Спосіб виділення компонента з крові шляхом центрифугування і пристрій для його здійснення

1. Способ выделения компонента из крови путем центрифугирования, включающий подачу крови с антикоагулянтом в первую кольцевую ка меру, ограниченную цилиндрическими наружной и внутренней стенками, простирающимися соос но общей оси, и верхней и нижней стенками, од на из которых образована корпусом поршня, сме щаемым внутрь первой камеры, центрифугирова ние устройства вокруг указанной общей оси, пос ледующий перенос полученной жидкой фракции под действием корпуса поршня во вторую ка меру, ограниченную цилиндрической стенкой, простирающейся соосно общей оси, отделение жидкой фракции во второй камере путем продол жающегося центрифугирования и добавление композиции, способствующей отделению, возв ращение жидкой части плазменной фракции в первую камеру и перенос оставшейся во второй камере части в принимающий контейнер через фильтр, отличающийся тем, что в качестве спо собствующей отделению полимерной формы фибрина композиции используют ферменты, из второй камеры гель полимерной формы фибрина подают предварительно в третью камеру, соосно установленную с другими камерами, пропускают через кольцевой фильтр во время центрифуги рования для отделения раствора мономерной формы фибрина и подают его в кольцевую на ружную камеру, связанную с принимающим кон тейнером. 2. Устройство для выделения компонента иэ крови путем центрифугирования, содержащее первую кольцевую камеру, ограниченную цилиндрическими наружной и внутренней стенками, простирающимися соосно общей оси, верхней и нижней стенками, одна иэ которых образована корпусом поршня, смещаемым внутрь первой камеры, далее содержащее вторую камеру, сообщающуюся с первой камерой посредством первого трубопровода и ограниченную наружной цилиндрической стенкой, соосной общей оси, нижней стенкой первой камеры и другой нижней стенкой, причем вторая камера приспособлена располагаться ниже первой камеры во время центрифугирования, и указанное устройство также содержит средство для подачи крови в первую камеру и средство для подачи композиции, способствующей отделению, а также приемное средство для соединения, по крайней мере, одного приемного контейнера для жидкости, сообщающееся со второй камерой через второй трубопровод, отличающееся тем, что второй трубопровод сообщается со второй камерой через третью камеру, соосную ей и содержащую канал во вторую камеру, открываемый снаружи, причем третья камера содержит внутренний и наружный кольцевые отсеки, взаимно связанные через проходящий радиапьно круговой канал, в котором расположен кольцевой фильтр для предотвращения прохождения жидкости, содержащей нежелательные ингредиенты, используемые для стимуляции отделения. 3. Устройство по п. 2, отличающееся тем, что ка нал между второй и третьей камерами соосно рас положен относительно двух камер и закрывается посредством капсулы, включающей центральную втулку, соосно установленную во второй камере и которая несет множество расположенных на расс тоянии друг от друга радиальных дисков, образую щих перегородки во множестве отсеков в капсуле, причем диски имеют идентичный наружный окруж ной контур, который снаружи отсеков закрыт пос редством герметизирующего смещаемо установ ленного корпуса в форме муфты, наружная сто рона которого подобрана для плотного упора в бо ковую стенку осевого канала в любом из его по ложений, причем самый нижний, образующий пе регородку, диск капсулы обеспечивает свободный проход жидкости иэ второй камеры в третью ка меру путем осевого смещения корпуса в форме муфты с устранением контакта с окружностью са мой нижней перегородки при воздействии поршня. 4. Устройство по п. 3. отличающееся тем, что корпус поршня включает направленную вниз юбку, простирающуюся соосно с корпусом в форме муф см о со О) 34497 ты капсулы и приспособленную для входа в зацепление с корпусом при сдвиге корпуса поршня вниз под давлением для последовательного открывания в подходящие моменты соответствующих отсеков е капсуле и открывания прохода жидкости из второй камеры в первую камеру. 5. Устройство по п 3 или 4, отличающееся тем, что втулка капсулы включает осевой сквозной канал и закреплена на направленном вверх выступе, расположенном в центре на дне нижней, третьей камеры, причем указанный сквозной канал через жидкость сообщается с наружным кольцевым отсеком третьей камеры через канальную систему, а верхний конец втулки приспособлен для герметичного соединения с канапом в корпусе поршня с возможностью сое динения с принимающим жидкость контейнером, прикрепленным к нему. 6, Устройство по п. 5, отличающееся тем, что втулка капсулы прикреплена к выступу на дне третьей камеры посредством муфты, включающей круговую, выступающую наружу часть стенки, посредством которой кольцевой фипьгр закреплен между наружной окружностью поверхности стенки и нижней стенкой второй камеры, посредством чего выступающая наружу часть стенки муфты расположена на расстоянии от дна третьей камеры, и таким образом образует соединение с наружным кольцевым отсеком и простирающимся по оси каналом в соединении со сквозным каналом втулки и. между внутренней стороной выступа и примыкающей внутренней стороной муфты. Изобретение относится к центрифужному устройству для отделения компонента, такого как мономерная форма фибрина, из плазмы, причем указанный способ включает обработку плазмы одним или более реагентами, s котором указанные реагенты подаются а подходящую реакционную камеру, содержащую указанную плазму, и где такие реагенты поэтому удаляются из желаемого продукта с помощью нового устройства и способа для центробежной фильтрации. . В документе ЕР-PS № 592.242 описаны способы и композиции для совершенно нового фибринового материала для закрытия ран. включающие контактирование желаемого участка с композицией, содержащей мономерную форму фибрина и превращение этой мономерной формы е полимерную форму фибрина одновременно с этапом контактирования. Термин "фибрин" определяется как фибрин I. фибрин II и/или фибрин дез pp. Кроме того, известен способ из патентной заявки США с Серийным Номером 155,984 для отделения компонента, такого как мономерная форма фибрина, из крови. Этот способ отделения компонентов жидкости, содержащей несколько компонентов с различным удепьным весом, включает этапы сбора крови в первую камеру устройства, причем указанная камера ограничивается по существу симметричными по оси наружной и внутренней стенкой Кровь подвергается центрифугированию путем вращения устройства вокруг оси симметрии камеры так, чтобы установить концентрическую поверхность раздела между компонентами крови. По крайней мере, один иэ компонентов крови, такой как плазма, в последующем переносится во вторую камеру в устройстве предпочтительно путем уменьшения объема первой камеры во время продолжающегося центрифугирования устройства. По существу симметричная . по оси внутренняя стенка выполнена в первой камере так, чтобы обеспечить то, что вся кровь подвергается воздействию вращения центрифуги, необходимому для разделения. Эта внутренняя стенка имеет радиус, приспособленный для желаемой скорости вращения. Во второй камере фракция с полимерной формой фибрина без поперечных связей отде ляется от плазмы посредством подходящего фермента и в последующем повторно растворяется в мономерную форму фибрина и переносится в шприц через фильтр путем уменьшения объема вто* рой камеры Однако оказалось, что отделение компонента, такого как мономерная форма фибрина из крови только путем фильтрации в устройстве указанного выше типа не обеспечивает удовлетворительный результат. Это происходит главным образом вследствие того факта, что трудно гарантировать удовлетворительное отделение фракции, содержащей фибрин I во второй камере, и, соответственно, относительно большое количество содержащегося в крови фибрина I те* ряется во время следующего переноса фракции жидкости из второй камеры в первую камеру во время последующего этапа способа. Наряду с этим, в предложенном