Похідні 1,2,4-триазоліл-5-тіооцтової кислоти, що виявляють противірусну, ранозагоювальну та анаболічну активність

Изобретение относится к медицине, а именно к фармакологии, в частности к новым биологически активным химическим соединениям, на основе которых могут быть созданы лекарственные препараты противовирусного, ранозаживляющего и анаболического действия. Наиболее близким структурным аналогом заявляемых производных 1,2,4-триазолил-5-тиоуксусной кислоты является морфолиний 3-метил-1,2,4-триазолил-5-тиоацетат, проявляющий гепатозащитную, ранозаживляющую и противовирусную активность (см. п. Украины № 1988, приоритет от 22.12.86, опубл. 20.12.94 М.Кл.4 C07D 413/12, А61К 31/41, А61К 31/535). Торговое наименование морфолиния 3-метил1,2,4-триазолил-5-тиоацетата-тиотриазолин. Известное соединение хотя и проявляет ранозаживляющую и противовирусную активность, однако их величина недостаточно высока. Кроме того, увеличение дозы тиотриазолина приводит к подавлению иммунной системы организма и снижению его резистентности. В основу изобретения поставлена задача создания новых биологически активных химических соединений, химическая структура которых обеспечивает стимуляцию синтеза в организме анаболиков и за счет этого достигается проявление производными 1,2,4-триазолил-5-тиоуксусной кислоты противовирусной, ранозаживляющей и анаболической активности при низкой токсичности и отсутствии андрогенной активности. Поставленная задача решается тем, что созданы производные 1,2,4-триазолил-5-тиоуксусной кислоты общей формулы N N R N R1 S-CH 2-COO -*H +X , где R - водород, н-пропил, фенил, 4-пиридил; R1 - водород, фенил; Х - диметиламин, диэтиламин, моноэтаноламин, диэтаноламин, пиперидин, морфолин, причем, если R1 -фенил, то R -фенил или 4-пиридил, проявляющие противовирусную, ранозаживляющую и анаболическую активность. Химическая структура заявляемых соединений обеспечивает стимуляцию синтеза в организме анаболиков. В свою очередь, анаболики способствуют синтезу белка в организме и специфических и неспецифических факторов естественной резистенции, вследствие чего заявляемые соединения проявляют противовирусную и анаболическую активность и, в то же время, не обладают андрогенной активностью. Усиление процесса синтеза белка в организме способствует также внутриклеточной регенерации, ускоряет репаративные процессы в эпителиальной и кроветворной тканях, т.е. заявляемые соединения обладают ранозаживляющей активностью. Таким образом, заявляемые производные 1,2,4-триазолил-5--тиоуксусной кислоты проявляют противовирусную, ранозаживляющую и анаболическую активность при низкой токсичности и отсутствии андрогенной активности, вследствие чего могут быть использованы в фармакологии для создания лекарственных препаратов указанного действия. Структурные формулы заявляемых производных 1,2,4-триазолил--5-тиоуксусной кислоты приведены на фиг. 1 - 36, соответственно: фиг. 1 - диметиламмоний 1,2,4-триазолил-5-тиоацетат; фиг. 2 - диэтиламмоний 1,2,4-триазолил-5-тиоацетат; фиг. 3 - моноэтаноламмоний 1,2,4-триазолил-5-тиоацетат; фиг. 4 - диэтаноламмоний 1,2,4-триазолил-5-тиоацетат; фиг. 5 - пиперидиний 1,2,4-триазолил-5-тиоацетат; фиг. 6 - морфолиний 1,2,4-триазолил-5-тиоацетат; фиг. 