Пероральна композиція рослинного походження для лікування орального кандидозу

Реферат: Винахід стосується застосування пероральної композиції рослинного походження для лікування орального кандидозу, зокрема викликаного стійкими до азолу штамами Candida albicans. Зазначена композиція містить 0,05-20 % екстракту з ягід рослини Piper cubeba від загальної ваги композиції у формі в'язкої олії і щонайменше одну фармацевтично прийнятну допоміжну речовину, і може бути складена у формі льодяника, жувальної таблетки або перорального гелю. UA 104292 C2 (12) UA 104292 C2 UA 104292 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Галузь винаходу Даний винахід стосується пероральної композиції рослинного походження для застосування в лікуванні хвороб ротової порожнини, причому композиція включає терапевтично ефективну кількість екстракту рослини Piper cubeba (P. cubeba). Більш специфічно даний винахід стосується пероральної композиції рослинного походження для застосування в лікуванні орального кандидозу або молочниці ротової порожнини, причому композиція включає терапевтично ефективну кількість екстракту рослини Piper cubeba (P. cubeba). Даний винахід також забезпечує спосіб виробництва пероральної композиції рослинного походження. Передумови винаходу Кандидоз (дріжджова інфекція або молочниця) являє собою грибкову інфекцію (мікоз), що викликається членом видів Candida. Дріжджі Candida звичайно присутні у більшості людей, але їх неконтрольоване розмноження може призвести до інфекції ротової порожнини, шкіри або піхви. Надмірний розвиток дріжджів Candida стримується іншими мікроорганізмами, що існують в природі, наприклад, бактеріями, що співіснують з дріжджами в тих самих місцях, та імунною системою людини. Однією з поширених причин кандидозу може бути часте застосування антибіотиків, які, як передбачено клінічно, руйнують шкідливі мікроорганізми і мікроорганізми, що викликають захворювання в організмі, але вони можуть також руйнувати корисні мікроорганізми, які відповідають за стримування росту дріжджів (грибів). Руйнування корисних мікроорганізми може викликати те, що ріст дріжджів (грибів) вийде з-під контролю, приводячи до стану, відомого як candidiasis moniliasis або "дріжджова" інфекція. Ослаблена або нерозвинута імунна система або метаболічні порушення, такі як діабет, можуть також провокувати у осіб Кандидоз. Оральний кандидоз (молочниця ротової порожнини) є найбільш поширеною грибковою інфекцією в слизових оболонках рота. Хоча молочниця ротової порожнини може вражати будького, але вона більш поширена у немовлят і дітей дошкільного віку, людей, що носять зубні протези, і у людей з ослабленими імунними системами, особливо тих, що страждають на синдром набутого імунодефіциту (СНІД), пацієнтів з раком, що проходять хіміотерапію, і тих, кому зробили трансплантацію кісткового мозку або трансплантацію цільного органу, або інших пацієнтів з ослабленим імунітетом. Як зазначено в даному винаході вище, патоген, що викликає захворювання, є звичайно видами Сandida (гриби). Найбільш поширено, оральний кандидоз викликає Candida albicans (C. albicans), хоча, повідомляли про появу інших видів Candida, що викликають оральний кандидоз. У відносно недавньому повідомленні про 153 ВІЛ-позитивних пацієнтів, було описано, що 21 % з цих пацієнтів мали оральний кандидоз, який викликали види, інші, ніж Candida albicans, найбільш поширеним з яких був Candida glabrata (Masia Canuto et al.; Med. Clin. 112:211-214, (1999)). Подібно до цього, також встановили, що 25 % видів дріжджів, виділених з осіб зі СНІДом, були види, інші, ніж Candida albicans (Morace G. et al; Eur. J. Epidemiol. 6:398-403(1990)). В більш недавньому дослідженні, що включає встановлення і визначення видів Сandida, відповідальних за спричинений оральний кандидоз у дітей і підлітків, що мають рак, було встановлено, що, хоча C. albicans був найбільш поширеним видом, інші види, а саме Candida parapsilosis (C. parapsilosis), Candida tropicalis (C. tropicalis), Candida krusei (C. krusei), Candida glabrata (C. glabrata) та Candida lusitaniae (C. lusitaniae), були також відповідальними за викликаний оральний кандидоз (Med. Oral. Patol. Oral. Cir. Bucal; 2007 Oct. 1; 12(6); E419-23 (2007). Найбільш поширеними симптомами орального кандидозу є дискомфорт і печіння рота та горла і змінене почуття самку. Оральний кандидоз характеризується виникненням білястих оксамитових бляшок на слизовій оболонці рота і язика, і зскрібання цього білястого матеріалу залишає червоне (еритематозне) висипання під ним з капілярною кровотечею. У людей з імунною недостатністю інфекція може бути масивною, і додатково вона може поширюватися на стравохід, спричиняючи кандидозний езофагіт, викликаючи біль в роті і з часом приводячи до болісного утрудненого ковтання. Стандартна терапія для лікування орального кандидозу включає застосування протигрибкових агентів, вибраних з поліенових похідних, таких як амфотерицин B і структурно пов'язана сполука, ністатин (мікостатин); і азольних протигрибкових агентів, таких як міконазол, кетаконазол, флюконазол, ітраконазол або клотримазол. Проте, існують обмеження для застосування цих синтетичних протигрибкових агентів відносно їх недостатнього профілю безпеки, множинних взаємодії між лікарськими засобами, надмірної вартості і недостатньої ефективності через зростаючу стійкість видів Сandida до традиційних протигрибкових агентів. Повідомляли про поширення стійкості видів Сandida, особливо C. albicans, виділених з пацієнтів із СНІДом, до протигрибкових агентів, зокрема амфотерицину B і флюконазолу (Law D. et al., J. Antimicro. Chemo (1994) 34, 659-668). Розвиток стійкості видів Сandida, особливо експериментальної популяції C. albicans, до азольних протигрибкових агентів, особливо 1 UA 104292 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 флюконазолу, кетоконазолу та ітраконазолу (Leah E. Cowen et al., J. Bacteriology, March 2000, 182 (6), p. 1515-1522), додатково робить лікування менш ефективним. Також, дані досліджень вказують на те, що стійкий до флюконазолу C. albicans, можуть викликати рецидивний оральний кандидоз у пацієнтів з ВІЛ інфекцією, пацієнтів, що приймають протиракову хіміотерапію, і пацієнтів, яким зробили трансплантацію кісткового мозку або трансплантацію цільного органу (Kieren A. Marr et al., Antimicrobial Agents and Chemotherapy, Oct. 1998; 42(10): 2584-2589). Застосування альтернативних способів терапії, особливо терапії на основі рослинних препаратів, набирає темпу в усьому світі. Деякі рослини, рослинні екстракти або речовини, що походять з рослин, використовувалися протягом років для лікування широкого спектру хвороб. Застосування рослинних композицій для лікування хвороб ротової порожнини відомо з рівня техніки і набуває зростаючої важливості. Ефірні олії, екстраговані з трав, забезпечувалися для застосування в комплементарній медицині для бактеріальних і грибкових інфекцій. Опублікована заявка на патент Японії № 2003089652A стосується композиції рослинного походження для профілактики виникнення і для лікування орального кандидозу (молочниці ротової порожнини). Композиція містить суміші різних ефірних олій в якості активних інгредієнтів, які вибирають з олії чайного дерева, олії лаванди Shinsei, олії лаванди широколистої, олії лаванди-спік, рожевої олії, геранієвої олії, пачулевої олії, олії лимону GURASU і пальмарожевої олії. Компоненти ефірних олій являють собою терпінен-4-ол, ліналоол, цитронелол, гераніол, цитрал, цитронелаль і хінокітіол. Рослина Piper cubeba L. (P. cubeba), загальновідома як Kababchini (в Індії) належить до родини Piperaceae. Рослина P. cubeba мала широке застосування в Азії в якості приправи, харчової добавки і заспокійливого засобу при запаленні горла і для лікування кашлів. Про застосування екстракту P. cubeba в комбінації з іншими рослинними екстрактами в лікуванні певних медичних розладів повідомлялося в даній галузі техніки. Наприклад, опублікована заявка на патент США № 20040126441 A1 вказує на синергічну композицію рослинного походження, що містить екстракти P. cubeba, Glycyrrhiza glabra, Acorus calamus, Alpinia galanga, Zingiber officinale разом із фармацевтично прийнятними добавками, для застосування в якості протикашльового, відхаркувального і полегшуючого біль у горлі складу. Опублікована заявка на патент Японії № 56083416A стосується композиції для ротової порожнини для попередження зубного карієсу і парадонтозу, де композиція містить один або більше матеріалів, екстрагованих за допомогою органічних розчинників з рослин, вибраних з групи, що містить Ginkyo biloba L., Anethum graveolens L., Piper Cubeba L., Nardostachys jatamansi DC, Zingiber officinale Roscoe, Asiasarum Sieboldi F. Maekawa, Bupleurum Falcatum L., Malva silvestris L., Caesalpinia sappan L., Terminalia charbrila Rety і т. і. Опублікована заявка на патент Японії № 2001278800A стосується каріостатичного агенту (протикарієсного агенту), що містить, щонайменше, один екстракт рослини, вибраної з Sariawan (Olygala glomerata Lour) або Kemukus (P. cubeba L), де каріостатичний агент складають у вигляді композиції для застосування в якості зубного еліксиру, а також в якості добавки до їжі або напою, для профілактики хвороб ротової порожнини, особливо зубного нальоту. Звіт про дослідження (Silva M L et al., Phytotherapy Research, 2007, 21(5): 420-2) розкриває активність спиртового екстракту P. cubeba проти оральних патогенів (мікроорганізмів). Мікроорганізми, що використовували в дослідженні, включали Enterococcus faecalis, Streptococcus salivarius, Streptococcus mitis, Streptococcus mutans, Streptococcus sobrinus, Streptococcus sanguinis і C. albicans. Відповідно до звіту, сирий спиртовий екстракт з насіння P. cubeba, (-)-кубебін і його напівсинтетичні похідні проявляли активність проти зазначених мікроорганізмів.Встановили, що сирий екстракт є найактивнішим проти Streptococcus salivarius. З рівня техніки видно, що ще існує давно назріла потреба і високий попит на пероральну композицію для лікування орального кандидозу, що може боротися з небажаними побічними ефектами, пов'язаними з синтетичними препаратами, подолати стійкість до традиційних протигрибкових агентів, а також забезпечити додаткові переваги. Даний винахід забезпечує рішення цієї проблеми в формі пероральної композиції рослинного походження, яка може задовольнити загальновизнану потребу, забезпечуючи ефективне і безпечне лікування орального кандидозу. Композиція рослинного походження також дає додаткові органолептичні переваги. Цілі винаходу Відповідно, ціль даного винаходу полягає в тому, щоб забезпечити пероральну композицію рослинного походження для застосування в лікуванні орального кандидозу (молочниці ротової порожнини), де композиція містить терапевтично ефективну кількість екстракту рослини P. cubeba. Інша ціль даного винаходу полягає в тому, щоб забезпечити пероральну композицію 2 UA 104292 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 рослинного походження для застосування в лікуванні орального кандидозу (молочниці ротової порожнини), де композиція містить терапевтично ефективну кількість екстракту P. cubeba разом із, щонайменше, однією фармацевтично прийнятною допоміжною речовиною. Інша