ранее способе отделения мономерной формы фибрина описанная выше обработка фибриногена в плазме подходящим ферментом давала получение полимерной формы фибрина без поперечных связей в форме толстой желеобразной массы на дне второй камеры. Для обеспечения желаемого раствора мономерной формы требовалось значительное количество буфера для повторного растворения в сочетании с активным перемешиванием Это привело к нескольким недостаткам. Во-первых, предпочтительные способы получения мономерной формы фибрина, например, для использования в качестве фибринового материала для закрытия ран, как раскрыто в ЕР 592,242, требуют концентрированные растворы мономерной формы фибрина и большое количество буфера для повторного растворения или растворителя, требуемого для растворения желеобразной массы, если растворяющие растворы недостаточно эффективны. Далее, активное перемешивание, требуемое для растворения желеобразной массы в раствор мономерной формы фибрина, может вызвать повреждение устройства и самого фибрина. Одновременно подаваемая заявка "Способ и устройство для отделения компонента такого как фибрин I при заболеваниях крови" поданная одновременно с данной заявкой, раскрывает изобретение, включающее способ, который обеспе 34497 чивает отделение полимерной формы фибрина без поперечных связей из фракции плазмы в цилиндрической камере, осуществляемый во время центрифугирования, посредством которого полимерная форма фибрина без поперечных связей осаждается на наружной стенке камеры, после чего остающаяся жидкая фракция, накапливаемая в камере, удаляется из камеры, и что фракция с полимерной формой фибрина без поперечных связей, остающаяся в камере, преимущественно осажденной на стенке, растворяется добавлением растворителя и центробежным перемешиванием. Поскольку обработка плазмы ферментом проводится во время продолжающегося центрифугирования, центробежная сила, действующая на получаемую в результате полимерную форму фибрина без поперечных связей, обеспечивает то, что он осаждается в виде тонкой желеобразной пленки, которая в основном прилипает к окружающим стенкам камеры. Остающаяся жидкая плазма осаждается на дне камеры, когда прекращается центрифугирование, и может удаляться любым удобным способом Затем желаемый раствор мономерной формы фибрина обеспечивается внесением подходящего буферного раствора для повторного растворения в камеру и воздействием на буфер в покрытой гелем камере центробежным перемешиванием. Этот способ предоставляет преимущества перед предшествующими способами. Во-первых, повторное растворение геля без поперечных связей буферным раствором крайне эффективно, частично, вследствие большой площади поверхности того же объема фибринового геля, по сравнению с массой фибринового геля. предоставляемой в известных способах. Соответственно, гель может быть растворен небольшими количествами буфера для повторного растворения, обеспечивая получение раствора мономерной формы фибрина желаемой концентрации. Далее, действие центробежного перемешивания на буферный раствор внутри покрытой гелем камеры является сравнительно щадящим способом, не вызывающим повреждения оборудования или продукта мономерной формы фибрина. Одновременно заявляемое изобретение также включает способ, включающий подачу крови, предпочтительно в присутствии антикоагупянта в первую кольцевую камеру в устройстве, где кольцевая камера ограничивается цилиндрической наружной стенкой и цилиндрической внутренней стенкой, причем обе стенки простираются соосно вдоль общей оси, а также верхней стенкой и нижней стенкой, где верхняя стенка или нижняя стенка образована корпусом поршня, смещаемым внутри первой камеры, причем указанный способ кроме того включает центрифугирование устройства вокруг указанной общей оси в основном для разделения крови на клеточную фракцию и фракцию плазмы с последующим переносом полученной в результате фракции плазмы под влиянием корпуса поршня во вторую камеру, ограничиваемую наружной цилиндрической стенкой, которая простирается соосно с указанной общей осью, посредством чего вызывается отделение фракции с полимерной формой фибрина без поперечных связей во второй камере в то время как добавляется подходящий фермент. Этот способ отличается тем, что фракция плазмы, содержащая фибриноген, подвергается воздействию фермента во время центрифугирования так, что полученная в результате полимерная форма фибрина без поперечных связей осаждается на цилиндрической наружной стенке указанной второй камеры, после чего жидкая фракция, собранная на дне второй камеры, переносится под влиянием корпуса поршня в первую камеру, и что фракция с полимерной формой фибрина без поперечных связей, остающаяся во второй камере, в основном осажденная на цилиндрической стенке, Dacreoряется добавлением растворителя и центробежным перемешиванием. Затем фермент по желанию может быть удален, и полученный таким образом раствор мономерной формы фибрина переносится в любой желаемый приемный контейнер. Соответственно, асептическое условие для сбора раствора легко поддерживается После повторного растворения мономерной формы фибрина он может переноситься в приемный контейнер, такой как шприц, для последующего использования как описано в предшествующем уровне техники. Перед переносом фермент может быть удален любым удобным средством. Указанная выше одновременно подаваемая заявка также раскрывает устройство для разделения компонентов из жидкости путем центрифугирования вокруг центральной оси вращения, которое включает первую кольцевую камеру, ограничиваемую наружной цилиндрической стенкой и внутренней цилиндрической стенкой, причем обе стенки концентрично расположены вокруг указанной оси вращения, а также верхней стенкой и нижней стенкой, где нижняя стенка образована корпусом поршня, смещаемым внутри указанной первой камеры, причем указанное устройство кроме того включает вторую камеру, сообщающуюся с первой камерой посредством первого трубопровода и определяется наружной цилиндрической стенкой, концентрично расположенной вокруг оси вращения и указанным корпусом поршня, и нижней стенкой, где указанная вторая камера приспособлена располагаться ниже первой камеры во время центрифугирования, и где указанное устройство также включает средство для подачи крови в первую камеру и средство для подачи композиции, способствующей отделению, а также приемное средство для соединения, по крайней мере, одного приемного контейнера для жидкости, где приемное средство сообщается со второй камерой через второй трубопровод. В предпочтительном варианте реализации поршневой шток содержит внутреннюю стенку первой камеры. Это устройство изобретения для осуществления способа в соответствии с одновременно подаваемой заявкой отличается тем, что первый трубопровод включает, по крайней мере, один канал, существующий между отверстием в верхней стенке первой камеры и отверстием в нижней стенке второй камеры. В результате, обеспечивается устройство, которое является относительно простым и которое независимо от положения поршня обеспечивает легкий и быстрый перенос обсуждаемых фракций из одной камеры в другую камеру, и, в 34497 частности, жидкой фракции из второй камеры в первую камеру после отделения фракции, содержащей фибрин-1 Последнее особенно связано с фактом, что жидкость автоматически концентрируется на дне второй камеры, когда центрифугирование прекращается, посредством чего она может быть легко перенесена в первую камеру приводимым в движение поршнем В соответствии с одновременно подаваемой заявкой на изобретение, особенно предпочтительно, чтобы указанный, по крайней мере, один канал простирался через внутреннюю часть наружной цилиндрической стенки как в первой, так и во второй камерах, что в результате обеспечивает особую простоту и легкость изготовления устройства Далее, отверстие канала на нижней стенке второй камеры может быть расположено в центре камеры в связи с углублением, образованным нижней стенкой В результате, рассматриваемая жидкая фракция легко и быстро направляется прямо