7 - диметиламмоний 3-(н-пропил)-1,2,4-триазолил-5-тиоацетат; фиг. 8 - диэтиламмоний 3-(н-пропил)-1,2,4-триазолил-5-тиоацетат; фиг. 9 - моноэтаноламмоний 3-(н-пропил)-1,2,4-триазолил-5-тиоацетат; фиг. 10 - диэтаноламмоний 3-(н-пропил)-1,2,4-триазолил-5-тиоацетат; фиг. 11 - пиперидиний 3-(н-пропил)-1,2,4-триазолил-5-тиоацетат; фиг. 12 - морфолиний 3-(н-пропил)-1,2,4-триазолил-5-тиоацетат; фиг. 13 - диметиламмоний 3-фенил-1,2,4-триазолил-5-тиоацетат; фиг. 14 - диэтиламмоний 3-фенил-1,2,4-триазолил-5-тиоацетат; фиг. 15 - моноэтаноламмоний 3-фенил-1,2,4-триазолил-5-тиоацетат; фиг. 16 - диэтаноламмоний 3-фенил-1,2,4-триазолил-5-тиоацетат; фиг. 17 - пиперидиний 3-фенил-1,2,4-триазолил-5-тиоацетат; фиг. 18 - морфолиний 3-фенил-1,2,4-триазолил-5-тиоацетат; фиг. 19 - диметиламмоний 3-(4-пиридил)-1,2,4-триазолил-5-тиоацетат; фиг. 20 -диэтиламмоний 3-(4-пиридил)-*1,2,4-триазолил-5-тиоацетат; фиг. 21 - моноэтаноламмоний 3-(4-пиридил)-1,2,4-триазолил-5-тиоацетат; фиг. 22 - диэтаноламмоний 3-(4-пиридил)-1,2,4-триазолил-5-тиоацетат; фиг. 23 - пиперидиний 3-(4-пиридил)-1,2,4-триазолил-5-тиоацетат; фиг. 24 - морфолиний 3-(4-пиридилЇ-І,2,4-триазолил-5- тиоацетат; фиг. 25 - диметиламмоний 3,4-дифенил-1,2,4-триазолил-5-тиоацетат; фиг. 26 - диэтиламмоний 3,4-дифенил-1,2,4-триазолил-5-тиоацетат; фиг. 27 - моноэтаноламмоний 3,4-дифенил-1,2,4-триазолил-5-тиоацетат; фиг. 28 - диэтаноламмоний 3,4-дифенил-1,2,4-триазолил-5-тиоацетат; фиг. 29 - пиперидиний 3,4-дифенил-1,2,4-триазолил-5-тиоацетат; фиг. 30 - морфелиний 3,4-дифенил-1,2,4-триазолил-5-тиоацетат; фиг. 31 - диметиламмоний 3-(4-пиридил)-4-фенил-1,2,4-триазолил-5-тиоацетат; фиг. 32 - диэтиламмоний 3-(4-пиридил)-4-фенил-1,2,4-триазолил-5-тиоацетат; фиг. 33 - моноэтаноламмоний 3-(4-пиридил)-4-фенил-1,2,4-триазолил-5-тиоацетат; фиг. 34 - диэтаноламмоний 3-(4-пиридил)-4-фенил-1,2,4-триазолил-5-тиоацетат; фиг. 35 - пиперидиний 3-(4-пиридил)-4-фенил-1,2,4-.триазолил-5-тиоацетат; фиг. 36 - морфолиний 3-(4-пиридил)-4-фенил-1,2,4-триазолил-5-тиоацетат. Заявляемые производные 1,2,4-триазолил-5-тиоуксусной кислоты получают следующим образом. Смешивают 0,02мол соответствующей 1,2,4-триазолил-5-тиоуксусной кислоты с 0,02мол соответствующего амина и растворяют в 20мл этанола при нагревании. Затем растворитель упаривают, получая соединения, структурные формулы которых приведены на фиг. 1 - 36. В частности, для получения диметиламмония 1,2,4-триазолил--5-тиоацетата (фиг. 1) смешивают 0,02мол 1,2,4-триазолил-5-тио-уксусной кислоты с 0,02мол диметиламина. Смесь растворяют в 20мл этанола при нагревании. Затем растворитель упаривают, получая диметиламмоний 1,2,4-триазолил-5тиоацетат. Выход: 86%. Белое кристаллическое вещество, легко растворимо в воде, трудно растворимо в спиртах, нерастворимо в эфире и гексане. Тпл = 146 - 148°С Найдено, %: S 15,9 Вычислено, %: S 15,7 ИК-спектр, см-1: Ö COO- 1610 (асс.), 1390 (сим.) Для получения диэтиламмония 3-(н-пропил)-1,2,4-триазо-лил-5-тиоацетата (фиг. 8) смешивают 0,02 мол 3-(н-пропил)-1,2,4-триазолил-5-тиоуксусной кислоты с 0,02мол диэтиламина, смесь растворяют в 20мл этанола при нагревании. Нагрев ведут до полного растворения смеси. Затем растворитель упаривают, получая