додаткова ціль даного винаходу полягає в тому, щоб забезпечити пероральну композицію рослинного походження для застосування в лікуванні стійкого до азолу орального кандидозу, де композиція містить терапевтично ефективну кількість екстракту P. cubeba разом із, щонайменше, однією фармацевтично прийнятною допоміжною речовиною. Інша ціль даного винаходу полягає в тому, щоб забезпечити пероральну композицію рослинного походження для застосування в лікуванні орального кандидозу, де композиція містить терапевтично ефективну кількість екстракту P. cubeba, що забезпечує поліпшене дотримання пацієнтом схеми лікування. Інша ціль даного винаходу полягає в тому, щоб забезпечити спосіб виготовлення пероральної композиції рослинного походження, що включає етапи отримання рослинного екстракту P. cubeba і складання зазначеного екстракту з однією або більше фармацевтично прийнятними допоміжними речовинами. Інша ціль даного винаходу полягає в тому, щоб забезпечити спосіб лікування орального кандидозу у суб'єкта, де спосіб включає введення суб'єкту, що цього потребує, терапевтично ефективної кількості пероральної композиції рослинного походження, що містить терапевтично ефективну кількість екстракту P. cubeba і, щонайменше, одну фармацевтично прийнятну допоміжну речовину. Різні цілі та переваги даного винаходу стануть очевидними з детального опису даного винаходу. Короткий опис винаходу Даний винахід забезпечує пероральну композицію рослинного походження для застосування в лікуванні орального кандидозу (молочниці ротової порожнини), де зазначена композиція містить терапевтично ефективну кількість екстракту рослини P. cubeba і, щонайменше, одну фармацевтично прийнятну допоміжну речовину. Пероральна композиція рослинного походження даного винаходу може бути складена в формі льодяника, жувальної таблетки і перорального гелю. Пероральна композиція рослинного походження забезпечується для застосування в лікуванні стійкого до азолу орального кандидозу. В одному аспекті даний винахід забезпечує спосіб виготовлення пероральної композиції рослинного походження, де зазначений спосіб включає етапи, на яких: a) отримують ягоди of P. cubeba; b) висушують ягоди P. cubeba в тіні; c) подрібнюють висушені ягоди P. cubeba для отримання дрібнозернистого порошку; d) екстрагують повторно дрібнозернистий порошок, отриманий на етапі (c), з неполярним розчинником; e) концентрують екстракт у вакуумі для отримання концентрованого рідкого екстракту в формі в'язкої олії; і f) складають екстракт, який знаходиться в формі в'язкої олії, з однією або більше фармацевтично прийнятними допоміжними речовинами для отримання композиції рослинного походження. В іншому аспект даний винахід забезпечує спосіб лікування орального кандидозу у суб'єкта, де спосіб включає введення суб'єкту, що цього потребує, терапевтично ефективної кількості пероральної композиції рослинного походження, що містить терапевтично ефективну кількість екстракту P. cubeba і, щонайменше, одну фармацевтично прийнятну допоміжну речовину. Детальний опис винаходу Даний винахід забезпечує пероральну композицію рослинного походження, яка містить терапевтичноефективну кількість екстракту, що походить з рослини P. cubeba, особливо з ягід рослини, де зазначена композиція забезпечується для застосування в лікуванні орального кандидозу. Композиція рослинного походження може бути складена в формі льодяника, жувальної таблетки і перорального гелю. Композиція рослинного походження даного винаходу містить екстракт P. cubeba в якості активного інгредієнту і відповідні фармацевтично прийнятні допоміжні речовини, щоб складатися у бажану форму. Відповідно, пероральна композиція рослинного походження даного винаходу містить терапевтично ефективну кількість екстракту, що походить з ягід рослини P. cubeba, де зазначена композиція забезпечується для застосування в безпечному і ефективному лікуванні орального кандидозу. Як було зазначено вище, C. albicans є найбільш поширеним видом Сandida, що є патогеном, 3 UA 104292 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 який викликає оральний кандидоз. Проте, як інші види Сandida, особливо C. glabrata і C. krusei, про що також повідомлялося, викликають оральний кандидоз. Відповідно, композиція рослинного походження даного винаходу забезпечується для застосування в лікуванні орального кандидозу, викликаного видами Сandida, вибраними з групи, що містить C. albicans, C. krusei і C. glabrata. Екстракт, що походить з ягід рослини P. cubeba, що міститься в композиції рослинного походження даного винаходу, також проявляє протигрибкову активність проти стійких до азолу штамів видів Сandida, включаючи C. albicans. Відповідно, композиція рослинного походження даного винаходу забезпечується для застосування в лікуванні стійкого до азолу орального кандидозу. Далі наведений перелік визначень для виразів, що використовуються тут. Ці визначення застосовуються до виразів так, як вони використовуються скрізь в описі винаходу, якщо інше не обмежуються в окремих випадках. Вираз "терапевтично ефективна кількість", як використовується в даному документі, означає кількість активного інгредієнту, тобто, екстракту P. сubeba, що підлягає включенню в композицію рослинного походження, яка є суттєво достатньою для того, щоб проявляти протигрибкову активність і значно покращувати стан, який підлягає лікуванню, тобто, оральний кандидоз (молочниця ротової порожнини), але не достатньою для того, щоб запобігати побічній дії, якщо вони мають місце (при доцільному співвідношенні користь/ризик), в обсязі результатів ретельного медичного оцінювання. Вираз "екстракт", як використовується в даному документі, означає концентрат компонентів екстракту, що походить з ягід рослини P. cubeba. Також, вирази "екстракт рослини P. cubeba", “ екстракт P. cubeba" і "екстракт" використовуються взаємозамінно. Вираз "жувальна", як використовується в даному документі, стосується композиції рослинного походження у формі, яку можна жувати в ротовій порожнині для отримання бажаного фармакологічного результату без необхідності ковтати цілу таблетку. Вираз "Мінімальна інгібуюча концентрація (MIC)” визначається як найнижча концентрація екстракту P. cubeba, що не демонструє видимого росту або викликає майже повне інгібування росту видів Сandida. Як використовується в описі винаходу, відсоткові значення (%) представляють масову долю від загальної ваги композиції. Як використовується в описі винаходу, вираз "близько" означає приблизно, і в контексті числових значень вираз "близько" може інтерпретуватися для оцінки значення, що становить ±10 % від викладеного значення або діапазону. Як використовується в описі винаходу, форми однини включають посилання на форми множини, якщо тільки контекст чітко не вказує на протилежне. Рослинний екстракт, включений в композицію рослинного походження даного винаходу, являє собою екстракт, що походить з ягід рослини P. cubeba. Екстракт з ягід рослини P. cubeba отримують, використовуючи неполярний розчинник. Екстракт P. cubeba отримують у формі в'язкої олії, і він має характерний запах. Екстракт проявляє протигрибкову активність проти Candida albicans. Іншими видами Сandida, проти яких екстракт, як з'ясували, проявляє протигрибкову активність, є C. krusei і C. glabrata. Відповідно, композиція рослинного походження даного винаходу може використовуватися для лікування орального кандидозу, який викликають види Сandida, вибрані з групи, що містить C. albicans, C. krusei і C. glabrata. Екстракт P. cubeba є також ефективним проти стійких до азолу штамів видів Candida, включаючи C. albicans, C. krusei і C. glabrata. Відповідно, композиція рослинного походження даного винаходу може використовуватися для лікування орального кандидозу, який є стійким до азолу оральним кандидозом. У варіанті здійснення даного винаходу пероральна композиція рослинного походження, що забезпечується для застосування в лікуванні орального кандидозу, містить 0,05-20 % екстракту P. cubeba від загальної ваги композиції. В іншому варіанті здійснення даного винаходу забезпечує спосіб виготовлення пероральної композиції рослинного походження, де зазначений спосіб включає етапи, на яких: a) отримують ягоди P. cubeba; b) висушують ягоди P. cubeba в тіні; c) подрібнюють висушені ягоди P. cubeba для отримання дрібнозернистого порошку; d) екстрагують повторно дрібнозернистий порошок, отриманий на етапі (c), з неполярним розчинником; e) концентрують екстракт у вакуумі для отримання концентрованого рідкого екстракту у формі в'язкої олії; і 4 UA 104292 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 f) складають екстракт, який знаходиться у формі в'язкої олії, з фармацевтично прийнятними допоміжними речовинами для отримання композиції рослинного походження. Неполярний розчинник, що використовується в способі екстракції даного винаходу, вибирають з групи, що містить петролейний ефір, n-гексан, толуол, n-гептан, хлороформ. Я кості репрезентативних прикладів неполярних розчинників, петролейний ефір використовується для екстракції дрібнозернистого порошку ягід P. cubeba. Екстракція дрібнозернистого порошку висушених ягід P.cubeba проводили, використовуючи неполярний розчинник в кількості, достатній для отримання екстракту в формі в'язкої олії. Екстракцію проводили при температурі близько 35C-40C і під тиском близько 1 атмосфери. У варіанті здійснення даного винаходу пероральна композиція рослинного походження для застосування в лікуванні орального кандидозу містить терапевтично ефективну кількість екстракту P.cubeba у формі в'язкої олії і, щонайменше, одну фармацевтично прийнятну допоміжну речовину. В іншому варіанті здійснення даного винаходу екстракт, який знаходиться в формі в'язкої олії, складають з однією або більше фармацевтично прийнятними допоміжними речовинами для отримання композиції рослинного походження в формі жувальної таблетки, перорального гелю і льодяника. Відповідно до конкретного варіанту здійснення даного винаходу пероральну композицію рослинного походження отримують у вигляді льодяника, що містить 0,05-5 % екстракту P. cubeba в формі в'язкої олії. Композиція рослинного походження даного винаходу в формі льодяника є переважною, тому що льодяник зберігається в ротовій порожнині потягом суттєвого періоду часу при вживанні, і, тому, це дійсно робить льодяник, що містить екстракт P. cubeba, ефективним засобом для лікування орального кандидозу. В способі виготовлення композиції рослинного походження в формі льодяника автори даного винаходу спостерігали, що фізико-хімічні характеристики, особливо в'язкість і густота екстракту P. cubeba, що міститься в композиції рослинного походження в якості активного інгредієнту, впливає на ефективність композиції. Застосування екстракту в формі в'язкої олії мінімізує шанси розпаду активного інгредієнту (екстракту) при високих температурах, через відомий факт, що отримання твердого складу льодяника включає застосування дуже високих температур, щонайменше, 120C-130C. Таким чином, неполярний розчинник, що використовується для екстрагування ягід рослини P. сubeba, відповідає за отримання екстракту в формі в'язкої олії, що, у свою чергу, впливає на ефективність композиції. Екстракт P. cubeba в формі в'язкої