во впускное, отверстие канала Альтернативно, каждый канал может быть образован трубкой, простирающейся прямолинейно через корпус поршня и укрепленной на концах в верхней стенке первой камеры и нижней стенке, соответственно, второй камеры, где она сообщается с отделами канала, заканчивающимися в соответствующей камере. Дополнительно, первая и вторая камера может особенно простым образом включать общую наружную цилиндрическую стенку, сформированную наружным и внутренним цилиндром, герметично пригнанными друг к другу, и ограничивающими между собой простирающийся в осевом направлении канал, и цилиндры могут заканчиваться на одном конце торцевой стенкой, включающей отверстие, позволяющее проходить поршневому штоку, соединенному с корпусом поршня, причем указанный корпус поршня образует нижнюю стенку первой камеры и отделяет указанную первую камеру от второй камеры, и где канал простирается между торцевыми стенками цилиндров в отверстие, непосредственно примыкающее к поршневому штоку. При использовании такого устройства и способа, подходящие реагенты для облегчения отделения и обработки желаемых компонентов в плазме крови, были предварительно загружены во вторую камеру. Например, в ЕР 592,242 описано, что биотиново-авидиновая система захвата может удобно использоваться для удаления батроксобина из желаемого раствора. Требуется, чтобы биотин-батроксобин присутствовал во второй камере для вступления в реакцию с фибриногеном в плазме и превращения его в мономерную форму фибрина (который немедленно превращается в полимерную форму фибрина). Для последующего захвата биотинилированного батроксобина с использованием биотиново-авидиновой системы, авидин, который связан, например, с агароэой должен также присутствовать во второй камере в закрытом, автоматическом центрифужном устройстве эти .вещества должны загружаться а устройство перед обработкой крови Предварительная загрузка биотинилированного батроксобина и авидиновой агарозы в одну и ту же камеру представляла трудности, поскольку высокое сродство авидина с биотином, на котором основан ферментный захват, как и требуется, предотвращает первую реакцию достаточных количеств фермента с фибриногеном Вторая совместно подаваемая заявка, составленная одновременно с этой и озаглавленная "Центрифуга с кольцевым фильтром", описывает устройство, которое обеспечивает возможность легко помещать один или более реагентов внутрь реакционной камеры и освобождать такие реагенты в желаемой последовательности Предпочтительно, при использовании в устройстве типа, описанного в упомянутой выше совместно подаваемой заявке, реагенты, такие как фермент и композиция захвата фермента, могут освобождаться по желанию Для достижения указанной выше цели, в соответствии с изобретением предоставляется устройство, отличающееся тем. что капсула расположена во второй камере и включает множество отсеков для приема соответствующих композиций, способствующих разделению, и что капсула включает закрывающее приспособление, закрывающее указанные отсеки и под воздействием поршня, приспособленного последовательно открываться для выпуска содержимого отсеков Такая капсула обеспечивает возможность простым и легким способом подавать вещества, необходимые для отделения фибрина 1, причем указанная капсула предпочтительно обеспечивается этими веществами заранее Кроме того. предоставленные отсеки обеспечивают возможность равномерного разделения рассматриваемого количества Батроксобин предпочтительно помещается в один отсек в химическом взаимоотношении с биотином, обеспечивая то, что фермент батроксобин может легко захватываться после использования с помощью а видива, который поэтому помещается во второй отсек а химическом взаимоотношении с агарозой в форме относительно крупных частиц Высокое сродство биотина к авидину обеспечивает то, что комллексованные биотинилированные агарозные частицы батроксобина/авидина в последующем легко удаляются фильтрацией из раствора фибрина I. Помещение двух веществ в их соответствующие отсеки обеспечивает также возможность легко дозировать вещества в желаемое время воздействием на поршень Указанные выше вещества или композиции, биотин-батроксобин, соответственно, и авидин-агароза могут использоваться в любой удобной форме, например, в форме лиофилизированного порошка. В соответствии с изобретением, особенно предпочтительно, чтобы капсула включала центральную втулку, соосно установленную внутри второй камеры и несущую три расположенные на расстоянии друг от друга радиальных диска, образующих перегородки в отсеках и имеющих в основном идентичный наружный окружный контур, и что закрывающие средства образованы корпусом в форме муфты, смещаемо, но герметично окружающей радиальные диски Для активации корпуса в форме муфты поршень может в соответствии с изобретением преимущественно включать направленную вниз юбку, функционирующую совместно с корпусом а форме муфты на капсуле так, чтобы ступенчато смещать 34497 указанный корпус в форме муфты, посредством чего указанный корпус последовательно открывает для освобождения содержимого указанных отсеков внутри капсулы В соответствии с одновременно подаваемой заявкой на изобретение системы доставки реагентов, капсула может быть приспособлена в соединении с осевым каналом в примыкающую третью камеру, причем наружная сторона корпуса в форме муфты капсулы плотно примыкает к боковой стенке осевого канала, по крайней мере, после начального смещения корпуса, посредством чего самая нижняя перегородка капсулы позволяет жидкости свободно проходить из второй ка- 1 меры в третью камеру после конечного смещения корпуса в1 форме муфты, вызванного поршнем вне контакта с окружностью самой нижней перегородки Таким образом, капсула образует дополнительную часть, создающую преимущества устройства и способствующую указанному устройству в дальнейшей работе во время отделения фибрина I Так, чтобы далее образовать неотъемлемую составную часть устройства, втулка капсулы может в соответствии с изобретением включать осе- , вой сквозной канал и закрепляться на направленном вверх выступе, расположенном в центре на дне нижней, третьей камеры, причем указанный сквозной канал на дне через жидкость сообщается с наружным кольцевым отсеком третьей камеры через канальную систему, а верхний конец втулки может подбираться для герметичного соединения с осевым каналом в корпусе поршня так, чтобы соединяться с принимающим жидкость контейнером, прикрепленным к нему Для удаления одного или более реагентов из желаемого раствора продукта, полученная в результате жидкая фракция, содержащая фибрин I, направляется в шприц через фильтр под воздействием поршня. В результате, раствор фибрина I принудительно направляется через фильтр, в то время как фермент и другие вещества, подмешанные для ускорения отделения, задерживаются фильтром. Однако итоговый выход фибрина I не полностью удовлетворительный, по сравнению с количеством фибрина I. присутствующим в образце крови. Сущность изобретения. Задачей изобретения поэтому является пре доставление способа, обеспечивающего возмож ность достижения более высокого выхода фибри на I посредством устройства рассматриваемого > тмпа. Для решения указанной выше задачи, в соответствии с изобретением предоставляется способ, отличающийся тем, что часть жидкой фракции, остающаяся во второй камере, перед переносом в принимающий жидкость контейнер переносится в третью камеру, соосно установленную с другими камерами, и что жидкость, присутствующую теперь в указанной третьей камере, заставляют пройти через кольцевой фильтр во время центрифугирования с тем, чтобы войти в кольцевой наружный отсек, который приспособлен для соединения с принимающим жидкость элементом. В результате, раствор фибрина I может пропускаться через фильтр под влиянием центробежной силы, которая значительно более эффективна, чем фильтрация посредством поршня Изобретение кроме того относится к устройству для осуществления указанного выше способа Устройство изобретения включает певчую кольцевую