диэтиламмоний 3-(н-пропил)-1,2,4-триазолил-5-тиоацетат. Выход: 86%. Белое кристаллическое вещество, легко растворимо в воде, трудно растворимо в спиртах, нерастворимо в эфире и гексане. Тпл = 108 - 110°С Найдено, %: S 11,9 Вычислено, 0: S 11,7 ИК-спектр, см-1: Ö COO- 1590 (асс.), 1390 (сим.). Для получения моноэтаноламмония 3-фенил-1,2,4-триазолил--5-тиоацетата (фиг. 15) смешивают 0,02мол 3-фенил-1,2,4-триазолил-5-тиоуксусной кислоты с 0,02мол моноэтаноламина, смесь растворяют в 20мл этанола при нагревании. Затем растворитель упаривают, получая моноэтаноламмоний 3-фенил1,2,4-триазолил-5-тиоацетат. Выход: 91%. Белое кристаллическое вещество, легко растворимо в воде, трудно растворимо в спиртах, нерастворимо в эфире и гексане. Тпл = 113 - 115°С Найдено, %: S 10,8 Вычислено, %: S 10,8 ИК-спектр, см-1: Ö COO- 1610 (асс.), 1400 (сим.). Для получения диэтаноламмония 3-(4-пиридиа-1,2,4-триазо-лил-5-тиоацетата (фиг. 22) смешивают 0,02мол 3-(4-пиридил)-1,2,4-триазолил-6-тиоуксусной кислоты с 0,02мол диэтаноламина в 20мл этанола, смесь нагревают до полного растворения. Затем растворитель упаривают, получая диэтаноламмоний 3-(4пиридил)-1,2,4-триазолил-5-тиоацетат. Выход: 87%. Желтоватое кристаллическое вещество, легко растворимо в воде, трудно растворимо в спиртах, нерастворимо в эфире и гексане. Тпл = 150 - 152°С Найдено, %: S 9,2 Вычислено, %: S 9,4 ИК-спектр, см-1: Ö COO- 1600 (асс.), 1390 (сим.) Для получения пиперидиния 3,4-дифенил-1,2,4-триазолил-5-тиоацетата (фиг. 29) смешивают 0,02мол 3,4-дифенил-1,2,4-триа-золил-5-тиоуксусной кислоты с 0,02мол пиперидина в 20мл этанола, смесь нагревают до ее растворения. Затем растворитель упаривают, получая пиперидиний 3,4-дифенил-1,2,4триазолил-5-тиоацетат. Выход: 96%. Желтоватое кристаллическое вещество, легко растворимо в воде, трудно растворимо в спиртах, нерастворимо в эфире и гексане. Тпл = 171-174°С Найдено, %: S 8,1 Вычислено, %: S 8,1 ИК-спектр, см-1: Ö COO- 1610 (асс.), 1390 (сим.) Для получения морфолиния 3-(4-пиридил)-4-фенил-1,2,4-триазолил-5-тиоацетата (фиг. 36) смешивают 0,02мол 3-(4-пири-дил)-4-фенил-1,2,4-триазолил-5-тиоуксусной кислоты с 0,02мол морфолина в 20мл этанола, смесь нагревают до ее растворения. Затем растворитель упаривают, получая морфолиний 3-(4пиридил)--4-фенил-1,2,4-триазолил-5-тиоацетат. Выход: 97 %. Желтоватое кристаллическое вещество, легко растворимо в воде, трудно растворимо в спиртах, нерастворимо в эфире и гексане. Тпл = 193-195°С Найдено, %: S 8,0 Вычислено, %: S 8,0 ИК-спектр, см-1: Ö COO- 1590 (асс.), 1360 (сим.) В таблице 1 приведены физико-химические константы полученных заявляемых производных 1,2,4триазолил-5-тиоуксусной кислоты, структурные формулы которых приведены на фиг. 1 - 36, а именно: брутто-формула; температура плавления, °С; выход, %; содержание серы, % (найдено, вычислено); ИК-спектр: волновое число: Ö COO-, см-1. Заявляемые производные 1,2,4-триазолил-5-тиоуксусной кислоты обладают противовирусной, ранозаживляющей и анаболической активностью. Исследование противовирусной активности заявляемых соединений проводили in vivo на модели гриппозной пневмонии мышей, воспроизведенной адаптированным к легочной ткани вирусом А (Англия 42/72 H3N2) при