олії полегшує повільне вивільнення активного інгредієнту в роті, тим самим забезпечуючи те, що активний інгредієнт залишається в ротовій порожнині довший період часу. Тому, композиція рослинного походження даного винаходу забезпечує пролонговану та уповільнену протигрибкову активність в ротовій порожнині, що робить композицію набагато більш ефективною для лікування орального кандидозу. Льодяник являє собою кондитерський продукт. Карамельний кондитерський виріб має тверду текстуру, склоподібний вигляд і вміст твердих складових 97-98 %. Карамельний льодяник в цілому містить кондитерську основу, що складається з суміші до близько 70 % цукру (сахарози) та інших вуглеводневих утворюючих масу агентів і звичайно до близько 92 % кукурудзяної патоки. Також можуть застосовуватися цукри, що не ферментуються, такі як сорбітол, маніт, ксилітол, мальтитол, ізомальт, еритритол і т. і. Додатково можуть також включатися інгредієнти, такі як ароматизатори, підкислювачі, утворюючі гель агенти, розріджувачі, барвники, зв'язувальні речовини, зволожувачі і консерванти. Твердий кондитерський виріб може бути отриманим в різних конфігураціях і формах, таких як пласкі, круглі, восьмикутні і двоопуклі форми. Загальне обговорення композиції твердих кондитерських продуктів можна знайти в E. B. Jackson, Ed. "Sugar Confectionery Manufacture", друге видання, Blackie Academic and Professional Press, Glasgow UK, (1990) (сторінки 129-169). Отримання кондитерських продуктів або складів є історично добре відомим і мало змінилося за роки. Такий кондитерський продукт може бути отриманим за стандартною методикою за допомогою традиційних способів, таких як ті, що включають застосування вогневих варильних апаратів, вакуумних варильних апаратів і скребкових варильних апаратів. Якщо використовується вакуумний варильний апарат для отримання льодяника, то вуглеводневий утворюючий масу агент кип'ятять до 125-132C в варильному апараті і застосовують вакуум. Додаткову воду з варильного апарату випарюють без додаткового нагрівання. Коли теплова обробка завершена, маса є напівтвердою і має подібну до пластика консистенцію. На цьому етапі екстракт P. cubeba, ароматизатори, барвники та інші добавки змішують з масою за допомогою традиційних операцій механічного змішування. 5 UA 104292 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Оптимальне перемішування, необхідне для однорідного змішування ароматизаторів, барвників та інших добавок в процесі традиційного виробництва твердого кондитерського продукту, визначається часом, необхідним для отримання однорідного розподілу матеріалів. Щойно льодяникова маса була відповідно виготовлена, вона може бути розрізана на оброблювальні частини або сформована в бажані форми. Різноманітні технології штампування можуть використовуватися в залежності від форми і розміру кінцевого бажаного продукту. Загальний опис складу і отримання твердих кондитерських продуктів можна знайти у A. A. Lieberman, Pharmaceutical Dosage Forms: Tablets, Том 1 (1980), Marcel Dekker, Inc, New York, N.Y. на сторінках 339, 469, розкриття якої включене в даний опис посиланням. Хоча є переважним мати композицію рослинного походження даного винаходу в формі льодяника, композиція може також бути забезпечена в формі жувальної таблетки і перорального гелю. Склади для жувальних таблеток є добре відомими і типово містять основу з цукру, крохмалю або ліпіду і ароматизатор. Жувальну таблетку даного винаходу отримують будь-яким відповідним способом, відомим з рівня техніки. В даному документі забезпечується ілюстративний склад для жувальної таблетки. Фармацевтично прийнятні добавки, що використовують для отримання жувальних таблеток, можуть бути вибрані, серед інших, з консервантів, зв'язувальних речовин, змащувальних речовин, підсолоджувачів, відповідних барвників, ароматизаторів і т. і. Жувальна таблетка, що містить екстракт P. cubeba в формі в'язкої олії, може бути будь-якого бажаного кольору, конфігурації та форми. Композиція в формі перорального гелю можна отримати шляхом включення екстракту P. cubeba в формі в'язкої олії с іншими фармацевтично прийнятними добавками, де композицію складають як пероральний гель, використовуючи будь-які традиційні засоби або спосіб. Фармацевтично прийнятні добавки можуть бути вибрані з консервантів, підсолоджувачів, ароматизаторів, згущувачів, зволожувачів, солюбілізаторів і т. і. В даному документі забезпечується ілюстративний склад для перорального гелю. Ароматизатори, що є придатними для застосування в даному винаході, можуть бути вибрані, серед іншого, з групи, що містить м'ятну олію, ментол, лимонну олію, апельсинову олію, коричну олію і т. і. Підсолоджувачі, що є придатними для застосування в даному винаході, можуть бути вибрані з групи, що містить сахарозу, рідку глюкозу, цукралозу, маніт, аспартам, сахарин натрію і т. і. Зв'язувальні речовини, що є придатними для застосування в даному винаході, можуть бути вибрані з групи, що містить крохмальну пасту, сорбітол, гуарову камедь, полівінілпіролідон, похідні целюлози, такі як гідроксіпропілметилцелюлоза, карбоксиметилцелюлоза натрію, карбомер (комерційно доступний як карбополи) і т. і. Консерванти, придатні для застосування в даному винаході, можуть бути вибрані серед групи, що містить натрію бензоат, метилпарабен, пропілпарабен, крезоли і т. і. Змащувальні речовини, що є придатними для застосування в даному винаході, можуть бути вибрані з наступного: стеарати металів, таких як стеарати магнію, кальцію і натрію, стеаринова кислота, тальк, поліетиленгліколі, розчинні солі, такі як хлорид натрію, бензоат натрію і