камеру, ограниченную наружной цилиндрической стенкой и внутренней цилиндрической стенкой, причем обе стенки концентрично расположены вокруг оси вращения, и верхнюю стенку и нижнюю стенку, где верхняя'стенка или нижняя стенка образована корпусом поршня, смещаемым внутри первой камеры, причем указанное устройство кроме того включает вторую камеру, сообщающуюся с указанной первой камерой посредством первого трубопровода и ограничивается наружной цилиндрической стенкой, концентрично расположенной вокруг оси вращения, указанной нижней стенкой первой камеры и другой нижней стенкой, где вторая камера приспособлена располагаться ниже первой камеры во время центрифугирования, и где указанное устройство также включает средство для подачи крови в первую камеру и средство для подачи композиции, способствующей отделению, а также приемное средство для соединения по крайней мере одного приемного контейнера для жидкости, причем приемное средство сообщается со второй камерой через второй трубопровод. Это устройство в соответствии с изобретением отличается тем, что второй трубопровод сообщается со второй камерой через третью камеру, соосно установленную относительно ее, и включающую канал во вторую камеру, который может открываться снаружи, что третья камера включает внутренний отсек и наружный кольцевой отсек, причем указанные отсеки взаимно связаны через проходящий рэдиально круговой канал, в котором расположен кольцевой фильтр для предотвращения прохождения жидкости, содержащей нежелательные ингредиенты, используемые для стимупяции отделения. В соответствии с изобретением, канал между второй и третьей камерой может быть соосно расположен относительно двух камер, и закрываться посредством капсулы, которая раскрыта в упомянутой выше одновременно подаваемой заявке на патент, озаглавленной "Устройство подачи реагента в центрифугу". Эта капсула включает центральную втулку, соосно установленную во второй камере и несущую множество расположенных на расстоянии друг от друга радиальных дисков, образующих перегородки во множестве отсеков в капсуле, где диски имеют идентичный наружный окружный контур, которые снаружи отсеков закрыты посредством герметизирующего, смещаемо установленного корпуса в форме муфты, на* ружная сторона которого подобрана для плотного упора в боковую стенку осевого канала, причем самый нижний образующий перегородку диск капсулы обеспечивает свободный проход жидкости из второй камеры в третью камеру путем осевого смещения корпуса в форме муфты с устранением контакта с окружностью самой нижней перегородки при воздействии поршня. В результате, достигается легкий и простой доступ к рассматриваемому фильтру посредством капсулы, которая уже используется для подачи веществ, необходимых 34497 дет понятно специалистам в этой области, не будет ограничен этим. Используемый здесь термин "центробежное перемешивание" относится к движению устройства, в которое буферный раствор для повторного растворения вносится для повторного растворения промежуточного продукта, такого как гель полимерной формы фибрина без поперечных связей с наружных стенок камеры. Такое движение или центробежное перемешивание может включать центрифугирование для обеспечения того, чтобы вся доступная площадь поверхности геля подвергалась воздействию раствора для повторного растворения, и включает предпочтительно такое центрифугирование с последующими прерывистыми вращениями в том же направлении и/ипи прерывистыми вращениями в противоположных направлениях Обычные центробежные перемешивания включают, но не ограничиваются, быстрыми вращениями в течение 5-30 секунд, предпочтительно быстрыми вращениями в течение 5-Ю секунд при 2 000-5 000 об./мин в повторных циклах возвратно-поступательного движения в течение любого желаемого периода времени. При настоящих способах предпочтительны быстрые вращения в течение 5-10 секунд приблизительно при 3 000 об./мин с повторными циклами возвратно-поступательного движения в течение 1-2 минут. Как упомянуто вы-' ше, этому может предшествовать несколько более продолжительное вращение, например, 20 секунд или более для первоначального распределения растворителя. Термин "фибрин" используемый здесь, относится к фибрину I, фибрину I! или фибрину дез pp. Настоящее устройство, включающее центрифужную систему кольцевого фильтра, раскрытую здесь, предоставляет эффективный и точный способ выделения одного или более реагентов из раствора желаемого продукта.- Это особенно важно в закрытых, замкнутых, автоматических центрифугах для использования в методиках разделения крови, в которых требуется последовательное введение двух или более реагентов в реакционную камеру. В предпочтительных способах и устройствах, описанных здесь, для предоставления раствора, содержащего мономерную форму фибрина, например, для использования в новом фибриновом материале для закрытия ран, последовательное внесение биотинилированного бзтроксобина с последующим введением авидиновой агарозы в камеру, содержащую плазму, предоставляет высоко совершенный способ получения такого раствора. Краткое описание чертежей. Предпочтительные варианты реализации настоящего устройства и способов будут теперь описаны со ссылкой на чертежи, на которых Фиг. 1 представляет вид в разрезе по оси предпочтительного варианта реализации устройства в соответствии с изобретением, а Фиг. 2 иллюстрирует второй вариант реализации устройства в соответствии с изобретением. Фиг. 3 иллюстрирует третий вариант реализации устройства в соответствии с изобретением. Настоящее устройство представляет единое, закрытое автоматизируемое устройство, сло для стимуляции отделения фибрина I внутри второй камеры Эта капсула предпочтительно активируется корпусом поршня, включающим направленную вниз юбку, простирающуюся соосно с корпусом в форме муфгы капсулы и приспособленную входить в зацепление с указанным корпусом, когда корпус поршня сдвигается вниз под давлением с тем, чтобы таким образом последовательно открыть в подходящие моменты соответствующие отсеки в капсуле, и наконец открыть проход жидкости из второй камеры в третью камеру Для облегчения переноса раствора фибрина І в контейнер для приема жидкости, такой как шприц, втулка капсулы может, в соответствии с изобретением, включать осевой сквозной канал и прикрепляться на направленном вверх выступе, расположенном в центре на дне нижней, третьей камеры, причем указанный сквозной канал через жидкость сообщается с наружным кольцевым отсеком третьей камеры через канальную систему, а верхний конец втулки может подбираться для герметичного соединения с каналом в корпусе поршня так, чтобы соединяться с принимающим жидкость контейнером, прикрепляемым к нему. Наконец, в соответствии с изобретением, втулка капсулы может прикрепляться к выступу на дне третьей камеры посредством муфты, которая на каждом конце, соответственно, окружает втулку и выступ, и муфта может включать круговую, выступающую наружу часть стенки, посредством которой указанный кольцевой фильтр прикрепляется между наружной окружностью указанной поверхности стенки и нижней стенкой второй камеры, посредством чего выступающая наружу часть стенки муфты расположена на расстоянии от дна третьей камеры и ташм образом образует соединение между наружным кольцевым отсеком и простирающимся по оси каналом в соединении со сквозным каналом втулки и простираясь между наружной стороной выступа и примыкающей внутренней стороной муфты. Полученное в результате устройство особенно простое. Способы настоящего изобретения относятся к усовершенствованным способам отделения и выделения отдельного компонента крови или раствора, содержащего такой компонент. Однако настоящий способ пригоден для любой процедуры, приспосабливаемой к цилиндрической центрифуге, в которой первый раствор обрабатывается одним или более катализаторами или реагентами во время центрифугирования. Другие процедуры с кровью, которые могут получить преимущества от использования такого способа, включают, но не ограничиваются, отделением любого компонента