интраназальном введении заявляемых соединений в дозе 1/10 ЛД50. Результаты исследований противовирусной активности заявляемых производных 1,2,4-триазолил-5тиоуксусной кислоты приведены в таблице 2, в графе 1 которой приведены номера заявляемых соединений в соответствии с номерами фигур, изображающих их структурные формулы; в графе 2 вводимые дозы заявляемых соединений, мг/кг; в графе 3 - средняя продолжительность жизни мышей, дни; в графе 4 - выживаемость мышей, %. В таблице 2 приведены также результаты исследования противовирусной активности тиотриазолина (прототип) и ремантадина известного препарата, обладающего противовирусной активностью в отношении штамма вируса А. Из данных таблицы 2 видно, что заявляемые производные 1,2,4-триазолил-5-тиоуксусной кислоты проявляют более высокую противовирусную активность по сравнению с прототипом - тиотриазолином и ремантадином. Исследование ранозаживляющей активности заявляемых соединений проводили на белых крысахсамцах массой 130 - 190г. После депиляции участков кожи в области спины животным спустя двое суток наносили две ассептические линейные раны на глубину нижележащих мышц. Под наблюдением находились 22 группы животных по 7 в каждой. Восемнадцати группам животных перорально вводили заявляемое соединение в дозе 1/10 ЛД50. Трем группам животных вводили соответственно тиотриазолин в дозе 1/10 ЛД50, оротат калия и метилурацил в дозах 100мг/кг. Контрольной группе вводили физиологический раствор. Изучаемые соединения вводили перорально 1 раз в сутки. Определение прочности послеоперационного рубца проводили на 5-е сутки после разреза методом ранотонзиометрии. Величину ранозаживляющей активности определяли по усилию, затрачиваемому на раскрытие раны, выраженному в граммах. Результаты исследования ранозаживляющей активности приведены в таблице 3, при этом при расчете ранозаживляющей активности в процентах (графа 5) в качестве базы сравнения брали контрольную группу животных. Из данных таблицы 3 видно, что заявляемые производные 1,2,4 -триазолил-5-тиоуксусной кислоты проявляют более высокую ранозаживляющую активность по сравнению с тиотриазолином и известными препаратами, усиливающими процессы регенерации ткани, -оротатом калия и метилурацилом. Исследование анаболической активности заявляемых соединений проводили по методу L.Hershberger, E.Shipley, R.Meyer "Myotrophic Activity of 19-Nortestosterone and other steroids Determined by Modified Levator Ani Mucsle Method". J.Proc. Exp. Biol. and Med., 1953, V.83, p.175 - 180. Белых крыс-самцов линии Вистар подвергали гонадэктомии в возрасте 28 дней. Подкожное введение исследуемых соединений в дозе 1/20 ЛД50 в виде масляного раствора в персиковом масле начинали в день кастрации и продолжали в течение 7 дней. На 8-е сутки через 24 часа после последнего введения исследуемых соединений животных забивали декапитацией. Показателем анаболической активности служил вес мышцы перианального комплекса (m.levator ani), который кольцом окружает анальное отверстие. Дорзальную часть этого кольца выделяли, тщательно очищали от жира, обрезали по границе соединения с m.bulbocavernasus и взвешивали на торсионных весах Абсолютный вес пересчитывали на 100,0г живой массы животного в