т. і. Зволожувачі, що є придатними для застосування в даному винаході, можуть бути вибрані з гліцерину, сорбітолу, поліпропіленгліколю і т. і. Барвники, що є придатними для застосування в даному винаході, являють собою традиційні барвники, які схвалені для регулярного застосування. У варіанті здійснення даний винахід також стосується застосування пероральної композиції рослинного походження, що містить терапевтично ефективну кількість екстракту P. cubeba в формі в'язкої олії і, щонайменше, одну фармацевтично прийнятну допоміжну речовину, для лікування орального кандидозу. В іншому варіанті здійснення даний винахід також стосується застосування пероральної композиції рослинного походження, що містить 0,05-20 % екстракту P. cubeba в формі в'язкої олії і, щонайменше, одну фармацевтично прийнятну допоміжну речовину, для лікування орального кандидозу. В іншому варіанті здійснення даний винахід стосується застосування пероральної композиції, що містить 0,05-5 % екстракту P. cubeba в формі в'язкої олії і, щонайменше, одну фармацевтично прийнятну допоміжну речовину, для лікування орального кандидозу, де пероральна композиція складена у формі льодяника. В іншому додатковому варіанті здійснення даний винахід стосується застосування пероральної композиції рослинного походження, що містить терапевтично ефективну кількість екстракту P. cubeba і, щонайменше, одну фармацевтично прийнятну допоміжну речовину, для виготовлення медикаменту для лікування орального кандидозу. 6 UA 104292 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 Даний винахід також включає в свій обсяг спосіб для лікування орального кандидозу у суб'єкта, де зазначений спосіб містить введення суб'єкту, що цього потребує, терапевтично ефективної кількості пероральної композиції рослинного походження, що містить терапевтично ефективну кількість екстракту P. cubeba в формі в'язкої олії і, щонайменше, одну фармацевтично прийнятну допоміжну речовину. Відповідно до даного винаходу бажана доза композиції буде змінюватися в залежності від ряду факторів, включаючи, наприклад, фізичні характеристики особи, такі як вік, вага і стан здоров'я, і тяжкість хвороби, і може бути легко визначена фахівцем-медиком. Проте, для того, щоб отримати бажані ефекти, в цілому рекомендовано вводити композицію в формі льодяника з дозуванням в діапазоні від 1 г до 35 г на день в лікарській формі для однократного дозування або в окремій лікарській формі для багатократного дозування. Композиція рослинного походження в інших формах, таких як жувальна таблетка і пероральний гель, може прийматися у відповідному дозуванні. Для того, щоб отримати бажані ефекти, в цілому рекомендовано вводити композицію в формі жувальної таблетки з дозуванням в діапазоні від 0,5 г до 24 г на день в лікарській формі для однократного дозування або в окремій лікарській формі для багатократного дозування. Також рекомендовано вводити композицію в формі перорального гелю (1 %) з дозуванням в діапазоні від 1 г до 20 г в лікарській формі для однократного дозування або в окремій лікарській формі для багатократного дозування. Тривалість лікування може коливатися, базуючись на тяжкості орального кандидозу, що підлягає лікуванню, і може тривати протягом від 1 тижня до 1 місяця або навіть більше. Композиція даного винаходу забезпечує кращу альтернативу існуючим дорогим протигрибковим агентам. Більш важливо, що композиція не призводе до серйозних небажаних реакцій, що викликаються традиційними протигрибковими агентами. Наступні приклади додатково описують і демонструють варіанти здійснення в обсязі даного винаходу. Ці приклади забезпечуються лише для ілюстративних цілей і не повинні тлумачитися як ті, що обмежують обсяг даного винаходу. Приклади Приклад 1 Отримання екстракту P. cubeba: Ягоди рослини P. cubeba, отриманої комерційно, були висушені в тіні і крупно подрібнені (розміром 6-8 меш) для отримання висушених ягід у порошкоподібній формі. Порошок нагрівали із зворотним холодильником з петролейним ефіром (60:80) при температурі 405C і атмосферному тиску при постійному перемішуванні і екстрагували повторно (три рази) протягом 3 годин. Екстракцію проводили, використовуючи розчинник в кількості, в два рази більшій (вага/об'єм), ніж кількість подрібнених ягід P. cubeba. Екстракт фільтрували, концентрували під дією вакууму, використовуючи роторний випарник для отримання концентрованої форми в'язкої олії екстракту P. cubeba. Вихід екстракту коливається від 10 до 18 %. Приклад 2 Отримання композиції рослинного походження, що містить екстракт P. cubeba: склад льодяника (20 кг) Інгредієнт Цукор Рідка глюкоза Лимонна кислота Екстракт P. cubeba (в формі в'язкої олії) Ароматизатор 45 50 Вага 13 кг 7 кг 40 г 100 г 50 мл 1. Цукор розчиняли у воді, і потім туди додавали рідку глюкозу і лимонну кислоту. 2. Отриману суміш варили у вакуумному варильному апараті при 120(C. 3. Кип'ячену суміш потім виймали на лист для охолодження і до неї додавали олію P. cubeba (100 г) і ароматизатор (50 мл) і збивали для відповідного перемішування для отримання сиропу. 4. Сироп потім переносили до різальної машини для льодяників для виготовлення льодяників бажаної форми. Кінцевий продукт-льодяник мав склоподібний прозорий вигляд. Приклад 3a Отримання композиції рослинного походження, що містить екстракт P. cubeba: пероральний гель (100 г) 7 UA 104292 C2 Інгредієнт Карбомер C Tween 80 Поліетиленгліколь-400 (ПЕГ400) Пропіленгліколь Метилпарабен Фенокси етанол EDTA (етилендіамінтетраоцтова кислота) Гідроксид натрію Аспартам Вода Екстракт P. cubeba (в формі в'язкої олії) 5 10 Вага 1г 1г 20 г 2г 0,1 г 0,25 г 0,1 г 0,1 г 0,2 г 78 г 1г 1. Карбомер диспергували у воді і перемішували протягом 30 хвилин для отримання однорідної густої дисперсії. 