крови, такого как обогащенная тромбоцитами плазма, конментрат тромбоцитов, криопрецилитированный фибриноген, другие белки в плазме, такие как тромбин, фибронектин и им подобные. Предпочтительно кровь получают от одного донора, а наиболее предпочтительно кровь получают от одного и того же лица, кому будет введен компонент крови Хотя настоящие способы далее описываются с точки зрения получения раствора мономерной формы фибрина, объем изобретения, как бу 6 34497 собное превращать цельную кровь в желаемые компоненты крови, предпочтительно аутологичные компоненты, используемые, например, в качестве фибриновых материалов для закрытия ран Описание предпочтительных вариантов реализации настоящего изобретения Предпочтительно, настоящая центрифужная система кольцевого фильтра используется с устройством как описано в указанной выше приведенной в качестве ссылки одновременно поданной заявки, и поэтому описывается ниже со ссылкой на такое устройство Однако следует понять, что она может использоваться в любом устройстве реакционной камеры, требующем одного или более реагентов Устройство, показанное на фиг 1 в соответствии с изобретением, собрано из частей, в целом представляющих вращательную симметрию и подразумевающих, что устройство может известным самим по себе способом легко размещаться в центрифуге для центрифугирования вокруг центральной оси 1 На фиг 1 предпочтительный вариант реализации устройства включает наружный контейнер 2 и внутренний контейнер 3, которые подобраны так, что они полностью смыкаются при помещении одного в другой и везде плотно примыкают друг к другу, кроме части, где образуется протирающийся по оси промежуточный канал 4 Канал 4 образуется бороздой, спрофилированной во внутреннем контейнере 3 Два контейнера 2 и 3 включают их соответствующие верхние части 5 и 6, соответственно, которые ограничивают центральное отверстие 7, обеспечивающее прохождение поршневого штока 8 Вокруг отверстия 7 два контейнера включают простирающиеся по оси части 9 и 10. соответственно, которые простираются близко к полому поршневому штоку 8 в направлении в сторону от внутренней части контейнеров Наружный контейнер 2 упирается в полый поршневой шток вдоль короткого радиально выступающего фланца 11, имеющего углубление 12, принимающее уплотнительное кольцо 13 Как показано на фиг 1, канал 4 продолжается между внутренним и наружным контейнерами на всем протяжении от наружных цилиндрических стенок внутреннего и наружного контейнера вдоль верхних частей 5, в и осевых частей 9 и 10 к отверстию непосредственно ниже уплотнительного кольца 13 в отверстии 7 Осевая часть 10 внутреннего контейнера 3, упирающегося в отверстие 7, подобрана по размеру так, что внутри контейнеров 2 и 3 вокруг полого поршневого штока в существует узкий, но свободный канал. Наружный контейнер 2 включает цилиндрическую часть равномерного диаметра, как показано на фиг. 1. По направлению вниз в проекции относительно чертежа эта часть продолжается е цилиндрическую часть 14 несколько большего диаметра через короткую переходную часть 15, образующую внутреннюю поверхность 16 в форме усеченного конуса Внутренний контейнер 3 заканчивается 8 месте, где переходная часть 15 наружного контейнера 2 продолжается в цилиндрическую часть 14 большего диаметра Нижний конец внутреннего контейнера 3 включает наружную поверхность 17в форме усеченного конуса, подходящую по форме усеченно-конической поверхности 16 на внутренней стороне наружного контейнера 2 Наружный и внутренний кольцевой диск 19 и 20 соответственно» расположены непосредственно под нижним концом внутреннего контейнера 3 который заканчивается радиальной поверхностью 18 Эти диски тесно примыкают друг к другу, за исключением того, что они образуют между со бой канал 21, простирающийся в осевой плоскос ти от центрального отверстия 22 и по направле нию к внутренней стороне наружного контейнера 2, где канал 21 сообщается с каналом 4 между наружным контейнером 2 и внутренним контейне ром 3 через простирающуюся по оси часть 23 Канал 21 и осевая часть 23 канапа удобно сфор мированы посредством борозды на стороне внут реннего диска 20, обращенной к наружному диску 19 Два диска 19 и 20 спрофилированы с таким косым ходом, что они включают в целом внутрен нюю и наружную усеченно-конические поверхнос ти, как показано на фиг 1, и посредством их нак лонены вниз, по направлению к центральному от верстию 22 На фиг 1 также показано, что внут ренний диск 20 включает радиальную поверх* ность 24, упирающуюся в прилегающую радиаль ную поверхность 18 внутреннего контейнера 3. Радиальная поверхность 24 внутреннего диска 20 снабжена углублением- 25 для приема уплот нительного кольца 26 Два диска 19 и 20 удерживаются в положении упора в радиальную поверхность 18 внутреннего контейнера 3 посредством крышки 27, закрывающей наружный контейнер в направлении вниз. Крышка 27 включает имеющую форму муфты круговую часть 28, подобранную для плотного упора во внутреннюю сторону наружного контейнера 2, к которому она фиксирована подходящим образом, таким как путем защелкивания вхождением в зацепление между круговым фланцем 29 на наружной стороне муфты 28 и соответствующей круговой бороздой 30 на внутренней стороне наружного контейнера 2 Герметизирующее соединение обеспечивается посредством уплотнительного кольца 31 в круговом углублении 32 на наружной периферии наружного диска 19 Крышка 27 включает кроме того относительно тонкую стенку 32, подобранную для образования нижнего дна устройства в положении, показанном на фиг. 1 Зта стенка 32 простирается в основном вдоль хода, параллельного наружному и внутреннему диску 19 и 20 таким образом, что перегородка 32 простирается от внутренней стороны муфты 28 в части, прилегающей к дискам 19 и 20, и по направлению вниз к части, в целом на уровне с нижней кромкой 33 наружного контейнера 2. Для усилений отно сительно тонкой стенки 32, предоставляется уси ливающий радиальный фланец 34 через одина ковые промежутки, причем только один из указан ных фланцев изображен на фиг. 1. Этот фланец 34 частично спрофилирован частью, расположен ной снаружи стенки 32. и частично частью, распо ложенной внутри стенки 32, как показано на фиг. 1. Последняя часть обозначена ссылочным но мером 35 и спрофилирована так, что она упирает ся в нижнюю сторону наружного диска 19, что а результате помогает поддерживать диски 19 и 20 в надежном положении. 34497 разделяющее средство 36 вдавливается лежду наружным диском 19 и крышкой 27 Это разделяющее средство 36 включает центральный сегмент (отрезок) трубки 37 Этот сегмент трубки установлен на штыре 38, простирающемся по оси по направлению внутрь и спрофилированном как единое целое со стенкой 32 крышки 27 Этот сегмент трубки 37 спрофилирован как единое целое с круговым перегородочным диском 39, простирающимся в наружном направлении от сегмента трубки 37 таким образом, что он первоначально слегка прогибается по направлению вниз к стенке 32 крышки 27, после чего он простирается вдоль короткой осевой линии так, чтобы продолжиться в направлении, в основном параллельном стенке 32 крышки Перегородочный диск 39 заканчивается короткой радиально простирающейся периферией 40, опирающейся на выступ 41 на фланцевых частях 35 на крышке 27. Блок кольцевого фильтра 42 впрессовывается между наружной периферией 40 перегородочного диска 39 и нижней стороной наружного диска 19 Этот блок кольцевого фильтра 42 упирается во в целом радиально спрофилированную'поверхность 43 на прилегающей наружной стороне наружного диска 19. Устройство и способы применения такого кольцевого фильтра являются предметом заявки, составленной и подаваемой одновременно с настоящей заявкой и озаглавленной "Центрифуга с кольцевым фильтром". Для обеспечения устойчивости разделяющего средства 36, усиливающие радиальные фланцы, обозначенные ссылочным номером 44, приспособлены кроме того между сегментом трубки 37 и перегородочным диском 39. Система подачи реагентов настоящего изобретения включает капсулу, обозначенную номером 45, закрепленную