих складових частин крові (кресленгострі і хронічні болі. ня, таблиці 1 і 2), забезпечену кульками з боросиЗрозуміло, що для адекватного лікування відлікатного скла (приблизно 200 штук) з діаметром повідних хвороб фахівець вибирає відповідний 3,5 мм, доцільний вид застосування для введення конди- канюлю калібру 20 для заправляння протизціонованої композиції крові, згідно з винаходом. гортального засобу в шприц для взяття крові, Кондиціоновану композицію крові або композицію - шприц об'ємом 60 мл для взяття крові, сироватки крові ін'єктують або вливають в тіло - канюлю типу «метелик» для взяття крові, і/або відповідний орган, такий як суглоб, м'яз, су- шприц об'ємом 60 мл для розміщення кондихожилля, шкіра або нерв, а саме, переважно внутціонованої композиції сироватки крові. рішньовенно, внутрішньоартеріально, підшкірно, Всі компоненти є одноразовими, упакованими і внутрішньошкірно, під слизову оболонку, місцево, гамма-стерилізованими і забезпечені загальною інтратекально, периспінально, в і/або біля центрастерильною верхньою упаковкою. льних нервів, в і/або біля периферійних нервів, У таблицях 1 і 2 наведені матеріали для завнутрішньосуглобово і/або внутрішньом'язово. стосовуваних компонентів. 15 90048 16 Таблиця1 Компоненти Пакет (10) Внутрішні структури Матеріал, постачальник Плівка для пакета: ПВХ компаунд 3222 (Solvay Draka) 200 кульок з боросилікатного скла, діаметр 3,5 мм (Duran®) Таблиця 2 Набір для одержання кондиціонованої композиції крові Компоненти Пристрій, згідно з винаходом Канюля типу метелик, 1,1x19 мм Канюля, 1,1x40 мм Шприц, 60 мл Шприц, 10 мл 3 (12 см ) Перфузійна трубка, 1,5 м, 1,0x2,7 мм Блістерна упаковка, 0,9x206x500 мм Запечатувальний папір Матеріал, постачальник Дивись таблицю 1 Закриваючий ковпачок Адаптер LL З'єднувальна головка крил Шланг Канюля Захисний шланг З'єднувальна головка Захисний ковпачок Канюля Циліндр Шток поршня Пробка поршня Циліндр Шток поршня Пробка поршня Штир LL Ковпачок Гніздо LL Ковпачок Шланг: Внутрішній шар Середній шар Зовнішній шар PET-GAG ΡΕ ABS, прозорий PVC PVC 60 Sh A ISO 638/13 PE PP PP Нержавіюча сталь за DIN EN ISO 9626 PP PP Природний каучук PP PP PP ABS KR 2802 PE, напівпрозорий PVC ABS, червоний NDPE EVA PVC Tyvek 10MP/1073B Приклад 2: Одержання кондиціонованої композиції сироватки крові з цільної крові a) Взяття крові Взяття крові здійснюється за допомогою шприца Луерлока об'ємом 60 мл. Шприц повільно заповнюють цільною кров'ю до відмітки 60 мл. Потрібно звертати увагу на відсутність пузирчиків, щоб в шприці дійсно знаходилося точно 60 мл крові. b) Заповнення пакетної системи і інкубація Вміст шприца повільно і повністю через підвід/відвід 11 наливають у виконану у вигляді пакета еластичну посудину 10. У посудині розташовано приблизно 200 кульок з боросилікатного скла (Duran®) з діаметром 3,5 мм. Шприц після заповнення відгвинчують, і з'єднання (12) пакета знов закривають новим закриваючим ковпачком. Посудину 10 залишають при температурі близько 37°С протягом 9-36 годин переважно у висячому положенні. При цьому відбувається інкубація взятої крові в посудині із кульками, що збільшують внутрішню поверхню. Збільшена внутрішня повер 2 хня становить приблизно 350 мм на 1 мл інкубованої крові. с) Відділення твердих складових частин крові У стерильній відцентровій підвісці у відцентровий стакан встановлюють посудину 10. Після контролювання правильного балансування ваги виконують центрифугування при приблизно 2500 об./хв. протягом приблизно 3 хвилин. Після завершення центрифугування, при якому відбувається відділення клітинних складових частин крові від рідких складових частин, обережно витягують відцентровий стакан разом з посудиною 10. За рахунок центрифугування клітини крові, головним чином еритроцити (EZ), збираються в нижній ділянці посудини 10. Центрифугування відділяє сироватку від зсідка крові. Сироватку переводять у другий пакет і потім за необхідності піддають центрифугуванню другий раз. Через відбірне з'єднання підводу/відводу 11 відбирають кондиціоновану композицію сироватки. Потім відгвинчують заповнений шприц. Приклад 3: Аналіз кондиціонованої композиції сироватки крові 17 90048 18 Було підготовлено чотири дослідних набори А, У іншому наборі D іншу систему відбору крові, В, С, D і Е, які застосовувалися однаково для інкуяка має по суті циліндричну форму, заповнювали бації цільної крові. 