2. Гідроксид натрію (0,1 г) розчиняли в очищеній воді (10 г) для утворення розчину. 3. Розчин, отриманий на етапі 2, додавали до дисперсії етапу 1 і ретельно змішували. 4. Розчин, утворений змішуванням води, EDTA і аспартаму, додавали до вмісту етапу 3. 5. Поліетиленгліколь-400 (ПЕГ-400), пропіленгліколь, метилпарабен і фенокси етанол додавали повільно до дисперсії, отриманої на етапі 4. 6. На завершення екстракт P. cubeba і бажаний ароматизатор додавали до дисперсії, отриманої на етапі 5, і перемішували для отримання однорідного гелю. Приклад 3b Отримання композиції рослинного походження, що містить екстракт P. cubeba: Жувальна таблетка (1200 мг) Інгредієнт Вага INSTACOAT MASK 150 мг Цукор 250 мг Пеарлітол 200-400 мг Авіцел 200ph 78,8 мг Аеросил 200 36 мг Цукралоза 9 мг Метилпарабен натрію 2 мг Пропілпарабен натрію 0,2 мг Лимонна кислота 60 мг Натрію хлорид 24 мг PVP K-30 60 мг (полівінілпіролідон) Барвник еритрозин 2 мг Ізопропіловий спирт скільки треба Тальк 24 мг М'ята перцева 6 мг Стеарат магнію 12 мг Екстракт P. cubeba (в 50 мг формі в'язкої олії) 15 20 1. INSTACOAT MASK диспергували в екстракті P. cubeba і замочували на ніч. 2. Інгредієнти: цукор, пеарлітол, авіцел, аеросил, сукралоза, метилпарабен натрію, пропілпарабен натрію, лимонна кислота, хлорид натрію, винна кислота, цитрат натрію, полівінілпіролідон 30 і барвник еритрозин просівали крізь сито з розміром 60 меш. 3. Масу інгредієнтів в етапі 2 отримували, використовуючи ізопропіловий спирт, і пропускаючи крізь сито з розмір 8 меш. 4. Масу, що була отримана на етапі 3, піддавали сухій грануляції при 50(C-60(C. 5. Висушені гранули просіювали до відповідного розміру для пресування, використовуючи сито з розміром 30 меш. 8 UA 104292 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 6. Тальк, м'яту перцеву і стеарат магнію ретельно перемішують з гранулами. 7. Гранулят потім пресують в кінцеву таблетку (1200 мг). Приклад 4 In vitro аналіз на чутливість (MIC) екстракту P. cubeba за допомогою способу макророзведення в рідкому живильному середовищі Для оцінки ефективності екстракту P. cubeba (в формі в'язкої олії) in vitro випробування були проведені зі штамами C. albicans. Випробування чутливості за допомогою макророзведення в рідкому живильному середовищі застосовували для визначення мінімальної інгібуючої концентрації (MIC) екстракту P. cubeba. Середовище, що застосовували в способі макророзведення в рідкому живильному середовищі, являло собою RPMI 1640 (Sigma) з Lглютаміном, але без бікарбонату натрію і забуферене до pH 7,0 з мононатрієвою сіллю 3-(Nморфоліно) пропансульфонової кислоти (MOPS). Маточний розчин екстракту P. cubeba отримували в 100 % диметилсульфоксиді в 100-кратній кінцевій концентрації з наступними додатковими розведеннями в RPMI 1640 середовищі для отримання десятикратної кінцевої концентрації, необхідної для випробування. Аліквоти (0,1 мл) кожного екстракту розподіляли в пробірки. Кінцеві концентрації екстракту коливалися від 0,5 до 0,01 % (об'єм/об'єм). Петлю для посіву C. albicans культури від 24-годинної культури на скошеному середовищі (37C) суспендували в сольовому розчині і перемішували на вортексі протягом 15 секунд. Щільність клітин цієї суспензії регулювали додаванням більшої кількості сольового розчину і стандартизували по відношенню до 0,5 стандарту мутності за МакФарландом за допомогою 6 6 спектрофотометру при 530 нм для отримання маточної суспензії інокуляту 110 -510 клітин/мл. Робочу суспензію отримували серійними розведеннями в 100 разів з наступним 202 кратним розведенням маточного розчину з RPMI середовищем, отримуючи в результаті 5 × 10 2 2,510 клітин/мл. В кожну пробірку розподіляли 0,1 мл екстракту P. cubeba (в формі в'язкої олії) і 0,9 мл грибкового інокуляту. Пробірки контролю росту були включені, і в них вносили лише розріджувачі без екстракту P. cubeba. Пробірки інкубували при 37C протягом 24 годин. Позитивний контроль, що використовували, являв собою амфотерицин B. Ступінь росту в пробірках, що містять екстракт порівнювали візуально з ступенем росту в пробірках контролю росту. MIC визначали як найнижчу концентрацію екстракту P. cubeba, що показувала 100 % інгібування росту грибкових штамів C. albicans. Визначили, що MIC екстракту P. cubeba для C. albicans штамів коливався в діапазоні 0,12-0,25 % (об'єм/об'єм). Приклад 5 In vitro аналіз на чутливість (MIC) олійного екстракту P. cubeba проти стійких до флюконазолу C. albicans штамів способом макророзведення в рідкому живильному середовищі Активність екстракту P. cubeba (в формі в'язкої олії) проти стійких до флюконазолу штамів визначали за допомогою способу макророзведення в рідкому живильному середовищі, як в Прикладі 4. Визначили, що MIC значення екстракту P. cubeba проти стійких до флюконазолу Fr штамів C. albicans (C. albicans 10231) коливалися в діапазоні 0,01-0,06 % (об'єм/об'єм). Активність екстракту P. cubeba (в формі в'язкої олії) проти інших видів Candida, таких як Fs Fr Fs штами C. krusei (чутливий до флюконазолу), C. krusei (стійкий до флюконазолу), C. glabrata Fr (чутливий до флюконазолу) і C. glabrata (стійкий до флюконазолу), також визначали за допомогою способу макророзведення в рідкому живильному середовищі, як в Прикладі 4. Fr Fs Визначили, що MIC значення олійного екстракту P. cubeba проти C. krusei і C. krusei штамів коливаються в діапазоні 0,06-0,12 % (об'єм/об'єм) і 0,03-0,06 % (об'єм/об'єм). Визначили, що Fs Fr MIC значення екстракту P. cubeba проти C. glabrata і