на конце, противоположном от крышки 27 сегмента трубки 37 разделяющего средства 36. Такая капсула подходит для избирательного освобождения агентов во вторую камеру 75. Эта капсула включает удлиненный сегмент трубки 46, спрофилированный как единое целое с радиальным кольцом 47, и несущим два дополнительных радиальных кольца 48 и 49. Эти радиальные кольца 48 и 49 закреплены путем неподвижной посадки на их соответствующие стороны фиксированного кольца 47. Нефиксированные кольца 48 и 49 размещены йа их соответствующем расстоянии от фиксированного кольца 47 посредством круговых выступов 50 и 51, соответственно, на сегменте трубки 46. Три диска 47, 48 и 49 имеют одинаковый наружный диаметр и несут вдоль своих соответствующих периферических участков круговую, смещаемо установленную муфту 52. Как показано на чертежах, нижний диск 49 упирается в верхний конец сегмента трубки 37 разделяющего средства 36, посредством чего определяется положение капсулы 45 в осевом направлении. Положение кроме того определяется таким образом, что при смещении в осевом направлении, смещаемая муфта 52 капсулы входит в герметизирующее зацепление своим нижним концом, как показано на чертеже, с самым внутренним краем 53 на наружном диске 19 в центральном отверстии 22. В этом положении муфты 52 еще существует сообщение между пространством внутри внутреннего диска 20, окружающим муфту 52, и впускным отверстием в канал 21 между наружным диском 19 и внутренним диском 20 Длина оси смещаемой муфты 52 подобрана таким образом, что зацепление с наружным диском 20 происходит до того как верхний конец, показанный на чертеже, Муфты 52 разьединится с фиксированным кольцом 47 во время осевого смещения вниз указанной муфты 52. Внутренний диаметр муфты 52 подобран также к наружному диаметру простирающейся по оби части перегородочного диска 39 разделяющего средства 36 таким образом, что продолжающееся смещение вниз муфты 52 по направлению к крышке 27 вызывает фиксирующее зацепление указанной муфты 52 с разделяющим средством 36 как только оно разъединилось с наружным диском 19 Длина осевой части разделяющего средства 36 соответствует также длине по оси муфты 52 таким образом, что указанная муфта 52 в самом нижнем положении в целом пол* ностью принимается разделяющим средством 36. Как показано на чертежах, полый поршневой шток 8 включает круговой поршень 55 внутри наружного контейнера 2 и внутреннего контейнера 3, причем указанный поршень 55 плотно прилегает к внутренней стороне внутреннего контейнера 3 посредством уплотнительного кольца 56 Люеровский переходник 57 спрофилирован внутри полого поршневого штока для соединения с обычным шприцем 58 с плунжером 59 поршневого действия для воздействия на содержимое шприца 58. Переходник 57 спрофилирован в целом как сегмент трубки, сообщающейся с центральным отверстием 61 в поршне 55 через усеченно-коническую часть 60. Сегмент трубки 57 снабжен радиально внутрь простирающейся перемычкой 62 для направления жидкости, вытекающей из шприца 58 в сторону от осевого канала и посредством этого вокруг сегмента трубки 46 ниже его внутрь капсулы 45 Последний сегмент трубки 46 имеет такую длину и такие размеры, что он может вступать в плотный контакт с сегментом трубки 57 внутри полого поршневого штока 8, когда поршень 55 находится в своем крайнем нижнем положении около крышки 27. Для способствования указанному плотному соединению, внутренняя сторона сегмента трубки 57 сформирована с постепенно уменьшающимся диаметром на конце, примыкающем к поршню 55. Простирающаяся по оси юбка 63 изготовлена как единое целое с поршнем 55 вокруг центрального отверстия 61 указанного поршня. Эта юбка 63 спрофилирована с таким диаметром и такой длиной, что путем подходящего смещения поршня 55 он может активировать указанное выше смещение смещаемой муфты 52 капсулы 45 в указанные положения, в которых она входит в зацепление с внутренним краем 53 центрального отверстия 22 посредством двух дисков 19 и 20 с последующим зацеплением разделяющего средства 36. Упругое, выступающее уплотнительное кольцо 64, как указано, фиксируется вокруг полого поршня на верхней части внутри контейнеров 2 и 3, как показано на фиг. 1. Это выступающее уплотнительное кольцо 64 приспособлено лредотвра 34497 щать нежелательное прохождение жидкости из внутренних частей контейнеров 2 и 3 в канал 4, но оно позволяет жидкости проходить, когда на нее воздействует сила,, прилагаемая посредством поршня 55. Как показано в верхней части фиг. 1, имеется соединение с рукавом 65 через отверстие 66 в наружном и нижнем контейнере 2 и 3. соответственно. Это соединение известно и поэтому не показано в подробностях, но оно позволяет прерывать соединение с рукавом по желанию. Кроме того, отверстие для выпуска воздуха с подходящим фильтром предоставлено обычным образом, и поэтому оно ни показано, ни описано в подробностях. Канал 69 обеспечивается из зоны между разделяющим средством 36 и крышкой 27 и на всем протяжении вверх через внутреннюю часть трубчатого сегмента 37 разделяющего средства 36 и через внутреннюю часть сегмента трубки 46 капсулы 45. Этот канал 69 позволяет жидкости проходить в шприц 58 из указанной"зоны, когда последний сегмент трубки 46 соединен с сегментом трубки 57 внутри поршневого штока 8. Канал 66 предоставлен а самой нижней части штыря 38 в крышке 27 путем профилирования указанного штыря 38 плоской, осевой поверхностью, причем указанный штырь имеет в целом поперечное сечение в виде круга. В результате, пространство создается между штырем и прилегающей частью внутренней поверхности сегмента трубки 37. Зона 67 предоставлена непосредственно на штырем 38, где разделяющее средство 36 представляет слегка уменьшенный внутренний диаметр. Таким образом можно разместить небольшой фильтр 68 непосредственно выше указанной зоны, показанной на фиг. 1, посредством чего жидкость должна проходить через указанный фильтр перед тем, как она войдет в сегмент трубки 46 капсулы 45. Описанное устройство включает первую кольцевую камеру 70, ограничиваемую изнутри полым поршнем 8, образующим цилиндрическую внутреннюю стенку 71, а снаружи цилиндрической наружной стенкой 27, образованной наружным контейнером 2 и внутренним контейнером 3. В положении при обычном использовании, показанном на фиг. 1, кольцевая камера 70 свержу ограничивается верхней стенкой 73. образованной дном 5 и 6, соответственно, наружного контейнера 2 и внутреннего контейнера 3. По направлению вниз, копьцевая камера 70 ограничивается нижней стенкой 74, образованной поршнем 55. Вторая камера 75, ограничивается ниже поршня 55, причем ука занная вторая камера снаружи ограничивается той же цилиндрической наружной стенкой 72, как и первая камера 70. По направлению вниз, вторая камера 75 ограничивается второй нижней стенкой 76, образованной наружным диском 19 и внутрен ним диском 20. Капсула 45 установлена в центре внутренней части второй камеры 75. Третья ка мера 77 предоставляется ниже указанной второй нижней стенки 76, и эта третья камера 77 огра ничивается разделяющим средством 36 и блоком кольцевого фильтра 42. Кроме того, эта третья ка мера 77 сообщается со второй камерой 75 через канал, образованный центральным отверстием 22 в наружном диске 19 и внутреннем диске 20 Наконец, четвертая камера 78 предоставляется ниже разделяющего средства 36, причем указанная четвертая камера 78 ограничивается снизу стенкой 32 крышки 27 и, кроме того, частями муфты 28 крышки 27 и нижней стороной наружного диска 19. Как описано выше, описанное устройство первоначально приспособлено для отделения компонента, такого как мономерная форма фибрина из крови, и для этой цели вторая камера 75 и предпочтительно верхняя камера 80 капсулы 46, заблаговременно заполняется подходящим ферментом, таким как батроксобин. Как понятно из EP-PS № 592,242, может использоваться любой фермент, подобный тромбину. Такие ферменты включают тромбин как таковой или любой другой материал с аналогичной активностью, такой как Анкрод, Акутик, Вениим, Аслераэа, Ботропаэа, Кротабаза, Флаворксобин, Габонаэа и предпочтительный Батроксобин. Батроксобин может быть химически связан с биотипом, который представляет собой синтетическое вещество, позволяющее батроксобину захватываться обычно известным образом посредством авидина в авидиново-агарозной композиции. Соответственно, авидин-агароза обнаруживается в самой нижней камере 81 капсулы. Как биотиноао-батроксобиновая композиция, так и авидиново-агарозная композиция сравнительно легко заполняются в соответствующие камеры 80 и 81 внутри капсулы 45 перед тем как указанная капсула помещается внутрь устройства. Наконец, установлен шприц 58, причем указанный шприц содержит буфер рН-4 из ацетата, растворенного уксусной кислотой и приспособленный для приема фибрина і. Другой буфер, известный из предшествующего уровня техники, также может использоваться. Буферный агент для повторного растворения может быть любым кислотным буферным раствором, предпочтительно раствором, имеющим рН между 1 .