день забоя. В проводимых опытах исследовали также андрогенную активность соединений по весу добавочных половых желез (вентральной простаты и семенных пузырьков), которые выделяли и взвешивали на торсионных весах, пересчитывая абсолютный вес на 100,0г массы тела животного. В качестве препаратов сравнения был взят тиотриазолин (прототип) и оротат калия. Контрольная группа животных получала инъекции чистого персикового масла. Результаты исследований анаболической и андрогенной активности соединений приведены в таблице 4. В таблице 4 приведены также показатели токсичности заявляемых соединений (ЛД50), определенные по методу Прозоровского В.Б. на белых мышах. Анализ данных таблицы 4 показал, что заявляемые производные 1,2,4-триазолил-5-тиоуксусной кислоты проявляют более высокую анаболическую активность по сравнению с тиотриазолином и оротатом калия, при этом андрогенная активность у заявляемых соединений отсутствует, о чем свидетельствует то, что вес добавочных половых желез несущественно отличается от контрольной группы. Таким образом, приведенные данные свидетельствуют о том, что заявляемые производные 1,2,4триазолил-5-тиоуксусной кислоты проявляют противовирусную, ранозаживляющую и анаболическую активность, превосходящую по силе как ближайший струк турный аналог - морфолиний 3-метил-1,2,4-триазолил-5-тиоаце-тат (тиотриазолин), так и эталонные препараты аналогичного действия, при этом заявляемые соединения не обладают андрогенной активностью и являются малотоксичными соединениями. Производные 1,2,4-триазолил-5-тиоуксусной кислоты, проявляющие противовирусную, ранозаживляющую и анаболитическую активность: N H N S-CH2-COO- *H2+ N N H CH3 CH3 Фиг. 1 N H N N H S-CH2-COO*H2+ N C2 H5 C2H5 Фиг. 2 N H N S-CO2-COO-*H3+N-CH2-CH2-OH N H Фиг. 3 N H N S-CO2-COO-*H3+N N H CH2-CH2-OH CH2-CH2-OH Фиг. 4 N H N S-CO2-COO-*H3+ N N H Фиг. 5 N H N N H S-CH2-COO-*H3+ N O Фиг. 6 N CH3-CH2-CH2 N S-CH2-COO-*H2+N N H CH3 CH3 Фиг. 7 N CH3-CH2-CH2 N S-CH2-COO-*H2+N N H C2H5 C2H5 Фиг. 8 N CH3-CH2-CH2 N N H S-CH2-COO-*H3+N-CH2-CH2-OH Фиг. 9 N CH3-CH2-CH2 N S-CH2-COO-*H3+N N H CH2-CH2-OH CH2-CH2-OH Фиг. 10 N CH3-CH2-CH2 N S-CH2-COO-*H2+ N N H Фиг. 11 N CH3-CH2-CH2 N N H S-CH2-COO-*H2+ N O Фиг. 12 N N CH S-CH2-COO-*H2+N CH 3 3 N H Фиг. 13 N N S-CH2-COO-*H2+N N H C2H5 C2H5 Фиг. 14 N N S-CH2-COO-*H3+N-CH2-CH2-OH N H Фиг. 15 N N N H S-CH2-COO-*H3+N CH2-CH2-OH CH2-CH2-OH Фиг. 16 N N S-CH2-COO-*H2+ N N H Фиг. 17 N N S-CH2-COO-*H2+ N N H O Фиг. 18 N N N S-CH2-COO-*H2+N N H CH3 CH3 Фиг. 19 N N N S-CH2-COO-*H2+N N H C2H5 C2H5 Фиг. 20 N N N S-CH2-COO-*H3+N-CH2-CH2-OH N H Фиг. 21 N N N S-CH2-COO-*H3+N N H Фиг. 22 N N N N H S-CH2-COO-*H2+N CH2-CH2-OH CH2-CH2-OH Фиг. 23 N N N S-CH2-COO-*H2+ N N H O Фиг. 24 N N CH S-CH2-COO-*H2+N CH 3 3 N Фиг. 25 N N S-CH2-COO-*H2+N N C2H5 C2H5 Фиг. 26 N N S-CH2-COO-*H3+N-CH2-CH2-OH N Фиг. 27 N N S-CH2-COO-*H3+N N Фиг. 28 N N N S-CH2-COO-*H2+ N CH2-CH2-OH CH2-CH2-OH Фиг. 29 N N S-CH2-COO-*H2+ N N O Фиг. 30 N N N S-CH2-COO-*H2+N N CH3 CH3 Фиг. 31 N N N S-CH2-COO-*H2+N N C2H5 C2H5 Фиг. 32 N N N S-CH2-COO-*H3+N-CH2-CH2-OH N Фиг. 33 N N N N S-CH2-COO-*H3+N CH2-CH2-OH CH2-CH2-OH Фиг. 34 N N N S-CH2-COO-*H2+ N N Фиг. 35 N N N N S-CH2-COO-*H2+ N Фиг. 36 O