C. glabrata штамів коливаються в діапазоні 0,06-0,12 %(об'єм/об'єм) і 0,005-0,01 % (об'єм/об'єм). Приклад 6 In vitro аналіз на чутливість (MIC) за допомогою способу розведення в агарі композиції рослинного походження, складеної у формі льодяника П'ять льодяників (приблизно 15 г) розчиняли в сольовому розчині і краплі олії видаляли, використовуючи ділильну лійку. Краплі олії потім нагрівали для отримання олійної маси, яку розчиняли в петролейному ефірі для відділення екстракту P. cubeba (в формі в'язкої олії) від нерозчинних інгредієнтів, що залишилися. Петролейний ефір випаровували і екстракт (в формі в'язкої олії) використовували в дослідженні. Екстракт потім змішували з 5 мл середовищем агару Сабуро з декстрозою (SAB), що містить Tween 20 (0,001 %) і 1,2 % агар. Петлю для посіву культуру від 24-годинної культури на скошеному середовищі (37C) суспендували в сольовому розчині і перемішували на вортексі протягом 15 секунд. Щільність клітин цієї суспензії регулювали додаванням більшої кількості сольового розчину і стандартизували по відношенню до 0,5 стандарту мутності за МакФарландом за допомогою 6 6 спектрофотометру при 530 нм, для отримання матричної суспензії інокуляту 110 -510 9 UA 104292 C2 5 10 15 клітин/мл. Маточний розчин потім розводили в 100 разів для отримання маточної суспензії 3 3 інокуляту 110 -510 клітин/мл. 10 мкл отриманих суспензій культур висівали плямами на планшети затверділим середовищем і плями висушували при кімнатній температурі. Планшети потім інкубували при 37C протягом 24 годин. MIC визначали як найнижчу концентрацію екстракту для складу льодяника, що не дає видимого росту або викликає майже повне інгібування росту в планшетах. Визначили, що MIC екстракту P. cubeba в складі льодяника складає 2 % (об'єм/об'єм). Приклад 7 Порівняльне дослідження: In vitro аналіз на чутливість (MIC) способом макророзведення в рідкому живильному середовищі екстракту P. cubeba в порівнянні з олією чайного дерева Порівняльне дослідження для визначення активності екстракту P. cubeba (в формі в'язкої олії) в порівнянні з комерційно наявною олією чайного дерева проводили проти C. albicans і Fr стійких до флюконалозу штамів C. albicans (C. albicans 10231) штамів, використовуючи спосіб макророзведення в рідкому живильному середовищі, як описано в Прикладі 4. Активність екстракту P. cubeba (в формі в'язкої олії) в порівнянні з комерційно доступною олією чайного дерева також визначали таким самим способом проти іншого видів Саndida, таких як штами C. Fs Fr Fs krusei (чутливий до флюконазолу), C. krusei (стійкий до флюконазолу), C. glabrata (чутливий Fr до флюконазолу) і C. glabrata (стійкий до флюконазолу), також визначали таким самим способом. Результати порівняльного дослідження представлені в наступній Таблиці1. 20 Таблиця 1 Види Candida C.albicans Fr C.albicans 10231 Fs C.krusei G06 Fr C.krusei G03 Fs C.glabrata H04 Fr C.glabrata H05 25 30 35 40 45 MIC (% об'єм/об'єм) Екстракт P. cubeba (у формі Олія чайного дерева в'язкої олії) 0,12 0,25 0,01 0,25 0,03 0,06 0,06 0,06 0,12 0,03 0,01 0,25 Fs = Чутливий до флюконазолу штам; Fr = Стійкий до флюконазолу штам. Результати чітко вказують на те, що екстракт P. cubeba (в формі в'язкої олії) має MIC значення, вищі за MIC значення олії чайного дерева, проти C. albicans і більш конкретно,проти стійких до флюконазолу штамів C. albicans. Результати також вказують на те, що екстракт P. cubeba має MIC значення вище, ніж таке значення для олії чайного дерева проти стійких до флюконазолу штамів C. glabrata. Значення MIC екстракту P. cubeba проти стійких до флюконазолу штамів C. krusei є порівняним до такого значення для олії чайного дерева. ФОРМУЛА ВИНАХОДУ 1. Застосування пероральної композиції рослинного походження для лікування орального кандидозу, де зазначена композиція містить 0,05-20 % екстракту з ягід рослини Piper cubeba (P. cubeba) від загальної ваги композиції у формі в'язкої олії і щонайменше одну фармацевтично прийнятну допоміжну речовину. 2. Застосування композиції за п. 1, де оральний кандидоз є стійким до азолу кандидозом. 3. Застосування за п. 1, де композиція складена у формі, вибраної з групи, що містить льодяник, жувальну таблетку і пероральний гель. 4. Застосування за п. 1, де оральний кандидоз спричинений видами Candida, вибраними з групи, що містить Candida albicans, Candida krusei і Candida glabrata. 5. Застосування за п. 1, де зазначена фармацевтична допоміжна речовина вибрана з групи, що містить зв'язувальну речовину, змащувальну речовину, ароматизатор, підсолоджувач, барвник і консервант. 6. Застосування за п. 5, де зв'язувальна речовина вибрана з групи, що містить крохмальну пасту, сорбітол, гуарову камедь, полівінілпіролідон, гідроксипропілметилцелюлозу, карбоксиметилцелюлозу натрію і карбомер. 7. Застосування за п. 5, де змащувальна речовина вибрана з групи, що містить стеарати магнію, кальцію і натрію, стеаринову кислоту, тальк, поліетиленгліколі, хлорид натрію і бензоат натрію. 10 UA 104292 C2 5 8. Застосування за п. 5, де ароматизатор вибраний з групи, що містить м'ятну олію, ментол, лимонну олію, апельсинову олію і коричну олію. 9. Застосування за п. 5, де підсолоджувач вибраний з групи, що містить сахарозу, рідку глюкозу, цукралозу, маніт, аспартам і сахарин натрію. 10. Застосування за п. 3, де зазначена композиція складена у формі льодяника. 11. Застосування за п. 10, де зазначений льодяник містить 0,05-5 % екстракту Р. cubeba від загальної ваги льодяника. Комп’ютерна верстка А. Крижанівський Державна служба інтелектуальної власності України, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 11