и 5. Подходящие примеры включают уксусную кислоту, янтарную кислоту, глюкуроновую кислоту, цистеиновую кислоту, кротоновую кислоту, итаконовую кислоту, глутоновую кислоту, муравьиную кислоту, асларагиновую кислоту, адипиновую кислоту и соли любой из этих кислот. Предпочтительными являются янтарная кислота, аспарагимооая кислота, адипиновая кислота и соли уксусной кислоты, например, ацетат натрия. Также солюбилиэация может проводиться при нейтральной рН посредством хаотропного вещества. Под* ходящие вещества включают мочевину, натрия бромид, гуанидим1 гидрохлорид, KCNS, калия иодид и калия бромид. Концентрация и объемы таких кислотных буферов или таких хаотропных веществ такие как описано в EP-PS №592,242, Во время или сразу после подачи крови, поршневой шток 6 проталкивается так далеко внутрь устройства, что смещаемая муфта 52 капсулы 45 сдвигается по направлению вниз, герметично перекрывая сквозной канал через нижнюю стенку 76 и во вторую камеру 77. В результате, одновременно открывается доступ к композиции биотин-батроксобин внутри самой верхней камеры ВО капсулы. Когда устройство готово к использованию, образец крови подеется в первую камеру через 34497 нижней стенке 76. Эта процедура центрифугирования/дренирования может проводиться два и более раз," как может потребоваться, для получения насколько возможно максимального количества жидкой плазмы из полимерной формы фибрина Как только остающаяся порция плазменной фракции была вытеснена из второй камеры 75, смещаемая муфта 52 капсулы 45 смещается дальше вниз таким образом, что возникает возможность доступа в самую нижнюю камеру 81 В то же самое время или в связи с последним смещением муфты, плунжер 49 шприца 58 полностью придавливается вниз посредством шпинделя, действующего снаружи таким образом, что буфер рН-4 переносится во вторую камеру 75, что может быть сделано во время начала центробежного перемешивания Добавление буфера рН-4 обеспечивает то, что полимерная форма фибрина растворяется в нем, а присутствие авидин-агароэной композиции в нижней камере 81 внутри капсулы 45 обеспечивает то, что биотин-бактроксобиновая композиция связывается обычным образом авиди* ном Продолжающееся смещение поршня 55 вызывает зацепление смещаемой муфты 52 на 'капсуле 45 с разделяющим средством 36 и разъединение нижней стенки 76, что в результате приводит к тому, что обеспечивается свободный доступ к третьей камере 77 В результате Содержимое второй камеры 75 может свободно стекать вниз в третью камеру 77 Предпочтительно, повторное растворение проводится во время центробежного перемешивания, которое включает центрифугирование и серию прерывистых возаратно-поступательных перемешивающих движений Продолжающееся центрифугирование обеспечивает то, что раствор мономерной формы фибрина может быть отделен в третьей камере через кольцевой фильтр 42, задерживающий относительно крупные частицы агароэы и батроксобина, связанные с ней, через систему захвата биотин-авидина Когда раствор мономерной формы фибрина прошел в самую нижнюю четвертую камеру 78 в результате упомянутого выше центрифугирования, указанное центрифугирование прекращается и раствор фибрина I легко переносится в шприц 58 путем возобновленного оттягивания вверх плунжера 59, причем самый верхний конец трубчатого сегмента 46 капсулы 45 входит в зацепление с сегментом трубки 47. образуя соединение со шприцем 58 По мере того как полимерная форма фибрина отделяется от плазменной фракции во второй камере 75 во время продолжающегося центрифугирования и по мере того, как раствор мономерной формы фибрина отделяется в третьей камере 77 центрифугированием, можно достичь относительно высокий выход фибрина I из рассматриваемого образца крови. Изобретение было описано со ссылкой на предпочтительный вариант реализации. Однако может быть выполнено много модификаций беэ отклонения от объема изобретения. На фиг. 2 показаны примеры таких модификаций, так как указанная фиг. 2 иллюстрирует второй вариант реализации изобретения, который более или менее соответствует варианту реализа* иголку, не показанную, и рукав 65 обычным образом, причем в указанный образец крови предпочтительно подмешивается антикоагулянт также обычным образом Во время подачи крови через рукав 65 и отверстие 66 во внутрь первой камеры 70, воздух удаляется из камеры обычным образом После подачи крови рукав 65 удаляется, а отверстие 66 герметично закрывается В последующем устройство с кровью помещается в центрифугу, которая, наряду с другими функциями, помогает в герметической компрессии различных частей Центрифуга вызывает вращение устройства вокруг оси вращения 1 В результате центрифугирования кровь отделяется в первой камере 70 на плазменную фракцию, осаждающуюся радиально внутри остающейся порции крови, причем указанная остающаяся порция содержит эритроциты и белые клетки крови Как описано в EP-PS № 592,242, тромбоциты могут присутствовать в любой фракции, по желанию, путем изменения скорости и времени центрифугирования Когда поверхность раздела между плазмой и оставшейся порцией крови стабилизируется, т е. когда разделение заканчивается, начинается уменьшение объема первой камеры 70 поршневым штоком 8 и в последующем поршень 55 вытягивается наружу В результате, сначала возможный внутренний слой воздуха проходит через каналы 4 и 21 во вторую камеру 75, а дальнейшее движение поршня 55 приводит к тому, что плазма также проходит во вторую камеру 75 Движение поршня 55 прекращается, когда весь слой плазмы будет перекачен во вторую камеру 75, т е. когда поверхность раздела между плазмой и оставшейся порцией крови достигнет внутреннюю стенку 71 первой камеры 70 Во второй камере 75 плазменная фракция вступает в контакт с ферментом батроксобином, что в результате приводит к тому, что мономерная форма фибрина, который полимеризуется немедленно в полимерную форму фибрина без поперечных связей, освобождается из плазменной фракции. Этот процесс выполняется в то время как устройство непрерывно центрифугируется, что в результате приводит к тому, что полимерная форма фибрина эффективно отделяется от оставшейся порции плазменной фракции, причем указанная полимерная форма фибрина образуется реакцией биотиново-батроксобиновой композиции и осаждением в виде вязкого слоя вдоль цилиндрической наружной стенки 72. Когда это отделение завершается, центрифугирование прекращается, посредством чего остающаяся относительно жидкая порция плазменной фракции может быть легко выдавлена назад в первую камеру 70 поршнем 55 сначала поднятым для переноса воздуха из пер* вой камеры 70 во вторую камеру 75, с последующим нажатием указанного поршня 55 вниз. Таким образом, этот перенос жидкости может выполняться относительно легко и быстро перед тем как вязкий слой с полимерной формой фибрина достигнет отверстия в канал 21. Дальнейшие меры могут необязательно предприниматься для предотвращения слишком быстрого достижения вязким слоем впускного отверстия канала 21, такие как путем установки кольца выступающих вверх зубцов 82, показанных пунктирными