36 скляними кульками з діаметром 1,5 мм. У цьому У наборі А комерційно доступний пакет для випадку внутрішня поверхня складає в цілому 2 крові (OSTEOKIN, Orthogen, Дюссельдорф), який приблизно 4050 мм . При 10 мл заповнюваної кропо суті описаний в прикладах 1 і 2, заповнювали ві це відповідає коефіцієнту поверхні приблизно 2 210 кульками з боросилікатного скла (Duran®) з 405 мм /мл. діаметром 3,5 мм. За рахунок додавання внутрішУ іншому наборі Ε систему відбору крові, яка ніх структур внутрішня поверхня модифікованої має по суті циліндричну форму, заповнювали 62 2 посудини складає в цілому приблизно 18125 мм . скляними кульками з діаметром 3,5 мм. У цьому При інкубації 50 мл крові відношення поверхні до випадку внутрішня поверхня складає в цілому 2 об'єму (коефіцієнт поверхні) модифікованої посуприблизно 6200 мм . При 10 мл заповнюваної кро2 дини становить приблизно 360 мм /мл. ві це відповідає коефіцієнту поверхні приблизно 2 У іншому наборі В використовували ту ж паке620 мм /мл. тну систему для крові, що і в наборі А, однак без У всіх випробуваннях відбирали свіжу венозну заповнення додатковими внутрішніми структурацільну кров і заповнювали в посудини наборів А, В ми. Незаповнена пакетна система для крові має і С Посудини піддавали інкубації при температурі 2 внутрішню поверхню приблизно 10000 мм . При 50 приблизно 37°С протягом 24 годин (t=24 год.). Домл крові це відповідає коефіцієнту поверхні прибдатково до цього, як контроль приблизно 10 мл 2 лизно 200 мм /мл. свіжої цільної крові тих же донорів обробляли безУ іншому наборі С використовували ту ж пакепосередньо після відбору крові (t=0 год.). тну систему для крові, що і в наборі А, і заповнюПісля закінчення часу інкубації визначали кільвали 780 кульками з діаметром 3,5 мм. У цьому кість компонентів крові IL-1Ra, IL-6, TNFa і IL-1β в випадку внутрішня поверхня складає в цілому композиції крові. Результати наведені в таблиці 3. 2 приблизно 40000 мм . При 50 мл крові це відпові2 дає коефіцієнту поверхні приблизно 800 мм /мл. Таблиця 3 Фактор/ цитокін, в пг/мл IL-1Ra IL-6 TNFa IL-β t=0 год. 323,7 3,7 19,9 1,00 A 360 2 мм /мл 8592 2830 718,3 396,6 В 200 2 мм /мл 6626 1571 204,5 92,69 t = 24 год. С 800 2 мм /мл -* -* -* -* D 405 2 мм /мл 2663 847,5 31,54 16,81 Ε 620 2 мм /мл 7836 2933 569,8 154,8 *) Лізис клітин, відсутність вимірювання У той час як набори А і В показують явну індукцію аналізованих факторів в композиції крові, в наборі С під час інкубації відбувся гемоліз. Це показує, що сила індукції залежить від коефіцієнта поверхні; при більшому коефіцієнті поверхні (більшій внутрішній поверхні) одержують велику частку індукованих цитокінів. Одночасно існує верхня границя коефіцієнта поверхні; при подоланні критичної величини відбувається гемоліз. Гемолізовану композицію крові не можна більше використовувати. При великих коефіцієнтах поверхні поблизу критичної величини можна пригнічувати гемоліз у визначених межах за рахунок скорочення часу інкубації з 24 годин до 6-9 годин (дані не показані). Приклад 4: Цитокіновий профіль кондиціонованої композиції крові У додатковому наборі циліндричну посудину для відбору крові заповнювали для збільшення внутрішньої поверхні 36 скляними кульками з боросилікатного скла (Duran®) з діаметром 1,5 мм. Інкубації піддавали 50 мл свіжовзятої цільної крові. Коефіцієнт поверхні становив приблизно 405 2 мм /мл. У посудині для відбору крові кров піддавали інкубації при температурі приблизно 37°С протягом 3 годин, 9 годин і 24 годин. Потім визначали вміст цитокінів FGF, IL-4, IL-10, IL-1β, TNF, IL-6, IL1Ra і TGF β. Результати: Вже після 3 годин інкубації виявилося явне збільшення вмісту цитокінів в кондиціонованій композиції крові. У таблиці 4 виміряні після 24 годин (t=24 год.) величини протиставляються величинам, виміряним безпосередньо після відбору крові (t=0 год.). 