линиями на 10 34497 ции изобретения, показанному на фиг. 1. Вариант реализации, показанный на фиг. 2, включает первую камеру 90 и вторую камеру 91, разделенные поршнем 92. который включает полый поршневой шток 93, ограничивающий первую камеру по направлению внутрь. По направлению наружу, две камеры определяются частью, в целом, трубчатого элемента 94, образующего наружную цилиндрическую стенку 95 для двух камер 90 и 91. По направлению вверх, первую камеру 90 ограничивает верхняя стенка 85, которая в свою очередь образуется верхней крышкой, прикрепленной к трубчатому элементу 94 посредством кольца 96, вкрученного в указанный трубчатый элемент 94. Верхняя стенка 85 определяет сквозное отверстие для прохода полого поршневого штока 93. По направлению вниз, вторую камеру 91 определяет нижняя стенка 96, образованная круговым внутренним фланцем в трубчатом элементе 94. На стороне примыкающей ко второй камеро 91, трубчатый элемент 94 включает усеченно-коническую поверхность '97, наклоненную в сторону от поршня 92 по направлению к центру второй камеры 91. Нижняя стенка 96 определяет центральный сквозной канал 98 в третью камеру 99. Третья камера 99 определяется разделяющим средством 100 и блоком кольцевого фильтра 101, вставленного между нижней стенкой 96 и разделяющим средством 100 и ведущим в четвертую кольцевую камеру 102. Четвертая камера 102 определяется между имеющей форму конуса крышкой 103, фиксированной к трубчатому элементу 94 резьбой. Указанная крышка 103 удерживает через промежуточные фланцы 103 разделяющее средство 100 в положении в центре внутри трубчатого элемента 94, в то же время сдавливая блок кольцевого фильтра 101. Капсула 105 крепится на выступающем к центру и вверх штыре 104 на разделяющем средстве 100. Капсула 105 включает трубчатую часть 106 с имеющими форму диска кольцами 107. 108, подвижно прикрепленными к нему и определяющими камеры для указанных ферментов, обозначенные буквами ВВ и АА, соответственно, посредством смещаемо расположенной манжеты. Имеющие форму диска кольца фиксируются на желаемом расстоянии друг от друга на сегменте трубки 106 с помощью спрофилированных на нем выступов по наружной периферии трубчатого элемента 106. имеющего уменьшающийся диаметр по направлению снизу вверх. Сквозные каналы 115 и 116 образованы от верха первой камеры 90 по направлению ко дну второй камеры 91. Эти каналы предоставлены .посредством их соответствующих фиксированных сегментов трубки 117 и 118, соответственно, простирающихся параллельно оси вращения устройства и прикрепленных на концах в связанных отверстиях в верхней стенке 95 и нижней стенке 96. Канальное соединение между этими сегментами трубки и камерами, соответственно, обеспечиваются подходящими отверстиями и втулками, прикрепленными на них. Сегменты трубок 117 и 118 простираются через их соответствующие отверстия в поршне 92. Везде установлены уплотнительные кольца с тем, чтобы предотвратить утечку. Переходник 120 закреплен в центре внутри поршня 92 для подсоединения к шприцу 121 внутри полого поршневого штока 93 и к верхнему концу трубчатого сегмента 106 капсулы 105. Переходник 120 несет юбку 122, выступающую во ато, ую камеру 91 и влияющую на смещаемую муфту 110 на капсуле 105. Как показано, наружный диаметр этой муфты 110 подобран к диаметру сквозного канала 98 по направлению вниз в третью камеру 99 таким образом, что муфта 110 направляется и удерживается нижней стенкой 96 в любом положении, а следовательно также в самом нижнем положении, в котором муфта 105 не входит в зацепление с самым нижним концом 109 в форме диска в капсуле, что обеспечивает возможность прохождения жидкости из второй камеры 91 по направлению вниз в третью камеру 99. Канал 123 простирается из четвертой камеры 102 и проходит по центру вверх через штырь 104 на разделяющем средстве 100 и далее по направлению вверх через трубчатый элемент 106 капсулы 105, посредством чего жидкость может оттуда попадать в шприц 121. Устройство, показанное на фиг. 2, исполь-. зуется полностью таким же образом, как и устройство, показанное на фиг. 1, и в нем. естественно, также предусмотрено приспособление для подсоединения к нему рукава для подачи крови. . Описанные части, образующие часть различных устройств, легко изготавливаются из подходящих пластических материалов путем инжекторного формовочного литья, и поэтому рассматриваемые устройства также относительно дешевы и подходят для одноразового использования. Изобретение было описано со ссылкой на предпочтительные варианты реализации устройства. Способ в соответствии с изобретением может, однако, легко осуществляться в лаборатории в асептических условиях посредством колпачка, который может быть закрыт крышкой, Плазма и фермент заливаются в колпачок й путем смешивания и последующего центрифугирования, полимерная форма фибрина без поперечных связей отделяется на дно или стенку колпачка, как описано выше. После удаления остающейся плазменной фракции, полимерная форма фибрина без поперечных связей повторно растворяется путем добавления растворителя и путем центробежного перемешивания как также описано выше. Пример. 140 мл цельной крови и 20 мл антикоагулянта нитрата натрия (Фармакопея США) вносят в первую камеру 70 устройства, описанного выше. Эту комбинацию центрифугируют в течение 2 минут приблизительно при 6 000 об./мин для обеспечения разделения плазмы и клеток крови. Продолжая центрифугирование до полного разделения поршень поднимают так, чтобы перенести саму внутреннюю фазу, т.е. плазму, во вторую камеру 75. Переносят около 60 мл плазмы. Ее обрабатывают 30 единицами биотинилированного батроксобина, который вносят во вторую камеру 75 через верхнюю камеру 80 капсулы 45, как описано ранее. Плазму и аброксобин смешивают при более низкой скорости, например, приблизительно от 2 000 до 3 000 об./мин и затем центрифугируют в течение 9 минут при 9 000 об./мин. 11 34497 авидин-агарозу через нижнюю камеру 71 капсулы 45 После этого в течение 5 минут проводят центробежное перемешивание, состоящее из циклов 5-10 сек вращений приблизительно при 3 000 об /мин каждый при повторных возвратно-поступательны* движениях. Полученный в результате раствор содержит мономерную форму фибрина плюс комплекс авидин-агароэы: биотина-батроксобина. Этот раствор переносят в третью камеру 77 и, центрифугируя, фильтруют через кольцевой фильтр Рогех с размером пор 20 мкм в течение 1 минуты при 9 000 об./мин. Полученный в результате раствор мономерной формы фибрина набирают в шприц 58, как описано ранее Образованный таким образом раствор мономерной формы фибрина (фибрин І в этом случае) повторно полимериэуют в фибриновый материал для закрытия ран путем совместного нанесения на участок, где требуется такой материал для закрытия ран, с 0,75 М буфером карбоната/бикарбоната натрия в соотношении фибрин 1.буфер5:1. Гель полимерной формы фибрина без поперечных связей осаждают в виде тонкого слоя геля на стенки цилиндра и вращение прекращают Оставшуюся плазменную жидкость (сыворотку) затем переносят назад в первую камеру 70. За этим следуют два дополнительных центрифугирования в течение 1 минуты при 9 000 об /мин для удаления максимально возможного количества сыворотки в геле После каждого такого 1-минутного центрифугирования, избыток сыворотки переносят в первую камеру 70. Затем буферный раствор, содержащий 3,5 мл 0,2 М ацетата натрия (рН 4.0), содержащий 24 мМ хлорида кальция вносят во вторую камеру ' 75 через шприц 58. В это время в течение 2 минут проводят центробежное перемешивание, состоящее из циклов 5-10 сек. вращений приблизительно при 3 000 об /мин каждый при повторных возвратнопоступательных движениях, для растворения геля полимерной формы фибрина и получения раствора, содержащего мономерную форму фибрина В разделенный таким образом раствор добавляют 73 68 67 57 38 36 44 Фиг. 1 12 34497 109 Фиг. 2 13 34497 Фиг. 3 Тираж 50 екз. Відкрите акціонерне товариство «Патент» Україна, 88000, м. Ужгород, вул. Гагаріна, 101 ( 0 3 1 22 ) 3 - 7 2- 8 9 ( 0 3 12 2) 2 - 5 7- 0 3 14