19 90048 20 Таблиця 4 Фактор/цитокін, в пг/мл FGF IL-4 IL-10 IL-1β TNF IL-6 IL-1Ra ΤGFβ t=0 год. 0,1 5,4 7,9 3,9 6,0 241,9 18313 Приклад 5: Лікування нейродерміту Для лікування нейродерміту одержану, згідно з винаходом, кондиціоновану композицію крові вводили пацієнтам у вигляді ін'єкцій, а також внутрішньосуглобових ін'єкцій. При цьому ін'єктували 2 мл кондиціонованої композиції крові протягом 3 тижнів з перервами в 2-3 дні. Поліпшення симптомів нейродерміту можна було встановити протягом 3 днів. Повторне загострення хвороби приблизно після 2,5 місяців було успішно вилікуване також за допомогою 3 ін'єкцій. У інших пацієнтів, у яких застосовувалися внутрішньосуглобові ін'єкції, первинно для лікування болів в колінах (зумовлених артрозом і болями в меніска) також поліпшувалися симптоми нейродерміту в ході 6 ін'єкцій. Після цього більше не відбувалося загострення нейродерміту. Приклад 6: Лікування запалення або подразнення нервової системи У цьому застосуванні за допомогою одержаної, згідно з винаходом, кондиціонованої композиції крові лікували пацієнтів з болями в спині (n=30), які протягом щонайменше останніх 6 місяців страждали хронічними, викликаними радикулітом болями в спині, за допомогою локальних ін'єкцій біля корінця нерва (епідурально-перидуральна ін'єкція за Кремером і ін.). Болі послабшали протягом декількох тижнів, і дія зберігалася в середньому ще після 6 місяців. При цьому був встановлений щонайменше однаковий або злегка поліпшений результат в порівнянні з пацієнтами, яких лікували за допомогою тієї ж техніки ін'єкцій 5 мг або 10 мг глікокортикоїду (триамцинолону) як порівняльної речовини. Приклад 7: Лікування ендометріозу Пацієнток (n=4), які страждали болісним ендометріозом, лікували за допомогою внутрішньоперитональної ін'єкції 4 мл одержаної, згідно з винаходом, кондиціонованої композиції сироватки крові безпосередньо у викликану ендометріозом тканину пухлини і/або в черевну порожнину. Після цього, спочатку пов'язаного з сильними болями застосування, наступало явне зменшення болів. Ця дія продовжувалася і приводила майже до повної відсутності болю на наступний день. Як продовження терапії продовжували лікування за допомогою підшкірних ін'єкцій по 2 мл кондиціонованої сироватки крові. До цього часу ще не спостерігалося жодного рецидиву, відповідно поновлення болів. t=24 год. 2,0 7,9 55,4 409 536 3444 9975 36696 Гальмуюча болі дія кондиціонованої композиції крові, згідно з винаходом, несподіваним чином набагато перевершує дію звичайних анальгетиків. Приклад 8: Хронічне запалення очей у коня Для лікування хронічного запалення очей у коня (кінського рецидивного увеїту, ERU) одержану, згідно з винаходом, кондиціоновану композицію крові ін'єктували в око (під слизову оболонку), відповідно закапували в око (місцево) 6 коням, з яких кожні З коня лікувалися в двох різних ветеринарних лікарнях. Всередині періоду часу після лікування аж до 10 місяців не було виявлено жодного рецидиву у цих коней. Приклад 9: Регенерація і зменшення болів при подразненні сухожиль у коня У іншому застосуванні кондиціонованої композиції кров проводили лікування коней з кульгавістю, зумовленою масивним подразненням сухожильної піхви, що супроводжується утворенням виливу в сухожильній піхві, за допомогою ін'єкцій 3 мл кондиціонованої сироватки крові, згідно з винаходом, в сухожильну піхву. Для цього спочатку в першій стадії пунктирували витікання для зменшення тиску на тканину і видалення запальних речовин. Після першої ін'єкції зменшилася протягом одного тижня як кульгавість, так і встановлене у другого тижня кількість виливу. Після чотирьох тижнів, тобто один тиждень після ін'єкції третьої і останньої дози в сухожильну піхву, була встановлена майже повна ремісія як кульгавості, так і виливу. Такі ж ін'єкції в так звані «пошкодження жил» (Core Lesions) і/або «підшкірні пошкодження» (superficial lesions), тобто дегенеративні зміни всередині сухожильної тканини, приводили також до явної ремісії цих клінічних симптомів. У деяких випадках спостерігалося знов заповнення дефекту колагеновими волокнами. Приклад 10: Лікування ран у коня 14-річний мерин, що шкутильгає на декількох суглобах, страждав вже декілька тижнів через персистуючу рану над лівим переднім копитом. Кондиціоновану композицію крові, згідно з винаходом, капали на цю рану (3 краплі на поверхню близько 1x3 см). Потім рану забинтували. Після заключного огляду (після трьох нанесень з інтервалом в один тиждень) після 4 тижнів було встановлено, що відкрита поверхня рани зменшилася приблизно на одну третину. 21 Комп’ютерна верстка І. Скворцова 90048 Підписне 22 Тираж 26 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601